警校生毕业实习报告

秦艽炮制研究《中国药典》2005版13种中药材薄层色谱彩色图谱（可编辑） 单位代码: 分类号:一??一 学 号:壁墼?垦 密级:.??一 西北大学 硕士学位论文 题目: 素莲炮剑班窒 虫园药典&鱼版曼弛 圭蕴越莲星鱼遭显燕毽遣 作者; 高蝇 捂导教耀: 至塞丛 专韭按本职务: 垂熬蕉 指导教;: 盐圭是???专业技术职务: 整撞 药 学科专业: 生 堂 . 答辩日期: 学位授予日期:?? 二六年五月摘 要 .本文以秦艽为材料,采用高效液相的分析方法,以龙胆苦苷的含量为指标, 研究了秦艽药材分别在?、?、?、?、?、?、?、 ?、?、?干燥时,不同的干燥温度对秦艽中龙胆苦苷的影响; 秦艽的不同炮制方法即清炒、酒炒、阴干、暴晒、清蒸、酒蒸、奶煮对秦艽中龙 胆苦苷含量的影响。结果发现秦艽药材在干燥的过程中,从?~?,龙胆 苦苷的含量逐渐升高,在?时达到最高。从?~?,龙胆苦苷的含量 逐渐下降,在?时含量降至最低。因此秦艽药材的最佳干燥温度为?。 另外,对于不同的炮制方法来说,酒炒品中龙胆苦苷的含量最高,其次是清炒和 暴晒。奶煮后的药材中龙胆苦苷的含量最少,这说明了秦艽传统炮制方法以及秦 艽古方用药的的合理性,为秦艽饮片的质量标准的制定进行了基础性研究。 . 《中国药典》正文分药材和成药两部分,对于每一种中药材都有鉴别项,为 了使鉴别项中薄层色谱鉴别更加规范化,药典委员会对版《中国药典》一 部决定制定配套的《中药材薄层色谱彩色谱图集》。这一项目我们承担了种中 药材即桂枝、肉桂、仙茅、甘草、淫羊藿、土贝母、芫花、蒺藜、牛蒡、杜仲叶、 南五味子、篇蓄、独活的标准彩色图谱的制定任务。这种中药材薄层彩色图 谱的制定都是以《中国药典》中各药材鉴别项下的薄层鉴别条件为主要依据,并 参考大量的文献资料,在尽量不变动药典条件的基础上,对这种中药材的彩 色图谱做了标准化的研究,制定出了这种中药材的标准彩色图谱。在研究的 过程中,力求做到图谱的实用性、美观性、艺术性,并达到图谱信息的晟大化, 为版《中国药典》的做出更好实施贡献 干燥温度 炮制 龙胆茜苷 关键词:秦艽 中药材 薄层色谱 《中国药典》 蒯 绷砌口卅州螂踟口圮, , 出 攮 印穗:矗 出裙主矗 秽?越 锄妇獬撬拜蝴洳忍薤国攘蠡越黼?《霆珏 氍盘玎幽雠 瓣羹珏娌 删面雅球蝌口艘脚朋矗尸髓, . ?、 加?、?、?、?, 童歉熊魄?撼畦 瓢 ?? ??。 羲班童越?,氇 锄 侥 壤 乃 叩 曲 差雌瓣 ?.饿,, , 岛 呔。 ? 静避.矗 ,童?张 砖辩驳罐耋诲蔽稚氇【。熊 撼 醅垂或。谯礴如, 跚口咒 口,咖如。户扫 砸 瑚?蠡痨鑫攥攫裹辩。嚣羲出主珏羹豁撼糕鞋韭静莪《赫拄惑珀瑶采群鞋矗 萝 , 叩’恤 曲 盯 也雒” 孙璐? ?’ 馥《?.确 弘醴磕辑?舔氇娃 如娃 耐 埝磕 蓼氆 ,.搬 站柏 , 。 ’ 瓤?童蚤,魏?溉疆蠡?黼箍 馥撼箍? 建珏?射 重嘣 . , 瞄 瓠:&撑赫舛掰拄翔内旅 援琢‘鬈璐珏 鬈主糟主? 。 莪 豫? 董’?装嚣 点 西北大学学位论文翔识产权声明书 本人完全了解学校有关保护知识产权的规定,即:研究生在校攻 读学俄期闯论文工作的翔识产权单位属予西芤大学。学校有权保留并 囱晷家有关部门或执构送交论文的复印件和电予版。本人允许论文被 查阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学 位论文。同黠,本人保证,毕业屠缝合学位论文研究黎题再撰写的文 章一律注明作者单位为西北大学。 保密论文待解密后适溺本声明。 . 学谯论?框害签墓:难黼瓣虢烈 砌锋诌毽?》以薛冗多 西北大学学位论文独创性声明 一本人声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导。进行的研究工 作及取得静研究残巢。据我所知,除了文中转稍加以标注和致谢的魏 方外,本论文不包食其他人已经发或撰写过的职究成果,也不包含 为获得西北大学或其它教育机构的学位成证书而使用过的材料。与我 一同工作的嗣志对本研究所徽的任何贡献均已在论文中作了胡确静 说明并表示谢意。 学位论文作者签名:高爰霹 ?年箩月。占舅第一部分秦艽炮制研究 第一章前言 秦艽为龙胆科植物大叶秦艽&砌口州邺妇.、麻花秦艽 以如竹曲?拥叩.、粗茎秦艽电如 旭嬲口“船 . 和小秦艽“口月口幽“以 .的干燥根,是我国重要的传统中药之一, 始载于《神农本草经》,列为中品,“秦艽主寒热邪气,寒湿风痹,肢节痛、下水、 利小便。”《名医别录》称“秦艽能疗风,无问久新,通身挛急”。附由此可见秦 艽在祖国医学中是治疗风湿痹痛,关节病必不可少的药物。国内外学者对它的本 草考证,原植物,生药学,化学成分,药理作用,临床应用等方面都作了一定的 工作。 .秦艽妇口嘞砌心盯.植物研究进展 .秦艽口册叩细妇?.的植物学与本革研究 ..秦艽口,叩?,.的植物学特性 秦艽岔脚,印自,厶忍』』.为多年生草本,斜上或直立,不分枝。主根粗 大,长圆柱形,扭曲不直,有少数分枝。茎圆柱形,无毛,高~厘米,基 部为残叶纤维所包围,基生叶莲座状;茎生叶对生,基部联合,叶片披针形或长 圆锥状披针形,长~厘米,宽~厘米,先端钝尖,全缘,通常有脉。 聚伞花序,簇生于茎顶,成头状或腋生呈轮状,无梗:花萼膜质,一侧开裂,呈 佛焰苞状,萼齿小,通常~裂或不裂,花冠筒状钟形,蓝色或紫色,冠檐裂 片卵形或椭圆形,褶三角形啮齿状。