葡萄糖酸钙工艺规程1

技 术 标 准 （T S） 目：葡萄糖酸钙工艺规程 编号：TS01-YL002-I 分发号： 颁布部门：质量保证部 分发部门：质量保证部 生效日期： 起草人： 审核人： 批准人： 起草日期： 审核日期： 批准日期： 分发范围：生产技术部、质量控制部、设备部、供应部、仓储部 技 术 标 准 （T S） 题目：葡萄糖酸钙工艺规程 编号：TS01- YL002-I 1、目的：制定葡萄糖酸钙工艺规程，作为葡萄糖酸钙生产的依据，作为制定其它生产文件的依据。 2、适用范围：本规程适用于本公司葡萄糖酸钙原料药的生产。 3、责任：生产技术部、生产车间操作人员负责对这一规程的实施。 4、产品概述 4.1产品名称：葡萄糖酸钙，化学名称：D-葡萄糖酸钙盐一水合物，英文名称：Calcium Gluconate 4.2化学结构式、分子式、分子量 分子式：C12H22CaO14 .H2O，分子量448.40 4.3基本特性 本品为白色颗粒状粉末，无臭，无味；在沸水中易溶，在水中缓慢溶解，在无水乙醇、氯仿或乙醚中不溶。本品熔点201℃，120℃脱去一分结晶水成为无水物；本品比旋光度+9.5°（C=1，水），本品的饱和水溶液的pH=6-7，本品为D-葡萄糖酸钙盐一水合物，含C12H22CaO14 .H2O应为99.0%—104.0%。 4.4剂型：原料药 4.5类别：补钙药 4.6规格：25kg/袋（桶） 4.7贮藏：密闭保存 4.8有效期：2年 5.质量与检验 5.1原辅材料质量标准与检验方法 见“原辅材料质量标准”和“原辅材料的检验方法”。 5.2产品质量标准与检验方法 见“葡萄糖酸钙质量标准与检验方法”。 6.工艺原理、化学反应过程与工艺流程图 6.1工艺原理 葡萄糖酸钙是具有所羧酸结构的盐，工艺原理是：玉米淀粉通过淀粉酶、糖化酶双酶法水解生产葡萄糖，葡萄糖经黑曲霉有氧发酵生产葡萄糖酸，生产的葡萄糖酸与碳酸钙反应生产葡萄糖酸钙，再经过压滤去渣，滤液减压浓缩、结晶、离心、脱水、溶解、脱色到再结晶、再离心脱水、造粒、烘干、包装而制得。 6.2化学反应过程 n C6H10O5 n C6H10O5 CH2OH(CHOH)4COOH [CH2OH(CHOH)4COO]2Ca ·2H2O 6.3工艺流程图 见下页。 7.工艺过程及操作 7.1糖化反应 7.1.1投料配比 原料名称 投料重 配比 质量规格 玉米淀粉 12吨 工业级 碳酸钙 5kg左右 工业重钙 淀粉酶 6kg 0.5kg/T淀粉 食品级 糖化酶 15kg 1.3~1.5kg/T淀粉 食品级 盐酸 约25kg 25%工业级 水 约47吨 净化水 7.1.2生产操作过程 在检查设备清洁完好的前提下，按上表投料配比，先加入净化水，开搅拌，再将淀粉投入调料罐内，搅拌下测pH值，视pH值加少量碳酸钙，调pH至6.0~6.5，再加淀粉酶0.5kg/T淀粉，搅拌半小时，开糖化罐进料阀，开蒸汽预热喷射管路温度至100~105℃，然后开喷射管上的进料阀，将调料罐中的淀粉乳吸入喷射管，进行喷射进料至糖化罐，喷射毕，清空喷射管。 搅拌下，取样，用碘液检查料液中的淀粉反应情况，有淀粉显色反应，需继续搅拌，让淀粉全部变成糊精，待取样滴入碘液显紫色时，加25%盐酸约25kg，调pH至4.0，开冷却水降温至60±1℃，关冷却水，分两次投糖化酶，每吨淀粉投糖化酶1.3~1.5kg，搅拌20小时后，用无水乙醇抽样检测糊精残留情况。待pH4.4~4.5，没有糊精反应，即为糖化终点。马上开蒸汽升温至75℃以上灭酶，趁热打入糖液贮罐待用。糖液收率为110%，糖化液含糖量22~23%。 7.1.3糖化反应结束时，用无水乙醇检查糊精残留情况。检查方法是：试管倒入10ml无水乙醇，滴入经滤纸滤过的糖液数滴，澄清无混浊现象即为糖化终点。 7.2发酵反应 7.2.1黑曲霉菌种来源 我公司生产的葡萄糖酸钙产品的菌种，原来是从上海科研所购买的，2009年8月25日从北京中国普通微生物菌种保藏管理中心中科院微生物研究所购买一支菌种，据菌种记载，这支菌种是轻功部上海科研所2087菌种，分离源：柑桔。