复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂的制备及其性质考察

第 28卷 第 1期 2 0 1 1 年 1 月 沈 � 阳 � 药 � 科 � 大 � 学 � 学 � 报 Journa l o f Shenyang Pharm aceutica lU nive rsity V o l� 28 � N o�1 Jan. 2011 p�1 收稿日期: 2010�03�08 作者简介:陶丽丽 ( 1984�), 女 (汉族 ) ,辽宁朝阳人, 硕士研究生, E�mail tao lili1984@ 126. com; 王思玲 ( 1962�), 女 (汉族 ), 辽宁沈阳人,教授, 博士,主要从事纳米制剂学研究, Te l. 024�23986348, E�m ailw ang slsy@ 163. com。 文章编号: 1006�2858( 2011) 01�0001�05 复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂的 制备及其性质考察 陶丽丽, 姜同英, 郑 � 力, 王思玲 (沈阳药科大学 药学院,辽宁 沈阳 110016) 摘要: 目的 制备复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂, 以期提高其主要成分 (芦丁和氢氯噻嗪 )溶出 度及生物利用度。 通过溶解度实验和绘制伪三元相图的方法进行自乳化处方的筛选, 以载药 量、载油量及粒径等为指标应用单纯形网格法优化处方;采用熔融法制备半固体胶囊并对该半固 体胶囊进行稳定性影响因素考察及药物溶出度测定。结果 复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂最 优处方为泊洛沙姆 188�油酸乙酯�聚乙二醇辛基苯基醚�聚乙二醇 400 (质量比 28�6�8�4� 44� 1�19� 1) ,该制剂中主要成分芦丁和氢氯噻嗪载药量为 128�8、57� 7 m g� g- 1; 60 � 、光照下含量 明显下降; 复方自乳化半固体胶囊剂和市售胶囊剂 1 h药物溶出度分别为 100%、48�1%。结论 所 制备的复方自乳化半固体胶囊剂具有载药量高、溶出度好的特点。 关键词: 自乳化; 半固体骨架; 芦丁; 氢氯噻嗪 ; 性质 中图分类号: R 94� � � 文献标志码: A � � 现今,心脑血管疾病是人类死亡的首要原因。 复方降压药是从不同角度,不同机制降压,以达到 相加或协同作用。由野菊花膏粉、珍珠层粉、芦 丁、氢氯噻嗪和盐酸可乐定等成分组成的复方制 剂是目前市场上使用较普遍的中老年人降血压药 物 [ 1]。芦丁具有降低毛细血管异常通透性和脆 性等作用,氢氯噻嗪为中效利尿药,二者都为降压 的主要成分, 但水中均难溶 [ 2] , 口服生物利用度 低。自乳化药物传递系统 ( self�m icroemulsify ing drug de livery system, SMEDDS) , 是由水不溶性药 物、油相、表面活性剂和辅助表面活性剂所组成的 口服固体或液体剂型 [ 3]。半固体骨架 ( sem i�so lid matrix )制剂技术是将具有流动性的半固体状态 药物及其载体装入硬胶囊的一种新技术 [ 4]。作 者将自乳化和半固体骨架制剂技术联合起来制备 复方制剂,以提高芦丁和氢氯噻嗪溶解度,进而提 高其生物利用度。该制剂相关研究未见报道。 1� 仪器与材料 L�7100高效液相色谱仪 (日本日立公司 ), ZHWY�103B恒温培养振荡器 (上海智城仪 器制造有限公司 ), ELS 800 apparatus(日本 O tsu� ka公司 ) , DMBA 450显微摄像系统 (香港 Motic 公司 ) , KDC�1042低速离心机 (科大创新公司 ), GL288旋涡混合器 (江苏海门其林医用仪器厂 ), RC�8D溶出度测试仪 (天津国铭医药有限公司 ), AH100D高压匀质机 (加拿大 ATS公司 )。 芦丁 ( rutin, 西安小草植物科技有限责任公 司 ) ,氢氯噻嗪 ( hydroch loro th iazide, 陕西圣瑞吉祥 文化发展有限公司 ), 油酸乙酯 ( ethy l oleate, 北京 风礼精求商贸有限公司, 批号 14268), 泊洛沙姆 188( Poloxamer 188,德国 BASF公司 ), 乳化剂聚乙 二醇辛基苯基醚 (乳化剂 OP,天津博迪化工有限公 司 ),聚乙二醇 400( PEG400,天津博迪化工有限公 司 ),其他辅料均为药用级,试剂均为分析纯。 