生姜凝胶贴剂的制备及其体外透皮吸收的研究

　 ●中 药 研 究 ● 生姜凝胶贴剂的制备及其体外透皮吸收的研究 3 ★　苏小妹 1 　王芳 2 　汪国华 2 　陈雨娇 3 　 (1. 江西省南昌市第一医院 　南昌 330006; 2江西中医学院 　南 昌 330006; 3江西南昌市中西医结合医院 　南昌 330006) 摘要 :目的 :制备生姜凝胶贴剂 ,研究不同促渗剂对生姜凝胶贴剂体外透皮性能的影响。方法 :以卡波姆 U10为基质主要成分 制备生姜凝胶贴剂 ,用离体大鼠皮肤为透皮屏障 ,采用改进的 Franz扩散池 ,通过体外渗透性实验对含有不同处方的生姜凝胶 贴剂进行了透皮性能的研究。结果 :生姜凝胶贴剂制备工艺简单 ,各类促渗剂对 62姜酚的经皮渗透有不同程度的促进作用 , 其中含 4%氮酮的生姜凝胶贴剂具有良好的透皮性能。结论 :生姜凝胶透皮贴剂具有临床应用价值 ,值得在临床上试验推广。 关键词 :生姜 ;促进渗透剂 ;凝胶贴剂 中图分类号 : R 283. 6　　文献标识码 : A 　　生姜系姜科植物姜 ( Ziniber officinale Rose)的 新鲜根茎 ,是我国传统的药食兼用植物 ,为历代“医 家止呕圣药 ”,《千金要方 》载 :“凡吐者多食生姜 ,此 是呕家圣药。”民间亦有单用生姜片穴位贴敷发挥 抗运动病作用的记载。现代研究表明 [ 2 ] ,生姜中的 有效成分姜辣素能有效防止晕车、妊娠及化疗等原 因引起的恶心、呕吐 ,其止吐的作用机制主要与调整 胃肠机能 ,抑制胃运动因素有关。近年来 ,虽对生姜 止吐作用的相关物质基础及药效作用机制的研究已 取得不少成就 ,但在制剂研制方面 ,尚存在很大差 距 ,临床应用仍以服用原药材及将生姜片贴内关穴 和神阙穴为主 ,存在剂型落后、使用不便等缺点。为 拓展生姜的药用价值 ,提高疗效及患者顺应性 ,开发 现代化中药制剂 ,笔者以卡波姆为主要组分 ,配以增 稠剂 (聚丙烯酸钠 )、交联剂 (三氯化铝 )等 ,研制了 生姜凝胶贴剂并对其体外透皮吸收进行了研究 ,为 开发中药新剂型提供依据。现报道如下 : 1　仪器与试药 1. 1　仪器 　1200型高效液相色谱仪 (Agilent公 司 ) ; TK212B型透皮扩散试验仪 (上海锴凯科技贸 易有限公司 ) ; AE240电子天平 (METTlER公司 ) ;贴 剂黏附力测定仪 (自制 )等。 1. 2　试剂与药材 　生姜 (购于南昌湾里区市场 )经 江西中医学院中药鉴定组曹岚老师鉴定为姜科植物 姜 ( Ziniber officinale Rose)的新鲜根茎 , 62姜酚对照 品 (62gingerol,上海同田生物技术有限公司 ,批号 : 2412200706) ;丙二醇 (汕头市光华化学品厂 ) 卡波姆 U10 (Carbopol Uhrez 10,美国诺誉化工 公司 ) ,聚丙烯酸 7S( PAS 7,美国诺誉化工公司 ) ,甘 油 (丙三醇 , 天津市科技有限公司 ) , 氮酮 (Azone,天津市科密欧化学试剂有限公司 ) ,三氯化 铝 (A lum inium trichloride,河北益达化工有限公司 )、 柠檬酸 ( citric acid,苏州虹阳化工有限公司 ) ,无纺 布 (南昌卫生厂 ) ,背衬 (南昌卫生材料厂 )乙腈 为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯 雄性 SD大鼠 ,体重 (200 ±20) g,江西中医学院 动物实验室 , 合格证号 : SCXK (赣 ) : 200520001, JZDW NO: 20072236。 2　方法 2. 1 　贴剂制备工艺 　将处方量的卡波姆撒在适量 去离子水中 ,待聚合物润湿后将分散液以 300 r/m in 搅拌 30 m in作为 A相 ,将聚丙烯酸钠粉末加入甘 油 ,低速搅拌 6 m in,混合均匀后作为 B相 ,三氯化 铝粉末与柠檬酸溶于适量去离子水中低速搅拌均匀 后作为 C相。