经本公司接种、传代培养、贮存，第五代传代培养的菌种投入车间生产。 7.2.2黑曲霉种子培养 7.2.2.1投料配方 原料名称 投料重 配方 质量规格 （NH4）2SO4 9kg 药用 Mg SO4 2kg 药用 KH2PO4 1kg 药用 CaCO3 50kg 工业 玉米浆 20kg 工业 水 300kg 工业 葡萄糖液 1000L 糖化液 含糖23% 7.2.2.2生产操作过程 在检查设备清洗完好的前提下，按上表投料配方精确称取计重，倒入种子罐中，再加糖化液1000L和净化水3000L搅拌均匀，配成含糖量8%左右的稀糖液培养基（检测计算含糖量），然后升温至120℃，搅拌保温半小时进行灭菌。灭菌结束后，排蒸汽，关蒸汽阀门，开冷却水降温至37℃左右，开无菌空气，压力0.15~0.2MPa，Ph6.2~6.5，接黑曲霉种子，用无菌净化水1500ml溶解3瓶第5次传代培养的黑曲霉菌种，用酒精点火消毒种子罐投料口后，将菌种连同培养基倒入种子罐，关投料盖。经14~16小时左右的种子培养，待pH4.0左右，检测种子罐中料液的含糖量，当含糖量达2%左右继而种子已培养好，且继续搅拌保温待用。 7.2.2.3含糖量检测方法 吸取过滤后的供试液5ml至200ml容量瓶中，以水定容，再吸5ml于250ml碘量瓶中，加0.1N碘液10ml，滴加1%NaOH2.0ml放置暗处5分钟，取出后，加稀硫酸10ml，以0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液进行滴定，在近终点时，加0.5%淀粉指示剂2ml，继续滴定至蓝色消失为止。并另吸取5ml蒸馏水作空白试验将以纠正。 计算公式： 含糖量% = ×100 V0 为供试液消耗硫代硫酸钠滴定液毫升数， V为空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液毫升数， f 为0.1mol/L硫代硫酸钠滴定液浓度校正系数， 9.001为消耗每1mol/L硫代硫酸钠滴定液相当的葡萄糖的mg数。 7.2.3发酵反应的操作过程 7.2.3.1投料配方 原料名称 配方 投料重 质量规格 Mg SO4 6kg 药用cp级 CaCO3 1500kg 工业级 糖化液 约34M3 含量22~23% 水 约4M3 净化水 种子 约4M3 自己培养种子 7.2.3.2生产操作过程 在检查设备清洗完好的前提下，按上表投料配方，先加净化水4 M3，碳酸钙1500kg，硫酸镁6kg于50 M3的发酵罐内，搅拌，开蒸汽升温至120℃，搅拌保温半小时进行灭菌，开无菌空气至发酵罐内，关蒸汽，排蒸汽，开冷却水降温冷却，同时，加糖化液34 M3（搅拌器上留50公分位置），冷却降温至40~41℃，pH6.0~6.2，移入种子罐已培养好的种子，保持无菌空气压力0.15~0.2MPa，搅拌发酵8小时后，每4小时抽样检测发酵液中的含糖量与pH值，待含糖量达1%以下，pH4.0左右时为发酵终点，发酵时间约为18~20小时。 7.2.3.3中和反应操作过程 为防止“反钙”现象，发酵液中预先加入的CaCO3不足与葡萄糖酸反应的量，待发酵终点后，即刻开蒸汽升温至75℃以上灭霉。然后视pH值情况，投碳酸钙500kg左右，让发酵罐内的糖液全部转为葡萄糖酸所需钙离子的量，进行搅拌中和反应，反应1小时，pH7.0~7.5，然后趁热送压滤，去除多余的碳酸钙和菌丝，滤渣回收出售，滤液经检测为澄清溶液，不能有混浊残渣，若发现有残渣或混浊需进行二道压滤。然后将滤好的滤液投入发酵液贮罐保温待用。 7.2.3.4终点控制标准与检测方法 发酵终点控制是测定发酵液中残糖含量1%以下，pH4.0左右为终点。 发酵液中残糖含量根据7.2.2.3含糖量检测方法进行检测。 中和反应需投碳酸钙量，按发酵投入的糖液全部转化为葡萄糖酸所需钙离子的量，按反应方程式平衡计算。 7.3减压浓缩操作过程 开真空﹣0.06~﹣0.07MPa，从发酵液贮罐拉发酵液至浓缩罐，发酵液漫过发酵器后开搅拌，开蒸汽进行减压浓缩，浓缩温度在70℃以上，真空度﹣0.06~﹣0.07MPa，原发酵液浓度1.07左右，每隔1小时取样测比重一次，浓缩后期灵活掌握，待浓缩液比重达1.18~1.20即达浓缩终点。