TLC纯度检测

TLC纯度检测： 1、 方法： 1 将过P6柱收集的MOmix、M3、M4、GOmix、G3、G4分别过P2柱脱盐，并冻干。 2 用超纯水将冻干后已脱盐的M3、M4、G3、G4配制成5mg/ml样品，将MOmix、GOmix配制成25mg/ml样品。用超纯水配制5mg/ml的半乳糖醛酸样品。 3 配制展开剂、显色剂。 展开剂： 正丁醇：甲酸：水=4：6：1（v：v：v） 显色剂：20mg 硫酸高铈，50mg钼酸铵，5ml 98%H2SO4，95ml乙醇。 4 通过TLC进行样品纯度检测： a．硅胶板活化：100℃烘箱，30min。 b． 用点样毛细管，取相同体积的样品点样（＞3μL），顺序依次为半乳糖醛酸、MOmix、M3、M4、GOmix、G3、G4。（如图1，点样时用风筒吹干以免扩散，样品之间留有一定空隙） c． 在层析缸中加入展开剂后，放入硅胶板，但不是展开剂与硅胶板接触，盖好盖子使展开剂饱和（20min）后，开始进行展开。 d． 展开结束后吹干硅胶板，喷上显色剂并晾干后，于200℃显色1min后，测量展距，计算比移值Rf（Rf=原点中心至斑点中心距离/原点中心至溶剂前沿的距离）。铺上保鲜膜后，进行扫描。 e．寡糖聚合度及纯度