2� 方法与结果 2�1� 分析方法的建立 采用 HPLC法。色谱柱: D ikma D iamonsil C18 柱 ( 200 mm � 4�6 mm, 0�5 �m ), 流动 相: 50mmo l�L- 1枸橼酸�乙腈 (体积比 78�22, 用三乙 胺调 pH 值至 4�1 ) , 检测波长: 270 nm, 流速: 1�0mL�m in- 1。精取干燥后的芦丁和氢氯噻嗪对 照品 10�01 mg和 10�03 mg, 精密称定, 置同一 25mL棕色容量瓶中, 流动相定容得质量浓度为 400mg� L- 1及 401 mg� L- 1对照品储备液。分别 取 0�4、0�6、0�8、1�0、1�2、1�4 mL于 10 mL容量 瓶中, 加流动相稀释, 定容,摇匀,各取 20 �L进样 测定峰面积。以峰面积 (A )与质量浓度 ( �)进行 线性回归, 得芦丁线性回归方程为 A = 1�50 � 10 4�- 4�55 � 102 ( r = 0�999 9 ) , 线性范围为 40�0~ 240 mg� L- 1, 平均回收率为 99�3% , RSD 为 0�35%; 氢氯噻嗪线性回归方程为 A = 6�10 � 10 5�- 3�38 � 102 ( r= 0�999 9), 氢氯噻嗪线性范 围为 10~ 35mg� L- 1, 平均回收率为 99�1% , RSD 为 0�20%, 均符合方法学要求。 2�2� 芦丁、氢氯噻嗪自乳化制剂的制备 2�2�1� 芦丁、氢氯噻嗪溶解度的测定 取过量的芦丁、氢氯噻嗪分别与 1 g的蓖麻 油、中链油 (MCT)、油酸乙酯、大豆油、VE、质量分 数 2%乳化剂 OP、质量分数 2%聚山梨酯 80、质量 分数 2%聚山梨酯 20混合,涡旋混匀, ( 37 � 1) � 恒温 振 荡 72 h, 溶 液 分 配 达 到 平 衡 后, 4 000 r�m in- 1离心 15 m in, 取上清液用无水乙醇 稀释, 按 � 2�1�条方法测定药物的质量浓度。结 果见表 1。 � � 由结果可见,芦丁、氢氯噻嗪在油中的溶解度 以油酸乙酯最大, 因此确定以油酸乙酯为油相。 但仅靠油相溶解药物不能满足给药的要求, 故进 一步选择对芦丁溶解度影响较大的表面活性剂, 以期增加芦丁、氢氯噻嗪溶解度。同时由结果可 知,乳化剂 OP的胶束溶液对芦丁、氢氯噻嗪有较 高溶解能力,可考虑作为自乳化液的乳化剂。 Table 1� Solubilitie s(S ) of hydroch loroth iazide and ru tin in d ifferent sam ples S imp le S ( rutin) / ( m g� g- 1 ) S ( hydrochloro thiazide) / ( m g� g- 1 ) C asto r o il 0� 93 2�30 MCT 1� 42 1�88 E thy l o leate 1� 52 4�29 Po lysorbate 20 135� 5 35�64 VE 0� 85 0�77 OP 360� 8 92�84 Soybean o il 153� 7 28�21 Po lysorbate 80 48� 87 16�60 2�2�2� 助表面活性剂的选择 取 OP 2�01 g溶解于 5�02 g水中,加入油酸 乙酯 0�10 g, 混匀。取上述溶液 1 g,于 37 � 分别 滴加无水乙醇、1, 2�丙二醇、正丁醇和 PEG400至 溶液变澄清,加入量。结果见表 2。 Tab le 2� The add ing we igh t of d ifferent cosur factan t when form ingm icroem u lsifying Cosurfactant E tOH 1, 2�P ropy lene g lycol n�Butano l PEG400 m ( add ing w e ight) / g 1�25 3�91 1� 15 1� 28 � � 由结果可知, PEG400、正丁醇与乙醇的助乳 化效果较好,综合考虑溶解度及挥发性,暂且选择 PEG400和正丁醇为助乳化剂。 2�2�3� 伪三元相图的绘制 以油相、乳化剂、助乳化剂各为一相, 各成分 取不同的比例, 涡旋混合后,形成均一、透明的油 溶液; 将上述溶液在 37 � 、20 r�m in- 1搅拌下用 滴管滴加到约 100mL蒸馏水中,将能形成澄明或 带有少许乳光溶液的处方点确定为相图中可形成 微乳的边界点。 固定油酸乙酯为油相, OP为乳化剂, 分别以 正丁醇和 PEG400为助乳化剂,在 37 � 绘制空白 三元相图,直线封闭区域为有效自乳化区域。结 果见图 1。