OPGmRNA在牙齿萌出过程中牙台方组织内的表达

OPGmRNA在牙齿萌出过程中牙台方组织内的表达 ,, , ,( (, ,, , , , , , , , ; , ,, ,, ,,(, ,,,( , , ,,,; ,, , ,, , ,, ,, , , , ,, ,, , ,, ?, , ? , , ,在牙 齿萌出过程中牙 方组织 内的表达 木 , ,, , 台 金 星爱 贺佳倩 吕 晶 薛 欣 刘英群 ( , , , 哈尔滨医科大学 口腔医学 院儿童 口腔科 黑龙 江 哈 尔滨 ,, , ) 探 ,, ,,, , , ,, ,) , 运用原位 杂交方法检测 大鼠 摘要 目的: 讨骨保护素( , , ,, , ,,, ,, ,在 牙齿 萌出过程 中胎 方组织 内的表达。方法: , , 大鼠下颌第一磨牙牙 方组 织内牙囊成纤维细胞 中 ,,下颌第一磨牙胎 方组织 内 , ,,, , 的表达 。结果 : 台 , ,,, ,在 牙齿骨 内 与萌 出早 、萌 出阶段 中期 阳性表达 ， , ,, )其 , ,, )成釉细胞 中 ,, 晚期 比较差异有统 计学意义( , (, ， 中早期 比晚期 差异显著( , (, ; ,,, 与萌 出早 、 ,,在牙齿骨 内萌出阶段 中期阳性表达 ， , , )早期 与晚期 没有显著性差异( , ( , 晚期比较差异 亦 、, ， ,, ,。 , ,,, ,在 大鼠出生后下颌 第一有统计学意义( , 磨 牙牙囊成纤 维细胞、, ) 结论 : , , 牙齿萌 出过程 中可能 成釉细胞骨 内萌出阶段 中期表达最强 ， , , 通 过 , , , ,,表 达量 的 变化 来 调 节 牙 齿 的 萌 出 。 牙齿萌 出;关键词 : ,; 牙囊 骨保护素 ,, 牙胚 ; , ,( , ,, —, , , , ,,, ,—,中图 分 类 号 , , , 献标 识码 : 文 章 编 号 :, ,, , ( , , ,—, ,, , , ,, 文 , ,, , , , ,,, ,,,, ,,; , , ,, ,, ,,, , , ,, , ,,, , , , , ;,, , , ,,, ,,, , ,, , ,,, , , , , , ,， , — ,, ,,,, ， , ,, ， ， , , ？ , ,, ,,,,, ,, ,, ？ , ， ,, , , , , , ,,, , ,,,, ,, ,, , ， , ,, , ,, , , , ,, ,, ,; , , ,, , ( , , , , , ,,, , , , , , , , , , ,,， ,, ,; ,,, ,,,, , , ， , ) ,, , , ,,, , , ,,,,, , ,, , , , , ,, ,, , ,, ,;, : ,, ,,,, , ,,, ,, , , ,, , , , , , , , ,, ,,, , , ,,, ,,,,, ,, ,,, ,,, ,, ( ,) ,, , ,, ; ,,, , , , ,,, , ,, , , , , ,, , , ,, ,, , ;, , ,,,,, ,, , , , , ( , , :, , , , , , , , , , , , ,, , , , , , , , , , , ,,, , , , , , , ， , , , ,, ,, , ; , ？ ,,, , ,, , , , , ,,, ,,,, ,, ;, , ,, , , ,, , ,, , — , , , , ; , , , ,, ,, , , ,, , , ,,,, ,, , , , , , , ,, : , ,,, , , ,,, , ,, , ,,, , , , ,, ,,, ,, , , ,,, ,, , , ,— , , , , , , , ,, ,, 、 ,,, , ,,,,, ,, , ,,, , , , ; ,, , ,,,,, ,, ,,,, ,, ,, , , ,, , , ,, , , , , , , , , , , , , , ,, , , , , ,, , ,, ,, , ,, ,, ,, ,, , , , , , ,, , , , ,,; ,, , ,,, , , , , , , ,,,, — , ,,, , ,,,( , (, ( , ,, , , ,, , , , , , , , , ,, , ,, , , , ,, , , , , , ,, ) , , ,, , ,, , , ,, , ,, ,, , , , ,, ,, , ,,, ,, , ,, , , , , ,, ,, , , , ,,,,,,, , ,, ,, ,( , (, ( , ,,, , , , , , , ,,;, ,,, , , ,, ,, , ,, , ,,,,,, — , ,, ,,, ,,,,,; , ,, , , ,,, ,, , ,, ) ,, ;, ,, : ,, , , , , , , , , , , ,, , , , ,, , , , , , , , , , , , , , , ,,, , , , , , , , , , , , — , , , , , , ,, , , , , ,, ,,, ,,,, , ,,, , , , , , , , ,,, ; , , , , , , , , , , , , , ,,, , ,,,,, ,, , , , ,, ,,, , , , ,, , ,, , , , ( , ,, , , , , , , ,, , , , , , , , , , ,, ,, , , ,, , , , , ,, , , , , ,, , , , , , , , , , ,, , , , , , ,, , , ,, , ,, ,, , , , , ,, , ,？ , ,; , , , , , , , , , , , , , , ,, ,, , ,,,( ,,, , , , , , , ; ,, , , , , , , , , ,, , ; , , , , , , , ,, , : , , , , , , ,,, , , , , , ; , , ,,; , , , , , , , , , ,, , ; , , ,, , , , , ; ,, , , : ; , , , ,, , , , , , ,, , , : , ( ,, , , , , , , ; , ,, , ( , , , (, , , , , ,: , , , ， , , ,, , , , ), , , (, ( , , 试 剂 和 仪器 前 言 , 博 武 , ,原位杂交检测试剂盒 ( 士德 生物工程有限公司 ， 牙齿萌 出是一个复杂且被严密调控的生理现象 。在牙齿萌 汉 ),, 北京 中杉金桥 生物 技术 有 限公 司 ) ， ,显色试 剂盒 ( ， ,,,, , 高清 晰彩色病理 图象分析 系统 ( 促 , ， (, ,出过程 中 ，需要分化成熟 的破骨细胞作 用于骀 向的牙槽 骨 ， 哈尔滨 医科大 学 使骨吸收 以形成牙齿 的骨性萌 出通道。在牙齿 萌出后期需要抑 中国地方病控 制中心 ) 骨保护素( , , ,, , , 制破骨细胞来保证 萌出牙齿 的稳 固。 , ,, ,, ,,, , ， ( 针设 计 及 制 备 ,,探 , 是 , , ; , , , ，,, 超 , , , ,, ,, ,) 肿 瘤 坏死 因子 ( ,, ,,, ; ,, ) 家 族 成 , , , 根据基 因库 中登 录 的大 鼠 , ,基 因 中编码 , , ; ,, 为核 因子 ,员， ,;,, , , , , — ,, ,,, , ,受体 活化剂 配体 (,,,, ;, , , , , 序列及探 针设 计原 则 ，针对 大鼠 , ,靶基因的 , ,序列为 : , , , , ,, — , , , , ， , ,) , ,, , 与 ,, ,结合 ( ) ’ ,, ,, ,,, ,, ,, , , , ,, ,一 ’; , ,; , ,,, , ,, , ,, 的饵受体 ， , , , ,,, , , , ,, , ,, , , ; ,, ( , ,,与破骨细胞膜上 的受 体 , ,竞争性抑制 , , 抑 ( ) ’ , ,,, ,, , , , , , ,, ,一 ’ , ,,结合 ， , , , 一 , , , ,, , ,, ,, , , , , , , ; 诱导 成熟破骨细胞调亡 。