HPLC法测定茵山莲颗粒中野黄芩苷的含量

HPLC法测定茵山莲颗粒中野黄芩苷的含量 HPLC法测定茵山莲颗粒中野黄芩苷的含 量 920中国药事20O9年第23卷第9期 HPLC法测定茵山莲颗粒中野黄芩苷的含量 胡静,鞠忠良,满亮(辽宁省食品药品检验所,沈阳110023;沈阳市红药制药有限 公司) 摘要:目的建立茵山莲颗粒中野黄芩苷的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法, 色谱柱:迪马 C18色谱柱,甲醇一水一磷酸(40:6O:0.2)为流动相,检测波长335nm.结果野黄芩苷 在0.0724, 1.81/~g之间线性关系良好,r=O.9999,回收率为99.7,RSD为0.96~//00.结论该方法 操作简单,分离 效果好,灵敏度高,可作为茵山莲颗粒的质量控制标准. 关键词:茵山莲颗粒;野黄芩苷;含量测定;HPLC 中图分类号:R284;R927.2文献标识码:A文章编号:1002—7777(2009)09—0920— 02 DeterminationofScutellarinofYinshanlianKelibvHPLC HuJing,JuZhongliangandManLiang(LiaoningProvinceInstituteforFoodandDrugContro l,Shenyang 110023:ShenyangHongyaoPharmaceutica1Company) ABSTRACT:ObjectiveAHPLCmethodforthedeterminationofscutellarinofYinshanlian Keliwas established.MethodsADiaonsilC18wasusedwithmethanol,water— solutionofphosphoricacid(40:60:0. 2)asthemobilephase.Thedetectionwavelengthwas335nm.ResultsThelinearrangewas0.0 724, 1.81gg,r一 0.9999,andaveragerecoverywas99.7.RSDwas0.96.ConclusionsThemethodis simpleandsensitivewithgoodseparationefficiency.ItcanbeusedinthestandardofYinshanli anKeli. KEYWoRDS:YinshanlianKeli;scutellarin;determination;HPLC 茵山莲颗粒收载于卫生部药品标准中药成方制 剂第十七册,由茵陈,半枝莲,五味子,栀子, 甘草,板蓝根等六味药组成,具有清热解毒利湿. 用于慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,胆囊炎, 胰腺炎,而见湿热蕴毒之症者.原标准无含量测 定,为了能有效控制产品质量,保证疗效,本实验 采用高效液相色谱法对半枝莲的主要成分野黄芩苷 的含量进行了测定.],现将研究结果报道如下: 1仪器与试药 LC-2010C高效液相色谱仪,LC-2010C紫外 检测器.野黄芩苷(中国药品生物制品检定所,批 号:110842—200504),茵山莲颗粒(沈阳中药制药 有限公司,批号:050101,060201,060601),甲 醇为色谱醇,水为重蒸馏水,其它为分析纯. 2方法与结果 2.1溶液的制备 2.1.1对照品溶液的制备精密称取野黄芩苷对 照品10.00mg,置25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀 释至刻度,摇匀.精密量取lOmL,置100mL量 瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得. 2.1.2供试品溶液的制备取装量差异项下的本 品,研细,取约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶 中,精密加入6O甲醇50mL,称定重量,超声处 理30min,放冷.再称定重量,用60甲醇补足减 失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得. 2.1.3阴性对照溶液的制备按处方比例制备缺 半枝莲的阴性样品,再按供试品溶液的制备方法制 成阴性对照溶液. 