复制

nullnullnullDNA分子是怎样进行复制的呢? 第一节 复制的基本规律 第一节 复制的基本规律 一、半保留复制(semiconservative replication)null一、对DNA复制的推测1、全保留复制：新复制出 的分子直接形成，完全 没有旧的部分；2、半保留复制：形成的分子 一半是新的，一半是旧的； 3、分散复制：新复制的分子 中新旧都有，但分配是随 机组合的；null2、如果要你来设计实验，你认为最基本的思路是什么？ 把复制的单链和原来的链做上标记，然后观察它在新DNA中出现的情况。1、这些观点各有不同，如何来那个观点是正确的？只能用实验来证明。null1958年Messelson和Stahl实验证实 实验材料：大肠杆菌 其特点：20分钟生长成新一代。nullnullnullnull概念：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为，按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整接受过来，另一股单链则完全重新合成，两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致，这种复制方式为半保留复制。null根据上面实验过程,完成下列#格#全在下部12482n全在中部½中+ ½ 上¼中+ ¾ 上2/2n中+(1- 2/ 2n)上11½¼2/ 2n½¾（1- 2/2n）二、双向复制二、双向复制细胞的繁殖有赖于基因组复制而使子代得到完整的遗传信息。 原核生物基因组是环状DNA，只有一个复制起点（origin)。向两个方向解链，即双向复制。 真核生物每个染色体上有多个复制起始点。 复制子（replicon）：是独立复制的功能单位。(bidirectional replication) 复制子的定义 复制子的定义 DNA中发生一次复制的单位称为复制子(replicon)（一个DNA分子可能含多个复制子）。 复制子是根据它含有复制所需的控制元件来定义的，在复制的启动位点具有起始点（origin)，在复制的终止位点具有终点（terminus)。起始点仅作用于所在复制子。 注：在每个细胞周期中，每个复制子发生一次复制，且只发生一次。null质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子； 原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制； 真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。 不同生物复制子的数目复制眼概念 复制眼概念 复制眼：在一个长的未复制区域内DNA已经复制的区域nullnull复制叉:双螺旋DNA两条亲本链分开使复制能进行的部位。 复制叉的概念及其移动方向的确定复制叉移动方向的确定复制叉移动方向的确定放射性自显影法： 对于大基因组内的不确定区域，两次连续的放射脉冲可以用来标记复制的移动。如果一个脉冲比另一个脉冲强，我们可以用相对的标记强度来区分，这些可用放射自显影观察。 单向复制：在复制眼的一端，一种类型的标记后紧跟着另一种标记； 双向复制：在复制眼的两端产生一种（对称的）模式。在真核生物中普遍存在。nullA. 环状双链DNA及复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点(termination, ter)原核生物DNA双向复制null真核生物DNA多复制子复制null领头链(Leading strand) 随从链(Lagging strand) 冈歧片段（Okazaki fragment）三、复制的半不连续性(semi-discontinuous replication)null领头链 (leading strand)随从链 (lagging strand)岡崎片段 (okazaki fragment)领头链连续复制而随从链不连续复制 ——复制的半不连续性第二节 DNA复制的酶学 和拓扑学变化 第二节 DNA复制的酶学 和拓扑学变化 null参与DNA复制的物质 模板(template) : 解开成单链的DNA母链 底物(substrate): dNTP (dATP, dGTP, dCTP, dTTP) 引物(primer): 提供3-OH末端使dNTP可以依次聚合 酶(polymerase):依赖DNA的DNA聚合酶 (polymerase), 简称 DNA-pol,拓扑异构酶,解螺旋酶, 引物酶, DNA连接酶(ligase). 蛋白质因子:单链结合蛋白(SSB)。null解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶（1）解链酶（helicase）作用：利用ATP供能，解开DNA双链消耗 2 ATP/解开 1 bp可随复制叉的伸展向前移动 DnaA:辨认E.coli上的复制起点. oriC DnaB (解螺旋酶): 在起始点上结合并打开双链 DnaC:辅助解螺旋酶(DnaB).