辛伐他汀胶囊的制备及质量标准研究

西北药学杂志 2008年 8月 第 23卷 第 4期 203 储备液，吸取储备液 1．0，5．0，10．0，15．0和 20．0 mL， 分别置于25 mL量瓶中，加体积分数 70 甲醇溶液稀 释至刻度，摇匀，制得黄芩苷对照品系列溶液。分别吸 取20 L，注入色谱仪，记录色谱图，以黄芩苷色谱峰面 积为纵坐标，对照品溶液质量浓度 为横坐标进行线性 回归，回归方程为 A一80．84C一26．93(r一0．999 9)。 结果明黄芩苷对照品在 5．028～100．560 mg·L 范围内有良好的线性关系。 2．4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 20 L，连续 进样 6次，平均峰面积为 4 026．71，RSD为 0．79 ， 表明本系统精密度良好。 2．5 阴性对照试验 在样品溶液相同的色谱条件 下，吸取阴性对照溶液 20 L注入液相色谱仪 ，记 录 色谱图，结果阴性对照溶液的色谱图中与黄芩苷保留 时间对应的位置上无色谱峰出现，表明其它药材成分 对测定结果无干扰 。 2．6 稳定性试验 取同一份样品溶液 ，放置 0，1，3， 5，8和 24 h，按上述色谱条件分别进样，记录色谱图， 结果黄芩苷的平均峰面积为3 243．06，RSD为0．95 ， 表明样品溶液在该实验条件下，24 h内稳定。 2．7 重复性 试 验 取 同 一批 双 黄 消炎 片 (批 号 060903)细粉 6份，精密称定，分别按样品测定方法进 行测定，结果黄芩苷平均含量为 27．85 rag／片，RSD 为 0．82 ，表明本法重复性 良好 。 2．8 加样 回收试验 取已知含量 的双黄 消炎片 (批 号 060903)细粉(含黄芩苷 6．865 )约 150 mg，精密 称定，共 6份，分别置具塞锥形瓶中，精密加入黄芩 苷对照品 70 甲醇溶液(0．326 g·L )20，30和 40 mL，再精密依次加入 70 甲醇溶液 20，10和 0 mL， 按样品制备方法操作 ，每份进样 2针，测定其含量，黄 芩苷平均回收率为 99．91 ，RSD为 1．02 。 2．9 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液和样 品溶液各 20止 ，按上述色谱条件测定，记录色谱图，以 外标法计算样品中黄芩苷的含量，结果 3批双黄消炎片 中黄芩苷的含量分别为 27．85．24．97和 19．05 mg／片。 3 讨论 3．1 流动相的选择 曾以不同比例的甲醇一3 mL·L 磷酸溶液与不同比例的乙腈一3 mL·L～ 磷酸溶液为流 动相进行比较试验，结果乙腈一3 mI ·L『 磷酸溶液 (25：75)为流动相 时色谱 峰形对称 ，分离效果 佳 ，理 论板数高，是测定黄芩苷较为理想的流动相系统。 3．2 提取方法的考察 我们参考《中国药典》2005 年版一部 黄芩的黄芩苷含量测定项下方法，提取黄 芩苷采用加热 回流 3 h，与本实验提取方法进行 比较试 验，结果同一样 品(批号 060901)加热 回流提取含量测 定为 27．91 mg／片 ，超声提取含量测定为 27．85 mg／片 ， 试验结果表明 2种提取方法没有明显差异，由于超声 提取操作简便易行，所以选择超声提取方法。 参考文献 ： [1] 卫生部药品标准[S]．中药成方制剂．第二册．1990：65． E2] 中国药典 2005年版[S]．一部．2005：211，477． [3] 曹红，祝业．HPLC法同时测定双黄连 口服液中绿原酸 和黄芩苷的含量[J]．