国产甲型肝炎灭活疫苗低剂量的免疫原性研究
任银海!,陈江婷",马守东",薛伟华!,张玉成!,吴文婷!,
公雪杰",任一丰!,李胜平!,康文学!,韩连军!,高栓景!,刘崇柏#(指导)
(!$平山县卫生防疫站,河北 平山 %&%’%%;"$唐山怡安生物工程有限公司,河北 唐山 %(#%%%;
#$中国疾病预防控制中心,北京 !%%%&%)
摘要:为了观察国产甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗低剂量多针次的免疫效果,在平山县"个农村筛选’!!%岁甲肝病
毒抗体(抗)*+,)阴性的(&名易感儿童,以自然村随机分为"组,分别接种!"&-/剂(%、!、(个月)和"&%-/剂(%、(
个月)唐山怡安生物工程有限公司研制的甲肝灭活疫苗,观察免疫后局部反应和全身反应;检测免疫后!、(、.个月
的血清抗)*+,阳转率和滴度。结果显示:两种剂量疫苗免疫后无严重的局部和全身副反应。!"&-/剂和"&%-/
剂初免后,抗)*+,阳转率分别为("$&/和0#$0/,几何平均滴度(123)分别为#’"45-/46和#7"45-/46;(个
月阳转率均为!%%$%/,123分别为!45-/46和#0!45-/46;全程免疫后!个月123分别为#!.%45-/46和
&0(#45-/46。表明国产甲肝灭活疫苗!"&-适于儿童使用,并可作为研究甲、乙肝联合疫苗的参考剂量。
关键词:甲型肝炎灭活疫苗;免疫原性;低剂量疫苗
中图分类号:8&!"$(!;8!7( 文献标识码:+ 文章编号:!%%(90!(:("%%")%(9%#".9%#
!"#$%&’()*+,,&*)-#*./.%()0%"#1)23’)4#+*/5%.65%#’7),#4%./89::5//.*# !"#$%&’()%,
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(#+123/+%&%’%%,43#+/$)
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收稿日期:"%%"9%09!%;修回日期:"%%"9!%9""
基金项目:“九五”国家医学科技攻关项目(专号:0(90%(
9%#9%’)
作者简介:任银海(!0 ),男,河北省平山县人,河北省平山县
卫生防疫站副主任医师,主要从事疾病预防控制工作。
国产甲型肝炎(甲肝)灭活疫苗两针法在成人、
儿童中的应用研究已有[!9#]。X材料与方法
> 疫苗 唐山怡安生物工程有限公司生产的实验性甲肝灭
活疫苗,每剂含病毒抗原"&%-和!"&-,批号"%%!%"!"。
·."#·中国计划免疫"%%"年!"月第7卷第(期
! 研究对象 在河北省平山县农村经济水平、卫生条件和
生活习惯相似的!个毗邻村庄,筛选"!#$岁甲肝病毒抗体
(抗%&’()阴性、乙型肝炎病毒表面抗原(&)*’+)阴性、丙氨
酸氨基转移酶(’,-)正常、无过敏史的健康儿童(共./人),
平均年龄010岁,男女比#2$13#。随机按自然村分为’、)
两组进行观察。
" 接种方法、剂量和程序 上臂三角肌肌内注射。’组接
种#!/4/剂,程序为$、#、.个月,第#、!针为基础免疫,第5
针为加强免疫。)组接种!/$4/剂,程序为$、.个月,第#
针为基础免疫,第!针为加强免疫。
# 副反应观察 所有接种对象于每次接种后5$678内观察
即时反应,并于9:、!":、"9:、0!:观察接种局部(红、肿、热、
痛)和全身反应(发热、乏力、头痛、头晕、恶心、食欲不振、皮
疹等)。
$ 血清学检测 采集空腹静脉血,每次56;,无菌分离血
清,
标准 品由世界卫生组
织(>&?)提供的冻干品,批号$###$0。每安瓿加#1$6;蒸
馏水溶解,含量为391.6@4/6;。
$%& 抗’()*定性检测 用酶联免疫吸附试验(A,@B’)竞
争抑制法,试剂盒购自’CCDEE公司,批号9$"/FG!$$,灵敏度为
!!6@4/6;。样品竞争抑制率!/$H判为抗%&’(阳性。
$%! 抗’()*定量检测 用标准品标准化的甲肝抗体试剂
(A,@B’)测定,唐山怡安生物工程有限公司生产,批号为
$##!!$,灵敏度#$56@4/6;。在适当稀释范围内将>&?提
供的标准品抗体水平的稀释度和?F值进行直线回归统计,