也称：解螺旋酶（2）拓扑异构酶 （topoisomerase，Topo）（2）拓扑异构酶 （topoisomerase，Topo）Topo：拓扑是指物体或图像作弹性位移而又保持物体不变的性质 作用：是一类可改变DNA拓扑性质的酶 复制时,复制叉行进的前方DNA分子产生正超螺旋,DNA拓扑异构酶可松解超螺旋 还可以引入负超螺旋(水解、连接),有利于复制叉的行进及DNA的合成. 复制结束时,拓扑酶又可将DNA分子引入超螺旋,有利于DNA缠绕、折叠、压缩以形成染色质. 可见,拓扑酶是在复制全过程中有作用. 解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶null解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶（2）拓扑异构酶 （topoisomerase，Topo）（3）单链DNA结合蛋白 (SSB) (single strand DNA binding protein)（3）单链DNA结合蛋白 (SSB) (single strand DNA binding protein)作用：能与DNA单链可逆的结合，其作用有二解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶也称：DNA结合蛋白（DNA binding protein，DBP)①防止DNA复性 ②防止DNA单链模板被水解在复制中维持模板处于单链状态，并保护单链的完整。 （4）引物酶（primase）（4）引物酶（primase）模板 以DNA单链为模板 底物 NTP（ATP、GTP、CTP、UTP） 按碱基配对原则 （A = U G ≡ C） 按5 → 3 方向 解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶作用：复制起始时催化生成RNA引物 本质：是一种RNA聚合酶（可以使两个游离的NTP聚合，此不同于催化转录过程的RNA聚合酶） （5）（6）DNA聚合酶（5）（6）DNA聚合酶全称：依赖DNA的DNA聚合酶 ( DNA dependent DNA polymerase ) 简称：DNA pol （DDDP）解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶A. Kornberg 试管内实验证实 加有: 模板、底物、引物 该酶可催化新链DNA生成（5）（6）DNA聚合酶（5）（6）DNA聚合酶DNA pol （DDDP） 主要作用：5 → 3的聚合活性解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶 dTTP3'（5）（6）DNA聚合酶（5）（6）DNA聚合酶机理： 使核苷酸之间生成3，5磷酸二酯键 主要作用： 5 → 3的聚合活性 模板 以DNA单链为模板 底物 dNTP（dATP、dGTP、dCTP、dTTP） 引物 以小片段RNA为引物 注：引物的原料（ATP、GTP、CTP、UTP） 按碱基配对原则 （A=T G≡C） 按5 → 3 方向 在 RNA引物的 3 -OH末端上开始逐个添加dNTP解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶null需要 模板 领头链 ( leading strand ) 随从链 ( lagging strand )冈崎片段（Okazaki fragment）DNA聚合反应（新链生成）的特点具方向性 新链的延长 5 → 3需要 引物解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶（5）（6）DNA聚合酶（5）（6）DNA聚合酶E.coli大肠杆菌DNA聚合酶的作用解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶null解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶（7）DNA连接酶(DNA ligase)（7）DNA连接酶(DNA ligase)作用：消耗ATP，将随从链中相邻的两个DNA片段连接起来 催化同一模板DNA链上的两个相邻DNA片段的3＇端与5＇端间形成磷酸二酯键，把相邻的两段DNA连成完整的链解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶nullnullnull质粒：存在于细菌染色体外能自我复制的DNA，作为基因工程的常用载体 线粒体DNA（mtDNA） 容易发生突变，损伤后的修复困难，因此与衰老关系密切。 