复方利血平片质量调研

作者简介: 刘旻虹, 本科, 主管药师; Tel: ( 0519) 86629257; E�m ail : cz1mh@ sina� com 复方利血平片质量调研 刘旻虹, 董 � 荩, 丁 � 建 (江苏省常州药品检验所, 常州 � 213002) 摘要: � 目的 调研市场上复方利血平片质量, 保障公民用药安全。方法 采用化学鉴别和 HPLC法鉴别对 复方利血平片质量状况进行调研, 分析存在的问题和原因, 并找出相应对策。结果与结论 现有市场上复 方利血平片质量参差不齐, 质量问题急需改善。 关键词: � 复方利血平片; 鉴别; 质量 中图分类号: R927� 11 � � 文献标识码: A � � 文章编号: 1002�7777 ( 2010) 11�1115�04 Quality Research of Compound Reserpine Tablets Liu M inhong, Dong Jin and Ding Jian( Chang zhou Inst itute fo r Drug Control, Changzhou 213002) ABSTRACT: � Objective Study the quality of Compound Reserpine Tablets and assure people use it safely. Methods Study the quality o f Compound Reserpine Tablets by chem ical ident ificat ion and HPLC method, analyse the exist ing problems and reasons, and f ind corresponding measures. Results and Conclusion Qualit ies of Compound Reserpine Tablets in the mar ket are uneven and the quality problems need to be impr oved urg ent ly. KEYWORDS: � Compound Reserpine T ablets; identif icat ion; quality � � 复方利血平片原名复方降压片, 具有持久的降 压作用和轻度镇静作用, 适用于治疗早期及中期高 血压症。其处方为利血平 30mg , 氢氯噻嗪 3� 1g, 维生素 B61� 0g, 混旋泛酸钙 1� 0g , 三硅酸镁 30g, 氯化钾 30g , 维生素 B11� 0g, 硫酸双肼屈嗪 4� 2g, 盐酸异丙嗪 2� 1g , 辅料适量制成 1000片。其中利 血平为肾上腺素能神经阻滞药, 硫酸双肼屈嗪为血 管扩张药, 氢氯噻嗪则为利尿降压药, 能增加利血 平和硫酸双肼屈嗪的降压作用, 还能降低水钠潴留 的副作用。维生素 B1 和维生素 B6 为辅助用药。 目前市场上复方利血平片价格差距很大, 从 0� 65 元�瓶�1 ( 100片 �瓶�1 ) 到 5元/瓶 ( 100片�瓶�1 ) , 相差 7倍以上。通过调研, 核算出 1瓶的原料成本 约为 0� 75元 (不包括生产、包装、损耗及人工、 运输、辅料、税率等其他成本) , 如果加上其他成 本, 那么 0� 65元的价格是错误的。 针对这种情况, 本所抽检了市场上不同生产单 位的复方利血平片 24 个批次。根据 �国家药品标 准� 第十四册[ 1] 上的质量标准, 对这些样品进行检 验, 检验结果均符合规定。在检验过程中, 发现质 量标准存在严重缺陷。标准中只对利血平、盐酸异 丙嗪和硫酸双肼屈嗪 3个成分作了鉴别检查, 对于 其他成分尤其是氢氯噻嗪却无含量测定, 也无鉴别 检查。若按此标准执行, 药品的主要成分不能达到 有效控制。 为了更好地控制产品的质量, 本所研究了新的 方法, 通过增加鉴别项目, 来检验样品中是否含有 氢氯噻嗪、维生素 B1和维生素 B6。于 2009年 5月申 报了新的补充检验方法, 2009年 8月获得批准。 