求得回归方程曲线。根据样品的稀释度和测定的?F值代
入回归方程,在标准品?F值的直线范围内,计算抗体6@4/
6;,故此法所得抗%&’(水平与’CCDEE试剂是一致的。
$%" 肝功能检查 ’,-测定用赖氏法,""$4为正常,北
京北化康泰临床试剂有限公司生产,批号$#$.!!。
结 果
& 安全性
接种甲肝灭活疫苗后,两组均未见即时反应,副
反应均在9:!!":出现,"9:内消失,局部反应为红
晕(直径均#"66),全身反应为发热(均#501/=)
(表#)。
表& 甲肝灭活疫苗接种后副反应(局部、全身)发生情况
组别
剂量
(4)
观察
人数
第#针
局部 全身
第!针
局部 全身
第5针
局部 全身
’ #!/ 5! $ $ $ #(51#) $ $
) !/$ 55 #(51$)#(51$) $ $ < <
注:括号外数据为反应例数,括号内数据为副反应发生率(H)。
! 甲肝灭活疫苗第&针后#周抗体应答反应
接种甲肝灭活疫苗后"周,’、)两组抗%&’(
阳转率分别为.!1/H(!$/5!)和3513H(5#/55),几
何平均滴度(IG-)分别为5"!6@4/6;和59!6@4/
6;。经统计学处理,两组抗体阳转率差异有非常显
著的统计学意义("!J31/$,!#$1$#),但IG-差
异无显著的统计学意义("J$10",!!$1$/)(表!)。
表! 甲肝灭活疫苗第&针免疫后#周抗体应答反应
组别
接种
剂量
检测
人数
阳转
人数 H
IG-
(6@4/6;)
’ #!/4 5! !$ .!1/ 5"!
) !/$4 55 5# 3513 59!
" 甲肝灭活疫苗基础免疫后+个月抗体应答反应
甲肝灭活疫苗基础免疫后.个月,’组接种!
针,) 组接种 # 针,两组抗%&’( 阳转率均为
#$$1$H,IG-分别为/5#6@4/6;和53#6@4/6;,
经统计学处理,差异无显著的统计学意义("J
$15!,!!$1$/)(表5)。
表" 甲肝灭活疫苗基础免疫后+个月抗体应答反应
组别
接种
剂量
程序
(月)
检测
人数
阳转
人数 H
IG-
(6@4/6;)
’ #!/4 $、#、. 5! 5! #$$1$ /5#
) !/$4 $、. 55 55 #$$1$ 53#
# 甲肝灭活疫苗全程免疫后&个月抗体应答反应
’组接种甲肝灭活疫苗#!/4 和)组接种
!/$4全程免疫后#个月,甲肝抗体阳转率均为
#$$1$H,而IG-则分别为5#0$6@4/6;和/3.5
6@4/6;。抗%&’(滴度剂量效应十分明显,差异有
非常显著的统计学意义("J!1./,!#$1$#)(表
")。
表# 甲肝灭活疫苗全程免疫后&个月抗体应答反应
组别 剂量
程序
(月)
检测
人数
阳性
人数 H
IG-
(6@4/6;)
3/H可信限
(6@4/6;)
’ #!/4 $、#、. 5! 5! #$$1$ 5#0$ "/.!!!!$5
) !/$4 $、. 55 55 #$$1$ /3.5 9!55!"5#9
讨 论
国产甲肝灭活疫苗小剂量多针次接种儿童后发
生的副反应是轻微的,且呈一过性,证明国产甲肝灭
活疫苗是安全的。
疫苗的免疫原性和保护效果同疫苗的抗原量有
关。#!/4免疫后"周抗%&’(阳转率为.!1/H,显
著低于!/$4组的3513H;但.个月时,#!/4组已
完成!次基础免疫,总抗原量与!/$4组同等,两组
的抗%&’( 阳转率均为 #$$1$H,IG- 分别为
/5#6@4/6;和53#6@4/6;,统计学处理无显著性差
异,说明#!/4基础免疫后.个月也达到了!/$4/
剂的免疫水平。
在既往研究中[!<5],国产甲肝灭活疫苗!/$4、
·9!5· 中国计划免疫!$$!年#!月第9卷第.期
!""#、$"""#("、$,"、%,"、&个月程序)全程免疫
后,抗’()*+,-均达较高水平。本研究%针法全
程免疫后抗’()*+,-为%$."/0#//1,高于既往
2!"#剂"、$个月程序($3.%/0#),与2!"#/剂"、%
个月程序(%2&!/0#//1)的结果相当。该剂量作为
甲、乙肝联合疫苗中甲肝疫苗的剂量是合适的。
(康建婷、崔联云、刘中林、李海军、宗雪梅参加部分工
作,特此致谢)
参考文献:
[$] 任爱国,马俊荣,冯福民,等4国产甲型肝炎灭活疫苗的安全性
和免疫原性研究[5]4中华实验和临床病毒学杂志,2""$,$!
