酶与百草枯中毒肺损伤的相关性研究

，肺泡灌洗液中WBC的浓度 可以评价肺损伤的严重程度【191。在本研究中，染毒组大鼠BALF中WBC总数比对照 组均有统计学意义(P(O．01)，WBC水平从1d开始增高，7d达高峰，14d较7d有所 减少。 3、5一LO在急性肺损伤中的作用机制 白三烯(1eukotrienes，LTs)是花生四烯酸通过5一脂氧合酶(5．LO)代谢途径产 生的代谢产物，LT是重要的炎症介质。花生四烯酸通过5一Lo直接进入LT途径。 5-LO催化二步反应产生不稳定的环氧化白三烯A4。此后，白三烯A4在水解酶作 用下生成白三烯B4或在白三烯C4合成酶作用下生成白三烯C4，白三烯C4和它的 细胞外代谢物白三烯D4及白三烯E4组成炎性介质合称半胱氨酰基白三烯，是重 要的致炎因子【20】【2l】。肺脏是花生四烯酸的主要合成场所，LT是经由5一Lo途径的 主要花生四烯酸产物，它由肺泡巨噬细胞和中性粒细胞释放【221。LT通过与其特异 性同源性受体结合，能促进炎症部位几乎所有白细胞的聚集，并能增强其功能。 白三烯通过刺激骨髓多功能造血干细胞以及这些细胞在血液中的游走而影响白细 胞。白三烯还能增加粘附分子的表达(故而增强白细胞对微血管的粘附能力)，促 进细胞运动，使其向组织游移【23】。一旦白细胞到达炎症组织，白三烯可增强其生 存力和活性。白三烯主要介导中性粒细胞、单核巨噬细胞、肥大细胞的募集【2】。 白三烯在肺脏炎症反应中对白细胞的趋化作用，可能引发肺脏炎症反应的瀑布效 应【31。在Baud等的研究中5-LO的下游产物LT对纤维细胞的迁移，增殖以及基质 蛋白的增生有直接的作用【4】。外源性给予LTD4可以引起鼠类及人类的纤维细胞增 殖并且这种增殖呈剂量依赖性【5】。研究表明，LTs作为一种重要的前炎症介质，在 许多炎性疾病发病机制中的重要作用己被逐渐认识，但其在ALI发病过程中的作 用尚不清楚。在本研究中，染毒组大鼠5-LO表达比对照组均有统计学意义伴o．oo。 5-L0水平从1d开始增强，7d为表达达高峰，14d较7d有所减少，且蛋白和基因 水平变化趋势基本相一致。通过本实验研究，提示大鼠BALF中WBC总数与5一LO 免疫组化结果10D值之间存在显著的相关关系，推测5-L0在百草枯中毒急性肺损 伤及肺纤维化中可能有一定作用，但是具体机制还需要进一步的实验验证。 结论 研究表明大鼠BALF中WBC总数与病理学变化趋势基本上是一致的。5．LO 蛋白和基因水平的变化趋势基本上是一致的。大鼠BALF中WBC总数与5-LO免 疫组化结果IOD值之间存在显著的正相关关系(F0．981，P<0．001)。通过本实验研 究，提示5-LO可能通过影响肺组织中WBC含量的变化在百草枯引起的急性肺损 伤及肺纤维化中有一定作用。 24 本研究创新性的自我评价 5-)J旨氧化酶(5-LO)与百草枯(PQ)中毒肺损伤的相关性国内外尚未见报道， 本研究从蛋白水平和基因水平探索了5一L0与PQ中毒肺损伤的相关性，并探讨其机 制，为进一步研究5-LO在百草枯中毒肺损伤中的作用奠定了基础。 ·参考文献· 1． ChanBS，LazzaroVA，Seale吧eta1．Therenalexcretorymechanismsandtheroleoforganic cationsinmodulatingtherenalhandlingofparaquat[J]．PharmacolTher,1998，79：193-203． 2．Peters-GoldenM，HendersonWRJr．Leukotrienes[J]．NEnglJ Med，2007Nov 1；357(18)：1841-54． 3． BowtonDL．LeukotrieneB4，acuterespiratorydistresssyndrome，andoutcomes[J]．CritCare Med2000；28(I)：262-263． 4． BaudL．Modulationoffibroblastproliferationbysulfidopeptideleukotriencs：effectof indomethacin[J]．JoumalofImmunology138：1190-1195． 5． VannellaKM．Cysteinyllcukotrien嚣areautocrineandparacrineregulatorsoffibrocyte function[J]．JImmunol，2007Dec1；179(11)：7883·90． 6． 赵洪文，吕长俊，李振华，等．支气管肺泡灌洗液细胞定量【J】．中国医科大学学 报，1994，23(1)：23—25． 7． 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体内脂质过氧化物明显升高；组织或细胞内谷胱甘肽含量较低时，更易PQ中毒， 因为还原型谷胱甘肽(GSH)可能在拮抗百草枯的氧化作用发挥重要作用。 2．2炎性细胞 已证实PQ肺损伤所致的炎性反应特征表现为肺内皮和上皮细胞膜受损，血 管通透性增加，膜脂质氧化物和多形核白细胞浸润(PMN)，并随服毒量增大， PMN浸润加型41。Roc圮,o等【51研究表明将30mg／l【g百草枯注入大鼠腹腔244'时后 出现严重急性肺损伤(ALI)，间质水肿，肺泡内出血，分叶核白细胞和单核细胞 炎症，透明膜形成，肺内皮细胞和上皮细胞通透性增加；蛋白丰富的水肿液聚集 在间质和肺泡间隔，从而导致动脉缺氧，肺顺应性降低，呼吸功增加。近年来， 对ALI／ARDS的认识逐步发展致对炎症发生、调控的认识。大量研究证实，以多形 核中性粒细胞(polymorphonuclearneutrophils，PMN)为主的炎性细胞与多种细胞因 子在其发病过程中起着重要作用，其中炎性