1 � 补充检验方法 1� 1 � 仪器与试药 Water s 2695高效液相色谱仪 [包括: Waters 2996 二极管 阵列 检测 器、Waters 工作 站 ] ; XS105DU 电子分析天平 (梅特勒�托利多公司) ; HS10260D超声波清洗器 ( 260W 超声功率可调, 中国天津市鑫洲科技有限公司)。 氢氯噻嗪对照品 (批号: 100309�200702, 含 量 99� 8%) , 维生素 B1 (批号: 100390�200502, 1115中国药事 2010年第 24卷第 11期 含量 100� 0%) , 维 生 素 B6 ( 批 号: 100116� 200502, 含量 100� 0% ) (中国药品生物制品检定 所)。甲醇、乙腈和庚烷磺酸钠为色谱纯; 水为重 蒸水; 其他试剂为分析纯。 复方 利 血 平 片 ( A 厂, 批 号: C080102, C081102, C090101, C090201, C090301, C090403, C090405, C090501, C090502, C090702; B厂, 批号: 20080901, 20080110, 20090208, 20090326, 20090516, 20090611; C厂, 批号: 0802605, 0902601, 0902602; D厂, 批号: 0904221; E 厂, 批号: 090603; F 厂, 批号: 09051312; G厂, 批号: 090104; H 厂, 批号: 080425)。 1� 2 � 化学鉴别 1� 2� 1 � 维生素 B1 的鉴别 取本品细粉适量 (约相当于维生素 B13mg ) , 加水 5mL 超声 (功率: 200W, 频率: 40KHz) 溶 解后, 按 �中国药典� 2005年版二部维生素 B1 原 料[ 2]鉴别项下操作。 1� 2� 2 � 维生素 B6 的鉴别 取本品细粉适量 (约相当于维生素 B63mg ) , 加 20% 醋酸钠溶液 15mL, 超声 (功率: 200W, 频率: 40KHz) 溶解, 滤过, 滤液加水稀释至 30mL。各取稀释液 1mL, 分别置甲、乙 2支试管 中, 按 �中国药典� 2005年版二部维生素 B6 原料 药[ 2]鉴别项下操作。 1� 3 � 采用高效液相色谱法对 3组分鉴别[ 3�15] 1� 3� 1 � 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂; 以 0� 01mol � L�1庚烷磺酸钠溶液�乙腈�甲醇�二乙胺 ( 400 �80 �20� 0� 5) 用 20%磷酸溶液调节 pH 至 3� 5为流动相; 检测波长为 270nm; 流速为 1mL � min �1 ; 柱温为 30 � ; 进样量为 20�L。维生素 B6 理论板数为 13583, 氢氯噻嗪理论板数为 15668, 维生素 B1 理论板数为 16054, 分离度分别为 5� 4 和 22� 5。 1� 3� 2 � 对照品溶液的制备 精密称取氢氯噻嗪 30mg , 维生素 B1 10mg, 维生 素 B610mg, 置 100mL 量 瓶 中, 加 入 0� 1mol � L�1盐酸适量, 超声 (功率: 200W, 频 率: 40KHz) 使溶解, 加 0� 1mol � L�1盐酸稀释至 刻度, 作为对照品贮备液。精密量取 5mL 对照品 贮备液置 25mL 量瓶中, 用 0� 1 mol � L�1盐酸稀释 至刻度, 用 0� 45�m的滤膜滤过, 作为对照品溶液。 1� 3� 3 � 供试品溶液的制备 取本品 20片, 研细, 称取细粉适量 (约相当于 氢 氯 噻 嗪 3� 1mg ) , 置 50mL 量 瓶 中, 加 入 0� 1mo l � L�1盐酸适量, 超声 (功率: 200W, 频 率: 40KHz) 使溶解, 加 0�1mol � L�1盐酸稀释至刻 度, 用0� 45�m 的滤膜滤过, 作为供试品溶液。 1� 3� 4 � 阴性干扰试验 1� 3� 4� 1 � 空白辅料溶液的制备 � 取 1片量空白辅 料 (处方为 F 厂处方) , 置 50mL 容量瓶中, 用 0� 1 mol � L�1盐酸溶解并稀释至刻度。 