从相图中可以看出, 形成的有效自乳 化区域为 PEG400大于正丁醇,且 PEG400的毒性 小于正丁醇, 所以选择 PEG400作为自乳化系统 的助乳化剂。 2�2�4� 空白自乳化液处方的优化 利用单纯形网格法进行试验 [ 5] , 测定芦 丁和氢氯噻嗪在各处方中的溶解度。控制最终微 乳中油量的质量分数为 5% < 油酸乙酯 < 25%, 依据三元相图结果,确定各组分的质量分数范围 为:油相为 5% ~ 25�0% , 乳化剂为 55% ~ 75%, 助乳化剂为 20% ~ 40%, 处方优化结果见表 3。 � � 以乳化后粒径小于 100 nm、具有较高的载药 量、适宜载油量与乳化剂含量为指标, 确定处方 7 为最优处方, 且微乳的最大载药量为芦丁 128�8mg� g- 1、氢氯噻嗪 57�7 mg� g- 1。 2�2�5� 载药自乳化液的制备 取 OP 3�09 g、PEG400 1�34 g、油酸乙酯 0�59 g,在 60 � 条件下加热熔融, 于 37 � 加入芦丁 0�60 g、氢氯噻嗪 0�15 g,使其完全溶解即得复方 芦丁和氢氯噻嗪的载药自乳化液。 2 沈 � 阳 � 药 � 科 � 大 � 学 � 学 � 报 第 28卷 � F ig. 1� Effect of d ifferen t cosurfac tan ts on the pseudo�ternary phase d iagram s Tab le 3� D esign and resu lts of the sim p lex gr id m ethod No. w ( surfactant) / % w ( cosurfactan t) / % w ( o il) / % S /( m g� g- 1 ) Rutin H ydroch loroth iazide d /nm 1 65 30 5 116�50 25� 70 64� 7 2 75 20 5 99�91 35� 74 14� 8 3 55 40 5 77�64 55� 57 31� 5 4 65 20 15 105�43 49� 95 105� 3 5 55 30 15 69�84 45� 96 122� 1 6 55 20 25 75�76 47� 23 115� 5 7 61�7 26�7 11� 7 129�60 57� 92 18� 6 2�2�6� pH值对微乳形成的影响及其对芦丁和氢 氯噻嗪稳定性的影响 � � 分别以 pH值 1�0、5�0、6�8的 PBS和盐酸溶 液为水相,加入 � 2�2�5�条制备的自乳化液, 样品 均为透明均一溶液,即 pH值不影响微乳的形成。 2�3� 自乳化半固体的制备 2�3�1� 半固体载体的筛选 取 3份空白自乳化液 (质量为 1�0 g)于西林 瓶中, 分别加入相当于自乳化液量质量分数 25% 的泊洛沙姆 188、硬脂酸聚烃氧 ( S�40)酯及 PEG 4000,加热至 60 � 熔融冷却以固化时间为指标, 结果见表 4。 Tab le 4� The selection of sem i�solid carrier Composition Po loxam er 188 S�40 PEG4000 tem uls if icat ion /m in 1�5 1�4 3�4 tso lid ific at ion /m in 5�3 9�3 2�4 � � 由结果可以看出,泊洛沙姆 188的固化时间 比较适中。 2�3�2� 复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂的制备 � � 称取泊洛沙姆 188 5�00 g,置于 60 � 的水浴 锅上加热,边加热边搅拌, 当载体全部熔融成液态 后,加入自乳化液 12�50 g, 待分散均匀后加入珍 珠层粉和野菊花膏粉各 10�00 g,搅拌, 经高压匀质 机处理,待分散均匀后将熔融液注入硬胶囊中。热 熔物在胶囊内冷却固化即形成半固体骨架型胶囊。 2�4� 性质考察 2�4�1� 最大载药量 取 � 2�3�2�条制备的自乳化半固体胶囊剂 1�00 g,精密称定, 以无水乙醇稀释, 滤过, HPLC 法测定含量,平行操作 3次。平均最大载药量为 芦丁 128�8 mg� g- 1, RSD为 0�69% ; 氢氯噻嗪 57�7mg� g- 1, RSD为 0�98%。 2�4�2� 稳定性试验 按照�中华人民共和国药典 �2005年版 (二 部 )附录 X IX C对自乳化液进行离心、高温和光 照试验。离心试验表明制剂稳定、无分层现象,光 照和高温试验结果见表 5。 � � 由结果可知,芦丁对光极不稳定,因此应室温 避光保存。 