胶乳增强免疫比浊法定量测定肌钙蛋白Ⅰ的影响因素探讨

· 1744· 检验医学与临床2010年8月第7卷第 6期 !：璺 !! !垒 曼 旦 ： 竺!：!： 2： 成 良好习惯。 4．3 质 量 控 制 购 买 国 家 标 准 品 如 GBW09139～ GBW 09140，建立本实验室室内质控，有条件的可参加省级或卫生部 室间质评。质控物质每次随样品检测，并记录，绘 制质控图 。 5 仪器的维护 5．1 表面维护 仪器表面为金属外壳，应避免被酸碱实验液 体腐蚀，使用完后用仪器罩保护。 5．2 石英窗的维护 石英窗具有密封、透紫外线的功能，当石 英窗片被污染时造成铅镉能量的损失，使结果波动大。由于受 污染程度不同 ，要求维护人员会观察铅 、镉光源能 的负高压 ，当 能量平衡后负高压值比拆下石英窗时增加 4O～100伏时就应 该清洁石英窗片 。石英 窗片清洁可使 用 95 乙醇 棉球 ，然后 用擦镜纸擦干 ，避免产生划痕 。 5．3 石墨锥盖的维护 血样中有机成分在炉内高温燃烧，再 加上血样 的飞溅 ，会在石墨锥盖 口附近积累残留物 ，如果掉入 炉内会对样品造成污染 ，须定期清洁。本实验室一般每 3个工 作 日清洁一次 ，石墨锥盖拆卸严格按照说 明书进行 ，使 用 95 乙醇棉球清洁。 5．4 石墨杯的维护 石墨杯的寿命一般只有几百次测量周 期 ，更换石墨杯是 每个工作人 员必须掌握 的，拆卸和安装严格 按照操作说 明书执行 ，以免损坏 。 5．5 气瓶的更换 气瓶更换也 是每个工作人 员必 须掌握的 ， 当氩气钢瓶主压力表低 于 1 MPa时必需停止 使用 ，更换新 的 气瓶。建议实验室准备两个气瓶 ，可保证实验的连续性。 6 故障及处理 实际使用过程中常出现一些说明书中没有提到的故障及 处理方法 。 6．1 血样飞溅 加热过程中 ，经常会遇 到血样剧烈沸腾 ，甚至 飞溅出炉体，从而造成元素损失的现象。资料表明～ ：(1)血样 表面张力大，即使稀释 10倍，进样后在石墨炉平台上仍呈球状 液珠不扩散 ，且 由于富含胶体有机物 ，干燥时起泡严重 ，极易 出 现样品被保护气带出炉体 的现 象；(2)加热过 程中形成稳定 的 碳化物，很难被氧化并逐渐积累堆积，阻挡光路，进一步加重血 样飞溅现象 。处理方法 ：(1)本仪器使用的是配套稀释液，不考 虑通过增加稀释倍数，降低血样表面张力的方法，因此通过延 长干燥以及灰化温度和时间进行控制。同时，加样时可在液体 表面吹打少量气泡能够破坏血样表面张力，使干燥过程中热量 容易散发，加快挥发性物质的排出，可有效减少血样飞溅现象。 (2)清除积碳，在不破坏石墨杯物理结构的前提下，可以棉签小 心去除附着在石墨杯内的积碳 ，此可延长石墨杯使用次 数。当石墨杯使用超过 600次以上时，应及时更换。 6．2 系统提示“能量不平衡” 一次实验中，每完成一个样本 检测 ，能量需平衡一次，清 洁石英 窗片依然如此 。经咨询厂家 工程师，认为本实验室使用 自来水为冷却水，有时受室内外气 温骤降的影响 ，当水温过低时 ，经过高温的原子化器 ，会产生水 汽 ，打到石英窗上 ，从 而造成光路 系统 的能量失衡 。特别提醒 的是，此现象只出现在室外气温骤降，室内未供暖的一段时期。 ：给冷却水路加装保温层，使用空调提高室内温度，同时适 当减小 自来水流量 ，但不低于 1 I．／mln。 6．3 系统提示“石 墨杯断裂 ”，无 法加热 可能是由于石墨杯 与原子化器接触不 良或者由于使用次数过多，性能降低引起 的。此时应对 石墨杯进行调 整 ，然后 空烧 一次 ，检测 是否能正 常加热 ，如果反复 出现此现象 ，可以考虑更换新 的石墨杯进行 实验 。 6．4 系统提示“加热错误”，检测 终止 电压不 稳定可能导致 加热程序出现错误。处理方法：系统会 自动记忆该样本，如果 在到达灰化温度以前终止，可直接点击确定，继续完成检测；若 在灰化温度 以后终止 ，应空烧两次将炉体 内样本烧净 ，并删除 样本号，重新加样检测。反复出现此现象，应当终止此次实验， 请专业人员对用 电线路进行检测。 7 讨 论 以上为作者在实际使用过程中的一些体会。