为了正常的体验网站,请在浏览器设置里面开启Javascript功能!
首页 > 人类基因组

人类基因组

2012-03-30 50页 ppt 5MB 122阅读

用户头像

is_976660

暂无简介

举报
人类基因组null 人类基因组 THE HUMAN GENOME 人类基因组 THE HUMAN GENOME 组长:蒋蓉 组员:吴兰兰 田会会 覃振萍 周辉 范艳霞CONTENTSCONTENTSTHE HUMAN GENOME & HGP APPLICATION PROSPECT 基因组:生物体内遗传信息的集合,是某个 特定物种细胞内全部DNA分子的总和。 基因组:生物体内遗传信息的集合,是某个 特定物种细胞内全部DNA分子的总和。 人类基因组:包括24条染色体,约...
人类基因组
null 人类基因组 THE HUMAN GENOME 人类基因组 THE HUMAN GENOME 组长:蒋蓉 组员:吴兰兰 田会会 覃振萍 周辉 范艳霞CONTENTSCONTENTSTHE HUMAN GENOME & HGP APPLICATION PROSPECT 基因组:生物体内遗传信息的集合,是某个 特定物种细胞内全部DNA分子的总和。 基因组:生物体内遗传信息的集合,是某个 特定物种细胞内全部DNA分子的总和。 人类基因组:包括24条染色体,约有30亿 对核苷酸,编码了5万-6万个基因,人类基因组携带了有关人类个体发育、生老病死的全部遗传信息。 人类基因的基本数据人类基因的基本数据人类基因组包括 24条染色体,3×109bp, 平均每基因碱基数为3000,最大的dystrophin基因包含240万碱基。 基因总数为2-2.5万,远低于原估计的8-14万。 不同个体的碱基顺序有99.9%相同。 已发现的基因中约有一半功能未知。 人类基因的分布人类基因的分布null 确定人类基因组所携带的全部遗传信息,认识自我,揭开人类生长发育的奥秘,追求健康,战胜疾病,是人类基因组(HGP)的最终目标。 HGP (Human Genome Project)HGP (Human Genome Project)1986~1990~2000~2003 NIH&DOE 15年 30亿$ 六个国家 1999 1% 人类基因组计划研究概况人类基因组计划研究概况 1986年: Dulbecco R , 《癌症研究的转折点—人类基因组的全序列分析》 1990年10月1日: “人类基因组计划” 正式启动 2000年6月26日: 人类基因组工作框架图构建完成 2001年2月15日: (Initial sequencing and analysis of the human genome) nullHGP主要任务及这张解剖图包括4张小图,包括了人类基因组计划的全部主要内容,它们分别是遗传图(连锁图)、物理图、序列图和转录图 这张解剖图包括4张小图,包括了人类基因组计划的全部主要内容,它们分别是遗传图(连锁图)、物理图、序列图和转录图 null第一张图是遗传图,又叫连锁图。它是以在某个遗传位点上具有多个等位基因的遗传标记作为“路标”,以遗传学上的距离即两个遗传位点之间进行交换、重组的百分率cM作为“图距”,反映基因遗传效应的基因组图。 (1厘摩=重组频率为1%的两个基因间的遗传距离) 建立人类遗传图的关键是要有足够的高度多态的遗传标记 RFLP(限制性片段尺度多态性) STR重复序列 SNP(单核苷酸的多态性) null物理图是基因组计划的第二张图。物理图以一个“物理标记”作为路标,以Mb、Kb、bP作为图距的基因组图。物理图与遗传图相互参照就可以把遗传学的信息转化为物理学信息。这样,物理图就把人类庞大基因组分成具有界标的1500个小区域。 第三张图是序列图,可以说它是人类基因组在分子水平上最高层次、最为详尽的物理图。测定总长为1米、由30亿对核昔酸组成的基因组全部DNA序列,是基因组计划中最为明确、最为艰巨的定时、定量、定质的硬任务。 null第四张图是转录图。 我们知道,生物性状是由结构或功能蛋白决定的,功能蛋白是由信使RNA(mRNA)编码的,mRNA又是由编码蛋白功能基因转录而来的。转录图就是测定这些可表达片段(EST)的标记图。 