1� 3� 4� 2 � 阴性对照溶液的制备 (空白辅料加除氢 氯噻嗪、维生素 B1、维生素 B6 的其他主药) � 取 1片量空白辅料与 1片处方量的利血平、混旋泛酸 钙、三硅酸镁、氯化钾、硫酸双肼屈嗪、盐酸异丙 嗪置 50mL 容量瓶中, 用 0� 1mol � L�1盐酸溶解并 稀释至刻度。 1� 3� 4� 3 � 干扰试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、空白 辅料液和阴性对照液各 20�L 注入高效液相色谱 仪, 按上述色谱条件测定记录色谱图, 见图 1。 a� 对照品; b�H 厂样品; c� 空白辅料; d� 阴性对照液; 1� 维生素 B6; 2� 氢氯噻嗪; 3� 维生素 B1。 图 1 � 复方利血平片 H PLC 色谱图 � � 从上述实验结果可见, 在选定的色谱条件下, 空白辅料不干扰实验, 阴性对照溶液在与氢氯噻 嗪、维生素 B1、维生素 B6 相同保留时间处无色谱 峰干扰。对照品色谱峰峰形对称, 供试品色谱图中 分离度较好, 氢氯噻嗪、维生素 B1、维生素 B6 能 与其他成分分开。 2 � 国家食品药品监督管理局国家药品标准 (征求 意见稿) 检验方法 [ 16] 2� 1 � 仪器与试药 Water s 2695高效液相色谱仪 [包括: Waters 2996 二极管 阵列 检测 器、Waters 工作 站 ] ; XS105DU 电子分析天平 (梅特勒�托利多公司) ; HS10260D超声波清洗器 ( 260W 超声功率可调, 中国天津市鑫洲科技有限公司)。 氢氯噻嗪对照品 (批号: 100309�200702, 含 1116 中国药事 2010年第 24卷第 11期 量: 99� 8%) , 硫 酸双肼 屈嗪 对照品 ( 批号: 100514�200301, 含量: 100� 0%) , 利血平对照品 (批号: 100041�200311, 含量: 100� 0%) , 盐酸异 丙嗪 对 照 品 ( 批 号: 100422�200501, 含 量: 100� 0%) (中国药品生物制品检定所)。甲醇、乙 腈、己烷磺酸钠和庚烷磺酸钠为色谱纯; 水为重蒸 水; 其他试剂为分析纯。 复方利血平片 ( A 厂, 批号: C090502; B 厂, 批号: 20090811; C 厂, 批号: 0902602; D 厂, 批号: 0901101; E 厂, 批号: 090603; F 厂, 批号: 09051312; G 厂, 批号: 090104; H 厂, 批号: 080425)。 2� 2 � 色谱条件和分析方法 2� 2� 1 � 利血平、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪含量测定 色谱条件与系统适用性试验 � 用十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂, 以 60mmol � L�1磷酸二氢钾溶 液�甲醇 ( 90� 10) ( pH 3� 0) 为流动相 A, 乙腈为 流动相 B, 采用梯度洗脱, 见表 1。 表 1 � 流动相梯度洗脱比例 时间( min ) 流动相 A( % ) 流动相 B( % ) 0 100 0 4 100 0 7 65 35 20 65 35 21 100 0 25 100 0 � � 检测波长为 268nm。理论板数按利血平计算 应不低于 3000, 各主峰与其他色谱峰的分离度应符 合要求。 测定法 � 取本品 10片, 分别置 25mL 量瓶中, 加稀释剂 [醋酸钠溶液 (取醋酸钠 9� 0g , 加水 1000mL 使溶解, 加三乙胺 3� 0mL, 用冰醋酸调节 pH 值至 5� 0) �乙腈 ( 55 � 45) ] 超声溶解并稀释 至刻度, 摇匀, 滤过, 精密量取续滤液 20�L 注入 液相色谱仪, 记录色谱图; 另精密称取利血平、氢 氯噻嗪和盐酸异丙嗪对照品适量, 用稀释剂溶解制 成每 1mL 含利血平 1� 28�g、氢氯噻嗪 124�g、盐 酸异丙嗪 84�g 的溶液, 同法测定。按外标法以峰 面积计算出每片的含量, 并求出 10片的平均含量, 即得。 