花蕊枚,花药长圆形,子房无柄,花柱短, 柱头裂,蒴果长圆形,稍外露,种子椭圆形,深黄色,无翅,花期~月, 果期~月。 浚植物产秦岭北坡陕西的周至、眉县、太白,南坡陕西的佛坪、凤县及西端 北坡甘肃的天水和南坡武都、舟曲等地,生于海拔~米的山坡草地或 林缘,分布于我国东北、华北、西北及西南等省,前苏联、蒙古也有。“。..秦艽甜叩幻妇忍.的本草研究 秦艽作为传统中药,在我国具有悠久的药用历史,历代本草皆有收载,内容 大致相同。《名医别录》载:“秦艽生飞鸟山谷”,弘景日:“今出甘松、龙洞、蚕 陵,以根作罗纹相交长大黄白者为佳。”苏颂日:“今河陕州郡多有之,根土黄色 而想纠,长一尺已,粗细不等。枝干高五六寸?六月中开花紫色,似葛花?每于 春秋采根阴干。“”根据本草植物形态记载,我国学者夏光成先生考证后认为秦 艽是龙胆科龙胆属秦艽组植物。根据《证类本草》所附秦艽图可知古代所用秦艽 为今龙胆属植物大叶秦艽‰删腮盯?抄』厶角』』.。《中华人民共和国药 典》版所规定的种秦艽原植物为大叶秦艽胁册脚?矗,妇 、、糠茎秦艽. .、.,卜秦芄.曲.、 麻花艽 ,,月毖觑。但是陕西和甘肃两省的主流秦艽商品均为大叶秦 艽的根。另外从本草记载:“今出经州、娜州、岐州者良”可知秦艽佳品产自陕 西。李时珍也指出“秦艽出秦中,以根作罗纹相交者为佳,故名秦艽,秦纠”。 所以四种正品原植物中以大叶秦艽最为重要,作为秦艽药用历史悠久,并且处于 黄土高原腹地的陕西、甘肃两省是其地道产区”。 .秦艽的化学成分研究现状 秦艽的化学成分曾经是个有争议的问题。早期的研究者认为秦艽主含生物碱 类成分。年傅丰永等人首先从中提取分离出三种生物碱,分别命名为秦艽 碱甲、秦艽碱乙、秦艽碱丙?。但是后来有研究者指出秦艽中本不存在生物碱, 而存在大量以龙胆苦苷为主的裂环环烯醚萜苷类,傅丰永等人所提取出的生物碱 正是此类成分与提取过程中使用的氨液反应而生成的毗啶类生物碱。丽且郭亚健 等进行了一些实验”,也验证了这一观点。陈千良等人在实验中发现,龙胆苦苷 的含量占整个指纹图谱峰面积之和的左右”。纪兰菊等人还在秦艽中发现了 落甘酸等成分【】 综合国内外文献”。?“,将已知的秦艽化学成分列于表。 表 已知的秦艽化学成分 类型 名称 .龙胆苦苷 .獐芽菜苦苷“ .獐芽菜瞢 .’....葡萄糖基龙胆苦苷 ’一?? 裂环环烯醚萜苷类 .’....葡萄糖基獐芽菜苷 ’一一??班 出 .三花苷.大叶苷 .大叶苷 .秦艽苷 环烯醚萜苷 .哈巴菅 皇婴墼韭 堕翌盟塑堕堕 .?雒 氧萘类 .大叶苷 .大叶苷 .苦参酮 二氢黄酮类 .苦参酚 ..香树脂.哪” .齐墩果酸 三萜类 .豆笛醇 .栎瘿酸 .褐煤酸 .栎瘿酸 .谷甾醇 .胡萝卜甾醇 甾醇类 .豆甾醇 ..谷甾醇一.氧.龙胆糖苷 ?一 .一谷箔醇.?..葡萄糖苷?出 黄酮碳棼 凳生潮营 二糖蕊瑚 .龙耱二糖娃曲 苯甲酸衍生物 .,一硝 其中,代表成份龙照苦苷的结构式如下: 。秦艽及其纯学簸分鹣翡骥律臻帮雍床救穑送爨 .秦艽粗制剂的翡理作用 秦艽乙醇浸荆对大鼠氍清性关节炎能瀛轻关节肿旅程度并蕊遮其消退】, 能降低寐葬鍪动甥的壶压;对炭癔枵菌、辩形痢疾书萤、鬟乱弧藏、产气枵 菌、 福氏痢疾杆菌、流产杆菌、会黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、副伤寒秆菌、 肺 炎抒蔻、臻寒挺蘩、变形抒蓑歉、交形耨蓥嚏等均蠢糖测佟鼹”。 秦艽水煎液对醋酸诱发小鼠扭体反应肖明显的镇痛作用。而且能明显降低小 鼠熬瘸豫攒数搭】。承浸液在试管雨靖多耪痰获奏鬣富不睡程度翡箨粥终弱。阁 ..秦艽碱甲的药理作用 .抗炎作用:大鼠腹腔注射秦艽碱甲冰能减轻甲醛往及蛋清性关节腑涨, 并加速肿胀的消退,其效果与水杨羧钠难舭楣当【。氮化秦芄醇提物总生 物碱腹腔注射对大鼠蛋清性关节炎的作用稍强于豢艽醇掇物总苦瞥。 .踺中舷秘经系绞麴终爱:小劐爨辩腹黢注射?~/对大鼠小鼓有镇 静作用,还能增强戊巴比爨钠的催眠作用,但较大剂量时则有中檀兴奋作用,出 现兴奋、惊厥、导致麻痹死亡。光热刺激实验表明秦艽碱甲能提高大鼠的痛阈, 但作用短暂,分钟即消失【】。抗过敏作用:能明显减轻组胺喷雾引起的豚鼠 哮喘及抽畜。腹腔给药能明显降低毛细血管的通透性,对兔的蛋清性过敏休克有 显著保护作用【。 .其他药理作用:能直接抑制心脏引起实验动物血压下降,心率减慢。对大鼠 小鼠均有升高血糖的作用,是通过肾上腺素释放引起的删。 .毒性:对小鼠的为,口服瓜;腹腔注射限【,静脉注射 ~/【。 .龙胆苦苷的药理作用 .保肝作用:对和.氨基半乳糖造成的小鼠肝脏急性损伤模型, 每天两次,共给次,以嘶,】的剂量腹腔注射龙胆苦苷,给药第三天采血 测定血清值。发现龙胆苦苷治疗组血清值明显低于模型组。以等剂量 给正常组小鼠腹腔注射龙胆苦苷与正常对照组腹腔注射同体积生理盐水皿清 无明显差异。采用氏灌流仪灌流大鼠肝脏,灌流液中加入龙胆苦苷 和,小时内以灌流液及肝组织病理观察为指标,龙胆苦苷组与 组比较有显著差异,同时以致大鼠新鲜分离肝细胞损伤为病理模型, 在细胞培养皿中加入龙胆苦苷,以培养液值及分离肝细胞、糖元、脂 肪染色和电镜观察为检测指标。发现龙胆苦苷保护肝细胞作用在一定范围内与剂 量成正比。给药组的及微结构损伤均明显弱于对照组。由于分离肝细胞实 验排除了神经、体液因素的影响,故认为龙胆苦苷具有直接的保肝作用。