微生态制剂替代抗生素对生长肥育猪生长性能的影响

《饲料工业》·2010年第 31卷第 14期微生态制剂 ·本栏目由智荟生物科技有限公司协办· 电话：（010）59798526 智荟生物科技有限公司 让 饲 料 活 起 来 专栏负责人 刘 影 技术总监 微生态制剂替代抗生素对 生长肥育猪生长性能的影响 刘 影 朱文涛 张 博 成廷水 摘 要：试验以生长育肥猪为研究对象，通过饲养试验研究微生态制剂替代抗生素对育肥猪生长 性能的影响。试验采用了 90头体重接近 30 kg的健康杜×长×大三元杂交育肥猪，按体重随机分为 3个 组，每组 3个重复，每个重复 10头猪，结果表明，采用微生态制剂替代全部或者部分抗生素后，与对照 组相比，中猪阶段的日增重和饲料转化效率都有较大程度的提高，腹泻率有所降低。 关键词：微生态制剂；抗生素；生长肥育猪；生长性能 中图分类号：S816.3 文献标识码：A 文章编号：1001-991X（2010）14-0030-03 刘影，智荟生物科技有限公司，博士，100029，北京市朝阳 区裕民路 12号中国国际科技会展中心 A座 1901室。 朱文涛，河南宏展实业有限公司。 张博，单位及通迅地址同第一作者。 成廷水，北京九州互联农牧科技有限公司。 收稿日期：2010-06-14 目前在生长育肥猪日粮中添加一定剂量的抗生 素具有促生长的作用。但由于食品安全要求，生产上 也反映出了使用抗生素的负面影响，研究抗生素的替 代品已经从科研深入到生产领域。 动物日粮中添加抗生素，目的是为了抑制有害微 生物，给小肠粘膜提供一个理想的环境，提高营养物 质的吸收利用。但是长期添加抗生素会杀灭有害菌同 时也抑制了有益菌的生长，破坏了肠道的微生态区系 平衡。从生产上表现为生长抑制或生长速度不理想的 普遍现象。加之耐药性提高，机体抗病力降低，猪病复 杂难治等问题，导致科研和生产方面都在积极寻找替 代抗生素的。 微生态制剂通过与有害菌的竞争占位、夺氧等竞 争性抑制作用机理，使得肠道内乳酸菌、双歧杆菌等有 益菌能够成为优势菌群。另外，微生态制剂具有分泌抗 菌物质、酶和有机酸等营养物质，具有调整肠道微生态 区系达到有利于消化、健康的平衡作用。因此，微生态 制剂作为一个绿色的饲料添加剂成为应用研究热点。 1 与方法 1.1 材料 微生态制剂购自智荟生物科技有限公司，商品名 “派富”，其活性成分是由 100亿活芽孢/g枯草芽孢杆 菌组成。 抗生素：硫酸粘杆菌素 10%，黄霉素 4%，为市售产品。 1.2 方法 1.2.1 试验与分组 选取平均体重接近 30 kg的健康猪 9栏，分为 3 个处理组，每组 3个重复，即 3栏，以栏为单位做为一 个重复。每栏 10头猪。称取初重后用 SAS软件进行分 析，确认各处理间初始重无差异性。饲喂不同饲料的 栏交叉排列，消除环境差异。 1．2．2 试验日粮 日粮配合参照 NRC (1998)20~50 kg瘦肉型猪饲 养标准，各试验日粮的基础配方相同，基础日粮配方 见表 1。试验料为颗粒料，试验日粮编号为 A（添加抗生 素组，抗敌素 40 mg/kg+黄霉素添加量 8 mg/kg），B（不 添加抗生素＋100 g/t派富），C（20 mg/kg抗敌素+4 mg/kg 黄霉素＋100 g/t派富）。 表 1 基础日粮配方及营养水平 营养水平 CP（%） Lys（%） 消化能（MJ/kg） 16.5 0.95 13.38 日粮组成 玉米 豆粕 麸皮 预混料 含量(％) 63 25 8 4 1.2.3 饲养管理与疾病防治 饲养管理及疾病防治、疫苗注射与猪场保持 一致。 30 分别于试验开始和试验结束的当天清晨空腹称 重，每栏试验猪的体重及栏号。试验前过渡 3 d， 试验开始前饲喂小猪阶段日粮。第 1 d，75%小猪料+ 25%试验料；第 2 d，50%小猪料+50%试验料；第 3 d， 25%小猪料+75%试验料，第 4 d为 100%的试验料。每 天饲喂 3次，饲喂时间分别为 7:00、12：00、18：00，干 喂，喂量以槽内略有剩余为度，自由采食、饮水。 1.3 检测指标 1.3.1 生长性能 日增重（ADG）：日增重（g/d）=（试验末重-试验初 重）/试验天数。 日采食量：每天记录每栏的采食量来计算每头每 天的采食量； 料肉比：每单位增重所消耗的饲料。 1.3.2 腹泻率、死亡率 腹泻率（%）=[总腹泻头日数/（试验猪头数×试验 天数）] ×100； 死亡率（%）=死亡仔猪头数/试验猪总头数×100。 