黑米花青苷色素（标准文本）

号： 黑米花青苷色素 陕西省质量技术监督局 发 布 前 言 本标准为《黑米花青苷色素》的第一个标准。 本标准由 提出。 本标准由 负责起草。 本标准主要起草单位： 本标准主要起草人： 本标准是首次发布。 1 主内容与适用范围 本标准规定了黑米的技术要求，实验方法和检验规则等内容。 本标准适用于我国特有优质黑米的副产品，经过萃取，浓缩而成的黑米色素。 2 引用标准 GB/T 601-2002 化学试剂标准溶液的配制； GB 5009.3-2010 食品中水分的测定方法； GB 5009.4-2010 食品中灰分的测定方法 GB 5009.12-2010 食品中铅的测定方法 GB/T 5009.11-2003 食品中砷的测定方法 GB 4789.2-2010 食品卫生微生物生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3-2010 食品卫生微生物生物学检验 大肠菌群测定 3 技术要求 3.1 外观 本品为紫红色溶液、膏状或粉末，易溶于水，乙醇。 3.2 理化指标 应符合1规定 项 目 指标 溶液 浸膏 粉末 Cy-3-g Pn-3-g E 1cm，λ=535 灼烧残渣 水分 pH 砷（以As计） 铅（以Pb计） 菌落总数 大肠菌群 4实验方法 除特别注明外，实验中所用试剂级别均为分析纯，水为蒸馏水或相应纯度的水，溶液为水溶液。 4.1 鉴别 4.1.1 溶解性 溶于水、乙醇 4.1.2 颜色反应 在酸性溶液中呈红到紫红色（pH 1～6）；碱性时变青褐到黄色（pH 6～12）。 4.1.3吸收光谱 4.1.3.1 仪器设备 分光光度计 4.1.3.2 试剂 95%乙醇（AR）；盐酸（AR）； 盐酸-乙醇溶液：盐酸/乙醇= 15:85（V:V）。 4.1.3.3测定方法 称取样品0.5mL或0.15-0.2g（精确至0.01mL或0.001g），以盐酸-乙醇溶液定容至100mL，充分摇匀后，用分光光度计测定溶液的吸收光谱，最大吸收峰在535nm。 4.2 液相色谱 4.2.1 仪器设备 高效液相色谱仪（梯度洗脱）；色谱柱；紫外检测器 4.2.2 试剂 冰乙酸（AR）；甲醇（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；超纯水 4.2.3测定方法 流动相：4%的磷酸/乙睛(88:122,V :V,pH2.0)；流速为0.8ml/min;柱温:30℃；检测波长:535nm。 将花青素标准品矢车菊素一3一葡萄糖昔(cyanidin3 -glucoside,C y-3-g)，芍药素一3一葡萄糖昔(peonidin3 -glucoside,Pn-3-g）20 mg融于20mL含1%盐酸的甲醇溶液，配成1mg/mL的标准储存液，通过倍比稀释法配出标准品系列，根据峰面积(S)和标准品浓度制出花青素浓度(A)的标准曲线和回归方程。 Cy-3-g浓度的线性范围:1-250μg/ml。最小检测限为0.5μg/mL。 Pn-3-g浓度的线性范围:2-250μg/ml。最小检测限为0.8μg/ mL。 使用分析天平准确称取黑米花青苷色素0.1g，溶解于50mL的1%盐酸甲醇(V:V)中，充分混匀;将浸泡液避光置于室温保存12h;使用0.45 4 mol/L滤纸过滤浸泡液后，将过滤液放置在4℃冰箱中保存，残渣再使用50ml的1%盐酸甲醇浸泡12h，并重复上述操作2次后，将150mL提取液与100mL石油醚充分混匀后静止4h，通过萃取法除去提取液中的脂质，重复上述萃取操作2次后，将花青素移入500mL棕色瓶并定容，置于-80℃冰箱保存备用。取20μL提取液用盐酸甲醇稀释至200 μL后取10μL上样。 4.2.4 计算 X1=C1×100×500/M X1：样品花青苷Cy-3-g含量，单位mg/Kg C1：样品花青苷Cy-3-g浓度，单位μg/mL 100：稀释倍数 500：定容体积 M：色素称取量。 X2=C2×100×500/M X2：样品花青苷Pn-3-g含量，单位mg/Kg C2：样品花青苷Pn-3-g浓度，单位μg/mL 100：稀释倍数 500：定容体积 M：色素称取量。 4.3色价 4.3.1试剂 95%乙醇（AR）；盐酸（AR）； 盐酸-乙醇溶液：盐酸/乙醇= 15:85（V:V）。 4.3.2仪器 分光光度计 4.3.3 测定方法 精确称取样品0.15~0.2g（准确至0.0001g）用盐酸-乙醇溶液定容至100mL。以盐酸-乙醇溶液作空白对照，用1cm比色皿于最大吸收波长535nm处测定其Abs值。 4.3.4 色价计算 按式(1)计算色价： E 1cm，λ=535=A/M……………..(1) E 1cm，λ=535——色阶，样品以盐酸-乙醇溶液溶解于100mL，选用1cm比色皿，在最大吸收波长535nm处测得的吸光度值（Abs）； A——上机测试液的吸光度值； M——样品质量，g。 4.3.5相对误差 色价值双试验误差小于5%。 4.4质谱 4.4.1 仪器设备 LC—MS；色谱柱；柱温箱 4.4.2试剂 甲酸；乙腈；超纯水 4.43.3测定方法 4.4.4 计算 4.5 pH值 称取试样1g（精确至0.001g）用蒸馏水定容至100mL充分摇匀后，用pH计直接测定。 4.6灰分 按GB5009.4-2010测定。 4.7水分 按GB5009.3-2010测定。 4.8 铅 按GB5009.12-2010测定。 4.9 砷 按GB/T5009.11-2010测定。 4.10 菌落总数 按GB4789.2-210测定。 4.11大肠菌群 按GB4789.3-2010测定 5 检验规则 6 标志、包装、运输、贮存 附加说明： 陕西省地方标准 X83 备案号： -2010 标准号： 2010-01-10发布 2010-01-10实施 1% 1% 1% 陕西省质量技术监督局 发布 2010-01-01实施