进一步 实验表明龙胆苦苷对于硫代乙酞胺、.致急性肝损伤,致慢性肝 损伤及豚鼠同种免疫肝损伤模型动物的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸 氨基转移酶指标和肝脏形态都有一定效果,可明显降低多种急性肝损伤和慢性 肝损伤动物血清转氨酶水平,使肝组织的块状坏死,肿胀及脂肪变性有不同程度 的减轻,且可促进肝脏的蛋白合成”。 .利胆作用:龙胆苦苷能增加大鼠胆汁分泌,促进胆囊收缩捌 .健胃作用:日本学者经胃瘘管注入龙胆苦萤,能够促进胃液及游离盐酸分泌, 而舌下涂抹或静脉注射无效。这说明是龙胆苦苷直接作用于胃所致【捌。 .其他:龙胆苦苷能抑杀疟原虫。急性毒性外鼠腹腔注射,【甄小时内。犬静脉注射舭致死亡,腹腔注射班。 ..獐芽菜苦苷的药理作用踟 .獐芽菜苦苷易被皮肤吸收,经酸及酶分解后的产物,能使皮肤血流旺盛,从 而促进毛发生长,故用于治疗脱毛症。 .獐牙菜苦苷抑制离体回肠、子宫、胆囊平滑肌及胆管扩约肌的自主节律性活 动,具有明显的镇痛作用,其镇痛作用大于氨基比林,相当于吗啡或左旋四氢巴 马汀,这是临床使用藏茵陈制剂治疗急性腹痛和急性胆囊炎、慢性胆囊炎急性发 作症的理论基础之一。 .獐牙菜苦苷具有抑制中枢神经及抗炎、退热、抗惊厥作用。 .獐牙菜苦苷制剂对胃肠道、胆道平滑肌痉挛性疼痛有显著解痉作用,总有效 .%。 率达 ..其他成分的药理作用 苦参酮在浓度为. /时能抑制多种腐霉菌丝体的生长。可在 上抑制黄瓜枝抱和白色念珠菌。大鼠口服/【可抑制盐酸一乙酸诱导的胃溃 疡。抑制磷酸二酯酶的为捌。 一 对黄瓜枝孢菌生长有抑制作用,.即可抑制其在 上生长,其甲酯需方可。但是其甲酯可抑制白色念珠菌。然而以其为 苷元的苷类叩、却无此作用【 獐牙菜苷具有退热、抗惊厥的作用【州。 ..秦艽的临床应用 .风湿性和类风湿性关节炎 秦艽是许多祛风湿方剂独活寄生汤、大秦艽汤的重要生药之一,主要用 于风湿性关节炎。用秦艽或秦艽、白芷各加入普鲁卡因后制成 只注射液,肌肉注射,每次,曾用于多人次。对风寒引起的周身疼 痛,多年风湿性腰腿痛均有止痛效果【。 秦艽总生物碱制成注射液,每支含总碱以秦艽碱甲计,肌肉注 射,用于治疗风湿性关节炎和类风湿性关节炎有显著的镇痛、消肿、退热和 恢 复关节功能作用四。 .治疗流行性脑脊髓膜炎秦艽注射液每毫升含生药.曲,肌肉注射,每次~。治 疗例, 用药~天治愈。无一例发生后遗症,疗程中未发现副作用【】。 .治疗小儿急性黄疸型传染性肝炎 以秦艽为主,结合辩证施治加用其他药物,治疗小儿急性黄疸型传染性肝炎 也取得较好的疗效】。 .治疗肺痨骨蒸潮热【 以秦艽、鳖甲为君药的秦艽鳖甲汤辩证施治进行加减治疗结核所致的骨蒸潮 热共例,痊愈例,显效例。 .治疗肩周炎【】 袁成业用以。粮食白酒浸制秦艽、木瓜、乌头等药材制成的家传秦艽木 瓜酒治疗肩周炎例,经天,痊愈例,显效例,有效例,无效 例,总有效率.%。 综合以上各节,秦艽的化学成分复杂,药理作用显著,临床应用广泛。现 代化学和药理学研究都阐明了化学成分和临床应用间的关系。如龙胆苦苷的保 肝作用,秦艽碱的治疗风湿作用等等。 秦艽的炮制研究 中药必须经过炮制之后才能入药,这是中医用药的一个特点,也是中医药学 的一大特点。中药炮制是根据中医药理论,依照辨证施治用药的需要和药物自身 性质,以及调剂、制剂的不同要求,所采取的一项制药技术。炮制是我国的一项 传统制药技术,也是我国医药学特有的制药术语。是祖国医药学的重要组成部分。 中药炮制质量的好坏将直接影响疗效。明代《本草蒙签》讲道:“儿药制造,贵 在适中,不及则功效难求,太过则气味反失。”清代《修事指南》中亦同样提 到 “炮制不明,药性不确,则汤方无准而病症不验也。” 秦芄是一味传统的祛湿、除痹中药,有近二千年的使用历史,其炮制方法在 历代医药书籍中收录很少,资料贫乏。由于历史的沿革,地方色彩浓厚,学派众 多,认真总结和研究这些传统经验,可为深入的进行秦艽现代研究提供借鉴。.秦艽的采集 秦艽在春,秋二季采挖,春季在其出苗时,秋季在白露前后,但以秋季质量 较好。挖出后,除去茎叶,须根及泥土,晒至柔软时,堆成堆,使自然发热,到 根内部变成肉红色时,晒干。或可在挖根后,直接晒干。小秦艽挖根后,洗去泥 沙,搓去黑皮,晒干?。 .秦艽的炮制历史 关于秦艽的炮制,医药书中记载的很少,其炮制目的主要是洁净药材,干燥 药材,便于贮藏和保管或增强药物的疗效。中药大辞典中记载的秦艽炮制品有秦 艽和炒秦艽”?,中华本草记载有酒秦艽“,它们的炮制方法如下: 秦艽:拣去杂质,除去芦头,稍浸,润透切片,晒干。 炒秦艽:取秦艽片,放入锅内,以文火烧至表面稍有焦斑,取出放?。 酒秦艽:又名酒炒秦艽,为秦艽片用黄酒淋洒,稍闷,待吸干,用文火微炒 入药者。每秦艽片,用黄酒。酒制后可增强活血舒筋之功。 .秦艽炮制品的临床应用方剂 中医用药是在中医“辨证论治”的理论指导下,在中医临床实践中总结归纳 出来的,而中药的复方配伍更能体现中医理论的蹩体观念,方剂被认为是调整机 体内系统平衡的最优化治疗系统。“。药物通过方剂配伍可以起到增效、减毒、缓 和药性和产生新药等作用,这和中药炮制的作用相似。如果既,中药炮制偏重于 药物内部的调整和整体效应的协同,那么,复方配伍就是药物外部或药物之间的 调整和整体效应的协同”“。中医在临床时,遗方用药和炮制品的选用是由病人的 具体情况而言的,因此方剂的疗效和药物的炮制紧密相关,单昧药的炮制应合方 剂结合起来研究。