本 实验从 ( ) ’ , , , , , , ,, , , , , , , ,, 一’制破骨细胞的分化及成熟 ， , , , ( ,, , , , , , ,, , , , , , ; , , 为 经地高辛标记 ，, , , ,,表达量 变化的角度对 牙齿萌 出过程进行 探讨 ， 由武汉博士德生物工程有 限公司合成。 临床上解决乳恒牙替换异常提供必要 的理论依据 。 ( , , 方 法 ( ,石蜡切片 的制备 ,, , ,( ( ,, , ,戊 巴比妥钠对 ,,, 大 鼠进行 腹 ,材 料和 方 法 心脏灌注 ,, 腔麻醉 ， , (,生理盐水至无血色液体流出 ，,多聚 甲 (,,实 验动 物 ,,, , 灌 取 ,,多聚 甲醛 固定 醛 (,,,,, ,水配 制 ) 注 ， 下颌 骨 ， 、, , ,, , 有 出生后 , , 、,天 ,,, 大 鼠各 ,只 ， 哈尔滨 医科大学 , , ,、 , 。,, ,, 微波联合脱钙至切片要求 ， 常规包埋 。唇舌 向 , , 附属第一 医院动物实验中心提供 。 黑龙江省“ 基金项 目: 十一五” , ,, ,, ) 攻关课题资助项 目 ( , , , , , 金星爱 ，, , (， ， 作者简介 : 主治医师 ， (, ,)女 硕士 ， 主要研究方 向: 儿童 口腔及颌面部生长发育 ，— , : , , ??, , , ( , ,, , , ;, , , ,, ,, , , 刘英群 ， — ,:, , ,,,,; , 通讯作者 : , ,, ,,, ,,, ,？ , , , ( , ( 期 , , (,, , ,,— , , 收稿 日 :, ,,—,接收 日期 : ,—,, ) ? ,, ,, ? 现代 生 物 医 学 进 展 , , , , ,,, ,,, 昭 , ,,,, , , ,;, , ,)每牙切 ,张切片。切片( ， 值进行方差分析。( , ,染色 石蜡切 片经常规脱蜡 至水 ， , ,( , 流水充 苏木素染色 ， , 结果 伊红染色 ，分水洗 ， 常规封片 。( ,原位杂交染色 石 蜡切 片经 常规脱蜡至水 ，(, , ，经 ,,, 染色观察 ,,( , ， , ,( (, , ,水配 置),, , ,, , 室温 , ,,， , ,水洗 , , ,,,,次 ; 滴加 ,,柠 图 ) 大 鼠出生后下颌第一磨牙的牙胚形 态( ,。 , ( ,?消化 , ,,，原位杂交用 , , ,,光密度值测定及统计学分析 檬酸新鲜稀释 的胃蛋 白酶 , , , ,, , , , ,,, ,次 ;用 , 聚 甲醛 ,(洗 , ,,,次 ， , ,水 洗 , , ,多 , ,, , 台 ,,, 大 鼠下颌 第一磨牙萌 出过 程 中牙 方组织 中牙囊成 ,, ( , ( ,, ，, ,,, , ,() , , ,, 玢段 出生 ,, , , 室温 固定 ,,,， , 纤维细胞 , , ,,骨内萌出, 阳性表达 萌出中期 ( , 含有 ,,, , ,， , , ,, , ,,, , ,天 ) ,?,小时 ，,?杂交过夜( 白对 后 ,水洗 , , 次 ;预杂交 , , 空 与萌出早期( 、 出生后 ,天 )晚期 ( ,天 比较 出生后 , )照 以 , ,代 替杂交液 ) , , , ,, , , ,, ,依 次洗 差异有 统计学 意义 ( , (, ， 中早期 比晚期 差异显 著 ( , ( , , ; , , ,、( , 、 ( , , , , , )其 ,, ,? , , 生 物素化 鼠抗 地高 辛 , , )成釉细胞中 ,,涤 ; 常山羊血清封 闭 , 正 ,,,; , , ,; ,,,,,骨 内萌出阶段萌 出中期 阳性表达 ? , ,,， , ,,, ,次 ; , , , ,洗 , , , ,，,? ,,, ， , 与萌 出早 、.