第13章 厌氧性细菌

null第13章 第13章 厌氧性细菌 Anaerobic bacteria 上海交通大学医学院 陈洪 副教授概 述概 述 必须在无氧环境下才能生长繁殖。 根据能否形成芽胞，可分为： 1.厌氧芽胞梭菌属 2.无芽胞厌氧菌第一节 厌氧芽胞梭菌属第一节 厌氧芽胞梭菌属（Clostridium）概述概述 大多为严格厌氧菌，G＋。 芽胞直径比菌体粗，使菌体膨大呈梭状，对热、干燥和消毒剂均有强大的抵抗力。 除产气荚膜梭菌等极少数例外，均有周鞭毛，无荚膜。一、破伤风梭菌一、破伤风梭菌（C. tetani） 破伤风（tetanus）的病原菌。 发病后机体呈强直性痉挛、抽搐，可因窒息或呼吸衰竭死亡。一、生物学性状（一）形态与染色 菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜。形成芽胞后，使细菌呈鼓槌状。 G＋。 （二）培养特性和生化反应 严格厌氧 血平板上，有β溶血 不发酵糖类，不分解蛋白质一、生物学性状破伤风梭菌的芽胞一、生物学性状（三）抵抗力 芽胞抵抗力很强 75～80℃ 10 min仍保持活力 100℃ 1小时可完全被破坏 在干燥的土壤和尘埃中可存活数年一、生物学性状二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病条件 该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，致 病作用完全有赖于病菌所产生的毒素。 伤口需形成厌氧微环境：伤口窄而 深（如刺伤）、有泥土或异物污染大面 积创伤、烧伤，坏死组织多，局部组织 缺血的同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合 感染的伤口。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（二）致病因子 对氧敏感的破伤风溶血毒素 （tetanolysin） 质粒编码的破伤风痉挛毒素 （tetanospasmin）： 属神经毒，毒性极强（小鼠LD50为0.015 ng，对人致死量<1 µg）；为蛋白质，不耐热；可被蛋白酶破坏。破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素 分子量约150 kDa；B链（重链）是与神经节苷脂结合的单位；A链（轻链）具有毒性作用。破伤风痉挛毒素的结构null 1.与神经系统的结合： 毒素对脑干神经和脊髓前角神经细胞有高度亲和力，结合非常牢固，一旦结合，抗毒素便不能中和毒素。 毒素重链识别神经肌肉结点处运动神经元上的受体并与之结合，促使毒素进入细胞内形成小泡。 2.内在化作用 小泡从外周神经末稍沿神经轴突逆行向上，到达运动神经元胞体，进入传入神经末稍，最终进入中枢神经系统。破伤风痉挛毒素作用机制null 3.膜的转位 通过重链N端的介导产生膜的转位，使轻链进入胞质溶胶。 4.胞质溶胶中作用 靶的改变 轻链发挥毒性作用，阻止抑制性神经介质γ-氨基丁酸的释放，使肌肉活动的兴奋与抑制失调，造成强直性痉挛。破伤风痉挛毒素作用机制（三）所致疾病（三）所致疾病破伤风 潜伏期：几天～几周 典型的症状： 苦笑面容 角弓反张 其它二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素发挥中和作用。 一般病后不会获得牢固免疫力。 获得有效抗毒素的途径是人工免疫。二、致病性与免疫性三、微生物学检查法一般不进行涂片、镜检和分离培养。 典型的症状和病史即可作出诊断。三、微生物学检查法四、防治原则1.正确处理创口及清创、扩创。 2.注射白百破三联疫苗进行人工主动免疫。 3.对可疑病人可立即注射破伤风抗毒素（tetanus antitoxin, TAT）进行紧急预防。 4.发病早期可足量使用抗毒素进行特异性治疗。 5.抗生素。四、防治原则 二、产气荚膜梭菌 二、产气荚膜梭菌(C．perfringens )一、生物学性状一、生物学性状（一）形态与染色 两端几乎平切的G＋粗大杆菌，芽胞位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体。 无鞭毛，在体内有明显的荚膜。（二）培养特性（二）培养特性 厌氧，繁殖周期为8分钟。 血琼脂平板上，双层溶血环；蛋黄琼脂平板上，有Nagler反应； 代谢活跃，分解多种糖类，产酸产气。在牛奶培养基中分解乳糖，大量产气，出现所谓“汹涌发酵”（stormy fermentation）。一、生物学性状（三）分型（三）分型 根据4种主要毒素（α、β、ε、ι）的产生情况，可分为5个毒素型。 对人致病的主要为A型。