2� 2� 2 � 硫酸双肼屈嗪含量测定 色谱条件与系统适用性试验 � 用十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂; 以 ( 0� 06%的己烷磺酸钠, 0� 04%庚烷磺酸钠混合溶液, 用醋酸调节 pH 值至 3� 0) �乙腈�甲醇 ( 75 � 10 � 15) 为流动相, 检测 波长为 310nm , 理论板数按硫酸双肼屈嗪计算, 不低于 3000; 硫酸双肼屈嗪与其他色谱峰的分离 度应符合要求。 测定法 � 取本品 10 片, 分别用 0� 1%的磷酸 溶液 30mL 研磨转移至 100mL 量瓶中, 振摇 30min, 用上述溶剂稀释至刻度, 摇匀, 离心后取 上清液, 精密量取上清液 20�L 注入液相色谱仪, 记录色谱图; 另精密量取硫酸双肼屈嗪对照品适 量, 用 0� 1%的磷酸溶液制成每 1mL 中含硫酸双 肼屈嗪 42�g 的溶液, 同法测定。按外标法以峰面 积计算出每片的含量, 并求出 10 片的平均含量, 即得。 3 � 检验结果 3� 1 � 按补充检验方法鉴别结果 按照国家食品药品监督管理局药品检验补充方 法和检验项目批准件 2009017 (新) 检验了不同生 产单位的 24批复方利血平片, 结果见表 2。 表 2� 24 批复方利血平片检验结果 生产单位 批号 氢氯噻嗪 维生素 B1 维生素 B6 A C080102 - - - � C081102 - - - � C090101 - - - � C090201 - - - � C090301 - - - � C090403 - - - � C090405 - - - � C090501 - - - � C090502 - - - � C090702 - - - B 20080901 + - - � 20080110 + + - � 20090208 + + - � 20090326 + - + � 20090516 + - - � 20090611 + - + C 0802605 + + + � 0902601 + + + � 0902602 + + + D 0904221 + + + E 090603 + + + F 09051312 + + + G 090104 + + + H 080425 + + + � � 结果发现: A 厂的复方利血平片均未检出氢氯 噻嗪、维生素 B1 和维生素 B6 ; B厂的复方利血平 片有的未检出维生素 B1 , 有的未检出维生素 B6 ; C、D、E、F、G、H 厂生产的复方利血平片均能 1117中国药事 2010年第 24卷第 11期 检出氢氯噻嗪、维生素 B1、维生素 B6。高效液相 色谱法与化学鉴别检验结果一致。 3� 2 � 按国家食品药品监督管理局国家药品标准 (征求意见稿) 检验结果 2009年 4月 22日, 国家食品药品监督管理局 公布了复方利血平片国家药品标准 (征求意见稿)。 标准中规定, 含利血平 ( C33H 40N2O9 ) 应为标示量 的85�0%~ 115�0%; 含氢氯噻嗪 ( C7H8ClN3O4S2 )、 盐酸异丙嗪 ( C17 H20N2S � HCl) 和硫酸双肼屈嗪 ( C8H 10N 6 � H 2 SO4 ) 均应为标示量的 90� 0% ~ 110� 0%。 按照复方利血平片国家药品标准 (征求意见稿) 对不同厂家 8批样品进行含量测定, 结果见表3。 表 3 � 复方利血平片含量测定结果 生产 单位 批号 氢氯噻嗪 盐酸 异丙嗪 利血平 硫酸 双肼屈嗪 A C090502 未检出 79� 8 38� 1 50� 4 B 20090811 11� 1 18� 4 6� 8 14� 5 C 0902602 35� 8 34� 6 29� 5 23� 4 D 0901101 39� 6 73� 9 23� 5 43� 1 E 090603 90� 5 91� 9 88� 5 77� 0 F 09051312 96� 1 98� 6 98� 4 98� 0 G 090104 9� 0 64� 8 26� 5 46� 8 H 080425 92� 2 96� 5 90� 1 77� 5 � � 结果发现, A、B、C、D、G 厂生产的复方利 血平片均未按处方规定投料, 少加甚至不加氢氯噻 嗪, 盐酸异丙嗪、利血平、硫酸双肼屈嗪的含量也 均不合格。 