测序测序HGP大大推进了基因组测序技术的进步,反过来,更先进的基因组测序技术运用于HG P中,也加快了人类了解自身的速度。测序方法和策略测序方法和策略逐步克隆法 (clone by clone approach) 全基因组随机测序方法-散弹法(shotgun)测序方法测序策略自动化链终止法测序“逐个克隆法”策略— 公共领域测序“逐个克隆法”策略— 公共领域测序即先复制更大段的人类基因序列,对连续克隆系中排定的BAC(细菌人工染色体)克隆逐个进行亚克隆测序并进行组装(公共领域测序计划),然后将它们绘制到基因组的适当区域,这种方法需要研究人员在早期把较多的时间和精力放到克隆和绘制草图上, null基因组序列工作框架图基因组序列工作框架图工作:通过对染色体位置明确的BAC连续克隆系4-5倍覆盖率的测序,获得基因组90%以上的序列,其错误率低于1%。 用途:对基因组结构的认识,基因的认识和解析,疾病基因的定位克隆,单个核苷酸的多态性发现。全基因组随机测序方法-散弹法 美国Celera公司 全基因组随机测序方法-散弹法 美国Celera公司 两个阶段 大规模测序与序列组装-工作框架图构建 基因组DNA文库构建和质量检测( Lander-Waterman曲线) 大规模测序 序列组装(assembly) 基因组序列完成图的绘制 通过contig末端测序反应确定关系 大插入片段文库,如λ文库或Cosmid文库等 肽链连接法 随机组合进行PCR反应 Large-scale genome projectsLarge-scale genome projects Sequencing DNA molecules in the Mb size range All strategies employ the same underlying principles: Random Shotgun sequencingnullComplete sequenceShotgun readsContigsGenomic DNAShearing/SonicationSubclone and SequenceAssemblyFinishingFinishing read原理示意散弹法全基因组随机测序技术流程染色体Plasmid 2- 10 kbBAC ±100kb基因组 DNA测序组装基因组序列文库构建散弹法全基因组随机测序技术流程散弹法基本步骤-1 散弹法基本步骤-1 1. 目的基因组DNA片段的制备    分离和纯化基因组DNA时,通常采用蛋白酶分解和有机相抽提的方法除掉蛋白质及脂类等其他大分子。基因组DNA片段化则主要采用物理剪切法和限制性内切酶法。 散弹法基本步骤-2 2. 外源DNA片段的全克隆 选择适宜的载体,与外源DNA片段相连。 常用的载体有质粒、噬菌体、粘粒(cosmid)以及YAC。这些载体可以克隆的DNA片段长度上限分别约为1.5-3、10、23、45和1000kb。 选择载体的主要参数是基因组大小,即基因组DNA序列的长短。 例如,构建大肠杆菌(4.6Mb)等基因组较小生物的基因组文库时,采用质粒作为载体便可得到满意的结果:按每个DNA片段平均长5kb计算,一个包括5000个DNA片段克隆的基因文库就能够代表一个完整的大肠杆菌基因组序列。构建较大基因组的文库时,噬菌体、粘粒以及YAC常被选作克隆载体。 通过转化或转导的方法将带有不同DNA片段的重组DNA分子导入受体细胞,获得一套包含特定生物体所有DNA序列的克隆。 散弹法基本步骤-2 散弹法基本步骤-3 3.期望重组子的筛选 很多方法能帮助我们从基因文库的众多克隆中筛选和鉴定带有特定基因的克隆,它们大多是以杂交探测技术(hybridization probing)为基础的。 杂交探测是一种利用能和目的基因序列互补的DNA或RNA片段为探针,通过分子杂交的手段找出带有目的基因的DNA片段的实验方法。 用菌落(菌斑)原位杂交或免疫原位检测法可快速筛选基因文库。一般采用三步甚至两步筛选法,可以在短时间内完成全基因文库的筛选,其程序为: 首先制备高密度平板,使每块平板密集分布5000-10000个菌落或噬菌班,进行原位杂交; 由感光胶片上的斑点位置在原杂交阳性平板的相应区域挖下固体琼脂,用新鲜培养基洗涤稀释; 将稀释液再次涂布平板,使每块平板只含有200-500个可辨认的菌落(斑); 用相同的探针进行二轮杂交,直至准确挑出期望的重组克隆。