2�4�3� 溶出度测定 将自乳化胶囊 (每粒含芦丁 20mg, 氢氯噻嗪 3第 1期 陶丽丽等:复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂的制备及其性质考察 Tab le 5� The resu lts of stress test in d ifferen t cond itions �/ � t /d Appearance Content /% Ru tin H ydrochlorothiazide 40 5 Br illiant ye llow transparent liqu id 99� 9 101� 2 10 Br illiant ye llow transparent liqu id 99� 9 99� 6 60 5 Br illiant ye llow transparent liqu id 99� 8 99� 7 10 Br illiant ye llow transparent liqu id 99� 8 99� 4 L ight 5 O range red transparen t liquid 85� 6 99� 4 10 O range red transparen t liquid 69� 7 99� 2 5mg) 3粒与市售普通胶囊 (每粒含芦丁 20mg,氢 氯噻嗪 5 mg) 3粒, 按照 �中华人民共和国药典 � 2005版 (二部 )附录 XC第二法,分别以 pH值 6�8 缓冲盐、蒸馏水、0�1 mo l� L- 1盐酸 900mL为溶出 介质, 转速 100 r�m in- 1, 依法操作, 分别于 5、10、 15、30、45、60 m in时, 取出溶液, 用 0�45 �m微孔 滤膜滤过,取续滤液 20 �L注入液相色谱仪; 另取 对照液,同法测定,计算累积溶出量。溶出曲线见 图 2~ 5。 � � pH 1�0; � � pH 6� 8; � � W ater F ig. 2� D issolut ion profiles of hydroch loroth iazide from se lf�m icroemu lsifying sem i�solid m atr ix hard capsu les � � pH 1�0; � � pH 6� 8; � � W ater F ig. 3� D issolut ion profiles of ru tin from self�m icroem u l� sifying sem i�solid matrix hard capsu les � � pH 1�0; � � pH 6� 8; � � W ater F ig. 4� D issolut ion profiles of hydroch loroth iazide from conventional capsules � � pH 1�0; � � pH 6� 8; � � W ater F ig. 5� D issolu tion profiles of ru tin from conven tional capsu les � � 由图 2 ~ 5可知, 自乳化制剂 ( SMEDDS)中 芦丁和氢氯噻嗪的溶出不受溶出介质的影响, 在 3种介质 45 m in时的溶出度均超过 80% , 而 市售的胶囊在蒸馏水、pH 值 6�8缓冲盐及 0�1 mo l� L- 1盐酸中 60 m in时溶出度不超过 48�1%。 3� 讨论 a�微乳中油相含量越高即溶解于油相中的 4 沈 � 阳 � 药 � 科 � 大 � 学 � 学 � 报 第 28卷 � 药物越多,药物稳定性越好;乳化剂与助乳化剂的 用量直接影响载药量; 为此以 SMEDDS体系中芦 丁和氢氯噻嗪的溶解度、油相含量作为优化微乳 处方的指标之一。从绘制的三元相图可知能形成 微乳的各相范围,由于药物要有一定的载油量,所 以规定油相的质量分数为 5% ~ 25%。 b�考察了制剂在不同介质中的乳化情况, 在 水、0�1 mol� L- 1盐酸及 pH 值 6�8的磷酸盐缓冲 液中的粒径、乳化时间及溶出度均无显著差异,说 明本制剂体外乳化基本不受离子强度的影响。 c�因 SMEDDS口服进入体内后, 需自发形成 微乳, 故本实验在处方筛选过程中,如油相和表面 活性剂对药物溶解度的测定、相图的绘制、自乳化 速度的测定等,均尽可能采用 37 � 的条件, 以期 能更好的模拟体内微乳自发形成的实际情况。 d�油相通常选择中等极性的、体积较大的分 子,使用最广泛的是中等链长三酸甘油酯、脂肪酸 酯等。本实验中所使用的油酸乙酯为脂肪酸酯, 其溶解性和成乳能力均较植物油类好,较适宜用 作微乳的油相。 