中国药品标准，2007，8(2)：43． E4] 黄铭铸．HPI C法测定感冒软胶囊中黄芩苷的含量[J]． 中国药品标准 ，2007，8(4)：34． (收稿日期：2007—12—14) 辛伐他汀胶囊的制备及质量标准 研 究 仝俊太 ，韩继勇 ，胡 琰 (1．徐州市第一人民医院，江 苏 徐 州 221002；2．南京 新港 医药 有 限公 司，江 苏 南京 210006) 摘要 ：目的 对 自制辛伐他 汀胶 囊进行全面的质 量研 究。方法 采用高效液相色谱法，紫外吸收光谱法等。结果 试验表明在 26．4～264．0 mg·L 的范围 内线性 良好 (r一0．999 6)，仪器 精 密度及重复性 良好 ，回收率 100．7 ，RSD为 1．64 ( 一9)， 溶液在 10 h内基本稳定。结论 自制辛伐他汀胶囊工艺合理， 检 测方法的专属性 、重复性 、准确度符 合 国家药品标准规定 ，对 辛伐他汀制剂进一步开发利用具有参考意义。 关键词：辛伐他汀；制备；高效液相 色谱法；含量测定 中图分类号 ：R927．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1004—2407(2008)04—0203—03 辛伐他汀 (simvastatin，Zocor)由美 国默克公 司 开发 ，是以洛伐他汀为原料半合成 的 HMG—CoA还 原酶抑制剂，于 1988年首次上市，1991年 12月获美 国FDA批准，是治疗原发性高胆固醇血症的药物。由 于辛伐他汀在水中不溶，药物体外溶出度差，导致药物 体内生物利用度低，且辛伐他汀极易氧化降解，为提高 制剂生物利用度和制剂稳定性，笔者自行并制备 了辛伐他汀胶囊，并根据辛伐他汀胶囊国家药品标准 WS1一(X-065)一2003Z，进行了全面的质量研究 j。 1 辛伐他汀胶囊的制备 将辛伐他汀粉碎并过 100目筛，称取 10 g，与微晶 纤维素 120 g、乳糖 60 g、低取代羟丙基纤维素 20 g，按 等量递加法混匀。将叔丁基一4一羟基苯甲醚 0．4 g溶解 于少量乙醇中，与药物粉末混匀后 ，以 20 g·L 的羟 丙基甲基纤维素稀乙醇溶液为黏合剂制软材，20目造 粒，60℃干燥，18目整粒，加入硬脂酸镁 2 g、十二烷基 硫酸钠 2 g，混匀，灌装于胶囊壳中，制成 1 000粒。 2 质量控制 2．1 外观 为硬胶囊剂 ，物为类白色颗粒及粉末。 2．2 紫外吸收光谱 取本品内容物适量，加乙睛一0．05 tool·L 醋酸钠(pH4．0)(8：2)适量，充分振摇使 辛伐他汀溶解并制成每1 mL含辛伐他汀约 1O g的 溶液，滤过，取续滤液，照分光光度法测定，在 247， 维普资讯 http://www.cqvip.com 204 西北药学杂志 2008年 8月 第 23卷 第 4期 238与 231 am 波长 处有 最大吸 收，符合 国家标准。 同法取空白制剂进行试验 ，表明辅料在此波长无最大 吸收 ，对鉴别无干扰 。 2．3 水分 以卡尔费休氏法对制备的样品进行水分 测定 ，结果小于 2．5 。 2．4 含量均匀度 取本品 1O粒，分别将内容物倾入 100 mL量瓶 中；囊壳用乙睛一0．05 mol·L叫醋酸钠 (pH4．O)(8：2)适量，分次洗净，洗液并入量瓶中，加 上述溶剂适量，充分振摇使辛伐他汀溶解，加上述溶 剂稀释至刻度，摇匀，滤过；取续滤液作为供试品溶 液 ，照含量测定项下的方法测定，结果表明本品(A+ 1．80S)<15．0，含量均匀度符合规定。 2．