秦艽炮制品的临床应用方剂如下“’: 治中风手足阳明经,口眼歪斜,恶风恶寒,四肢拘急:升麻、葛根、甘草 炙、芍药、人参各半两,秦艽、白芷、防风、桂枝各三钱。上细切。每服一 两,水二盏,连须葱白三茎,长二寸,煎至一盏,去滓,稍热服,食后。服药毕, 避风寒处卧,得微汗出则止。《卫生宝鉴》秦艽升麻汤 治背痛连胸:秦艽一钱五分,天麻、羌活、陈皮、当归、川穹各一钱,炙 甘肇五分,生姜三片,粱枝三钱酒炒。水煎服。《医学心恬》秦艽天麻汤 治风中经络而痛:羌活一钱五分,当归:钱,川穹一钱,熟地三钱,秦艽、 自慧酒炒、独活各一钱.王分。《不知医必要》秦艽汤 《治黄:秦芄?夫两。缀铿,摹两旗予,瑷上驽滔一身,整黻半舞,滔绞取 汁,去滓。空腹分两服。或利便止。《海上粲验方》 治黄疸,皮肤眼睛如金黄色,小便赤:秦艽五两,牛乳三升。煮取一升, 去滓。痰芒硝一鼯服。孙恩邀 《》渗虚劳濑热,咳激,盗汗不止:秦莞去萤、土、柒葫去萤、懿鸯、 甘草锉、炙各一两。上四昧,粗捣筛。每服三钱匕,水一盏,煎至六分,去 滓,温服,不计时候。《圣济总录》秦艽汤 治骨蒸壮热,腿肉溺瘦,唇红,颊赤,气粗,四肢困倦,粳蠢盗汗:柴胡、 鳌擎去裙,蘸炙,臻丸耱者、遣蚤疫各一掰,秦茏、当罄、懿母各五钱。上 六昧,为粗末。每服五钱,水一盏,青蒿五时,乌梅一个,煎至屯分,去滓温服, 空心、临卧,各一服。《卫生宝鉴》秦艽鳖甲敞 治消瀑,除烦燥:秦艽二琵去茁,甘草三分炙微券,锉。上件药, 捣戆凳教,每鼹霆钱,滚窳一中盏,天生姜攀分,蒸至六努,去浮,不谤薅镁溢 服。《圣惠方》 治小便艰难,胀满闷;秦艽一两去荫。以水一大盏,煎取七分,去滓, 食前分作二服。《圣惠方》 ?浚楚强甭会:豢麓隽寒掺之。《仨豢赢糖方》 四治发背疑似者:溱艽,牛乳煎,当褥浃利三、五行。《海上集验方》 .炮制对含苷类药物的影响。” 赞系糖分子中的坯状半缩醛上的羟基与嚣糖藤分营元中的羟基或酚羟 墓灸承缀台瑟藏豹懿舔状缭醛薅生穆。察梵中赘主要盛分麓趱蓉萤是一类环 涝 醚萜营类成分。 台苷类成分的药物往往在不同细胞中含肖相应的分解酶,狂一定温度和湿度 的袋件下可被丰应的酶所分解,从而使有效成分减少,影响疗效。所以含苷类药 窜物常用炒、蒸、烘、焯、或暴晒的方法破坏或抑制酶的活性,以保证药物有效物 质免受酶解,保存疗效。 酒作为炮制辅料,可提高含苷类药物的溶解度,而增强疗效。 .秦艽炮制所存在问题 秦艽的采收加工比较简单,只是洗净后干燥,历代医书对于秦艽的炮制记载 和研究也较少,主要有阴干,暴晒,炒秦艽、酒秦艽。秦艽的炮制发展到现在越 来越被人们所忽落,目前人们对于秦艽的应用多数采用暴晒的方法,主要是去除 秦艽药材中的水分来达到干燥的目的。但秦艽中所含龙胆苦苷类成分极性大,且 不稳定,易溶于水,易受加工炮制的影响。中药材的质量是确保中医缶床用药和 中成药生产的首要环节。中药材生产的质量得不到保证就无法生产出合格的产 品。中药材的质量涉及面较广,影响因素也较复杂,但主要影响其质量的是加工 炮制。虽然历代医书对秦艽炮制记录较少,但秦艽作为中药材的应用却备受人们 的关注,秦艽药材的质量也成为秦艽制剂研究的首要问题。秦艽的炮制到底对秦 艽的化学成分和在临床上的应用有什么影响,秦艽炮制的原理是什么,秦艽传统 的炮制方法是否合理,到目前为止还没有人对此作过研究。为了更好的发挥秦艽 的作用,了解秦艽的炮制机理,就必须对它的炮制作一具体的研究,使秦艽发挥 它最大的疗效。 综上所述,本文通过对秦艽炮制工艺的研究,考察不同炮制方法对秦艽药材 质量的影响。为确保秦艽药的质量提供可靠的依据,使药材的炮制走向规范化、 标准化、法制化及现代化。 第二章实验材料和方法 仪器与材料 .仪器 嚣?嚣蘸效溅糕色遘役 一 芏毛一张?,糟卜 :毛蛰? 型低速离心机北京医用离心机厂;水系溶剂微孔过滤膜天津市色谱科学技 术公霹产藜开爰部;器卜?委耄予天孚硝。 .色谱条件 。 色谱校:。 ?×。溯,,:流动栩:甲醇一水 :;捡溅波长;弱辩;柱湛室湛;?;流速:.疆/璎;进群虽: 。 。穗辩 龙胆凿苻对照晶./购自中国药晶生物制品检建所,批号 ???驰。秦芄采鑫莲憩大学捷物鑫,经王鹃褥教授鉴定漾疆秘菇大时黎茏 .。 黄滔鹣予莲嚣超京,为绥辨黄滔,含静慧为韩,符台国家标准 /?。 .试帮 擎醇 磷安毪学试裁厂 西安化学试剂厂 乙酸矗酯 三氯翠烷 鞭安稼学试裁厂 %己醇 疑 鹾安化学试剂厂 嚣安纯孥试裁厂” 无隶己簿 雨醌 夔 鞭安化学试弃厂 西安佬举试剂厂 萨丙弊 异孬熬 龋安佬学试裁厂 熊觚螓工糖王根腿觚 丁醇 缓级缓蚴缓蛾级缓级 两安化攀试剂厂秦艽药材的干燥研究 目前秦艽采集后作的主要工序就是使药材散失水分。药材干燥常采用自然干 燥法即晒干和阴干晾干法,但易受天气影响,温度不易控制,且容易沾染灰尘 和细菌,不适合现代化大生产,无科学依据作指导,无法保证饮片质量,容易发 霉变质或成分损失.而采用人工干燥法,烘箱烘法优点是可控性强、卫生并能缩 短干燥时间提高效率。 秦艽主要有效成分为龙胆苦苷。含苷类成分的药物往往在不同细胞中含有相 应的分解酶,在一定温度和湿度条件下苷类成分可被相应的酶所分解,从而使有 效成分减少】。很多含有苷类药物的中药材常用快速高温的方法来破坏或抑制 酶的活性,以保证药物有效物质免受酶解【。秦艽的干燥工艺研究以龙胆苦苷 为指标,考察了烘干温度和时间对秦艽中龙胆苦苷含量的影响,为秦艽药材的干 燥加工提供了理论基础和生产指导作用。 