充分搅拌下将 C相加入 B相 ,然后在 250 r/m in搅拌下将 A相加入到 B、C相的混合物中 混匀 ,最后加入药物流浸膏混合均匀。将此混合物 超声脱气 15 m in,于 40 ℃迅速均匀涂布于无纺布 上 ,控制涂布厚度为 (1. 5 ±0. 1) mm。室温放置 ,覆 背衬 ,冲切成面积为 70 cm2 的方形贴剂 ,用纸铝塑 袋塑封保存。 2. 2　离体经皮渗透试验方法的建立 ·16· 江西中医药 2009年 1月第 1期总 40卷第 313期 　 3 南昌市科技局重点攻关及产业化科技项目 [课题编号 :洪科发计字 (2006) 82号 ] 　 ●中 药 研 究 ● 2. 2. 1　液相色谱条件 　色谱柱 :依利特 C18 ( 4. 6 mm ×250 mm, 5μm ) ;流动相 :乙腈 2水 ( 38∶62) ;流 速 1. 0 m l/m in;波长 : 280 nm;柱温 : 30 ℃。 2. 2. 2　线性关系考察 　精密吸取 62姜酚对照品溶 液 (110μg/m l) 1、2、4、6、8、10μl进样 ,测定峰面积。 以峰面积 (X)为横坐标 ,进样量 ( Y,μg)为纵坐标 , 得线性回归方程 : Y = 0. 000 1X + 0. 060 5 ( r = 01999 9) 62姜酚在 1. 39～13. 9μg/m l与峰面积具有 良好的线性关系。 2. 2. 3　离体皮肤的制备 　将 SD大鼠腹部长毛剪 去 ,刮除绒毛后 ,剥离皮下组织和脂肪 , 0. 1%的新洁 尔灭浸泡 0. 5小时 ,用生理盐水洗净 ,置冰箱内 4 ℃ 冷藏备用。 2. 2. 4　透皮吸收实验方法 　取出备用大鼠皮 ,将 皮肤固定于 Franz扩散池上部 ,取生姜凝胶贴剂 ,揭 去防粘保护层 ,贴于皮肤的角质层面 ,以 100 mL去 离子脱气水为扩散介质 ,温度为 (37 ±0. 5) ℃水浴 保温 ,磁力搅拌速度为 100 r/m in,分别于 1、2、4、6、 8、12、16小时取样 2 m l,立即补加等量的新鲜扩散 介质。接收液以 0. 45μm微孔滤膜滤过 ,弃去初滤 液 ,收集续滤液 1 m l,样品用 HPLC法测定扩散液中 62姜酚的含量 ,再按下列公式计算单位面积 ( cm2 ) 累积渗透量 : Q = [ Cn ×V + - ρn - 1 i = 1 ×2 ] /S 式中 , Q 为药物累积经皮渗透量 (μg/cm2 ) , S 为有效皮肤渗透面积 ( cm2 ) , V为接收室中接收液 体积 , Ci为第 i ( i≤n - 1)个取样点测得的药物浓度 (μg/m l) , Cn:第 n个取样点测得的药物浓度 (μg/ m l)。 对药物渗透曲线 (药物累积经皮渗透量 - 时间 曲线 )的稳态部分做切线 ,切线的斜率即为药物经 皮渗透速率。 3　结果 3. 1　考察透皮接收液对药物测定的干扰 　将不含 药物的空白贴剂安装在 Franz扩散池上 ,操作同 “212. 4”,空白贴剂和生姜凝胶贴剂的透皮接收液 的 HPLC图。结果表明 ,在供试品色谱图中 ,在与 62 姜酚对照品溶液色谱图相应保留时间 (约 19. 2分 钟 )处有相应的 62姜酚峰出现 , 62姜酚峰与皮肤渗出 物峰、溶剂峰等杂质峰分离良好 ,处方成分对含量测 定无干扰。 3. 2　不同促渗剂对生姜凝胶贴剂经皮渗透的影响 　在贴剂的基本处方固定后 ,为考察促渗剂对 62姜 酚在皮肤角质层的积累是否有促进作用 ,分别在贴 剂中加入常用的单一及复合促渗剂 4%冰片 (质量 百分含量 ,下同 )、4%氮酮、4%薄荷脑、2%丙二醇 + 2%氮酮促渗剂 ,按制备工艺制成贴剂后 ,以不含 促渗剂的生姜凝胶贴剂为对照 ,按“2. 2. 