5 溶出度 取本品 ，照中国药典 2005年版二部附 录X C溶出度测定法第一法，以磷酸盐缓冲液(取磷 酸二氢钾 1．36 g，加水 900 mL使溶解，用盐酸或氢 氧化钠溶液调节 pH值至 4．5，加水至 1 000 mL，摇 匀，即得)一正丙醇(2：1)900 mL为溶剂，转速为 100 r·min ，依法操作，经 30 min时，取溶液 1O mL，滤 过，取续滤液作为供试品溶液。另取辛伐他汀对照品 适量，精密称定，加上述溶液溶解并制成每 1 mL中 含 12 g的溶液 ，作为对照品溶液。分别取供试品溶 液和对照品溶液各 2O L注入液相色谱仪，照含量测 定项下的色谱条件测定，计算每粒的溶出量。结果表 明，本品溶出度可达 8o 以上，符合规定。 2．6 有关物质 我们依据文献[2]及国家药品标准， 对本品有关物质方法拟定如下：称取内容物细粉适量 (约相当于辛伐他汀40 mg)，置 5O mL量瓶中，加乙腈 32．5 mL，充分振摇使辛伐他汀溶解，加0．25 g·L 磷 酸二氢钠溶液(pH4．5)稀释至刻度，摇匀，滤过；精密 取续滤液 5 mL，置 25 mL量瓶 中，加流动相稀释 至 刻度，摇匀，作为供试品溶液；吸取供试溶液 1 mL至 5O mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作为对照溶 液。取对照溶液 2O L注入液相色谱仪，调节仪器灵 敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的 1O ～2O ， 再取供试品溶液 2O L注入液相色谱仪，记录色谱图 至主成分保留时间的 2倍。色谱图中如有杂质峰，量 取辅料峰以外的各杂质峰面积之和，不得大于对照溶 液的主峰面积(2．0 )。测定结果表明本品的有关物 质小于 1．O％。 2．7 含量测定 2．7．1 仪器及试药 岛津 LC-10A高效液相色谱仪 (日本岛津)，N2000色谱工作站(浙大智达)；AG285 电子分析天平(O．01 mg，梅特勒托利多)；乙腈 为色 谱纯(Meck)，其余试剂均为分析纯(上海化学试剂有 限公司)；色谱柱为 lichrospher C18(150 mm×4．6 mm，5 um)。 2．7．2 系统适用性试验 以0．25 g·L 磷酸二氢 钠溶液(pH4．5)一乙腈(35：65)为流动相；检测波长为 238 nml理论板数按辛伐他汀峰计算不低于 2 000。 2．7．3 测定法 取本品 2O粒的内容物，精密称定， 研细，精密称取细粉适量 (约相当于辛伐他汀 25 mg)，置 100 mL量瓶中，加乙睛一O．05 mol·L 醋酸 钠溶液(pH4．O)(80：20)适量，充分振摇使辛伐他汀 溶解，加上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过；精密取续 滤液 1O mL，置 25 mL量瓶中，用上述溶剂稀释至刻 度，摇匀，取 2O L注入色谱仪，记录色谱图；另取辛 伐他汀对照品适量，精密称定，加上述溶剂溶解并制 成每 1 mL中约含 0．1 mg的溶液，同法测定。按外 标法以峰面积计算，即得。 2．7．4 专属性试验 取不含主药的空白制剂适量， 按含量测定法中样品的配制方法，配制成相当于含辛 伐他汀 0．1 g·L 的溶液，吸取 2O L注入液相色 谱仪，记录色谱图。结果表明，本品辅料在辛伐他汀 的位置不出峰 ，不干扰含量测定。 2．7．5 线性范围考察 精密称取辛伐他汀对照品 26．4 mg，置 5O mL量瓶中，用稀释液溶解后定容，作 为贮备液。