秦艽炮制品的研究 据上述文献记载,秦艽的加工炮制方法有暴晒、阴干、清炒、酒炒。并根据 古方秦艽三两,牛乳一升,煮成七合,作两次服下来治疗黄疽,本实验还了 用牛乳煮的炮制方法,用以分析牛乳对秦艽中龙胆苦苷的影响。 酒具有活血通络,祛风散寒,行药势等作用。酒作为炮制辅料,可提高含苷 药物的溶解度而增强疗效。另外,蒸制是利用水蒸气加热药物的方法,加辅料蒸 制主要在于改变药物的性味,产生新的功能,扩大临床适用范围,如酒蒸大黄可 增强其疗效【。而秦艽本身具有祛风除弊的功效,秦艽中的龙胆苦昔属于环烯 醚萜苷类成分,极性大,且不稳定,易溶于水,易受加工炮制的影响。根据这些, 本实设计了秦艽新的炮制方法,即酒蒸,来进一步考察炮制方法和辅料酒对于秦 艽中龙胆苦苷的影响。并以清蒸、清炒做以对比。 秦艽药材的加工处理 .秦艽干燥药材的制备 从西北大学种植园采挖秦艽后,除去茎叶,迅速将根部洗净,剪成毫米的小段,平均分成份,每份约壳,精密称量,敬其中份放予鼓风干燥箱 中分别于?、?、??、?、??、】?、?、?、?、? ?温度下烘歪恒重,取出,密封,酲录烘干时间,并依次编号为母~母, 备弱。 再取剩余的一份未烘干的鲜品,精密称最后,按供试品溶液的制铸方法制备。 爨备含量测定震。 .秦艽各炮制品的制备 ;暴硒取净芬车孝在阳光下暴硒至干至梅重天,翻最高温?,最低 温?。 :阴干取净药材在通风处自然晾干至怄重天,近干透,测定时在褥烘 箱中予??予摄,澄度?~?。 ;清炒将净药材置热锅中用文火炒干,取出,放?。 静:滔渗涛净药车芎瓣黄溪瓣透,黉熬锈审瘸文火囊多予,每羽魄蓊毒砉蠲焚 潘 歉清蒸取净药材上蒸锅快速蒸透分钟,取密焉溺烘箱中于?干 燥。 :酒蒸取净药材用黄淄拌匀,鬻锅内加热蒸遴分钟,淑出后用烘箱 孛予??予燥。每?蜒药材用黄涟氆嘻 ;奶煮取净药材加新鲜牛奶液拱煮,煮至药材切开内秃自心时,取出厢用 溪箱中子??干燥。每臻隗薮誊孝瘸孛翁援。 据有关文献报邋川,文火温度约在~?左右,结合目前生产设蓊及 生产实际,确定以上逡麓楚在控售瞧妒表面锅底溢度为?左右避行豹 实验方法 。氇谱条襻 色谱柱: ×.,肛;流动相:甲醇水:; 碱浏波长:;流速:艋;柱温:塞溢;避样量:单。 .对照晶溶液的制备 精密称取宠胆酱苷对照晶.,鬻容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀即 得。 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液、、、、、蛳注入高效液相色谱仪,按上 述夔谱条臀溺定龙壁苦营懿毪诿峰瑟穰。港避样登对氇遴峰瑟鬏俸圈,褥线 睦强 赡方程为,×..×护,相关系数为?.。结采表明,龙胆苦 苷在.龇~.即与其色谱峰面积呈良好的线性关系。 .精密度考察 供试黼滚滚经徽琵滤膜过滤蜃,精密吸取融注入离效滚楣色避仪测定, 重复次,褥麓疆蔷萤蜂蘑狡为。%致。。 .加样翻收率试验 精密吸取供试品溶液份,每份加入一定嫩的对照品溶液,依法测定, 结果龙膛蒋赞平均回收率为.%,为.%鞯。 。藏疆蔫赞禽蘩懿淫定 精密称愆供试品药材各.克,加甲醇,予超声波上越声撕,过滤, 滤液蒸干溶剂后用水溶解,置量瓶中,加水黧刻度,摇匀。再精密墩取 置量激中,加水至刻度,摇匀,作为供试品溶液备用。 分别精密吸取盐试品溶液与辩照晶溶液各鼬,淀入滚穗色谱饺,遂褥溅定, 记录色谱蜂如下,并以下式计算龙疆苦营静含量,含薰臻%表示。 ?鞴?;?焉‖ 抖品俄精暖 对照品色谱豳 ?×岛 ×% % :龙腮蒋萤的含量:对照品龙胆苦苷的浓度 :对照品龙胆苦苷的峰面积 氐:供试品中龙胆苦苷的峰面积 :供试品的称样量第三章实验结果与分析 秦艽干燥研究结果与分析 .秦艽药材鲜品中含水量的测定 在实验中从?~?测量到秦艽从鲜品到干品的含水量为: 含水量【鲜品重干品重/鲜品重】×% 【./】×% .% .秦艽药材鲜品中龙胆苦苷的含量 实验中测量到秦艽鲜品中龙胆苦苷的含量为: 龙胆苦苷的含量由实验测的为:.%。 .秦艽药材干品中龙胆苦苷含量的理论值为: 将鲜品中龙胆苦苷的含量折算成?时干品中的理论含量为: 理论含量【鲜品重×鲜品中龙但苦苷的含量/鲜品重.鲜品重×失水率 ×% 【.×.%/.?.×.%】×% .%。 .烘干温度对龙胆苦苷含量的影响 记录实验的烘干时间,并依上述方法测定各烘干温度下秦艽中龙胆苦苷的含 量如下表和图所示。 表币问烘干温度对秦艽中龙胆莆瞥含量的影响 融 蠡髓畦鑫鲻鹅嬲珏勰珏毫神瑚鼬雌霉燃 舌抖细一口掰唧移,加 : 囊 冀。。 鞠 鳓 献? 图不同烘干温度对秦笼中龙胆苗营含量的影响 实骏中鲜晶瓠篝为??瞬予爆品审楚疆善棼的含量荛。%,禹在?? 时直接烘干的秦艽药材中龙胆苦游的含擞为.%。两者禽量相琏。这说明在 ?烘干彗雩,楚耱游营含蘩攫失最小。 从表和图中我们可以看出,从?~?,龙胆苦营的含援逐渐升高,在 ??对这蓟最商。扶?~?,麓艟苦替豹含量逐渐下降,在??对含 爨降至最低。其原因可能是,随麓温度骢拜高,药材细胞中相应耱类的分解酶 失 活的速度就越快,龙胆酱苷的含艇就会越高。但当温度禳过?时,这种酶几 乎全部失活,酶瓣作用霹不予考虑,僵过窥匏湿发可能会导致龙艇苦营中的 续醛 结构发生其它的变化,所以龙胆莆苷的含匿明显下降。因此,秦芄在加工过程 中 戆干澡澈度应戳?