4”项下方 法进行离体经皮渗透试验。 由药物渗透曲线计算可知 ,不同促渗剂作用下 62姜酚的经皮渗透速率分别为 4%氮酮 (37. 2μg × cm - 2 ×h - 1 ) > 2%丙二醇 + 2%氮酮 ( 34. 26μg × cm - 2 ×h - 1 ) > 4%薄荷脑 (28. 76μg ×cm - 2 ×h - 1 ) > 4%冰片 (25. 15μg ×cm - 2 ×h - 1 ) >对照 ( 21. 32 μg ×cm - 2 ×h - 1 )。结果表明 :各类促渗剂对 62姜酚 的经皮渗透有不同程度的促进作用 ,其中氮酮的促 渗作用最为显著。 3. 3　氮酮不同量的优选 　根据上述实验结果 ,选择 氮酮为生姜凝胶贴剂的促渗剂 ,由于氮酮用量影响 药物的透皮吸收。本实验以不含促渗剂的贴剂为对 照 ,考察了氮酮的用量对 62姜酚透皮吸收的影响。 由药物渗透曲线计算可知 ,不同促渗剂作用下 62姜酚的经皮渗透速率分别为 6%氮酮 ( 36. 78μg ×cm - 2 ×h - 1 ) > 4%氮酮 (35. 51μg ×cm - 2 ×h - 1 ) > 2%氮酮 ( 27. 92 μg ×cm - 2 ×h - 1 ) > 1%氮酮 (24. 73μg ×cm - 2 ×h - 1 ) >对照 ( 21. 32μg ×cm - 2 ×h - 1 )。结果表明 :随着凝胶贴剂中氮酮含量的增 加 , 62姜酚的经皮渗透速率也随之增加 ,但氮酮含量 在 4% ～6%范围内药物的渗透速率相近 ,考虑到长 期应用氮酮的毒副作用 ,故将生姜凝胶贴剂中促渗 剂氮酮的用量定为 4%。 3. 4　验证试验及重复性考察 　按优化复合透皮吸 收促进剂制备 3 批贴剂 (批号为 : 20080729、 20080801、20080807)进行验证试验和重复性考察 , 所用皮肤均取自同一只大鼠背部。批间药物体外释 放度和透皮扩散相应时间点数据依次进行方差齐性 检验 ,批间各指标两次比较用 Dunnett检验。结果 表明 , 3批透皮贴剂均具较佳的外观和物理特性 ,批 间药物经皮渗透性差异均无显著性 ( P > 0. 05)。 4　讨论 生姜凝胶贴剂有抗运动病的作用 ,相对其它抗 运动病的作用药物相比 ,不会引起口干、昏睡、血压 降低等副作用 ,且生姜凝胶贴剂抗运动病药效发挥 更加持久是一种新型运动病预防药物 ,值得在临床 上试验推广。 一个好的贴布需要满足两种自相矛盾的需求 : 对药用部位具有良好的生物黏附性 ,而在除去时在 应用部位没有药物残留。目前在以传统膏药和橡皮 膏为主的中药外用剂型使用中存在各种问题 ,如 :膏 ·26· 　J IANGX I JOURNAL OF TRAD ITIONAL CH INESE MED IC INE 　 ●中 药 研 究 ● 高效液相测定橘红枇杷片中陈皮的橙皮苷的含量 ★　黄咏梅 1 　李红 1 　邓子杰 2 　 (11广州市白云区人民医院 　广州 510500; 21广州固志医药科技有限公司 　广州 510600) 关键词 :橘红枇杷片 ; HPLC;陈皮 ;橙皮苷 中图分类号 : R 28411　　文献标识码 : B 　　橘红枇杷片处方是由化橘红、陈皮、枇杷叶、桔 梗、紫苏子、甘草六味药组成的复方制剂 ,化橘红和 陈皮在方中的君药 ,陈皮在方中的投料量较大 ,而陈 皮又是理气健脾、燥湿化痰的主药 ,为保证药品质量 故选用该药材中特有成分橙皮苷作为其定量指标进 行研究 ,方法学研究如下。 1　仪器与试剂 仪器 : D ionex 高效液相色谱仪 , P680 HPLC Pump, ASI2100 Autmated Samp le Injector, UVD170检 测器 , Chromeleon2HPLC management software; 色谱 柱 : Betasil (4. 