肝炎病毒

医学微生物学 大连大学医学院 伦永志 第二篇 病毒学 第15章 病毒的基本性状 第16章 病毒的感染与免疫 第17章 病毒感染的检查方法 第18章 呼吸道病毒 第19章 肠道病毒 第20章 急性胃肠炎病毒 第21章 肝炎病毒 第22章 虫媒病毒 第23章 出血热病毒 第24章 疱疹病毒 第25章 逆转录病毒 第26章 其它病毒 ¾病毒性肝炎的病原体包括甲、乙、丙、丁、戊、 己、庚、TT型肝炎病毒，它们的生物学性状、传 播途径、临床特点均不完全相同，但它们均能引 起肝炎病变。 −±++−诱发肝癌 020-70%40-70%3-10%0慢性肝炎 40d （10-60d） 50d （25-75d） 50d （15-90d） 75d （40-120d） 25d （15-45d）潜伏期 粪-口、垂直输血、垂直输血、垂直输血、垂直粪-口传播途径 −−−−+细胞培养 黑猩猩黑猩猩黑猩猩黑猩猩黑猩猩 绒猴动物模型 +ssRNA−ssRNA+ssRNAdsDNA+ssRNA核酸类型 杯状病毒缺陷病毒黄病毒嗜肝DNA小RNA病毒分类 HEVHDVHCVHBVHAV病毒 五型肝炎病毒要点比较 第一节 甲型肝炎病毒 第二节 乙型肝炎病毒 ¾甲型肝炎病毒（hepatitis A virus，HAV）主要经 粪-口途径传播，引起隐性感染和急性甲型肝炎。 ¾ 1973年，Feinstone应用免疫电镜技术在甲型肝炎 急性期患者的粪便中首次发现HAV颗粒。 第一节 甲型肝炎病毒 一、生物学性状 ¾HAV呈球形，无包膜，衣壳形成20面体对称，病 毒核心为+ssRNA，分为实心、空心两种颗粒。 ¾HAV每个壳粒由VP1、VP2、VP3和VP4 4种多肽 组成，其中VP1是主要衣壳蛋白和中和抗原，具有 HAV特异性抗原（HAVAg）。 第一节 甲型肝炎病毒 一、生物学性状 ¾HAV抵抗力较强，尤其耐乙醚、热（60℃/4h）及 酸（pH3），在4℃可存活数月。 ¾在淡水、海水、土壤以及毛蚶等水产品中可存活 数天至数月。 ¾ 100℃/5min使之灭活，对甲醛、氯和紫外线敏感。 第一节 甲型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （一）传染源与传播途径 ¾HAV主要通过粪-口途径传播，传染源为患者和隐 性感染者。HAV多引起隐性感染，主要侵犯儿童 和青少年，发病率随年龄增长而递减。 ¾HAV随患者粪便排出体外，通过污染水源、食 物、海产品（如毛蚶等）、食具等可造成流行， 也可通过输血或注射方式传播。 第一节 甲型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （二）致病机制 ¾HAV侵入机体后，先在肠粘膜和局部淋巴结中增 殖，继而入血形成病毒血症，最终侵入靶器官肝 脏，并在肝细胞内增殖。除病毒的直接作用外， 机体的免疫应答可导致免疫病理损伤。 第一节 甲型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （二）致病机制 ¾甲型肝炎的临床现多从发热、疲乏和食欲不振 开始，继而出现肝肿大且有压痛，使胆汁排出受 阻，小部分患者可出现黄疸。 ¾甲型肝炎发病2-3周后，随着特异性抗体的产生， 血液和粪便的传染性逐渐消失。甲型肝炎预后良 好，长期携带病毒者极为罕见。 第一节 甲型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （三）免疫性 ¾在甲型肝炎显、隐性感染过程中，机体可产生抗 HAV的lgM和lgG，后者在恢复后期出现并对再感 染有免疫力。 第一节 甲型肝炎病毒 三、微生物学检查法 ¾甲型肝炎一般不进行病毒分离培养，可检测抗体 或应用分子生物学方法检测病毒RNA。 ¾甲型肝炎感染早期可检测抗HAV IgM，而流行病 学调查可检测抗HAV IgG。 第一节 甲型肝炎病毒 四、防治方法 ¾预防甲型肝炎应注意饮食卫生，保护水源，加强 粪便管理。 ¾注射丙种球蛋白及胎盘球蛋白，对应急预防甲肝 有一定效果。 ¾我国生产的HAV减毒活疫苗只注射一次即可获得 持久免疫力，基因疫苗也已研制成功。 第一节 甲型肝炎病毒 ¾乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引 起的临床表现可以从一种轻微的自限过程达到一 种破坏性病程。 ¾HBV在全球流行，目前约3.5亿人携带病毒，其中 我国约1.2亿人。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （一）形态与结构 ¾电镜检查HBV感染者的血清，可见到3种颗粒。 z大球形颗粒 亦称Dane颗粒，代表HBV完整颗粒。 z小球形颗粒 HBV感染后血液中最多见的颗粒。 z管形颗粒 直径约22nm，但较小球形颗粒长，实际 上它是聚合起来的小球形颗粒。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （二）基因结构与功能 ¾HBV基因组为不完全环状双链DNA。它包括两条 链：一条长约3.2Kb的负链和另一条长度可变（约 为负链长度的50-100%）的正链。 ¾HBV DNA负链含有4个开放读码框架，分别称为 S、C、P及X，能编码全部已知的HBV蛋白。 第二节 乙型肝炎病毒 DR1 DR2 一、生物学性状 （三）HBV的复制 ¾以HBV DNA为，转录合成一条全长的+RNA （前基因组），前基因组被装配到一个未成熟的 核心中，经逆转录途径合成-DNA，其后是合成 +DNA和病毒颗粒的完全成熟。