如何保 证仪器处于良好的工作状态，得到准确的结果仍是值得讨论的 问 。实践充分 了解仪器原理 、结构、注意事项 ，严格执行 各项操作流程，掌握仪器的维护、保养以及故障处理，是确保仪 器正常运行、保证检测结果质量的有效办法 。 参考文献 [1] 陈祝军．石墨炉原子吸收光谱法测定血中铅升温程序的 研究[J]．江苏预 防医学 ，2009，20(1)：62． [2] 叶应妩 ，王 毓三 ，中子瑜．全 国l临床 检验操作规 程[M]．3 版．南京 ：东南大学出版社 ，2006：402—403． [3] 周青 ，王晓玮，冯慧，等．石墨炉原子吸收法测定生物材料 中几种微量元素的体会 [J]．工业卫生 与职业病 ，1995，21 (3)：174． (收稿 151期 ：2OlO一02—28) 胶乳增强免疫比浊法定量测定肌钙蛋白I的影响因素探讨 梁庆华，陈 晖，黄 金(广西壮族 自治区江滨医院检验科，南宁 530021) 【摘要】 目的 探 讨胶乳增强免疫比浊定量测定血 清肌钙蛋 白 I(cTnI)的影响因素。方 法 对胶乳增强免疫 比浊法定量测定 cTnI进行三酰甘 油、抗凝剂 、类风湿 因子 (RF)阳性 的干扰性试验 。结果 血脂、抗凝 剂、RF阳性 对胶乳增强免疫 比浊定量测 定 cTnI有一定影响。结论 胶 乳增 强免 疫比浊定量测定 cTnI受抗凝 剂等 因素影响， 在 实验 室检测和临床诊 断中应引起 重视 。 【关键 词】 胶 乳增 强免疫比浊法； 肌钙蛋 白 I； 三酰甘油 ； 类风湿因子 ； 抗凝 剂 DIO：10．3969／j．issn．】672—9455．2010．】6．047 中图分类号：R446．112 文献标志码：B 文章编号：1672—9455(2010)16-1744—02 肌钙蛋白I(cTnI)作为目前所发现的最好的心肌标志物， 显示出了高灵敏度 、高特异性、心肌损伤后 出现时间早 、持续 时 间长等突出优点，已经成 为公认的急性心肌梗死(AMI)诊断 的 “金标准”。cTnI的检 测有 多种 方法 ，而胶乳增 强免疫 比浊法 壁垒堕堂皇I堕 ! 生 旦箜 多 16期 Lab Med Clin，August 2010，Vo1．7，No．16 是近年来开展起来的一种高灵敏度、高特异性的检测方法叫， 可直接在全自动生化仪上进行批量测定，因此在临床上已得到 广泛应用。但在实际的工作中发现一些无明显心肌缺血性损 伤的患者出现 cTnI假性升高或降低的现象，给临床医生的诊 断带来了困扰，现分别对胶乳增强免疫比浊定量测定 cTnI进 行三酰甘油、抗凝剂、类风湿因子(RF)阳性的干扰性试验，报 道如下 。 1 材料与方法 1．1 材料 经体检心电 图正常 、无 心脏病 史 、RF阳性者 血清 10份 ，三酰甘油浓度为 1O．7 mmol／L脂血血清标本 1份；cTnI 含量为 21．4 ng／mL的血清标本 l份 ；将 cTnI含量为 13．7 ng／ mI 分别注入肝素锂、肝素钠、EDTA—Kz抗凝管各 1支，抗凝 管均为成都瑞琦科技实业有限责任公司产品；cTnI测定试剂 为太原 川至生 物工程 有限 公司提 供。检 测仪 器：贝克 曼 DXC800。 1．2 干扰性试 验方 法 1．2．1 将 cTnI含量为 21．4 ng／mI 的血清标本分成 1O份 ，另 外将三酰甘油浓度为 1o．7 mmol／L脂血血清标本用生理盐水 稀释，每份分别加入等量含 100 、90~／6、8O 、70 、60 0A、 5o 、4o 、3o 、2o 、lo％脂血血清标本混合均匀，测定 cT— nI含量 。 1．2．2 分 别测 定 3种抗凝管 中 cTnI含量 。 1．2．3 分别测定 1O份 RF阳性血清标本 中 cTnI含量 。 2 结 果 2．1 脂血对 cTnI含量 的干扰试 验 结果显示 脂血对 cTnI测 定存在一定 的干扰。当三酰甘油浓度超过 6．5 mmol／L时， cTnI含量比预期值明显升高。 2．2 抗凝剂对 cTnI含量的干扰 试验 结 果见 表 1。 