null起始:形成复制叉replication fork需解决两个问题 DNA解开成单链，提供模板 合成RNA引物，提供 3 -OH末端DNA复制的过程解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶起始 延长 终止Topo引物酶null延长: DNA-pol Ⅲ ( DDDP-Ⅲ )的5 → 3的聚合活性使核苷酸之间生成3，5磷酸二酯键 模板 以DNA单链为模板 底物 dNTP（dATP、dGTP、dCTP、dTTP） 引物 以小片段RNA为引物，在 RNA引物的 3 -OH末端上开始逐个添加dNTP 按碱基配对原则 （A = T G ≡ C） 按5 → 3 方向 4.DNA复制的过程解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶起始 延长 终止nullOH 3'3'目 录null4.DNA复制的过程解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶起始 延长 终止终止:随从链上不连续性片段的连接第三节DNA生物合成过程第三节DNA生物合成过程条件： 1.底物 (dNMP)n+dNTP (dNMP)n+1+PPi 2.模板(template)：亲代DNA链作为模板。3.引发体（ primosome ）和RNA引物（primer）原核生物50～100个核苷酸，真核生物中约为10个核苷酸nullDNA复制的基本过程1.拓扑异构酶松解超螺旋。2.DnaB(解链酶)使双链分开成单链。3.SSB可逆结合在单链DNA上维持其稳定。4.引物酶催化生成RNA引物，并与模板DNA结合。null5.DNApol Ⅲ催化领头链(leading strand)和随从链(lagging strand) DNA的生成。6.DNApol Ⅰ催化切除RNA引物。7.DNA连接酶催化岗崎片段首位相连。 null一、原核生物的DNA的生物合成 null（一）复制的起始：需要解决两个问题：1. DNA解开成单链，提供模板。2. 合成引物，提供3-OH末端。θ复制nullE.coli复制起始点 oriC1.DNA解链:有固定的复制起点OriCnullnull引发体和引物 由于DNApol没有催化两个游离dNTP聚合的能力 RNApol可以催化两个游离NTP聚合， 一段短RNA引物即可以提供3’-OH末端， DNApol催化dNTP加入、延长，合成子链DNA 因此需要引物酶，引物酶必需结合在引发体（DnaA、DnaB、DnaC等、引物酶）上起作用。起始的过程起始的过程辨认并结合起始位点打开双螺旋防止复螺旋单链结合蛋白解链酶引物引物酶DnaA合成null（二）复制的延长：复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 nullOH 3'3'null1. 领头链的合成领头链：顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为领头链。null2. 随从链的合成随从链：复制方向与解链方向相反，为不连续复制，这股不连续复制的链称为随从链。 复制中位于随从链上的不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。nullnull复制,包括引物合成,只能从5’ → 3’. 领头链(前导链):在DNA复制时,以母链为模板合成其延长方向与复制叉方向一致的,连续合成的子链,称 随从链(延缓链) :在DNA复制时,以母链为模板合成其延长方向与复制叉方向相反的,不连续合成的子链,称 冈崎片段:在DNA复制中出现DNA片段,是冈崎发现的故称为冈崎片段.null原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。（三）复制的终止null 随从链上不连续性片段的连接null复制的终点ter(termination) 随从链合成后,去掉5’端RNA引物 DNApolⅠ催化填补空隙(5’ → 3’) DNA连接酶连接复制片段3’-OH与5’P RNA酶水解RNAnull二、真核生物的DNA生物合成 null• 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。哺乳动物的细胞周期DNA合成期G1G2SMnull•多复制子 复制子(replicon)：相邻两个复制起点之间的距离。复制子是独立完成复制的功能单位。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 （一）复制的起始nullnull参与者： DNA-pol α (引物酶活性) pol δ (聚合酶、解螺旋酶活性) 拓扑酶 复制因子 (replication factor, RF) 增殖细胞核抗原 (proliferation cell nuclear antigen, PCNA) (相当于原核生物DNA-pol Ⅲ β亚基，在复制起始和延长中起关键作用)null3553领头链3535亲代DNA随从链引物核小体（二）复制的延长DNA-polδ DNA-polαnull染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。