乳胶增强免疫比浊法测定血清Lp（a）

'『工堕 堂捡 2 !笙 Q旦 卷_— 5 乳胶增强免疫比浊法测定血清 Lp(a、) 郁 新 中图分类号 R446．1 1+2 文献标识码 A 文章编号 1008—0023(2007)05—0433—02 ． 433． ·实验研究· [摘要】目的 了解乳胶增强免疫比浊法检测血清 Lp(a)的优越性和临床应用前景。 对检测血 清 LDfa1的乳 胶增强 免疫 比浊法和免疫比浊法进行重复性试验 、线性 范围试验和 回收试 验的 比较 ，采用 两 种方 法平 行检测 48例冠状动脉心脏病 患者血清 LDfa1的含量 ，进行相关性分 析 ，并用乳胶增强免疫 比浊 法检测 42例正常人血清 Lp『a1含量、结果 两种方法都有较好的重复性 ．但乳胶增强免疫比浊法稍优于 免疫 比浊法 ：两种方法具有较 好的相关性(r=0．988，P<0．0011，相关 方程 Y：1．087X+10．8；回收率 均在 95％ 以上，乳胶增强免疫比浊法略高于免疫比浊法；乳胶增强免疫比浊法的线性范N(5～l200m 较免疫比浊 法fl0～900rag／L)要宽 ：乳胶增强免疫比浊法检测血清 Lpfa1的参考范围为 l8．4～292mg／L。 结论 乳胶增 强免疫比浊法检测 血清 Lp(a)的准确件和精确度都优于免疫比浊法；具有敏感性高 、稳定性好 、方便快速 的优点 ．适宜 在有 自动化生化分析仪的医院推广使用 [关键词】 乳胶增强免疫比浊法 ；免疫比浊法；Lp(‘a) 脂蛋 白fa)[Lp(a1I’是一种富含胆 固醇 的血浆脂 蛋白．主要在肝脏合成后分泌入血。其脂质组成与低 密度脂蛋白十分相似，人群中血浆 Lpfa1浓度的个体 差异很大。当今 Lp(a1仍是脂蛋白研究中最热门的内 容之一 。但迄今为止 。Lpfa1的测定仍 以整个颗粒 的 质量表达其结果⋯。且人们对 Lpfa1的生理功能和其 所致血栓性疾病的机理等许 多方 面还不十分清楚 I21 我们应用乳胶增强免疫法检测了42例正常人及 48例冠心病患者的血清 Lp(a1含量 。并对乳胶增强 免疫比浊法和直接 免疫 比浊法进行了方法学 比较 ． 以了解不同检测方法的优越性和临床应用前景 1材料与方法 1．1试 剂 乳胶增强免疫 比浊法试剂盒 f批号 ： 68283))fit Lp(a)品f批号码 ：4854011为上海基恩 公司产品。主要组成包括 ：试剂f11免疫 比浊缓冲液 (pH 8．6)，试剂(2)抗人 Lp(a)-~k胶粒，校准物为人 Lp(a) f浓度为：740mg／L)。血清免疫比浊法试剂盒 E号： HE736)及 Lp(a)标准品为日本 WAKO公司产品 1．2 仪器 日本 日立公司 7170A全 自动生化分析 仪。 1．3方法 乳胶增强免疫比浊法主要参数：方法 为二点终点法：测光点 15／34：检测波长 600nm：标本 量 2txl：试剂 R1 180tx1．试剂 R2 45txl；定标方式 4P Log。免疫比浊法严格按照试剂盒使用说明书操作 1．4 对象 42例正常人均系来我院进行健康体检 作者单位：226151 海门，江苏省海门市第三人民医院 作者简介：郁新，本科毕业 ，学士学位，主管检验师，主攻生化 检测 的成年人 。排除肝 、胆 、肺及内分泌方面的疾病 ，且体 检肝、肾功能和血脂、血糖均正常：48例病人血清标 本来自本院门诊及住院的冠心病患者 1．5 统计学处理 两种方法 的比较用 Pears0n相 关分析和直线回归分析 2 结果 2．1参考范围的建立 ．用乳胶增强免疫 比浊法测 定 42例正常人的血清 Lpfa)浓度为(128．