β－内酰胺类抗生素颜色反应快速鉴别系统（讲义-北京修改1）

nullβ－内酰胺类抗生素 快速鉴别系统 β－内酰胺类抗生素 快速鉴别系统 null◆β－内酰胺类抗生素的结构特点和分类 ◆β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 总体思路 ◆β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体与步骤 ◆β－内酰胺类抗生素的操作要点及注意 事项 nullβ－内酰胺类抗生素包含的品种较多，剂型几乎覆盖了抗生素类药品所能应用的全部剂型。 β－内酰胺类抗生素的结构特点（共性）　　　　　母核含有四元β-内酰胺环。 结构分类 结构分类 β-内酰胺类药物按骈合环可分为青霉素（骈合五元氢化噻唑环）、头孢菌素（骈合六元氢化噻嗪环）及碳青霉烯类三类。青霉素类头孢菌素类碳青霉烯类null采用羟肟酸铁反应可直接快速初步区分大部分β-内酰胺类抗生素与其他药物，且根据颜色的差异快速区分青霉素类与头孢菌素药物．可疑的β-内酰胺类抗生素羟肟酸铁反应假药β-内酰胺类抗生素青霉素类 头孢类深红色 桔红色null（一）呈色反应1. 羟肟酸铁反应呈色β－内酰胺类NaOHH2NOH羟肟酸衍生物H+Fe3+null羟肟酸铁反应nullH+Fe3+/3 （红、棕、褐）蓝紫蓝紫（开环分解）似肽键双缩脲反应 β-内酰胺类内酰胺类碱性酒石酸铜¾¾¾¾¾®¾-b碱性酒石酸铜反应null碱性酒石酸铜反应null蓝紫色制 剂 分 类制 剂 分 类Β － 内 酰 胺 类 抗 生 素口服制剂注射用粉针剂片剂、胶囊颗粒剂、干混悬剂按辅料不同制 剂 特 点制 剂 特 点Β － 内 酰 胺 类 抗 生 素片剂、胶囊注射用粉针剂辅料成分简单、干扰小几乎不含辅料或 仅含少量助溶剂， 如精氨酸、碳酸钠颗粒剂 干混悬剂辅料含量多、成分复杂、干扰大null主药含量少辅料成分多头 孢 氨 苄 颗 粒【规格】0.125g 0.05g香 精色 素严 重 干 扰 颜 色 反 应 结 果★ β－内酰胺类抗生素 快 检 系 统 方 法 分 类★ β－内酰胺类抗生素 快 检 系 统 方 法 分 类 按制剂中辅料的多少及种类分为三类： 注射用粉针剂：几乎不含辅料或仅含少量助溶剂，如精氨酸、碳酸钠 片剂、胶囊：辅料成分简单、干扰小 颗粒剂、干混悬剂：辅料含量多、成分复杂、干扰大null注 射 用 粉 针青霉素类头孢菌素类碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033H-033颜色反应鉴别薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-036β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的总体思路羟肟酸铁反应null片 剂青霉素类头孢菌素类羟肟酸铁反应碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033H-036颜色反应鉴别薄层色谱系统碱性酒石酸铜反应三氯化铁反应H-033null 颗 粒 剂 、 干 混 悬 剂 碱性酒石酸 铜(1-5)反应三氯化铁反应颜色反应鉴别薄层色谱系统H-034null羟肟酸铁反应β- 内 酰 胺 类 抗 生 素青霉素类头孢类注射用粉针 β－内酰胺类抗生素的化学系统鉴别的 具体方法与步骤null 碱性酒石酸铜反应青霉素钠 氯唑西林钠 苯唑西林钠氨苄西林钠/舒巴坦钠 阿莫西林钠/克拉维酸钾 氨苄西林钠 氨苄西林钠/氯唑西林钠阿莫西林钠美洛西林钠青 霉 素 类 null三氯化铁反应氨苄西林钠 /舒巴坦钠 阿莫西林钠 /克拉维酸钾 氨苄西 林钠氨苄西林钠/ 氯唑西林钠氨苄西林钠 /舒巴坦钠 阿莫西林 /克拉维酸钾 氨苄西林钠 氨苄西林钠 /氯唑西林钠nullTLC阿莫西林钠/克拉维酸钾氨苄西林钠/舒巴坦钠 氨苄西林钠 /舒巴坦钠 阿莫西林钠 /克拉维酸钾null氯唑西林钠 苯唑西林钠三氯化铁反应1%醋酸 反应氯唑西林钠微桔红色或 浅桔红色 混浊或沉淀, 有颗粒挂壁null碱性酒石酸铜反应头孢他啶 头孢曲松钠 头孢唑肟钠 头孢拉定头孢唑林钠 头孢噻吩钠 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/ 舒巴坦钠蓝色变墨 绿色溶液墨绿色变 棕黄色美洛培南 亚胺培南/ 西司他丁头 孢 菌 类null三氯化铁反应头孢他啶 头孢曲松钠TLC头孢曲松钠头孢 他啶头孢唑肟钠头孢拉定H-033H-033头孢唑林钠 头孢噻吩钠 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠蓝色变墨 绿色溶液三氯化铁反应头孢唑林钠 头孢噻吩钠TLC头孢唑 林钠头 孢 噻 吩 钠头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠 H-033H-033TLC头孢呋辛钠头孢哌酮钠头孢哌酮钠/舒巴坦钠 头孢呋辛钠 头孢哌酮钠 头孢哌酮钠/舒巴坦钠 美洛培南 亚胺培南/ 