4 � 讨论 根据 �国家药品标准� 第十四册上复方利血平 片的质量标准, 对市场上复方利血平片进行检验, 检验结果均符合规定。这是因为该质量标准存在一 定缺陷。标准中只对利血平、盐酸异丙嗪和硫酸双 肼屈嗪 3个成分作了鉴别检查, 对于其他成分尤其 是氢氯噻嗪却无含量测定, 也无鉴别检查。若按此 标准执行, 药品的主要成分不能达到有效控制。 根据补充检验方法对各组分进行鉴别, 可以有 效地控制复方利血平片的内在质量, 但不能对含量 进行控制。 随着标准的进一步完善, 在国家食品药品监督 管理局国家药品标准 (征求意见稿) 中, 除利血 平、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪和硫酸双肼屈嗪的鉴别 外, 还包含了氯化钾、维生素 B1 和维生素B6 的鉴 别, 同时还规定了利血平、氢氯噻嗪、盐酸异丙嗪 和硫酸双肼屈嗪的含量。由上述检验结果可见, 虽 然有的厂家均加了主药, 鉴别符合规定, 但是含量 不符合规定。由于该品种为降压常用药, 全国市场 销量很大, 因此, 完善和推进使用复方利血平片的 新标准迫在眉睫。 参考文献: [ 1] 国家药品标准 [ S] � 第十四册, 2003: 143�143� [ 2] 中国药典 [ S] � 二部, 2005: 664�664, 667�667� [ 3] 吴艳琳, 林志华, 汪洋, 等� 高效液相色谱法测定复方利血 平片 [ J] � 中国药师, 2007, 10 (6) : 559�560, 567�567� [ 4] 张火旺� 高效液相色谱法测定复方利血平片中氢氯噻嗪的含 量 [ J] � 药物鉴定, 2006, 15 ( 11) : 39�39� [ 5] 刘元欢, 彭建梅, 罗燕, 等� 高效液相色谱法测定五维葡钙 口服溶液中维生素 B1、维生素 B2 的含量 [ J] � 现代医院, 2008, 8 ( 6) : 85�86� [ 6] 翁水旺� 复方降压胶囊中维生素 B1、维生素 B6、氯化钾和 硫酸胍生鉴别方法的研究 [ J ] � 海峡药学, 2002, 14 ( 6 ) : 48�49� [ 7] 许波, 苌玲, 高玲 � HPLC 法测定复方利血平片中维生素 B1、B6、泛酸钙和氢氯噻嗪的含量 [ J ] � 药物分析杂志, 2008, 28 ( 11) : 1906�1908� [ 8] 孙萍, 刘辉, 李诒光, 等� 高效液相色谱法同时测定复方维 生素咀嚼片中维生素 B1、B2及 B6的含量 [ J] � 江西中医 药, 2009, 40 ( 319) : 62�63� [ 9] 李运莉, 吴俊芳, 朱立伟, 等� 复方利血平片质量标准的研 究 [ J] � 中国药品标准, 2006, 7 ( 2) : 59�61� [ 10] 方东伟� 高效液相色谱法测定复方利血平片中氢氯噻嗪含 量 [ J] � 中国药业, 2005, 14 ( 9) : 51�51� [ 11] 蒙连琼� 复方利血平氢氯噻嗪片薄膜包衣工艺研究 [ J] � 中国药业, 2007, 16 ( 22) : 45�46� [ 12] 李运莉, 吴俊芳, 朱立伟, 等� 复方利血平片质量标准的 研究 [ J] � 中国药品标准, 2006, 7 ( 2) : 58�61� [ 13] 潘静岚� HPLC法同时测定复方利血平氨苯蝶啶片中 3 组 分含量 [ J] � 广东药学院学报, 2008, 24 ( 3) : 238�240� [ 14] 金鹏飞, 闫小燕, 邝咏梅, 等� HPLC测定复方利血平氨 苯蝶啶片中利血平的含量 [ J] � 药物分析杂志, 2010, 30 ( 7) : 1242�1244� [ 15] 吴红英, 范玉峰� 反相离子对色谱法测定复方利血平片中 硫酸双肼屈嗪的含量 [ J ] � 中国当代医药, 2009, 16 ( 16) : 62�63� [ 16] 国家食品药品监督管理局国家药品标准 (征求意见稿 ) [ S] � 复方利血平片, 2009� 1118 中国药事 2010年第 24卷第 11期