6 mm ×250 mm, 5μm) ,大连依利特分 析仪器有限公司 ; 试剂 :橘红枇杷片 :广东怡康制药有限公司 ,批 号 : 050701、050702、050703。橙皮苷对照品 :中国药 品生物制品检定所 ,供含量测定用 ,批号 : 1107212 200211。甲醇 :色谱纯 ,德国 Merck corporation;水 :重蒸水 ;其他试剂 :均为分析纯。2　含量测定2. 1　色谱条件 　检测波长及流动相的确定 ,参考中国药典一部陈皮项下的检测波长及流动相 ,选择对橙皮苷进行含量测定的检测波长为 283 nm;流动相为甲醇 2醋酸 2水 (35∶4∶61) ,样品峰形对称 ,理论塔板数按峰计算不低于 2000。212　对照品溶液制备 　精密称取橙皮苷对照品适量 ,加甲醇制成每 1 m l含 40μg的溶液 ,即得。213　供试品溶液制备 　取本品 10片 ,研细 ,取约 1g,精密称定 ,精密加入甲醇 25 m l,称定重量 ,加热回流 1小时 ,放冷 ,用甲醇补足减失的重量 ,滤过 ,取续滤液 ,用微孔滤膜 (0145μm)滤过 ,即得。214　测定法 　分别精密吸取上述供试品溶液与 药基质中含铅量过高 ,长期使用有造成铅中毒的危 险 ;橡皮膏基质吸水性和水气透过性差 ,长期使用会 造成皮肤泛白、过敏及因黏结强度过大易造成剥离 疼痛 ;反复揭贴性差及载药量偏低等缺点。本实验 制备的凝胶贴剂采用具有良好生物相容性的卡波姆 U10为主要组分 ,配以增稠剂 (聚丙烯酸钠 )、交联 剂 (三氯化铝 )等 ,具有优良的黏结性能 ,作为贴剂 基质材料还可以避免污染、剥离残留等现象 ,该凝胶 贴剂作为新型外用制剂具有良好的应用前景。 外用制剂中 ,常用的渗透促进剂有薄荷脑、冰 片、丙二醇、氮酮和萜类物质等。氮酮以使用浓度 低、促透效果好、无毒无刺激性等而广泛应用。氮酮 对疏水性成分和亲水性成分均有较好促渗作用 ,适 于有效成分较多而复杂的中药制剂。本实验显示 , 氮酮能明显促进 62姜酚的透皮吸收 ,但氮酮含量为 6%时 ,促渗作用与 4%时接近 ,说明氮酮对本样品的促渗作用与其浓度有一定关系 ,但不完全呈剂量依赖性。 参考文献[ 1 ]国家药典委员会. 中国药典 (一部 ) [ S]. 北京 :化学工业出版社 ,2005, 66, 12, 279, 542.[ 2 ]黄雪松 ,宴日安. 姜酚的生物活性述评 [ J ]. 暨南大学学报 , 2005,26 (3) : 434 - 438.[ 3 ]Hock S,W illiam R. Pressure2sensitive adhesives for transdermal drugdelivery system s. Pharmaceutical Science& Technology Today, 1999,2 (2) : 60 - 69.[ 4 ]张梅 ,宋芹. 三七水凝胶透皮贴剂的初步研究 [ J ]. 成都中医药大学学报 , 2005, 28 (3) : 60 - 61.[ 5 ]胥云 ,庄桂霞. 中药现代经皮给药制剂的临床应用与发展前景[ J ]. 中医外治杂志 , 2005, 14 (2) : 6 - 7.(收稿日期 : 2008209217　责任编辑 :蒋力生 ) ·36· 江西中医药 2009年 1月第 1期总 40卷第 313期 　 本人为中药执业药师，制药工程师，具有多年巴 布剂膏药生产经验，具有成熟的巴布剂配方和实际大 生产的工作经验。经过多年实践，在原有配方工艺基 础上进一步降低成本，提高生产效率。 出售巴布剂成熟配方，可现场指导巴布剂的大生 产，解决巴布剂研发以及大生产过程中的生产、工艺 等问题。 另有一台曾经立下汗马功劳的闲置巴布剂膏药生产 设备一台出售，用料完全按照 GMP要求设计生产的。 【联系电话】于先生 18345028310，qq：781317158。