（三）复制的终止null53355335+5333355null生命的时钟nullnull端粒酶的催化延长作用爬行模型null端粒酶(telomerase) 端粒酶RNA (human telomerase RNA, hTR) 模板 端粒酶协同蛋白(human telomerase associated protein 1, hTP1) 端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTRT)null端粒酶的催化延长作用爬行模型nullDNA聚合酶复制子链进一步加工目 录null1.亲代DNA为模板，严格遵守碱基配对规律； 2.复制延长时聚合酶对碱基的选择功能； 3. 复制出错时DNA-pol的即时校读功能； 4.错配修复机制DNA复制具有保真性 至少要依赖三种机制： null逆转录和其他复制方式 Reverse Transcription and Other DNA Replication Ways第四节一、概念一、概念 逆转录指遗传信息从RNA流向DNA，是RNA指导下的DNA合成过程，即以RNA为模板，四种dNTP为原料，合成与RNA互补的DNA单链。二、逆转录酶(reverse transcriptase) 二、逆转录酶(reverse transcriptase) 催化逆转录过程的酶称逆转录酶，RNA 病毒中都含有此酶。 具有三种酶活性： RNA指导的DNA聚合酶 RNA酶 DNA指导的DNA聚合酶null三、逆转录过程null DNA聚合酶Ⅰ碱水解 T T T T获取基因工程目的基因的重要方法之一，此法称为cDNA法。 以mRNA为模板，经逆转录合成的与mRNA碱基序列互补的DNA链。 试管内合成cDNAcDNA complementary DNAcDNAnull四、逆转录研究的意义 逆转录酶和逆转录现象，是分子生物学研究中的重大发现。 至少在某些生物，RNA同样兼有遗传信息传代与表达功能。 逆转录病毒的研究，拓宽了病毒致癌理论。 null二、滚环复制和D环复制 原核生物： θ复制 滚环复制（单链DNA病毒） 真核生物：多个复制起点 D环复制（线粒体）null滚环复制null D环复制(D-loop replication) 线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)的复制形式。 nullDNA损伤（突变）与修复 DNA Damage (Mutation) and Repair第五节null遗传物质的结构改变而引起的遗传信息改变，均可称为突变。在复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤(DNA damage)。从分子水平来看，突变就是DNA分子上碱基的改变。 null一、突变的意义（一）突变是进化、分化的分子基础 （二）突变导致基因型改变 （三）突变导致死亡 （四）突变是某些疾病的发病基础 null二、引发突变的因素物理因素 紫外线(ultra violet, UV)、各种辐射null化学因素null三、突变的分子改变类型错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement)nullDNA分子上的碱基错配称点突变(point mutation)。（一）错配null镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基正常成人Hb (HbA)β亚基null（二）缺失、插入和框移缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。插入：原来没有的一个碱基或一段核苷酸链插入到DNA大分子中间。框移突变是指三联体密码的阅读方式改变，造成蛋白质氨基酸排列顺序发生改变。 缺失或插入都可导致框移突变 。null缺失引起框移突变null（三）重排DNA分子内较大片段的交换，称为重组或重排。 null由基因重排引起的两种地中海贫血基因型目 录null四、DNA损伤的修复修复(repairing) 是对已发生分子改变的补偿措施，使其回复为原有的天然状态。光修复(light repairing) 切除修复(excision repairing) 重组修复(recombination repairing) SOS修复 修复的主要类型null（一）光修复光修复酶(photolyase) UVnull （二）切除修复是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。