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[2] 刘崇柏,任银海,张玉成,等4国产甲型肝炎灭活疫苗在儿童中
应用的安全性免疫原性和免疫程序研究[5]4中国计划免疫,
2""2,8($):$7%4
[%] 任银海,张玉成,吴文婷,等4国产甲型肝炎灭活疫苗在低龄儿
童中应用的安全性和免疫原性研究[5]4中国预防医学杂志,
2""2,%(%):2"372$$9
[6] :;<=>/;?@,ABCBDE,A;BFA,;GH140//ID>J;DB=BGK,LHM;GKHDF
G>1;?HNB1BGK>MCH?KBDJF>L;LHDF?;JB/;DL>MBDH=GBCHG;FO;PHGBGBL)
CB?ILCH==BD;BD:HCHQ>=OB1F?;D[5]4R;FBHG?B=LBDM;=GSBL,$336,
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[!] E?I=;T,0DDBLS,UDBMNOHDA,;GH14R?>G;=GB>DHJHBDLGO;PHGBGBL)
NKHDBDH=GBCHG;FCH==BD;[5]45),),2.$($.):$%287$%%64
[&] 迮文远4计划免疫学[,]4上海:上海科学技术文献出版社,
$33.,&!4
美国$6个州学生发生皮疹
2""$年$"月!2""2年2月,美国$6个州在校学生发生了皮疹,
州和当地卫生部门对此开展了调查。但$6个州的皮疹是否由相同
的病因引起还有待于进一步确定。
2""$年$"月6日印第安那州报告了第$例,随后弗吉尼亚州于
$$月2"日起开始出现病例,接下来的病例发生在2""2年$月末至2
月2$日。病例最初出现在小学,但一些初中和高中学校也出现了病
例。每个州发病学生数目从不足$"人到约&""人不等。一些教师
和校职工也被感染,学生家长或兄弟姐妹几乎无被感染的。
皮疹的特点差异较大,发病一般较急,伴有典型的红色斑丘疹皮
损。一般在面、颈、手或上臂呈网状分布,大部分在出疹期间有严重
瘙痒。皮疹不是由某种环境因素或感染性病原体引起。患皮疹的孩
子们不发热,通常无别的相关症状与体征。皮疹持续时间从几个小
时到2周不等,呈现自限性。无继发性传染病例的报告,但却有校内
“同情”病例的报告。为孩子们做检查的临床医生得出的诊断包含了
病毒性皮疹、接触性或遗传性过敏症皮炎、湿疹、化学物质暴露、脓疱
病和常春藤中毒。在6个州采集了大约6"份血清标本都是微小病
毒E$3,聚合酶链反应(RVA)或0J,抗体阴性。22个鼻拭子标本检测
肠道病毒也为阴性;环境评估未发现环境性致病原因。
2""$年$"月6日!$$月2日,印第安那州$所有%3"名学生的
小学中,$8名三年级学生和$名代课教师发生了皮疹。他们的家庭
成员中无人有皮疹。大多数人的皮疹从脸部开始,然后扩展到上肢
末端,多数皮疹发生在裸露的皮肤上。临床的症状包括:脸部及上肢
末端有周边微红的瘙痒性皮疹,眼睛肿胀,面颊光滑而粉红。皮疹的
突出程度和色度因人而异。家庭医生对几个孩子检查后做出的诊断
也不同,包括接触性皮炎、化学性暴露、脓疱病、常春藤中毒。因为
2""$年8月%"日曾有$名三年级学生被诊断为微小病毒E$3感染性
皮疹,于是印第安那州卫生局从6个患皮疹的学生中采集了血清,检
测他们是否是微小病毒E$3感染,所有标本的0J,抗体都是阴性。实