西司他丁TLC美洛培南亚胺培南/西司他丁H-033美洛培南 亚胺培南/ 西司他丁三氯化铁反应null片剂 胶囊β- 内 酰 胺 类 抗 生 素羟肟酸铁反应阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 氨苄西林 青霉素V钾头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯头孢克洛阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林 青霉素V钾碱性酒石酸铜反应青霉素V钾阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林三氯化铁反应 氨苄西林TLC阿莫西林阿莫西林克 拉 维 酸 钾H-035阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 氨苄西林null头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨 苄三氯化铁 反应头孢拉定 头孢氨苄头孢羟氨苄TLC头孢拉定头孢氨苄null头孢呋辛酯 盐酸头孢他美酯 头孢泊肟酯碱性酒石 酸铜反应头孢呋辛酯盐酸头孢他美酯头孢泊肟酯null颗粒剂 干混悬剂β- 内 酰 胺 类 抗 生 素三氯化铁 反应 头孢氨苄/甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾 头孢克肟 头孢泊肟酯头孢地尼null头孢氨苄 /甲氧苄啶 头孢拉定 头孢氨苄 头孢羟氨苄 头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/ 克拉维酸钾 头孢克肟 碱性酒石 酸铜反应 （1→ 5）头孢氨苄/甲氧苄啶头孢氨苄 头孢拉定头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾头孢克肟深蓝紫色浅墨绿色头孢羟氨苄墨绿色深红色深棕色null头孢克洛 阿莫西林 阿莫西林/克拉维酸钾TLC头 孢 克 洛阿 莫 西 林阿 莫 西 林克 拉 维 酸 钾H-034颜 色 反 应颜 色 反 应操作要点及注意事项 null颜色反应鉴别 一些品种（制剂）的羟肟酸铁反应和三氯化铁反应，反应后溶液的颜色深浅及溶液状态（澄清、浑浊、沉淀等）的判断受实验人员的主观因素的影响较大。为便于判断，正文中采用以“或”连接几种颜色、状态的方法进行叙述，举例如下：null注射用粉针剂的羟肟酸铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色混浊或溶液，照片如下： null注射用粉针剂的三氯化铁反应：微桔红色或浅桔红色混浊或沉淀，照片如下：null颗粒剂、干混悬剂的三氯化铁反应：桔红色、深桔红色或浅桔红色，照片如下： null一些品种（制剂）的碱性酒石酸铜反应，反应现象是颜色渐变的过程，如“深葡萄紫色变深棕色”、“墨绿色变棕黄色”、“蓝色变墨绿色”、“深葡萄紫色变深墨绿色”等，且变化速度的快慢依品种各异。因此，操作该反应时需仔细观察现象。null样品的溶解性对颜色结果的影响注射用亚胺培南西司他丁加水溶解时，发现溶解性不好使供试品溶液出现混浊，但不影响反应现象的观察和结果的判断．null辅料对颜色反应结果的影响 由于注射剂辅料较少直接溶解即可，不需过滤；片剂和胶囊剂过滤与否对结果影响不大，本实验仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色为主；颗粒剂干混悬剂用普通的过滤方法很难过滤，辅料对实验结果会产生一定影响，大部分颗粒剂仍以取粉末加溶剂溶解，取上清夜直接加入试剂后观察颜色，参考快检的图片仔细观察颜色null薄 层 色 谱操作要点及注意事项 null操 作 要 点null选择参比物的依据nullRf值的计算Rf值的计算应以UV254nm下检视的斑点位置为准（舒巴坦钠以碘蒸气熏蒸后的斑点位置计），注意从斑点前沿开始测量。以Rf值结合相对Rf值定性的稳定性 和重现性比单独以Rf值定性高。null展开剂在展开过程的挥发问由于本系列的展开剂中有乙醚和甲酸，挥发性较强，在展开过程中一定要注意圆形展开缸的密闭性，解决方案：在展开缸的盖子与缸的接触的地方要均匀涂布真空硅脂，且用夹子夹好．null注意事项舒巴坦钠UV254nm下检视无斑点，经碘蒸气熏蒸后斑点颜色依然较浅，操作时需仔细观察。 供试品溶液的制备：参照【取样方法参照】取本品一包，按标示量加入稀乙醇，振摇2～3分钟，制成每1ml约含25mg阿莫西林的溶液，静置，取上清液作为供试品溶液。 供试品溶液的制备：参照【取样方法参照表】取本品一包，按标示量加入稀乙醇，振摇2～3分钟，制成每1ml约含25mg阿莫西林的溶液，静置，取上清液作为供试品溶液。颗粒剂 干混悬剂样品前处理 其 他 其 他因头孢氨苄与头孢拉定的化学结构十分相近，采用目前建立的化学快检方法无法对二者的各种制剂进行有效鉴别，鉴别上述两个品种时应注意结合其它方法，如近红外鉴别、授权HPLC法鉴别。头孢氨苄　　　头孢拉定null