E.coli的切除修复机制目 录null（三）重组修复null（四）SOS修复当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 在E. coli，各种与修复有关的基因，组成一个称为调节子(regulon)的网络式调控系统。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。null四、RNA的生物合成（转录） Biosynthesis of RNA（transcription）四、RNA的生物合成（转录） Biosynthesis of RNA（transcription） 在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录。 经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，snRNA和HnRNA。（一）转录（一）转录不对称性能够转录RNA的那条DNA链为有意义链(模板链）；与之互补的另一条DNA链称为反意义链（编码链）。null有意义链反意义链5’5’3’3’5’5’1.转录的条件 1.转录的条件 （1）底物：NTP（ATP，GTP，CTP，UTP）（2）模板：以一段单链DNA作为模板。 （3）RNA聚合酶（DDRP）：五个亚基构成，即α2ββ‘σ；核心酶（α2ββ'） null原核细胞σ亚基与转录起始点的识别有关， 核心酶与RNA链的聚合有关。 null大肠杆菌RNA聚合酶全酶null真核细胞RNA聚合酶分为三种，由10～12个大小不同的亚基所组成，结构复杂，其功能也不同。 酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱ酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱnull（4）蛋白因子：ρ蛋白、nusA蛋白、CAP， （5）能量：GTP、ATP （6）激动剂：2.转录的过程 2.转录的过程 （1）识别 原核生物：σ因子识别转录起始点（在起始点-35区的TTGACA序列）。 酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列（Pribnow盒） ，并启动转录。 原核生物中转录起始区的共同序列原核生物中转录起始区的共同序列null位于基因上游，与RNA聚合酶识别、结合并起始转录有关的一些DNA顺序称为启动子（promoter)。 null真核生物的转录起始区上游也存在一段富含TA的顺序，被称为Hogness盒或TATA盒。 除此之外，在真核生物中还可见到其他带共性的序列，如CAAT盒及GC盒等。null真核生物的转录转录因子trans-criptional factor, TF)。包括 TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡ-I。 null转录因子 功 能 TFⅡA 稳定TFⅡD结合 TFⅡB 促进pol Ⅱ结合 TFⅡD 辨认TATA盒 TFⅡE ATPase TFⅡF 解旋酶真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录因子及其功能null（2）起始 ：RNA聚合酶全酶促使局部双链解开，并催化ATP或GTP与另外一个三磷酸核苷聚合，形成第一个3',5'-磷酸二酯键。 null（3）延长：核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。null（4）终止 ①自动终止：接近转录终止点处存在相连的富含GC和AT的寡聚U及发夹形的二级结构，引起RNA聚合酶变构及移动停止，导致RNA转录的终止。 ②依赖辅助因子的终止：由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。 null4.原核细胞转录后加工4.原核细胞转录后加工rRNA的剪切和修饰修饰的主要形式： 核糖2`羟基甲基化； 水解剪切5.真核细胞转录后的加工 5.真核细胞转录后的加工 （1）加帽(adding cap)： 5'-端加上m7GTP的结构。发生在细胞核内，即HnRNA可进行加帽。nullnull（2）加尾(adding tail)： 细胞核内，由核酸外切酶切去3'-端一些过剩的核苷酸，然后再加入polyA。 null（3）剪接（splicing)： 外显子 内含子。 真核需snRNA参与null 真核生物mRNA的转录后加工修饰null （4）修饰 内部甲基化： 脱氨基： 四膜虫前rRNA的自身剪接四膜虫前rRNA的自身剪接（二）RNA复制（二）RNA复制（三）基因转录的调节 1.