停真空，将浓缩液放入指定结晶槽，做好记录。然后进行自然冷却结晶48小时左右，即可离心脱水。 7.3.1浓缩放料比重标准 料液类别 终点比重 波美度 发酵液 1.18~1.20 22~24 精品母液 1.16~1.17 20~21 粗品母液 1.22~1.24 26~28 活性炭洗液 1.14~1.16 18~20 7.4粗品离心洗涤操作过程 将粗品从结晶槽中挖出，投入离心机脱水，每次投料不得太多，以免水洗不透。待粗品离心甩干至没有黄斑为止。若有黄斑要继续加净化水洗涤；若有夹心层要加净化水，调匀重新离心，以保证杂质冲洗干净，且由班长或溶解岗位人员检查验收为准。 7.5溶解脱色操作过程 在检查设备清洁完好的前提下，先加入净化水2000L至溶解罐中，开搅拌，再投入1500kg左右离心洗涤至无黄斑的粗品葡萄糖酸钙，开蒸汽加热，待物料完全溶解后，加净化水调节料液比重1.08~1.082时，倒入约20kg药用活性炭（以湿粗品1.3~1.5%），搅拌脱色半小时后，停搅拌静置沉淀1小时。抽取上面澄清液送循环过滤器进行过滤，经冷却器冷却降温，放入指定的精品结晶罐，自然冷却重结晶。 以溶解罐溶解脱色精制后的物料为一个批号，编为一个生产批次。 溶解罐下面洗涤的活性炭挖出，投入离心机脱水，炭洗液放入贮罐，待浓缩回收，活性炭回收出售。 7.6精品重结晶、离心洗涤、造粒、烘干 7.6.1离心脱水 精品自然冷却重结晶20~22小时后，即可离心脱水。离心前，先将上清液放入贮池，然后打开结晶罐底部放料阀，将物料放入料斗内，打入离心机脱水，将湿精品摊匀，不得过多，用净化水洗净说干。以溶解罐同一次放出的物料为一个生产批，进行离心甩干。湿精品甩干后，抽样送车间化验室初检，初检如发现色泽不白、有黑点异物或含水量过高，都要另行重新处理，初检合格后送造粒、烘干。 7.6.2重结晶时间的掌握 测定项目 生产批 混合批 注射批 结晶上清液比重 1.045~1.048 1.05~1.055 结晶上清液波美度 16~6.5 7~8 结晶时间 14~22小时 12~18小时 12~16小时 7.6.2湿成品车间初检项目内容 测溶液澄清度：取湿成品6g置50ml试管中，加入蒸馏水40ml，在电炉上煮沸3分钟，于伞形棚内照度1000Lx检查，或拿试管检查澄清度，溶液澄清，无黑点、无混浊、澄清透明的为合格。 并取样按草酸盐标准检验操作规程检查草酸盐，草酸盐含量＜400ppm为合格，草酸盐含量＜100ppm为注射级。 7.7成品包装 湿成品经车间初检合格后，送造粒烘干，干燥后成品抽样送公司化验室按《中国药典》2010版二部葡萄糖酸钙质量标准逐项进行鉴别，检查，含量测定，各项指标合格后进行过筛、称重、包装，按同一溶解罐同一次放出的物料结晶、离心、烘干的产品为一批，贴上批次、日前等标签，做好原始记录，签字后送成品仓库入库。若公司化验室来不及化验，先贴上状态标识，放在仓库待检区，待化验合格后，贴上批次、合格等标签，入合格区域。 8.经济技术指标与消耗定额 按淀粉计算，葡萄糖酸钙成品总收率为103%。 8.1化学反应方程式 n C6H10O5 + n H2O n C6H12O6 2 C6H12O6 + O2 2CH2OH(CHOH)4COOH 2CH2OH(CHOH)4COOH + CaCO3 [CH2OH(CHOH)4COO]2Ca ·2H2O 8.2物料平衡 8.3主要原辅材料消耗定额 原料名称 单位 单耗 淀粉 T 970kg 碳酸钙 kg/T 300 kg/T 盐酸 Kg/T 2 kg/T 活性炭 Kg/T 15 kg/T 培养基 若干 煤耗 电耗 9.技术安全与防火、工艺卫生与劳动防护 9.1防止交叉污染 9.1.1储存间、中间站所存的物料均要有状态标志。 9.1.2所有物料的内包装药扎紧口，容器加盖防止异物混入。 9.1.3生产过程因设备不够配套，严格防止各批次交叉污染。 9.1.4所有物料的称重、计算均要复核。 