e�从微乳三元相图可知,制备的 SMEDDS体 系可被水无限稀释, 较适宜作为口服给药制剂。 该 SMEDDS口服进入体内后,被胃肠道中的液体 稀释, 不会因为稀释倍数的增加而出现破乳、絮凝 等变化,较易保持微乳状态。 4� 结论 作者制备高载药量的复方自乳化半固体珍菊 降压胶囊剂。该制剂具有溶出度较好的特性, 为 进一步用于复方降压药的研究, 提高生物利用度 奠定了良好的基础。 参考文献: [ 1] 梁珑. 珍菊降压片降压作用的探讨 [ J]. 中成药, 1999, 21( 10): 15. [ 2] 白岩,李敬筠. 氢氯噻嗪片的鉴别实验改进 [ J] .中国 药品, 2005, 6( 5): 431. [ 3] ATEF E, BELMONTE A A. Form u lation and in vitro and in vivo character ization of a phenyto in self�emu lsify ing drug de livery system ( SEDDS) [ J]. Eur J Pharm Sc,i 2008, 35( 9) : 257- 263. [ 4] 赵晓群, 顾林金, 陆伟根. 半固体骨架制剂技术在缓 控释制剂中的应用 [ J]. 药学进展, 2005, 29 ( 3 ): 116- 121. [ 5] 李华,潘卫三, 吴振,等. 长春西汀微乳的优化及其理 化性质的考察 [ J]. 药学学报, 2004, 39 ( 9) : 681 - 685. Self�m icroemulsifying sem i�solid matrix hard cap� sules to treat hypertension: in vitro study TAO L i�l,i JIANG Tong�y ing, ZHENG L ,i W ANG S i�ling (Schoo l o f Pha rm acy, Shenyang Pharmaceutica lUn iversity, Shenyang 110016, C hina ) Abstract: Objective To develop the fo rm ulation of Zhenju Jiangya ( trad itiona lC hinesem ed ic ines) self�m i� cro emu lsify ing sem i�so lid matrix hard capsu le drug de livery sy stem and eva luate the disso lutions and bio� ava ilabilit ie s o f hydroch lo ro thiazide and rutin. Methods The conten ts of hydro chlo ro th iaz ide and rut in w ere m easured by HPLC. Pseudo�ternary phase diagram s w ere con structed identify ing the eff icien t se lf�em ulsif ica� t ion reg ion. In v itro d isso lution determ ination w as carried ou.t Results The in v itro d isso lution o f se lf�m icroe� m ulsify ing sem i�so lidma trix hard capsulesw as about tw o fo ld h igher than that o f comm ercia lly ava ilable cap� sules. Conc lusions The se lf�m icro emulsify ing sem i�so lidm atrix hard capsules can be successfu lly fo rm ulated w ith h igh drug loading ra te and d isso lution. Itm ay be a prom ising a lternative for the treatm ent of hyperten� sion. Key words: self�m icroemu lsify ing; sem i�so lid matrix; rutin; hydroch lo ro thiazide; property 5第 1期 陶丽丽等:复方自乳化半固体珍菊降压胶囊剂的制备及其性质考察