验数据分析、面谈、楼内检测和对孩子们的体格检查都未确定皮疹的病
因。
宾夕法尼亚州最初的皮疹报告于2""2年$月%$日,有!6名小
学生被当地卫生保健人员诊断为接触性皮炎。迄今,已有!.!例皮
疹报到宾夕法尼亚卫生局;!8所学校和育儿中心分别报告$!$&8
例。多数病例是中、小学生,女性多于男性。皮疹的特点是亮红色,
痒或烧灼感,斑疹,偶有荨麻疹或丘疹样表现。皮疹易消退或持续2
周,有复发的病例,未发现别的相关症状。在!6名最初报告的学生
中,采集了$%例的血清检测微小病毒E$3,结果所有病例0J,抗体都
是阴性。对另外$"例做RVA检测,微小病毒E$3也为阴性,其余病例
的结果还未得出。另一医务人员报告称患者的非血清活组织标本检
查结果同病毒性皮疹一致。$所学校的环境因素调查也未发现引起
皮疹的原因,这些调查包括对粉尘螨和蟑螂过敏原、溶媒、清洁剂的
检查,以及真菌或细菌培养。空气和物品表面培养尚未开展。
2""2年2月俄勒冈州2所学校的学生出现发病急、持续时间短
的皮疹爆发。2月6日在该州西南部$所有!83名学生的小学里,有
!%名孩子和$$名成人患了皮疹,其中!6名(86W)是女性。这些皮
疹出现在颊部、臂部,有瘙痒,呈晒斑状,但无全身症状。皮肤病专家
小组对28名儿童进行了检查,称皮疹象第五类疾病,但它的几个特
点与这个诊断不相符。有2名孩子的微小病毒检测结果是阴性。大
范围的问卷调查和环境监测未发现皮疹的病因。从2月2$日开始,
在俄勒冈州东北部$所有%$6名学生的中学里,有86名孩子和.名
成人报告发生了皮疹,其中&.人(.6W)是女性。两所学校间无联
系。皮疹的特点各异,包括湿疹和脸、臂、颈和背部的晒斑样瘙痒皮
疹;无其它症状报道。&人的微小病毒检测为阴性。这所学校的环境
评估未发现皮疹的原因。在这2所学校里,有几名孩子,当他们离开
学校时皮疹有所好转,但一旦回到学校就复发。
2月2"日,康涅狄格州卫生局接到报告,有3名学生患了皮疹。
2月2$日,又有$&名学生患了相似的皮疹。这些学生都是6年级来
自2!%名学生$2个班中的6个班。严重的皮疹发生在躯干和肢体末
端,以红斑和瘙痒为特点,不发烧也无其它症状,病程持续26O!.2O。
无家人被感染的报告。
美国疾病控制与预防中心(VSV)正与州和地方卫生、教育部门
合作,判断学生们是否由于一个共同的病因而患病。VSV正在有系
统地整理以下信息:"爆发日期和持续时间;#发生皮疹的周围环
境;$人数,年龄,性别;%皮疹表现及特征;&其它症状或体征、诊断
和治疗;’调查方法(例如:当面检查或问卷、生物学采样和环境采
样)。为了收集这些信息,VSV已经规定了在多年龄组学生中做调查
的方法。
在美国$$."""所学校,每天有!%""万学生上课,引起皮疹的原
因是多方面的。环境因素和生物因素均能导致学龄儿童群体发病。
潜在的环境因素包括生物污染物(如:细菌和真菌),化学制剂
(如:清洁剂和杀虫剂残留),物理因素(如玻璃纤维),昆虫(如:苍蝇
和蛾)和致敏源(如:尘螨)。如果怀疑有以上任何一种因素,应请教
相应的专家。
(VSV:AHLO;LH/>DJL=O>>1=OB1F?;D’UGHG;L,X=G>N;?,6,2""$’Y;N?IH?K
2.,2""24,,@A,2""2,!$(8):$&$7$&%4周吉坤译,冯琳校)
·32%·中国计划免疫2""2年$2月第8卷第&期