2.2色谱条件 色谱柱:迪马C18(4.6mm×200mm,5/,m), 流动相:甲醇一水一磷酸(40:60:0.2)为流动相, 检测波长:335nm,进样量IOt~L,理论板数:按 作者简介:胡静,主管药师,主要从事药品检验及标准修订工作;Tel:(024)25425645 中国药事2009年第23卷第9期921 野黄芩苷峰计算应不低于1500. 取供试品溶液,对照品溶液,阴性对照溶液各 10肚I进样,上述色谱条件下,野黄芩苷与其它组 分可得到基线分离,阴性组分无干扰.见图1. 0481216202428323640groin 止L…: 0481216202428323640groin u4lzlbuZ460J口4uInl兀 rd.对照品;b.样品;C.阴性;1.野黄芩昔. 图1茵山莲颗粒中野黄芩苷HPLC色谱图 2.3线性关系的考察 精密吸取野黄芩苷对照品溶液,浓度为 0.03620mg?mL.的溶液2,6,10gL,浓度为 0.1810mg?mL的溶液3,5,10L,注入液相色 谱仪中,按上述色谱条件在335nm波长处测定, 以对照品进样量为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘 制标准曲线,经线性回归,回归方程: Y一4.149822×10X一1.0129×10r一0.9999 结果表明,野黄芩苷在0.0724,1.81gg范围内, 呈良好的线性关系. 2.4精密度试验 精密吸取同一供试品溶液1O,,连续进样6次, 测定峰面积,RSD值为0.28,表明精密度良好. 2.5稳定性试验考察 精密吸取同一供试品溶液10gL,分别于配制 后0,2,4,8,1O,12,18h进样分析,测定峰面 积,RSD值为0.23,结果表明,供试品溶液在 18h内稳定. 2.6重复性试验 精密称取样品6份,各0.5g,按样品测定项下方 法测定,结果野黄芩苷平均含量为2.3806mg?g, RSD值为1.6,表明本品测定方法重复}生良好. 2.7加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批号(含量 2.3806mg?g)的样品约0.25g,分别精密加入野 黄芩苷对照品溶液(C===0.181mg?mL)各3mL, 精密加人6O甲醇50mI,按正文供试品溶液的制 备方法制备及上述色谱条件测定,结果见表1. 表1回收率试验结果 样品中野黄芩对照品加实测总回收率平均回收率RSD 苷含量(n培)入量(rag)N(rng)()(%)() 0.6085 0.6063 0.6125 0.6032 O.616l 0.6187 0.5430 0.5430 0.5430 0.5430 0.5430 0.5430 2.8样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10L,注入液相色谱仪,测定,结果见表2. 表2野黄芩苷含量测定结果(n=2)rag/袋 3讨论 本试验比较了超声2O,30,40min不同时间 野黄芩苷的提取率,结果30min提取率与40min 相同,因此确定提取时间为30min.测定波长的确 立,参考有关文献,并绘制紫外图谱,确定测定波 长为335nm.野黄芩苷的测定方法已有文献报 道_8.,本文建立的方法具有样品处理简单,样品 分离良好的优点. 参考文献: [1]陶曙红,吴凤锷.半枝莲化学成分的研究[J].时珍国医国 药,2005,(7):47—48. E23李洁.中药半枝莲的研究与应用EJ3.齐鲁药事,2006, (12):44—46. [3]陈艳,张国刚,毛德双,等.半枝莲的化学成分研究(I) [J].中国药物化学杂志,2008,18(1):48—50. [4]李萍,左甜甜,王晓秋,等.半枝莲的化学成分研究(?) EJ3.中国药物化学杂志,2008,18(5):374—376. [5]张海方,许化溪.半枝莲的化学成分及生物学活性的研究进 展[J].江苏大学,2006,(1):82—85. [63邹箴蕾,吴启南.半枝莲的化学成分及药理作用研究进展 口].时珍国医国药,2005,16(2):149—150. [7]蔡震峰,任凤莲,申定珠,等.中草药半枝莲研究进展 [J].广州化学,2006,(4):59—64. E83中国药典[S].一部,2005:77. [9]高晓霞,原红霞,赵云丽,等.HPLC法测定半枝莲及其制 剂热炎宁胶囊中野黄芩苷[J].中草药,2007,38(4): 538—540. ElO3林燕芝,陈晓辉,唐星,等.RP-HPLC测定灯盏细辛中野 黄芩苷的含量EJ3.药物分析杂志,2005,25:594—596. 6 9 ?O 7 ?9 9 66O295 752428 ??????99OOO7 99O009 111 29657O 0668OO 545465 111111l ?????? 111l1l