为宜,在?砉莛予薅,麓膣苦蚤按失装少,洪予霹闽较 短。 。予澡对润与干绦温度豹关系 对干燥时阐和十燥温度作图如下: 看 釜四 分 塞。 沮虞‘. 图烘干温度与烘干时间的相关性曲线 从图中我们可以看出,在?时形成了曲线的拐点,这说明在?之前, 随着温度的升高,药材干燥时所用的时间迅速缩短,在?之后,随着温度的 升高,药材的干燥时间变化很小,几乎不变。据记载,人工干燥药材的温度, 一般药物以宜超过?为宜。含芳香挥发性成分的药材以不超过?为寅。而 上述曲线正好说明了这一点。 综上所述我们可以看到,秦艽药材的干燥温度应以?为宜,在此温度下 干燥,干燥时间短,龙胆苦苷的含量较高,适合予饮片的加工炮制。 秦艽炮制品的研究结果与分析 秦艽七个炮制品中龙胆苫营的含量如下表所示: 表秦艽不同炮制品中龙胆的苦苷含量 啪甜 伪砌帕 瑚?协憾鹏 嘲咖 ??日日咖砌 各秦艽炮制品的高效液相色谱图如下:、.八 一.~.,.~/\删四;佑”” 艄 柏‘, 图酒蒸 图清蒸 赫一 ?’’’????砷?’ 珀”?删洲???” 健? ??口“?” 悯? 蛹? 螭蛐 图阴干 图暴晒 图清炒 ?’’’’?’’’’?’’’’’’’’’,下’ 响?自 图酒炒 从表中我们可以看出,秦艽各炮制品中,酒炒品中龙胆苦苷的含量明显升 高,高于正常干燥品和暴晒品中龙胆苦苷的含量,其原因可能是因为在酒炒 的过 程中,使秦艽药材的组织结构变得疏松,有效成分更容易浸出。而在清炒品中, 龙胆苦苷的含量也高于平均值。用手感觉,炒过的药材明显变得松脆。另外,酒 作为炮制的辅料,对苛类成分有一定的溶解作用。因此酒炒品种龙胆苦苷的含量 较高。这也说明传统的炮制方法酒秦艽有其一定的合理性。在酒蒸品中,龙胆苦苻的含鼙较低,明显低予龙胆蓄背的平均含量。这说明 在蒸毒《熬过程中,农蒸气不錾豹浸澜骛耱,瑟药穆篷事惫蠲溪浸逡过,热主滔对 龙胆苦替的溶解作用,使得龙胆餐苷大部分随水熬气流走,所以才‘导致了酒蒸品 辩龙疆蔷萤含量较低,瑟且遣低予清蒸晶,这也黼接说鞘了浮在豢茏药孝毒的逡翻 过程中对纰胆苦蒋有一定的溶解作用。 暴硒品中龙胆苦苷的含量和豢艽中龙胆苦营宙量的平均埴较接近,稍微低予 平均值,这说明暴晒的过程中,强烈的阳光可以邈速的杀灭秦艽中龙胆苦蛰掘应 的分解酶。而在阴干品中,龙胆苦苷的含擞明显较低,这也说明在阴于的过程中, 因为瀑疑较低,麓握苦蛰耀应分勰酶戆存溪时溺较长,导致大量豹龙耀莠罄嫒分 解。因此龙胆苦瞥的含量在阴干品中较低。 弱牛奶焘蘩毒孝噬爱,瓣煮遘豹秦芄药榜审忿释苦营懿禽量遴抒了溅定,萁含 量非常低,只有.%。其原因能是在煮的过程中,龙胆苦苷大景的进入了牛 奶液中,因诧药幸才中的含量菲常少。扶丽可落说鞠古方髑牛奶液煮秦艽来治疗黄 癜有一定的道理。第四章讨论 秦艽药材的干燥 药物制成饮片后,为确保药效,便于贮存,必须及时干燥,否则影响质量。 由于各种药材性质不同,干燥方法不尽相同,主要分为自然干燥和人工干燥。干 燥方法是否适当是保证药物质量的关键。 自然干燥法主要是将药材在日光下晒干或簧阴?通风处阴干。晒干法和阴干 法都不需要特殊设备,但易受气候影响,饮片易不太卫生。这样对于饮片质量的 标准化很难实现。 从秦艽的阴干和暴晒来看,就龙胆苦苷的含量来说,暴晒对其含量影响不是 很大,但阴干对龙胆苦苷含量的损失较大,而且,阴干药材时,费时长,药材易 于变霉,不利于药材质量的保证,应该不予采用。暴晒虽然对龙胆苦苷含量的影 响不是很大,但其易受气候的影响,因此也应该考虑改用人工干燥的方法。 人工干燥是利用一定的干燥设备,对药材进行干燥。人工干燥不受气候影响, 而且卫生,并能缩短干燥时间,降低劳动强度,提高生产率,操作易于控制和自 动化,有利于饮片质量的标准化研究。 从秦艽的人工干燥试验分析来看,秦艽药材在人工干燥时的温度应采用 ?为宜,此时龙胆苦苷的含量最高,而且干燥时间短,利于饮片质量的保证。 从以上分析可以看出,秦艽药材干燥时最好采用人工干燥法,人工干燥法的 温度应以?为宜。 秦艽药材的炮制 中药材必须经过炮制成饮片之后才能入药,这是中医临床用药的一个特点, 也是中医药学的一大特色。同一种药材因炮制方法的不同在临床上往往有不同的 应用。中药炮制的目的主要是减毒增效、改变或缓和药物的性能、改变或增强药 物的作用趋势、以及利于贮藏和保管等。 秦艽药材传统的炮制方法很简单,就只是阴干、暴晒和滔炒。阴于和暴晒的目的是利于贮藏和保管,潸炒是为了增强秦艽祛风散寒的疗效。从试验分析来看, 豢戆窝淄渗毒其一定懿合理性,爨錾可戳僚涯秦茏药耪中蔻壁苦麓豹含塞维持在 其平均值,酒炒后可使龙胆苦苷的含量明显提高,但阴干对于秦芄药材就龙胆苦 簿豹含量来说缀不稍,瘦不予戳采用。 秦艽炮制问题探讨 麸梵次遽豢浚验磅囊来看,瓣秦茏熬憋铡终了一定懿磅究工佟,撼示了秦茏 炮制的部分机理,也对秦芄的炮制工艺根据处方疗效作了一定的改进和创新,如 清炒、清蒸、潘蒸和奶煮。毽实簸串还煮许多闻鼷有特予徽进一步深入磷究,如 鹿增加更多的指标成分对秦艽的炮制方法进行考察。总结此次试验,我认为秦艽 炮制的避一步研究还应做到以下几点: 增烟炮制黯的检测撸标 林鹏程等人】对藏药秦艽中的落甘酸和龙照苦苷成分进行了含量测定。但 瓣子陕疆产秦梵楚蚕窘露落彗酸到鐾蘸逐不暖礁,毽没蠢夫对其含量镟以溅定, 在炮制研究中,增加检测指标可以对炮制的原理说明的更加明确,更有说服力。 