牛黄解毒片中重金属含量的比较分析

浙江中医药大学学报2010年3其第34卷第3期 牛黄解毒片中重金属含量的比较分析 郎玉英 浙江省中西医结合医院 杭州 310003 摘要：[目的]比较6种牛黄解毒片中重金属的含量。[方法]采用电感耦合等离子体原子发射光谱法分别测定人工胃液处理前 后6种牛黄解毒片样品中重金属的含量，并进行比较分析。[结果]6种牛黄解毒片中总金属含量均超过国家限量，而经人 工胃液处理后的酸可溶性重金属含量则低于其总重金属含量，部分符合或基本符合国家标准。[结论]酸可溶性重金属含量限 度可作为牛黄解毒片及舍重金属矿物中成药的质控指标之一。 关键词：牛黄解毒片；酸可溶性重金属；总重金属；电感耦合等离子体原子发射光谱法 中图分类号：R285．6文献标识码：A文章编号：1005—5509(2010)03一0427一02 Studi髂onContentsofHeavyMetalsinNiuh吼ngJieduTabI船LangYuyingZ^巧妇行g丁md衙。起口ZChi九P5已口ndⅣP盯P埘Md掂i挖已， Hn九gz矗o“(3jD003) Abstract：[0bjective]Tocomparethecontentsofheavymetalsin6typesofNiuhuangjiedutables．[Methods]Thecontentofheavy metalsin6typesofNiuhuangjiedutablesbeforeorafterpassedthroughmetab01icallyman—madestomachliquidwasdetectedbyin— ductivelycoupledplasmaatomiceminssionspectrometry(ICP—AES)．[Results]Thesecontentsofheavymetalsin6drugsweremore thantheorderinchinesestandards．Butthecontentsofacid—solubleheavymetalsweremuchlessthanorpartiallyaccordedwithto— talheavymetalsinthesamebatchofsample．[Conclusion]Thecontentofacid—solubleheavymetalsmaybetakenasoneofthei— temsofqualit)，contr01fortheNiuhuangjiedutabletsandtraditionalChinesemedicinepatentprescription． Keywords：Niuhuangjiedutablets；acid—s01ubleheavymetal；totalheavymetal；ICP-AES 中成药牛黄解毒片来源于《痘疹世医心法》的传 成药约o．59，精密称定，加人人工胃液(按中国药典 统中医药处方，是l临床常用的中成药之一，由人工牛 2005年版一部附录ⅫA制备)100ml，于37℃恒温水 黄、雄黄(As2S2)、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草浴振荡提取1h，4000r／min离心5min，取上清液 等药味组成，具有清热解毒的功效，用于火热内盛， 2．0ml，置25m1凯氏烧瓶，加8．Oml消化液[V 咽喉肿痛，牙龈肿痛，口舌生疮，目赤肿痛等症。 (HNO。)：V(HClO。)一4：1]，静置4h，加热回流消 含矿物的中成药是中药的重要组成部分，在已 化至无色透明，加1．OmIH：0。继续消化1h，冷却 有国家标准的中成药中占18．3％[1]。方中所含的矿后，定量转移至100ml容量瓶中‘2|，加超纯水稀释至 物药，一方面是药物的有效成分，另一方面也对人体 刻度，摇匀，备用。取相同体积的人工胃液，同法消 有一定的潜在毒性，如朱砂中所含的汞、雄黄中的砷 化，制备酸可溶性重金属测定用空白溶液。 等容易在体内积蓄，影响人体正常的生化反应及生 2．1．2总重金属测定用供试品溶液分别取成药 理功能坤]。为探讨体内消化环境对制剂中重金属溶 约0．19，精密称定，置50ml凯氏烧瓶，加8．Oml消化 出度的影响，本实验采用电感耦合等离子体原子发 液[V(HNO。)：V(HClo。)一4：1]，静置4h，加热 射光谱法(ICP—AEs)测定了人工胃液处理前后6种回流消化至无色透明，加1．OmlH：O：继续消化1h， 牛黄解毒片中重金属含量，并进行了比较分析。 冷却后，定量转移至100ml容量瓶中，加超纯水稀释 1仪器与材料 至刻度，摇匀，备用。取相同体积的消化液，同法消 IRIS／AP型电感耦合等离子体原子发射光谱仪化，制备总重金属测定用空白溶液。 (美国ThermoJarrellAsh公司)；Milli—Q超纯水系2．2 混合标准溶液的制备 分别取各重金属元素 统(Millipore，BedfordMA)。牛黄解毒片：取国内已 标准品溶液适量，用5％硝酸溶液制成混合溶液，梯 上市多年的六家不同生产企业生产的牛黄解毒片， 度稀释，作为混合标准品溶液备用。 分别编号为：①、②、③、④、⑤、⑥。标准单元素溶液 2．3测定方法仪器工作参数：检测器CID的低波 浓度均为100”g·ml～，购自国家标准物质研究中段(<265nm)积分时间：15s；高波段(>265nm)积分 心。临用前逐级稀释，介质为5％硝酸。