原核细胞转录水平的调节 操纵子学说 (1)乳糖操纵子(lac operon) (2)色氨酸操纵子nullLac operon调节基因启动基因操纵基因结构基因乳糖调节基因启动基因操纵基因结构基因mRNA 5’null2.真核细胞基因转录的调节 (1)顺式作用元件(cis-acting element) (2)反式作用因子(trans-acting factor)null 第四节 蛋白质的生物合成 Biosynthesis of Protein第四节 蛋白质的生物合成 Biosynthesis of Protein蛋白质的生物合成过程，就是将DNA传递给mRNA的遗传信息，再具体的解译为蛋白质中氨基酸排列顺序的过程，这一过程被称为翻译(translation)。 一、中心法则一、中心法则参与蛋白质生物合成的物质 参与蛋白质生物合成的物质 原料：20种氨基酸 蛋白质合成体系，包括： ① mRNA：作为翻译的模板； ② tRNA：搬运氨基酸的工具； ③ 核蛋白体：蛋白体生物合成的场所；④ 酶及其他蛋白质因子； ⑤ 供能物质及无机离子。 null 遗传密码基本特点：① 连续性；② 简并性（因为密码的摆动性）；③ 通用性；（但在线粒体或叶绿体中特殊）④ 方向性，即解读方向为5′→ 3′；⑤ 起始密码：AUG；终止密码：UAA、UAG、UGA。 （一）mRNA作为指导蛋白质生物合成的模板。遗传密码的连续性遗传密码的连续性遗传密码的简并性和通用性遗传密码的简并性和通用性null（二）tRNAnull反密码的第一个核苷酸与第三核苷酸之间的配对，并不严格遵循碱基互补原则。如反密码第一个核苷酸为Ⅰ，则可与A、U或C配对，这种配对称为不稳定配对。1.能够识别mRNA密码2.携带特定的蛋氨酸null原核生物：70S（30S小亚基和50S大亚基）。小亚基由16SrRNA和21种蛋白质构成，大亚基由5SrRNA，23SRNA和35种蛋白质构成。 真核生物：80S，（40S小亚基和60S大亚基）。小亚基（18SrRNA和30多种蛋白质构成），大亚基（5S rRNA，28S rRNA和50多种蛋白质构成），在哺乳动物中还含有5.8 S rRNA。 （三）核蛋白体和多核蛋白体核蛋白体的组装核蛋白体的组装null原核细胞核蛋白体null核蛋白体的大、小亚基分别有不同的功能： 1．小亚基：与mRNA、GTP和起动tRNA结合。 2．大亚基： （1）具有两个不同的tRNA结合点。A位（右）—受位或氨酰基位，可与新进入的氨基酰tRNA结合；P位（左）—给位或肽酰基位，可与延伸中的肽酰基tRNA结合。 （2）具有转肽酶活性：将给位上的肽酰基转移给受位上的氨基酰tRNA，形成肽键。 （3）具有GTPase活性，水解GTP，获得能量。 （4）具有起动因子、延长因子及释放因子的结合部位。 null多核蛋白体。 三、 蛋白质生物合成过程 三、 蛋白质生物合成过程 ③多肽链合成后的加工修饰。 包括三大步骤：①氨基酸的活化与搬运；②活化氨基酸在核蛋白体上的缩合；（一）氨基酸的活化与搬运 （一）氨基酸的活化与搬运 （二）核蛋白体循环 （二）核蛋白体循环 起动、延长和终止三个阶段。活化氨基酸在核蛋白体上反复翻译mRNA上的密码并缩合生成多肽链的循环反应过程，称为核蛋白体循环。null 1.肽链合成的起始 在起动因子（IF）的促进下，30S小亚基与mRNA的起动部位，起动tRNA（fmet-tRNAfmet），和GTP结合，形成复合体。 null IF3从30S起动复合体上脱落，50S大亚基与复合体结合，形成70S起动前复合体。 （IF1和IF2从复合物上脱落）。此时tRNAfmet结合在核蛋白的给位（P位）。 null2.肽链形成与延长： ⑴进位：与mRNA下一个密码相对应的氨基酰tRNA进入核蛋白体的受位。此步骤需GTP，Mg2+，和EF参与。 null⑶移位：核蛋白体向mRNA的3‘- 端滑动相当于一个密码，同时使肽酰基移到给位，受位留空。 ⑵成肽：转肽酶催化将给位的甲酰蛋氨酰基或肽酰基转移到受位，与其α-氨基缩合形成肽键。（需Mg2+，K+）。 null⑷肽链终止阶段： [识别]RF识别终止密码，进入受位。  [水解]RF使转肽酶变为水解酶，多肽链释放。  [解离] 水解GTP，使核蛋白体与mRNA分离，tRNA、RF脱落，核蛋白体解离。（三）真核细胞蛋白质合成（三）真核细胞蛋白质合成差别： 1.起始因子种类多。 2.核蛋白体较大。 3.起始复合物是蛋氨酸 4. mRNA为多顺反子，有多个起始点。 5.起始复合物形成机制不同。 6.延长因子不同。（四）线粒体中蛋白质的合成（四）线粒体中蛋白质的合成1.tRNA种类少。 2.2个rRNA、22个tRNA参与13种蛋白质合成。 3.起始氨基酸为甲酰蛋氨酸。 4.多数蛋白合成后转入线粒体。 （五）蛋白质合成后的折叠四、药物对遗传信息传递过程的影响四、药物对遗传信息传递过程的影响1.干扰核苷酸合成 2.影响核酸合成 3.影响蛋白质生物合成的抗生素null分泌型蛋白质的靶向输送nullnullnullnullnullnullnullnull分子伴侣（chaperon）