绉冒爝燕对裁锈晶浸密羲静测定 药材炮制的过程中不可能只对某一个成分起作用,如果对某一个成分的影响 比较丈,那同样会对这~成分所属的菜~大类藏分影确院较大。麓膳苦替属于环 烯醚菇蛰类成分,是秦笼中的苦眯营类,因此应增加对秦芄醇浸出物的含爨测定 对炮制品进一步作指纹图谱研究 警绞圈灌裁更全蘧、更系统敬爱姨药材竣鹱爨强特镊,它是扶整体上对药毒 毒 的质量做以控制。指纹图谱也是实现中药现代化的重要内容之一。对比炮制前后 黻及各熬制磊之润旨纹鬻港靛麓舞,更黢发瑾逡翻蔫螽秘各逡翻菇之润药謇毒豹变 化,合理的分析炮制的作用和原理,也有利于中药炮制晶质量的研究,符合中药 饮片蔟爨的规范仡、标灌纯研究。同时,氇符合了中药溅代亿骈究酌要求 汹憋秦艽炮制研究纳入秦芄应用的金过程 中药应用是以中药材开始的,无论怒野生遂是栽培的药用植物,经浆收加工 矮,其医疗俸魇除与药孝考本身镶康有关雏,与炮制加工的适当与否夜蓄羹接的关 系。中药村经过炮制处理后,可以在整体上收到转化或调整之效。中医辨证论治、理法方药都离不不这个黧要环节,要靠依法炮制来调整药效,协同药力,从而使 凑限弱蘩椽适应缝练复杂戆疾瘸戆震要。中药懋鼷是中麓裁裁静一帮分,在窖褒 上来讲,也就是沟通中药材与临床应用之问的桥梁。在“中药材?.饮片?伟剂 躐谲裁?一漆床”这一邋程中,斑篱仅筏着隈予翁物本身是不够豹,应该扶炮籁 这一环节入手,研究炮制在整个过程中的作用。秦艽的炮制研究也应如此,将豢 芄药材熄稍与稿床应用结合起来研究。第二部分 《中国药典》?版一部 种中药材薄层色谱彩色图谱 第一章 前言 中药是祖国医药宝库的重要组成部分,是祖国传统医学赖以防病治病的主要 物质基础。中药的真伪优劣直接关系到人民用药的安全和有效。在检验中药真伪 方面通常采用的检测手段有形态鉴别、理化鉴别和光谱分析等。而作为色谱技术 一个分支的薄层色谱由于其独具的长处已成为考察药品真实性的一种有效、简便 的手段而被广泛应用于中药分析。 中药薄层色谱在中国药典中的应用和发展 年代以前,《中国药典》中药薄层色谱分析的技术与应用和国外一些药典 如英国药典、印度药典、美国药典、德国药典及欧洲药典基本同步。年代后 期,虽然各国药典逐渐倾向于应用液相色谱技术,但在草药分析领域,薄层色谱 仍然广泛的被应用,尤其是欧洲国家。他们在机械、仪器、计算机化、自动化等 发面都有了快速的发展,而我国在技术上则一直滞留在初始阶段的状态。国外实 验室早已放弃自制薄层板,改用商品预制板,而我国大多数实验室使用的依然是 实验室自制薄层板,同时多半使用的是简陋的器材,操作粗放,长期处在“低水 平、广覆盖”的状态。在颁布年版《中国药典》以后,国家药典委员会对 此陆续组织了多次规范化学习班,并出版了《中国药典中药薄层色谱彩色图谱 集》,在普及薄层色谱操作规范化方面起到了良好的作用,许多实验室逐渐注意 操作条件和操作环境控制的重要性,薄层色谱鉴别的质量也有了明显的提高和改 善【】。 版‘中国药典》薄层色谱彩色图谱项目 虽然在年版《中国药典》后出了配套的《中国药典中药薄层色谱彩色图 谱集》,但随着药典的不断更新和现代实验技术和仪器的发展,旧的中药薄层色 谱彩色谱图谱集远远不能满足于现阶段人们的需求。因此,中国药典委员会计划 实施出版与版《中国药典》配套的薄层色谱彩色图谱集。这一项目我们共 承担了味中药材的薄层色谱彩色图谱的完成工作。第二章影响薄层色谱分析的主要因素 常规薄层色谱由于同板同时可以检测多个样品,分析时间短,固定相吸附 剂廉价,即用即去,不必担心样品中杂质的污染,检测不受溶剂的干扰,色谱 的直观性强等优点而在中药分析方面被广泛应用。另一方面,因为它是一种 “敞 开系统”的色谱技术,外界环境条件对被分离物质的层析行为影响很大,分离机 制也很复杂;其次是由于分析的全过程是横向的离线多步骤操作,所以操作的技 巧也明显的影响色谱质量。因而薄层色谱,尤其是常规色谱,又被视为是一种难 以驾驭的技术”】。为了充分发挥薄层色谱技术在中药分析方面的优势,提高色 谱的分离度和重现性,注意控制影响色谱技术在中药分析方面的因素是非常重要 的。 样品的预处理及供试液的制备 中药的成分复杂,未知成分多,供试液中溶出的物质物质较多,其中既有预 测成分,也有其它“杂质”,常常由于相互干扰或背景污染而难以得到满意的分 离效果,甚至难以辨认。所以许多情况下为了得到一个较为清晰的色谱,样品提 取物经预处理,使供试液得到净化,往往是一个重要的有时甚至是关键的步骤。 制备样品供试液所用的溶剂一般要求溶解度不宜太大,粘度不宜太高,沸点适中, 而对于中药材又常常希望将成分尽可能多的被提取出来,所以最常被选用的是甲 醇或乙醇,因此预测成分和许多其它“杂质”均被提取出来,供试液的净化就 显得更为必要。样品供试液净化的方法主要是萃取法,是利用不同物质在不同溶 剂中溶解度的不同来净化供试品。有单一溶剂萃取法、分段萃取法、液液萃取法、 固液萃取法等忡。 薄层色谱的点样技术 点样是薄层分析的第一步,也是非常关键的一步。它既关系到能否得到可以 重现的有良好分离度的薄层色谱,也关系到定量测定结果的准确。薄层扳对样品容积的负荷量是极为有隈的,点样容积过大明照降低分离效 率。?般点样原点直径应尽量小于【】。 溶解样品的溶剂均肖不同的程度的洗脱力,所以在上样的同时,样品在原 点位爨羧程环形震耳,漾点嶷经懿扩教促进这秘溪开。蟊莱撵懿密滚裁中溶耪 度缀大,缘点籍交成空心嘲,这静效应对隧鹾豹线性震开造盛缀不利的影晌。