胃蛋白酶 时间：5s；进样蠕动泵转速：100r／min；进样雾化器氩 (上海伯奥生物科技有限公司，生化试剂，批号 气压力：28psi；辅助气流量：1．oL／min；高频发生器 070702)，所用盐酸、双氧水为分析纯，高氯酸和硝酸功率：1500w；样品冲洗时间：5s；测定波长范围：180 为优级纯，实验用水为超纯水。 ～360nm。依次将仪器的进样管插入各个浓度的混 2方法 合标准品溶液中进行测定，以每一浓度测得的3次 2．1供试品溶液的制备 读数的平均值为纵坐标，相应元素标准溶液浓度为 2．1．1酸可溶性重金属测定用供试品溶液 各取 横坐标，作标准曲线[3]，并进行方法学考察。 427 万方数据 2．4 样品重金属含量的测定 取各样品液，按 “2．3”项操作平行测定。从标准曲线上计算得相应 的浓度，扣除相应试剂的空白值，计算样品中各元素 的含量。 3 结果 3．1方法的检出限及线性范围 由标准曲线得到 一系列回归方程，确定其相关系数及线性范围，并平 行测定酸可溶性重金属测定用空白溶液5次，计算 得到该方法对样品中各元素的检出限。结果见1。 表l检出限及线性范围 元素检测波长／ 标准曲线兀累 环准凹线 nm 线性范兽，7相关系数 肚g。ml 3．2回收率实验结果根据样品中各重金属元素 的含量，加入适量的混合标准品溶液，进行加样回收 实验[2]，结果平均回收率为As95．20％、Cd 103．4％、Cu97．44％、Hg108．9％、Pb95．71％， RSD分别为1．7％、0．4％、2．3％、1．8％、3．O％。 3．3样品重金属含量测定结果按上述方法测定 上述6种成药中总重金属(THM)和酸可溶性重金 属(ASHM)的含量，结果见表2。 表2 6种牛黄解毒片中重金属含量测定结果(弘g·g-1) 428 浙江中医药大学学报2010年3月第34卷第3期 (1)“一”表示未检出，小于表1中对应元素的检 出限；(2)“*”为超出《药用植物及制剂进出口绿色 行业标准》规定(As≤2．0、Cd≤o．3、Cu≤20、Hg≤ O．2、Pb≤5．O)。 4讨论 4．1 牛黄解毒片为传统中药制剂，由人工牛黄、雄 黄(As2S2)、石膏、大黄、黄芩、冰片、桔梗、甘草等药 味组成。由表2结果可知，以制剂中总重金属作为 限量指标时，6种牛黄解毒片中重金属As含量均大 大超出《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》规定 的限量L4j。 4．2牛黄解毒片、柏子养心丸等相当一部分中成药 中都含有雄黄(以硫化亚砷As2S2为主要成分)，且 含量很高，毒性较大。目前，砷的含量测定有紫外分 光光度法、比色法、原子吸收分光光度法、电感耦合 等离子体原子发射光谱等，多为将样品干法消化或 湿法消化，但所测结果往往为各重金属元素总的含 量，而不能区分该金属元素各形态的含量，因此，在 测定中成药重金属含量的同时，应同时考虑其生物 溶出度及重金属元素形态，从而有助于发现中成药 及其重金属元素的作用机理，为进一步提高疗效，降 低毒性，开发新药提供了依据。 4．3本实验研究证明，含重金属矿物中成药制剂中 所含的重金属尽管超标，但经人体胃液消化后并非 全部吸收，大部分被排出体外，而只有部分被人体吸 收。中成药中重金属元素的生物活性只有在其被人 体吸收后才能表现出来。重金属元素的存在形态首 先直接影响了它在人体的生物利用度，从而对人体 的机能产生程度不同的作用14]。 因此，单纯以制剂中总重金属量作为评价中成 药(特别是含有矿物类的口服中成药)的毒性限度指 标有一定的不合理性。建议可将酸可溶性重金属含 量限度可作为含重金属矿物中成药的质控指标之 一，拟订合适的安全性限度标准。 参考文献： [1]中华人民共和国药典委员会．中国药典(一部)．[S]． 2005：1． [2]王欣美，李丽敏，王柯，等．关于含矿物中成药中总重金 属和酸可溶性重金属含量的比较研究[J]．药物分析杂 志，2006，26(11)：1578—158o． [3]吴巧凤，曾晓艳．苏州荠芋总黄酮与微量元素含量的测 定[J]．广东微量元素科学，2004，11(9)：34—37． [4]冯江，黄鹏，周建民．100种中药材中有害元素铅、镉、砷 的测定和意义[J]．微量元素与健康研究，2001，18(2)： 43—44． (收稿日期 2009—12—03) 晋融槲。 书砩霜褂耳号哪玲虱砷呻吕再辫串尊 万方数据 牛黄解毒片中重金属含量的比较分析 作者： 郎玉英， Lang Yuying 作者单位： 浙江省中西医结合医院,杭州,310003 刊名： 浙江中医药大学学报 英文刊名： JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 年，卷(期)： 2010,34(3) 参考文献(4条) 1.冯江;黄鹏;周建民 100种中药材中有害元素铅、镉、砷的测定和意义[期刊论文]-微量元素与健康研究 2001(02) 2.吴巧凤;曾晓艳 苏州荠苧总黄酮与微量元素含量的测定[期刊论文]-广东微量元素科学 2004(09) 3.王欣美;李丽敏;王柯 关于含矿物中成药中总重金属和酸可溶性重金属含量的比较研究[期刊论文]-药物分析杂志 2006(11) 4.中华人民共和国药典委员会 中国药典(一部) 2005 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zjzyxyxb201003084.aspx