吸取贮备液适量用稀释液配制成一系列 质量浓度的溶液，摇匀，分别取 2O L注入色谱仪，记 录色谱图。以质量浓度对峰面积进行线性回归，方程 为 Y一 27 931．629 6X一95 733．630 8，r一0．999 6， 结果表明质量浓度在 26．4~264．0 mg·L 范围内， 线性 良好 。 2．7．6 仪器精密度试验 重复测定质量浓度为 105．6 mg·L叫的对 照品溶液的峰面积 ，结果 RSD 为0．42 (n一5)，表明仪器精密度良好。 2．7．7 重复性试验 平行测定样品6份，计算含量， 结果 RSD为 0．60 (n一6)，表明方法重复性 良好。 2．7．8 溶液稳定性试验 配制样 品溶液 1份 ，分别 于 0，2，4，6，8和 10 h进样分析，结果表明，在 10 h样 品溶液峰面积无 明显变化 ，溶液在 10 h内基本稳定。 2．7．9 回收率试验 按处方 比例，分别称取处方量 的8O ，100 和 120 的辛伐他汀原料，加处方量的 辅料，混合均匀，制成不同含量的模拟样品，各 100粒 量。分别按拟定的含量测定法测定，每个含量平行测 定 3份，计算回收率，试验表明本法回收率良好，结 果见表 1。 表 1 辛伐他汀 回收率测定结果 取样量／mg llt~llmg 回收率／ 平均回收率／ RSn／ 2O．2 22．1 22．6 27．9 25．5 26．8 29．1 28．9 29．3 2O．4 21．7 22．9 28．6 25．9 27．5 28．6 29．2 29．2 101．2 98．O 101．4 102．4 101．7 1OO．7 102．6 98．4 101．0 99．6 维普资讯 http://www.cqvip.com 西北药学杂志 2008年 8月 第 23卷 第 4期 2O5 2．7．10 含量测定 研究表明，其专属性、重复性、精 密度、准确度等皆符合要求，可作为辛伐他汀胶囊的含 量测定法，经测定自制辛伐他汀胶囊的含量为 98．3 ， 符合 90．0 ～10O．0 的限度规定。 3 讨论 ①辛伐他汀原料难溶于水，在处方中添加表面活 性剂十二烷基硫酸钠，可以增大辛伐他汀的溶出度， 有助于提高生物利用度 ，增强疗效 。叔 丁基一4一羟基 苯甲醚为抗氧剂，可延缓主药氧化，增加药物稳定性。 ②对含量测定进行方法学验证，表明其专属性 、 重复性、精密度 、准确度等皆符合要求，可作为辛伐他 汀胶囊的含量测定法。通过全面的质量研究，表明本 品符合辛伐他汀胶囊国家药品质量标准要求。 ③本研究对辛伐他汀制剂的进一步研究开发利 用具有参考意义。 参考文献 ： E1] WS1一(X一065)一2003Z，辛伐他汀胶囊国家药品标准IS]． [2] 杨 晓 白，张 茹 英 ，张 玉 珍．辛 伐 他 汀 片 中有 关 物 质 的 HPLC法测定[J]．浙江化工 ，2005，36(6)：34—35． (收稿 日期 ：2008—02—26) 磷酸苯丙哌林口服液中有关物质检 查方法的改进 张军武 ，赵 琦 (1．陕西中医学院，陕西 咸阳 712046； 2．咸阳市卫生学校，陕西 咸阳 712000) 摘要：目的 建立磷酸苯丙哌林 口服液有关物质检查方法。 方法 采用 高效液相 色谱 法 ，检 测波 长 270 nm。结果 通过 方法学考察，HPLC法用于磷酸苯丙哌林 口服液的有关物质 控制，分离效果理想，重现性良好。结论 该法可用于磷酸苯 丙哌 林 口服液的有关物质控制 。 关键词：高效液相 色谱法；磷酸苯丙哌林口服液；有关物质 中图分类号：R927．