9.2防火 9.2.1车间内配有消防栓。 9.2.2企业定期组织职工进行消防培训。 9.3工艺卫生 9.3.1严格执行一般区和洁净区清洁卫生管理。 9.3.2药品生产过程中，保证清洁卫生，班前班后彻底清扫，做到玻璃透明，墙壁、门窗、工作台无尘埃，地面无杂物，设备见原色。 9.3.3进入车间，必须穿戴工作服、鞋、帽，生产车间不准吸烟、吃东西、存放与生产无关的物品。 9.3.4直接接触药品的操作人员，必须洗手、消毒，职工要定期进行健康检查。 9.3.5包装材料必须清洁干燥，设备、容器、工具、管道等要保持清洁。 9.3.6劳动保护 生产与维修人员在工作时必须按规定穿戴劳动防护用品，注意劳动保护。 10.生产周期与劳动定员 10.1操作工时 操作内容 操作工时 劳动定员/班 淀粉投料 2小时 2人 糖化 30小时 2人 种子培养 20小时 1人 发酵 22小时 2人 压滤 8小时 1人 浓缩 8小时 1人 结晶 48小时 离心脱水 8小时 4人 溶解 3小时 1人 过滤 1小时 结晶 24小时 离心脱水 4小时 3人 粉碎造粒 4小时 2人 烘干 8小时 2人 包装 8小时 2人 机修 3人/班 车间化验室 3人/班 结净消毒 1人/日 制水系统 2人/日 车间监督管理 2人/日 合计 71人 11.装要求与贮藏方法： 11.1只有既符合工艺要求又符合质量标准的产品，并签署生产记录后，能进行包装操作。塑料袋、标签、纸板桶由质量管理部门检验合格后方可使用。 11.2标签的粘贴应端正，文字、批号要清晰、正确。 11.3包装作业结束后，认真填写包装记录，核算收率并将产品转入待检区待检，当检验合格后，方能正式入库、入账，进入销售渠道。 12.利用（包括副产品”回收的处理）与“三废”治理（包括“三废”排放标准） 本产品生产的废弃物全部回收出售，发酵后压滤的滤渣主要是菌丝和蛋白，是动物的饲料，我们全部回收出售。溶解脱色后的活性炭，可再生回收，我们全部回收出售，重结晶后的上清液达标排放，本产品没有“三废”污染。 母液回收 t=100℃ PH5.3 循环过滤 去活性炭 离心 检测 造粒干燥 包装 检测 重结晶 溶解脱色 去活性炭回收 入库 活性炭 离心脱水 母液回收 粗结晶 1.18～1.20 浓缩 P= －0.06～—0.07MPa t=70℃以上 贮罐 压滤 去CaCO3菌丝 回收 出售 CaCO3 80-85℃ PH5.3-5.5 中和 孢子菌种 斜面菌种 种子培养 40±1℃ PH6.0-6.2 空气0.15-0.2MPa 18-20小时 培养基 灭菌 发酵 灭菌 培养基制备 贮罐 过滤 去蛋白质等渣 喷射液化 糖化 调浆 反渗透水 糖化酶 PH4.0～4.5 60±1℃ 30小时 淀粉 淀粉酶 温度80~85℃ 碳酸钙中和，pH5.3~5.5 空气压0.15~0.2MPa，40±1℃,20小时 黑曲霉发酵，pH6.0~6.2 温度60±1℃,30小时 淀粉酶、糖化酶，pH4.0~4.5 (V0－V)×f×9.001 0.125 淀粉酶、糖化酶 60℃ （水解） 淀 粉 葡萄糖 黑曲霉生化氧化 pH6.0~6.2 40±1℃ 葡萄糖酸 中 和 85℃ + CO2 淀粉 12000kg 净化水47000kg CaCO3 5kg HCl 25kg 淀粉酶 6kg 糖化酶 18kg 糖 化 贮 罐 （糖液58M3） 糖化液1000L 净化水3000 L CaCO3 50kg 糖化液 34 M3 碳酸钙 2000kg MgSO4 6kg 净化水 4000 L 压 滤 去菌丝体500kg 贮 罐 浓 缩 水分蒸发15000kg 结 晶 水分蒸发200kg 离心脱水 母液10000kg 溶解脱色 活性炭20kg 料液100kg 活性炭20kg 料液2000L 湿粗品1500kg 重结晶 上清液1500L 离 心 活性炭 离心脱水 造粒粉碎 烘干 检验 包装成品1000kg 去水分700kg 种子培养 发酵中和 出售 出售20kg 洗液回 收90L 第 1 页 共 11 页 PAGE 第 18 页 共 18页