5_+68．4)mg／ L。测定结果经正态检验为近似正态分布fP=0．9031， 确定其 95％的参考范围为 18．4～292mg／L．与文献报 道免疫 比浊法的参考范围基本一致 2．2 线性范 围试验 参 照 NCCLS的线性评 价方 案．以Lp(a)浓度分别 80mg／L和 1400mg／L两份混合 血清按不同比例组成系列浓度标本．对乳胶增强免 疫比浊法和免疫比浊法进行线性范围测试 结果显 示 ．免疫 比浊法在 Lp(a)浓度 为 10～900mg／L范围内 线性良好．超过900mg／L时出现负偏离：而乳胶增强 免疫比浊法在 Lp(a)浓度为 5～1200mg／L范 围内线性 良好．超过 1200mg／L时出现负偏离 2．3 重复性试验 用乳胶增强免疫 比浊法和免疫 比浊法分别对两份 Lp fa1浓度分别为75．0mg／L和 580．0mg／L的病人混合血清进行重复性试验 f见附 裴 )。结果显示．两种方法都有较好的重复性，但乳胶 增强免疫 比浊法的 CV值稍小于免疫 比浊法 2．4 回收试验 取不同浓度的新鲜病人混合血清 【Lp(a)浓度分别为 58．0，250．0，580．Omg／L]分别加入 已知浓度的定值血清 。分别用乳胶增强免疫 比浊法 维普资讯 http://www.cqvip.com ． 434． 附表 两种方法定量检测Lp(a)的重复性试验 c (％) 和免疫比浊法进行检测 ．得平均回收率分别为 98．8％(97．1％～101．9％1和 96．4％(95．5％～103．7％1．乳 胶增强免疫 比浊法明显高于免疫比浊法 2．5 对照试验 分别用乳胶增强免疫比浊法和免 疫比浊法检测 42例病人血清标本的Lp(a)浓度．用 SPSS软件包进行相关和直线回归分析．结果显示两 种方法具有良好的相关性f1，=0．9883，P<0．oou，相关 方程 Y=1．087X+10．8。 3 讨论 由于 Apofa)分子大小 的极度不一致性 ．其氨基 酸序列与纤溶酶原高度同源。给LDfa)的免疫比浊法 准确测定带来诸多困难I”。目前测定血清 LDfa)含量 的报道多采用免疫 比浊法和酶免法 酶免法的主要 优点是基质效应不明显．测定中的酶标抗体一定程 度 【：可以避免 Apo(a1分子大小对测定结果 的影响 ． 但缺点是其精密度较差 按照 ApoAI、B国际标准化程序，Lp(a)测定的标 ianwxi J．Med Lab Sci．October 2007．VoI 25．No5 准化程序由 12个国家 、33个实验室『6个 Lpfa)标准 化实验室和 27个试剂生产公司]、40个测定系统，经 过 i个时期 的实验 ．最后确定 了 1个 国际标准化的 二级参考材料(PRM)E31 目前临床实验室常用的免疫 比浊法所用的单抗或多抗主要作用于K4—2，对Ap0 fa1分子大小敏感 的方法产生较大的偏差。因此 ，建 立一个不受 Apo(a)分子大小影响的准确的 Lp(a)常 规测定方法是当前 临床化学家十分重要和艰巨的任 务 乳胶增强免疫 比浊法采用了羰化聚苯 乙烯微 粒增强技术 ，减少了 Ap0(a)分子大小多态性对 I p0 fa1测定值的影响 。本文的结果也证实了这一点，其 测定的线性范围和精确度都较免疫 比浊法为高 且 此方法可全 自动分析大批量标本 ．快速 、准确 ，可更 好地满足临床诊疗的需求 参 考 文 献 f11王 羽，张宗久．免疫透射比浊法测定脂蛋白(a)[M]．见巾华人民共 和围 12生部医片司编．全国临床检验．第了版．南京：东南 大学 }H版社．2006．494～495． 【2]鄢盛恺．关于临床m脂测定的建议IJJ．