2 文献标识码：A 文章编号：1004—2407(2008)04—0205—02 磷酸苯丙哌林 口服液是部颁标准 (编号：WS一100 (X一139)一90)品种，因原标准中无有关物质检查方法， 无法对其稳定性作进一步研究，特建立磷酸苯丙哌林 口服液有关物质检查方法。考虑薄层色谱法(TLC) 的重现性较差，虽然有人采用高效液相色谱法研究磷 酸苯丙哌林口服液有关物质，但其方法受辅料干扰较 大口]，笔者采用了高效液相色谱法 (HPLC)，并对前 人的方法做了改进，报道如下。 1 仪器与试药 1．1 仪器 LC一10AT型高效液相色谱仪(日本岛 津)，Shimadzu CLAS VP色谱工作站。 1．2 试药 磷酸苯丙哌林对照品(中国药品生物制 品检定所 ，批 号 0237—9701，供 含量测定用)；磷 酸苯 丙哌林口服液(自制)；甲醇为色谱纯，醋酸铵等均为 分析纯 。 2 方法与结果 2．1 色谱条件 色谱柱：Planetsil G8柱(150 mm× 4．6 mm，5 m)，流动相：甲醇一醋酸铵缓冲溶液(2．5： 1．5)，检测器：SPD-10A，手动进样器 (20肚L定量 环)，流速 ：1．0 mL·min_。，检测波长 ：270 nm。 2．2 方法专属性考察 精密量取磷酸苯丙哌林 口服 液适量，用流动相稀释制成约相当于磷酸苯丙哌林 0．4 g·L 的溶液，进样 1O L，记录色谱图。另精 密称取磷酸苯丙哌林对照品适量，用流动相配制成 浓度为 0．4 g·LⅢ1的溶液，进样 1O肚L，记录色谱图。 按处方比例称取除磷酸苯丙 哌林外 的辅料适量 ，制 成阴性对照溶液，进样 1O肚L。由以上色谱图可见， 辅料对磷酸苯丙哌林测定无干扰。以磷酸苯丙哌林 峰( n约为 5．4 min)计，理论板数大于 3 000，分离 度大于 1．5。 2．3 精密度试验 取磷酸苯丙哌林 口服液稀释至适 当质量浓度，进样 1O L，连续进样 6次，由峰面积 计算得其 RSD为 0．33 。 2．4 灵敏度试验 按基线信噪比的 3倍计(S／N约 为 3：1)，测得磷酸苯丙哌林检测限 (LOD)约为 4× lO一 g·L-。。 2．5 破坏试验 取磷酸苯丙哌林 口服液样品 (含 量 ：相 当于标示量 99．26 )，在常规条件下进行 了破 坏试验。 2．5．1 高温破坏试验 分别将磷酸苯丙哌林 口服液 在 4O℃加热 10 h、60℃加热 3 h和 8O℃加热 3 h， 冷却至室温，用流动相制成约相当于磷酸苯丙哌林 0．4 g·L 的溶液作为高温破坏试验溶液，照上述 色谱条件，分别进样 2O L测定，结果见表 1。 2．5．2 光破坏试验 取磷酸苯丙哌林口服液于4 000 lx下光照 3 d，用流动相制成约相当于磷酸苯丙哌林 0．4 g·L 的质量浓度，作为光破坏试验溶液，进样 2O肚L 测定 ，结果见表 1。 表 1 加热及光照破坏试验结果 条件 未加热及光照前 40℃(10 h)6o℃(3 h) 8o℃(3 h) 光照 99．02 相当于标示量／9《 99．26 98．37 100．7 100．5 2．6 杂质检查线性试验 取磷酸苯丙哌林对照品用 流动相配制成质量浓度分别为 3×1O一，2．5×10啊“， 2×1O_“，1．5×lO 和5×10 g·L 的溶液，分别进 样 2O L，记录色谱图。以质量浓度为横坐标，色谱峰 面积为纵坐标 ，用最小二乘法进行线性回归，回归方程 为A一5．945×10 ×C一45．1O，相关系数r—O．997 5， 结果表明线性关系良好。 2．7 样品中有关物质测定 按照 2．2项下的方法，分 维普资讯 http://www.cqvip.com