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （四）抗原组成 ¾广义的HBsAg由三种蛋白组成，狭义的HBsAg即S 蛋白。 ①小表面蛋白（主要表面蛋白，小分子HBsAg） ②中表面蛋白（中分子HBsAg） ③大表面蛋白（大分子HBsAg） 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （四）抗原组成 ¾HBs抗体是HBV中和抗体，具有免疫保护作用， HBsAg的检出是HBV感染的标志之一。 ¾HBsAg含有三种特异性抗原组分，包括各亚型共 同抗原特异决定族a和二组互相排斥的亚型决定簇 d/y和w/r。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （四）抗原组成 ¾HBcAg存在于Dane颗粒的核心和乙型肝炎患者的 肝细胞核内。检出HBcAg或HBc抗体表示HBV在 肝内持续复制。HBc抗体对病毒无中和作用。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （四）抗原组成 ¾HBeAg是Pre C蛋白完整肽链的一部分，只在 HBsAg阳性血清中出现。 ¾由于HBeAg与DNA多聚酶的消长相符，故HBeAg 的存在可作为体内有HBV复制及血清具有传染性 的一种标记。HBe抗体对病毒亦无中和作用。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （五）细胞培养 ¾HBV尚不能利用体外细胞进行分离与培养。目前 采用的培养细胞是将HBV DNA稳定转染肝癌细胞 株获得的。 第二节 乙型肝炎病毒 一、生物学性状 （六）抵抗力 ¾HBV的抵抗力较强。对低温、干燥、紫外线和一 般化学消毒剂均耐受，不被70%乙醇灭活。 ¾HBV对100℃/10min、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸 钠和环氧乙烷敏感。 第二节 乙型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （一）传染源与传播途径 ¾HBV传染源为患者和无症状HBsAg携带者。在潜 伏期和急性期，患者血清均有传染性。 ¾输血、性行为是主要传播途径，也可经消化道感 染。孕妇在妊娠后期患急性乙型肝炎，可经垂直 传播感染胎儿或新生儿。 第二节 乙型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （二）致病机制 ¾HBV致病机制与一般病毒不同，病毒除了在肝细 胞内增殖而直接损害靶细胞外，还可引起机体产 生免疫病理损伤。 z细胞介导的免疫病理损伤 z免疫复合物介导的免疫病理损伤 z自身免疫反应介导的免疫病理损伤 第二节 乙型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （三）免疫耐受与免疫逃逸 ¾机体未能有效地清除病毒，导致HBV持续性感染 从而形成 HBV免疫耐受。 z特异性免疫功能低下 z免疫系统未发育成熟 z宫内感染导致特异性淋巴细胞克隆被排除 z大量感染导致特异性T细胞被耗竭 第二节 乙型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （三）免疫耐受与免疫逃逸 ¾ S基因编码的a抗原表位基因发生突变，导致HBsAg 抗原性或抗原位点丢失，出现“诊断逃逸”。 ¾Pre C基因发生1896nt G-A突变导致第28位TGG变 为TAG，不能转译出完整的HBeAg。 ¾C基因突变改变HBcAg抗原位点，形成“CTL逃逸 突变株”。 第二节 乙型肝炎病毒 二、致病性与免疫性 （四）HBV与原发性肝癌 ¾原发性肝癌常发生于与HBV有关的慢性肝炎或肝 硬化；在原发性肝癌细胞的染色体上整合有HBV 特异性DNA（50%为X基因片段）。 第二节 乙型肝炎病毒 三、微生物学检查法 ¾HBV抗原、抗体检测 z大三阳：HBsAg+；HBc抗体+；HBeAg+ z小三阳：HBsAg+；HBc抗体+；HBe抗体+ ¾血清HBV DNA检测 HBeAg- 第二节 乙型肝炎病毒 三、微生物学检查法 ¾HBsAg+ z急性乙肝的潜伏期、急性期 z慢性乙肝 z无症状HBsAg携带者 z与HBV有关的肝硬化或原发性肝癌 第二节 乙型肝炎病毒 三、微生物学检查法 ¾HBs抗体+ z感染过HBV，但已康复并获得免疫力。 z未感染过HBV，但注射过乙肝疫苗且接种成功。 z乙肝患者进入恢复期，且预后良好。 ¾HBc抗体+ z急性乙肝为高滴度IgM z慢性乙肝为中、低滴度IgM 第二节 乙型肝炎病毒 三、微生物学检查法 ¾HBeAg+ z急性乙肝暂时阳性 z慢性乙肝持续存在 ¾HBe抗体+ z急性乙肝进入恢复期 z慢性乙肝HBeAg-，传染性减弱，有康复迹象。 第二节 乙型肝炎病毒 四、防治方法 ¾采取切断传播途径为主的综合性。 ¾无特效疗法，采用广谱抗病毒药物、IFN-α及护 肝药物联合治疗。 ¾主动免疫采用乙肝疫苗，被动免疫采用高价乙肝 免疫球蛋白（人HBs抗体）。 第二节 乙型肝炎病毒 ¾五型肝炎病毒要点比较。 ¾甲型肝炎病毒与乙型肝炎病毒的生物学性状，传染 源与传播途径、致病机制，防治方法。 ¾乙型肝炎病毒的微生物学检查法。 学习要点