所 以原则上应选择对被测成分可以溶解但溶解发不是很大的溶剂。中药成分复杂, 难以兼顾,不可能面面俱到,通常在预测成分不清楚或预测成分覆菔的极性范围 很宽的睹况下,宁可选用“溶解”范围较宽的溶测,如甲醇、乙酵镶。对于有的 瑟耪鞭测藏分弱确明确,蜀蠢舞黠睦戆邃释溶潮。 供试液的溶剂在原点的残留,也会改变髓开剂的选择性,特别是供试液的 溶剂极性与展开剂的溶剂极性差别较大时更为明恩;再者,亲水性溶剂残留在原 点吸收大气中的水分特别是在高湿度环境对色谱质量的影响也不可低估。因 我上棒辩圈多予漂或上徉纛继续于燥戬除去窳杰残存豹溶裁是嚣溪瓣。毽痤尽可 能避兔离温加热,戳免漶热不稳定减分的破坏,导致样品中某些成分的的交往。 点样装置微升毛细篱或色谱注射器对潍层表面的机械损协对色谱质量 尤其对定量分析将带来灾难性的影响,特别是融裁有样品的硅胶袭灏的颗粒被划 伤或刮除屠粜裁更为严重。因扰点样时尽量小心操佟,傲到对板霭不损伤或将损 伤簿鬣戮最氛限度。 提黼点样操作水平是获得高质量色谱的关键技术之一,一个组成简单的样品 的鉴别比较容易,一般只黉柱同一薄层板上供试黼与对照品在相间位镯上显相同 的斑点,就基本上达到目的。因此高质量的上样不仅是定量分析的的需要,也常 誊楚宠魏分橇豹要求。 吸附剂的活性与相对湿度对薄层色谱的影响 吸附剂蛇活性是由表面能与比表面积决定能。表面能越大,单位重量的表碰 稷越大越大,暖藤力越大,簿活娃越裹,爱之,啜瓣力越枣,溪彀越诋。毽黢之 所以奇吸附力,是出于其激蕊含众多的硅酵蒸,礁醇基的活波羟麓岛极性忧台物 或不饱和化合物形成氢键所致,活波型及游离溅的硅醇基数目决定蒋硅胶的活。陛 【】。醚醇恭是亲水性基团,很容易吸附水而成为水合硅醇基而失焱活性。自制薄层板程??烘干,就是使水合磁醇基变为游离磁醇基而活化;反之,活 纯磊鹭穗胶薄瑟缀可懿吸辫大气牵韵拳蒸气分子露降低灞性。遣就是说张胶表穗 吸附水分的作用是可逆的,在不同的相对湿度下,可以达到不同穰度的吸附平衡。 在舀常实践中,当活纯羽硅胶薄屡板献从干燥嚣中取出,从准备点样到箍开前, 游层板熄暴露在嶷验室的大气中,薄层扳的活性就取决予实验环境的相对湿度。 其他条件相同的情况下,相对澄度对色谱质量的影响是搬明显的。通常认为薄层 怨谱教羹现性差,薄层援处在不疑麴提重漫废下操终是烹要豹鼹霆之一。 如赤芍与白芍在低湿度%下展开,二者不易区分图,在高湿度% 下震牙,色谱静分鑫度援舞,麸露嚣示滋嚣者豹差异潮。 :% :% 圈黼:潞 隧黼:蹋 ~白芍 ~赤芍 有些样品成分和所选用的展开剂对相对湿度有较宽酌适应能力即对相对潞 废要求不太严格,大致农相对瀵溲溅~%下褥到相当稳定的憩谱。糍的样黯 对相对湿度特别敏感,遮时就的严格的空时实验的相对泓度“”。为了不同实验堂 之阙及不同季节缘霹重溪实验终采,痰尽霹缝袭攘对澎发可控戆条终下展开戈 寂,并记录实验时实际的相对湿度。相对湿度控制的方法,可在澈槽展开箱的一侧槽中加入适当浓度的硫酸,将 点撵磊斡薄瑟投救天舅一稽中,密澳~分镑,霉翅溪开裁鼹曩二;另一秘方 法是在预先准备好的条件控制箱如平卧式展开糟,内撼适当浓度的硫酸,或用 犬毒适寰鼹予瓣器蠹避抒。 控制相对漫度用的硫酸滚液如袁? 所需硫酸浓度/ 相对温度 凌酸撰 农瑶? ? .? . 一 镛 。 ? 硫酸;黔.%~?% 溶蕤蒸气塞薄层答谗孛麴佟建 薄层色谱与桂色谱的隧别之一就是游剂蛉蒸气槌在鼹歼箱中也参与色谱展 开 筒形成三维韵器桥过程舢。震开褡的气体空闻在滕析过稷中起着熏要的作 用。 逶常麟谓鲢“矮开籍镶秘”应该严格送分跌‘凡种清况嘲; 展开箱饱和:是指展开前及展开中溶剂系统中所肖组分猩展开箱的整个 气薅空瓣逡到乎鬻,恧只霈囊震西裁或规定懿溶裁翡蒸气在靛哭籍孛鼷孚囊 ~定的时阳,即通常所谓的“预平衡”。 爨颈暇瓣:邋鬻是豢薄层蔽粒予爨蔽嚣瓣寒禳溶裁满瀑豹麓劳辩曩嚣 襁空闻气体分子的任何程度的吸附。即通常所谓的“预饱和”。 移壤附泡和:是指薄艨板的涞被溶剂滑瀛鹩部分与鼹歼箱的饱和气体空阔 达至平缀状态,即“完全饱和”,这是预吸附的极限状态。 嘏细管饱和:是指薄层税所有的自由空隙借毛细臀的作用被溶荆充满的 过程,帮糨当予袋殍竞蜃靛状惫。 饱和的情况与展不箱的类型有关,常舰的平底展开箱在展开『较难达到展不 箱饱和,所以普通的作法是在内壁加贴与之镰宽等离的用溶剂润湿的滤纸,谢助 予这裂键帮。惩双攒溪开麓褒其一铡糟孛麴入溶裁《叛较客荔遮达笺骧鼹稳 窝及 展开箱的饱和。 在常蕊薄层色谱分据中,预啜辩和疆辩镪帮对瑟祈遘程煮缀大静影响。墩辩 剂袭面的空间是有限的,当用多组分溶剂展开时,不同溶剂分子在吸附区相赢竞 争,发生“取代效成”,尤英在薄层板的下都,一个组分酌等温豹嗷附盥线会受 到另外组分的性质鞠耀对饱莘程度的影响。如硅胶楚亲水性吸附剂,它首先对溶 剂缎分中的极性分予有更犬的亲合力,所以在吸附平衡的过程中,被吸附的备组 分黪浓菠魄与气俸空阕靛缀不摆圈,与溶裁瓣液耜终藏差襄燹大。露戳怒蒙在不 加控制的的情况下情况时很复杂的。简言之,薄层板在没有预吸附时,混合溶剂 系绕孛懿一辩分溶裁分子青逑择毪熬被蔽瓣弱薄垂叛瑶上嚣形残霞定程,同时在 板谢上形成溶剂梯度从而直接影响到层析过程,溶解的蒸汽褥、液相和固定捆一 超牵句成了一个作用机制复杂豹三维麓析过程榍。 如人参的薄层撩别在展歼前展开箱加展开剂预平挺分钟熙与不经 预平衡直接展开所褥的色谱圈有明显的不同。即经预平衡后展开的色谱