表 1 抗凝标本对 cTnI测 定干扰的结果 · 1745 · 2．3 RF阳性血清标本 中 cTnI含量均超过正常值 ，明显 升高 ， 出现假 阳性 。 3 讨 论 胶乳增强免疫比浊定量测定血清 cTnI的方法，是将特异 抗体结合于胶乳颗粒表面，标本中的cTnI与其结合，使相邻的 胶乳颗粒彼此交联n]，具有较好的放大作用，测定溶液浊度增 加的程度与标本中的 cTnI含量正相关。但在脂血的抗干扰方 面效果不佳，易出现假阳性结果，为此，针对脂血标本，作者用 金标法检测 ，该法 比胶乳增强免疫 比浊法在脂血的抗干扰方面 效果较佳，但成本较高。作者在使用抗凝剂的过程中发现肝素 锂对结果的影响最小 ，EDTA—Kz的影 响最 大。这可能是 cTnI 因与肝素结合而影响免疫反应，EDTA-Kz可使 cTnI复合物裂 解，对本方法而言 EDTA-Kz抗凝剂可降低 cTnI的测定值从 而造成假阴性。因此，在实际的工作中应尽量使用血清标本， 虽然分离血清所用的时间比用血浆或全血长，但避免了抗凝剂 对检测结果影响，提高了检测结果的准确性和可比性。RF是 抗免疫球蛋白G的自身抗体 ，能与用于捕获和结合单克隆抗 体部分的 Fc受体结合，导致 cTnI假性升高。 胶乳增强免疫比浊法定量测定 cTnI是一种灵敏、简洁、快 速的测定方法 ，能在全 自动生化分析仪 上使用 ，具 有广泛 的应 用基础和推广价值。但在实际的工作中，该方法产生的假性升 高或假性降低也应引起大家的注意。进行 eTnI的动态检测并 将检测结果与临床症状以及心电图等其他检查结果进行综合 分析 ，更有利 于 胶乳 增 强免 疫 比浊 法 定 量测 定 cTnI的 临床 价值。 参考文献 [1] 陈鸿恩，黄丽辉．胶乳增强免疫 比浊法定量测定肌钙蛋白 I对心肌梗死价值的探讨EJ]．江西 医学检验，2007，25 (5)：469—470． [2] Antman EM．Cardiac—specific troponin I levels to predict the risk of mortality inpatients with acute coronary syn— dromes[J]．New Eng J Med，1996，335：1342—1344． C反应蛋白与儿童急性呼吸道感染的关系 陈 建(重庆市九龙坡区第五人 民医院检验科 401329) (收稿日期：2010—03—12) 【摘要】 目的 探讨 c反应蛋白(CRP)在儿童呼吸道感染早期诊断和疗效判断中的价值。方法 随机检测 2009年就诊的急性呼吸道患儿的血清 CRP水平，将 100例患几分为 2组：细菌感染组(A组)和病毒感染组(B组)， 检测就诊时和治疗 3 d后全血 白细胞计数 (WBC)和高敏 C反应蛋 白(hs—CRP)，并选取 同期健康 体检 儿童 5O例 为 健康对照组(C组)。以 hs—CRP>5．0 mg／L、WBC>1．0×10。／L为阳性进行 比较 。结果 3组相 比较 ，A组 WBC、 CRP明显升 高，A纽治疗 前后 CRP比较 ，差 异有 统计 学意义 (P<0．01)，而 WBC 下降差 异 无统 计 学 意义 (P> 0．05)；B组治疗前后 CRP及 WBC差异无统计学意义(P>0．05)。结 论 在 儿童 急性呼吸道 感染 时，血清 中 CRP 有助于疾病的早期鉴别诊断 ，动 态检测其 变化 可指导 临床合理 用药，对疗效判断有一定价值。 【关键词】 C反应 蛋白； 呼吸道感染 ； 儿童 D10：10．3969／j．issn．1672—9455．2010．16．048 中图分类号 ：R446．112；R725．6 文献标 志码 ：B 文章编号 ：1672—9455(2010)16—1745—02 C一反应 蛋白 (C—reactive protein，CRP)是 一种 急 性时相 蛋 白，由肝 脏合 成 分 泌 ，在 健 康人 血 清 中 含量 甚 少 (0．068～ 8 mg／L)，在人体发生细菌感染、非特异性疾病和创伤等情况下 均会迅速升高，一旦情况改善又会很快下降。近年国内外文献