一、生物学性状（一）致病物质（一）致病物质 产气荚膜梭菌能产生10余种外毒素，有些外毒素即为胞外酶。二、致病性与免疫性产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型产气荚膜梭菌主要和次要毒素及其分型（一）致病物质（一）致病物质 二、致病性与免疫性1.α毒素 以A型产生量最大。 分解细胞膜上磷脂和蛋白形成的复合物，造成细胞溶解，引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损。（一）致病物质（一）致病物质 二、致病性与免疫性2.肠毒素 不耐热的蛋白质，100℃瞬时即被破坏；整段肽链嵌入细胞膜，破坏膜离子运输功能。 （二）所致疾病（二）所致疾病 二、致病性与免疫性1.气性坏疽 战伤、工伤、车祸。 气性坏疽潜伏期短，发展迅速，病情险恶。 气肿（捻发音）及组织坏死，致毒血症、休克。 2.食物中毒三、微生物学检查法（一）直接涂片镜检 深部创口取材涂片 G＋大杆菌，大荚膜 白细胞甚少且形态不典型 伴其它杂菌 （二）分离培养及动物实验 血平板，镜检及生化反应 动物实验 本菌引起的食物中毒在发病后1日内，检出大于105病菌/克食品或106病菌/克粪便，即可确立诊断。 三、微生物学检查法四、防治原则（一）预防 及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境。 预防性的使用抗生素。 （二）治疗 局部扩创，清创 抗生素 α抗毒素 高压氧舱法 四、防治原则三、肉毒梭菌三、肉毒梭菌（C．botulinum）一、生物学性状 G＋粗短杆菌。 芽胞呈椭圆形，使细胞呈汤匙状或网球拍状。 厌氧。 肉毒毒素不耐热，煮沸1分钟即可被破坏。一、生物学性状（一）致病性（一）致病性 肉毒毒素（对人致死量为0.1 µg）。 肉毒毒素作用于外周胆碱能神经，抑制神经肌肉接点处神经介质乙酰胆碱的释放，导致弛缓性麻痹。二、致病性与免疫性null肉毒毒素作用机理 （二）所致疾病 （二）所致疾病 1.食物中毒 本病是单纯性毒素中毒而非细菌感染， 临床现与其它食物中毒不同，主要为神经 末稍麻痹。 2.婴儿肉毒病二、致病性与免疫性三、微生物学检查法1.标本 2.毒素检查三、微生物学检查法五、防治原则 加强食品卫生管理和监督，提高防范意识。 尽早根据症状作出诊断，迅速注射A、B、E三型多价抗毒素。五、防治原则四、 艰难梭菌四、 艰难梭菌（ C．difficile）一、生物学性状 新生儿肠道中正常菌群，可因长期使用抗生素引起的伪膜性肠炎。 G＋粗大杆菌，有鞭毛，有芽胞。一、生物学性状二、致病性与免疫性 产生A、B两种毒素，即肠毒素和细胞毒素。 因长期使用抗生素导致菌群失调后可引起内源性感染。 临床表现二、致病性与免疫性第二节 无芽胞厌氧菌第二节 无芽胞厌氧菌null 属人体内的正常菌群，包括革兰阳性和革兰阴性的球菌和杆菌 在某些特定状态下，这些厌氧菌作为条件致病菌可导致内源性感染与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌与人类疾病相关的主要无芽胞厌氧菌一、主要种类、性状和在感染中的作用一、主要种类、性状和在感染中的作用1.革兰阴性厌氧杆菌 脆弱类杆菌（B. fragilis）：临床上最常见的无芽胞厌氧菌分离株。 韦荣菌属最重要，咽喉部主要厌氧菌，常为混合感染菌之一。一、生物学性状一、主要种类、性状和在感染中的作用一、主要种类、性状和在感染中的作用2.革兰阳性厌氧球菌 消化链球菌属：在临床厌氧菌分离株 中仅次于脆弱类杆菌，主要寄居于阴道。 丙酸杆菌：能发酵糖类产生丙酸。 痤疮丙酸杆菌（P. acnes） 双歧杆菌属：正常肠道菌群，在大肠 中起重要的调节作用。 真杆菌属一、生物学性状二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（一）致病条件 寄居部位改变 宿主免疫力下降 菌群失调 厌氧微环境 二、致病性与免疫性 （二）感染特征 内源性感染；呈慢性 大多为化脓性感染 分泌物或脓液粘稠，有恶臭，使用 氨基糖苷类抗生素长期无效。 分泌物直接涂片可见细菌，但普通 培养法无细菌生长。 二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性（三）所致疾病 败血症 中枢神经系统感染 脑脓肿 口腔与牙齿感染 呼吸道感染 腹部和会阴部感染 女性生殖道感染二、致病性与免疫性三、微生物学检查法1.标本采取 采取后立刻放入厌氧标本瓶中，迅速送检。 2.直接涂片镜检 3.分离培养与鉴定 三、微生物学检查法四、防治原则破坏其成为条件致病菌的条件 合理使用抗生素四、防治原则思考题思考题 1.试比较破伤风梭菌和产气荚膜梭菌的致病条件及其致病机制 2.简述破伤风和气性坏疽的防治原则