1.3.3 观察记录指标 试验猪的毛色、粪便、疾病状况、用药情况、采食 时间及采食期间喝水次数。 1.4 试验数据处理 试验数据用 SAS 软件进行单因素方差分析和 Duncan's 法多重比较。 2 结果与分析 微生态制剂替代抗生素对中猪生长性能的影响 （见表 2）。 表 2 微生态制剂替代抗生素对中猪生长性能的影响 项目 初均重(kg/头) 末均重(kg/头) 日增重（g/d） 日采食量（g/d） F/G 腹泻率（%） A 27.60±1.65 60.53±2.67 816±37.4 2 168±139.41 2.67±0.14 3.59 B 27.55±1.28 62.7±2.08 858±48.56 2 218±145.98 2.60±0.18 1.57 C 28.43±0.86 65.24±2.05 880±40.46 2 264±100.62 2.58±0.14 1.76 由表 2可见，增重指标方面，部分替代抗生素的 效果更好。日增重在该阶段能从 816 g/d提高到 880 g/d， 提高 64 g/d。该生长速度的提高，对于生产上已是很 好的水平。 从料肉比情况看，C组最低。与对照组相比，降低 了 0.09。全部替代抗生素组后，也能降低料肉比 0.07， 这个改善程度的经济价值是很高的。说明使用微生态 制剂，从料肉比降低所体现的经济价值看，其投入产 出比是非常高的。 日粮中添加抗生素，主要目的是提高生长性能。 也有防止生长肥育猪偶尔腹泻的目的。该试验结果表 明，微生态制剂替代抗生素，腹泻率有所降低。 微生态制剂“派富”全部替代抗生素或者部分替 代抗生素，各处理组之间，生产性能无显著差异。但日 增重和饲料转化效率都提高了。这个改善的水平对于 生产上已有很高的应用价值。而且腹泻率还有所降 低。这几个指标的改善对生产应用方面具有好的指导 意义。 3 讨论 益生素很早就被应用于人的食品中，甚至作为医 药和保健品使用。在畜牧养殖中，使用最普遍是水产 养殖的水质净化。近年来，在幼龄动物和水产动物日 粮中都有普遍的使用。随着应用技术逐渐成熟，畜牧 养殖中都已逐步认可其提高生产性能，抗应激和抗病 能力。李福彬等（2009）认为，益生素作为活的微生物 饲料添加剂，通过维持肠道菌群平衡对宿主产生有益 影响，可以降低肠道疾病、提高机体免疫力、促进生产 性能、改善畜产品品质，是抗生素的有效替代品。30 kg 以上的生长肥育猪，消化系统发育成熟，消化能力强。 很多人会认为这个阶段的猪，酶的分泌能力强，肠道 微生态区系也很稳定，外源性的酶制剂和微生态制剂 不一定起到相应的效果。苏海燕等（2009）研究发现， 50 kg肥育猪日粮中使用微生态制剂能替代部分抗生 素，并起到促进生长和提到饲料转化效率的效果。本 试验证明，微生态制剂能替代生长育肥猪阶段日粮中 的全部抗生素，生长性能还有所提高。而替代部分抗 生素后，抗生素和微生态制剂还有一定的协同作用， 生长性能表现很好，与苏海燕等研究结果相似。俞宁 等（2009）发现，枯草芽孢杆菌能够替代抗生素治疗 7~15日龄的仔猪腹泻，而且能避免药物对猪只实质 器官的损害，不影响猪只的生产性能。从这些研究结 果表明，枯草芽孢杆菌等微生态制剂能够逐步成为抗 生素替代品，并在生产应用中逐步得到推广。 枯草芽孢杆菌微生态制剂能起到这样的作用，可 能与其以下作用机理有关：各种研究表明，枯草芽孢 杆菌在体内能拮抗多种动物致病菌（向贵友等，1994； 王红宁等，1994）；产生多种酶类，促进动物消化酶活 性（Sagarrd，1990；陈惠等，1994；王子彦等，1994）；产 生多种营养物质如维生素、氨基酸、促生长因子等，参 与机体的新陈代谢（Savage，1979；何瑞国等，1994）；能 使绒毛加长，粘膜陷窝加深（余成瑶等，1990）；产生细 菌素和有机酸等，刺激肠道免疫细胞发挥免疫机能 （Himanen等，1993；刘克琳等，1994；潘康成，1996；张 刘影等：微生态制剂替代抗生素对生长肥育猪生长性能的影响 微生态制剂 31 灵启等，2008）。李福彬等（2009）的综述也全面论述过 此方面的机理。 抗生素在畜禽日粮中作为抗病促生长的饲料添加 剂，已有多年的应用历史和经验。但是，人们逐步认识 到抗生素虽然可以杀死致病菌，但正常微生物菌群也 遭到破坏，影响生长。