增强免疫比浊法试剂测定血清铁蛋白

第 5卷 第 8期 2009年 8月 亚 太 传 统 医 药 Asia-Pacific Traditiona1 Medicine Vo1．5 No．8 Aug．2009 增强免疫比浊法试剂测定血清铁蛋白 杨来进 (盘县人民医院 检验科，贵州盘县 553500) 摘 要：使用增强免疫比浊法测定血清铁蛋 白，设置比对、回收、干扰试验对该方法进行性能评价，结果显示其使 用方便、反应快速，抗干扰能力强，适用于全 自动生化，满足临床检测要求。 关键词：增强免疫比浊法；含量测定；血清铁蛋白 中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1673—2197(2009)08—0010—01 l 实验部分 1．1 原理 样品中铁蛋白与试剂中相应的抗体在溶液中相遇，立 即形成抗原一抗体复合物，并形成一定浊度，在一定量抗体 存在时浊度的高低与抗原的含量成正比。通过与同样处理 的校准液比较，计算未知样品中的铁蛋白含量。 1．2 试剂 铁蛋白检测试剂、品、质控品由浙江伊利康生物技 术有限公司提供。 1．3 仪器 采用 FH400全自动生化分析仪。 1。4 方法 将 80~tg／L校准品按倍比稀释为4O，2O，10，5及 0／,g／L 作 6点定标。基本测定参数：主波长 600nm，副波长 800 Ilr,n，试剂 1(R1)240~L，试 剂 2(R2)60；aL。加入 R1试 剂 5min后加入 R2试剂，反应时间 5rain。 2 实验结果 2．1 精密度评价[1] 按 NCCLS评价，取低、中、高 3个不同浓度的血 清样本，铁蛋白浓度分别为 55／~g／L、174~g／L、435~g／L， 连续测定 20次 ，再每天测 1次，共测 20d，结果见 1。 表 1 批内和批间精密度测定结果(gg／L) 2．2 线性范围评价[2] 按 NCCLS的评价方案，用铁蛋白浓度为 600gg／L和 40pg／L的高低值样本 2份，等量混合产生中间值320pg／L，中 间值再与高、低值等量混合，产生46Ogg／L和180gg／L的5个 梯度值铁蛋白样本，在仪器上以低值到高值和高值到低值分 别测定，求得两次平均值，以X作为理论值，Y作为测定值进 行回归分析，其方程 Y=0．9857X+1．1714，R2一O．9996。表明 铁蛋白浓度在 180gg／L~600gg／L范围内，线性良好。 2．3 比对实验 取铁蛋白浓度从 30ttg／L 500gg／L的新鲜血清标本 5O份，分别用本试剂与进口试剂同时测定铁蛋白浓度，所 得数据均按 NCCLS文件统计，经 t检验得P>O．05，R2= 0．9996，表明本试剂与进口试剂高度相关。 2．4 回收实验 取低值和高值新鲜血清各 1份(60 tLg／L、530~g／L)， 以不同比例混合，结果显示本法测定血清铁蛋白的平均回 收率为 99％ 。见表 2。 表 2 铁 蛋白测定 回收试验结果 2．5 干扰试验 取4份高值铁蛋白混合血清，分别加入干扰物类风湿 因子、胆红素、甘油三酯、Hb，使其终浓度如表3。由表 3可 见 RF<-~ 12O0IU／L、BIL≤ 420~moi／L、TG≤10。0mmol／L、 Hb≤4．0 g／L时，对本法无干扰。 收稿 日期 ：2009—04—10 作者简介：杨来进(1975一)，男，贵州省盘县人民医院医师，现主要从事临床生物化学研究。 第 5卷 第 8期 2009年 8月 亚 太 传 统 医 药 Asia—Pacific Tradifional Medicine Vo1．5 No．8 Aug 2009 免疫记忆的建立对小鼠脑 c—Fos蛋白表达的影响 巩 丽 -X- (深圳大学医学院，广东 深圳 518O6O) 摘 要：目的：探讨免疫反应对小鼠脑海马 c-l os蛋白表达水平的影响。方法：以鸡的红细胞作为抗原免疫小鼠， 同时注射磷酸盐缓冲溶液PBS作为对照组。取小鼠脑石蜡切片采用免疫组化法检测其 c_los蛋白的表达。结果： 免疫组小鼠脑内c-los蛋白的表达水平明显高于对照组，比较免疫组与对照组免疫组化染色平均灰度有统计学意 义(PO．05)，该方法使 用方便、反应快速、结果准确，抗干扰能力强，适用于全自动 生化分析，能满足临床检测要求。 参考文献： [1] 杨昌国．精密度评价和方法比较中NCCLS评价方案的应用[J]． 临床检验杂志，1999，17(1)：47． [2] 杨昌国．线性评价和干扰实验中NCCLS评价方案的应用[J]．临 床检验杂志，1999，17(3)：184． [3] 潘泊荣．铁蛋白与肝脏疾病[J]．临床肝胆病杂志，1985，1(4)： 210． [4] 周荣馨．血清铁蛋白检测对肝脏疾病的意义EJ]．实用内科杂志， 1989(7)：359． (责任编辑：胡 静) 收稿 日期：2009—04—16 作者简介：巩丽云(1974一)，女，辽宁大连人 ，博士，深圳大学医学院讲师，主要从事分子肿瘤方面的研究。