中华医学检验杂志，2003，26： 182-184． f3]庄一义．脂蛋白(a)测定的标准化及存在问~'lJ1．临床检验杂志， 2003，21(2)：1 19-120． 【4】董 军，李健斋．咀清脂蛋门(a)测定方法研究进展l JI．巾华医学检验 杂志．1997．20：52～54． (上接第 507页) ment methods：approved standard．NCCLS Document H20一A[S] 【1],f~zA，王毓三．全国I临床检验操作规程[M]．第二版，南京：东南大学 NCCLS．Wayne(USA)，1992． }}；版社．1997．14． 【2j National Committee Clinical Laboratory"Standards． Reference leukocyte differential c0unt(p 0p0ni0n{l1) and evaluation of instm· f上接第 499页1工作状况、仪器维护或维修记录，并能自动传 输 到科主任的微机中 ．使科主任随时可 了解每台仪器的工作 状况 ．从而掌握总体情况 ．使 日常工作有条不紊 。每年消耗 的 大量试剂．保证试剂的质量、效期、库存量、消耗，请购均离不 开计算机管理 试剂的质量是影响试验结果 的准确可靠的重 要 因素 ．试剂管理 是科 室经济管 理的重要组成部分 ，为了节 流增效 ．及时将有 效期 内的试剂 投入使用 ．并且保证 支出 的 试剂被合理 消耗 ．本系统中提供 了试 剂管理功能 ．可杏 询每 种 i-l_I=剂库存量 ．进行人库管理并预报将要过期的试剂f以粉红 色显示 ．而过期 的试 剂则以深红色显示1．保证 了试剂 合理 安 全的使用 5．3 科 室文件 ．人事档案管理 实行计算机管理更加科 学 化．建立文件跟踪系统．使我们掌握了每一份文件批示记录， 可以清楚 了解文件处理的进程 ．也可 以方便地查找既往下 达 文什 ．有效地防止遗漏文件 科室 内部建立人事档案使科 主 仃对人员管理更加具体．无论是教育背景还是学术发展．这 些 资料都是对个人评 估的基础 ．显得很莺要 ．计 算机管理 能 更加详细且能进行动态管理 【3】丛玉隆主编．当代【8L液分析技术与临床【M】．第 1 IN．1eg：人民卫生 出版社．1997．12：40～46． 5_4 值班与考勤管理 值班管理可以发挥网络优势．使科 成员在科内随时查看自己的班次 ．更加灵活．从而降低遗 忘 的几率 ．它 比纸张管 理更加 安 全 ．不 会丢 失 ．可 以随时调 用 ．并可方便地进行年度或月份统计 6 教学与科研管理 检 验科(教研 室1教学人 员的档 案资料 、考核 、 、教学 评估 ．学生 与老师网上交 流等都上 了，教学 网络 。科研论文 、新 技术引进 、信息资料都依靠这个信息高速公路来完成。 检验科计算机信息管理．是医院管理信息系统的一个组 成部分．检验管理网络化已势在必行．外要逐步完善．从而进 一 步提高检验质量和] 作效率．做到更方便、快捷、优质地为 临床服务 ．为患者服务 参 考 文 献 [1]邱 骏，顾 围浩，吴 昀，等．医学检验网络信息管理系统的研发阴．临 床检验杂志，2005．23f11：57～58． [2】李 萍，黄享建，徐克和，等．优化T作流程提高临床检验T作效率 『J】．中华检验医学杂志，2004，27(1 1)：803 804． [3]申子瑜 我国临床实验室质量管理的基本要求『Jj．中华检验医学杂 志，2003、26(1 1)：700～701． 维普资讯 http://www.cqvip.com