目前很多生长肥育猪阶段出现生 长抑制的问题，可能与前期大量应用抗生素有关。从本 试验来看，抗生素组腹泻率最高，这说明抗生素可能导 致了肠道微生态失衡，从而引起腹泻。相反，微生态制 剂维持了肠道正常微生态平衡，提高了机体免疫力，使 得其日增重和抗腹泻能力并不比抗生素组差。 C组为抗生素与芽孢杆菌的组合，其生长性能和 抗腹泻效果优于抗生素组，这说明二者有协同作用。 很多人认为，抗生素具有杀菌作用，与微生态制剂不 能同时使用。也有人认可微生态制剂的菌种研发发展 迅速，能接受微生态制剂对抗生素具有耐药性，但还 难以推测微生态制剂与抗生素之间的协同作用。 Mohan 等(1995) 及吕东海等（2001）研究发现，益生素 与抗生素同时使用能达到最佳效果。本研究也发现二 者有一定的协同作用，说明通过合适的菌种筛选并对 该菌种进行抑菌浓度的研究，搭配一定剂量的抗生 素，益生素是能够和某些抗生素同时使用的。 4 小结 从本次试验的结果来看，微生态制剂部分或全 部替代抗生素，能提高生长肥育猪的生长性能和健 康水平。 （编辑：王 芳，xfang2005@163.com） 高含量芽孢杆菌益生菌的制造技术 刘华梅 陈振民 李 青 谢 翔 刘华梅，武汉科诺生物科技股份有限公司，博士，430074， 武汉东湖开发区关南科技工业园区。 陈振民、李青、谢翔，单位及通迅地址同第一作者。 收稿日期：2010-06-14 20世纪 50年代以来，抗生素作为疾病治疗剂和 动物生长促进剂对畜禽、水产养殖业的发展发挥了重 大作用。然而，大规模集约化养殖业的快速发展导致抗 生素的过度滥用，使食品安全受到日益严峻的挑战，近 年来，欧洲、美国、日本等发达国家已明令禁用抗生素 作为饲料添加剂，并在积极地寻找抗生素的替代品。人 们研究发现，益生菌用于饲料添加剂饲喂动物，能很好 地控制动物病原菌的增殖、促进动物生长作用，同时不 会出现耐药性，也不存在有害残留或污染等副作用，因 此，目前益生菌已经发展成为替代抗生素、控制动物疾 病的最有效的工具之一。其中芽孢杆菌益生菌，如凝结 芽孢杆菌(Bacillu coagulans)、缓慢芽孢杆菌(B. lentus)、 枯草芽孢杆菌 (B. subtilis)、地衣芽孢杆菌 (B. licheni－ forms)和短小芽孢杆菌(B. pumilus)等，由于其具有抗逆 性强、耐储藏、应用条件不苛求等优良性状，全部或部 分被美国 FDA、中国农业部列入可直接用于饲料添加 剂的菌种目录，成为目前应用最为广泛的一种益生菌， 对畜禽、水产业都显示良好的应用效果。 但是，当前我国益生菌产业还处在起步阶段，产 品纯度和含量低，产品稳定性差，使用效果也不很理 想。但随着科技的发展，研究的不断深入，益生菌产业 必将朝着健康、规范、高水平方向发展。目前，武汉科诺 公司采用先进的制造技术，已分别开发出活芽孢高含 量的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌产品，活芽孢数分别 达到 10 000亿个活芽孢/g，并申请了国家专利。 1 多种生物学技术保障了高效安全的菌种筛选与 鉴定 作为活菌制剂，在菌种的筛选时，一定要进行系 统的安全性毒理学试验，确定无毒副作用，并经权威 机构鉴定后，方可用于生产，这是保证产品安全的前 提条件，避免可能存在的安全隐患。其次，菌种应具有 优良的特性，能耐受动物肠道内的极端条件，包括胃 中的酸性环境和十二指肠中的胆汁，同时产品还应能 耐受饲料制粒过程中的热处理。分离在不同条件下收 集的芽孢杆菌样品，通常采用显微观察、生理生化试 验、现代微生物鉴定系统-API系统（API50试剂盒）及 16S rRNA基因的 PCR扩增等生物学技术对菌株进行 鉴定与选育。经过优选的芽孢杆菌同时应具有以下特 性：生长迅速、生物量高、良好的产芽孢能力，有耐酸、 耐碱、耐高温的良好稳定性及优良的产酸、产酶、产维 生素等性能。同时对目标菌种进行安全性鉴定， 其对动物和环境的影响，如急性毒性试验和毒理学试 验等。最后选择高效、安全的芽孢杆菌作为生产菌种， 进行保藏，并定期对生产菌种进行安全性检测。 2 响应面方法优化培养基显著提高了芽孢杆菌的发 酵水平 《饲料工业》·2010年第 31卷第 14期 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 微生态制剂 32