散弹法基本步骤-3 null常用的拼接软件常用的拼接软件◆ Phrap (http://www.genome.washington.edu/UWGC/analysistools/Phrap.cfm)http://www.phrap.com/consed/ 拼接结果显示(Consed界面)序列的组装序列的组装序列组装原理:直接从已测序的小片段中寻找彼此重叠的测序克隆,然后依次向两侧邻接的序列延伸. 优点:不需预先了解任何基因组的情况.ABCABCABCABC小片段测序计算机拼装nullConsensusMis-Assembly (Inverted)Find overlapsContig sequence constructionContig sequence constructionHighest weight path through the graph Tarjan algorithm Contig sequence derived from read segments that occur on the pathnullABC小片段测序计算机拼装散弹法测序的问 CAATGCATTA… …GCAGCCAATGCGAP错装完成(Finishing)完成(Finishing) Assembly: Process of taking raw single-pass reads into contiguous consensus sequence Closure: Process of ordering and merging consensus sequences into a single contiguous sequence Finished is defined as sequenced on both strands using multiple clones. In the absence of multiple clones the clone must be sequenced with multiple chemistries. The overall error rate is estimated at less than 1 error per 10 kbnull 各重叠群间仍有间隙 顺序间隙 物理间隙 ↓ ↓ 载体或宿主菌 选用不当而被丢失的顺序测序时遗漏的测序解决办法:通过相邻已知顺序作为探针筛选已有的基因组文库解决办法:利用其它宿主菌与载体重新构建文库两种测序的结果比较分析:两种测序的结果比较分析:两个研究组将数据进行的对比以及人类基因组工程的科学家、《科学》和《自然》杂志高级指导编辑的评估表明,塞莱拉公司的基因组分析与人类基因组计划的分析结果虽然存在一些差异,但大部分地方都有极高的吻合度。null测序技术也在不断地发展和提高。过去几年内,通过在一个测序的电泳胶上增加电泳泳道和测序胶的长度,使自动测序仪的通读水平提高了2-3倍。 毛细管电泳技术(CE,capillary  electrophoresis) 此外,一些不依赖于电泳技术来分离DNA片段的方法如质谱分析也正在或已经建立。杂交测序也是一项非电泳类方法。目前还有一种可用电子显微镜直接观察的方法。 人类基因组研究成果表明人类基因组研究成果表明基因数量少得惊人 人类基因组中存在“热点”和大片“荒漠” 三分之一为“垃圾”DNA 种族歧视毫无根据 男性基因突变比例更高null人类基因组草图基本信息人类基因组草图基本信息人类基因组 人类蛋白质由31.65亿bp组成 含3~3.5万基因 与蛋白质合成有关 的基因占2%61%与果蝇同源 43%与线虫同源 46%与酵母同源 人类基因组的功能区人类基因组的功能区人类基因组中的蛋白质编码区不足2%。 人类基因组中不编码蛋白质的重复序列(“junk DNA”)超过50%。 重复序列可能没有直接的功能,但参与染色体的结构形成和动态变化。在进化过程中,这些重复序列还与基因组重排、新基因产生、已有基因修饰和重排有关。 人类基因组中的重复序列(50%)明显高于拟南芥(11%)、线虫(7%)和果蝇(3%)。 null人类DNA二维图像人类DNA二维图像科学家绘制出最清晰立体人类基因组结构图 科学家绘制出最清晰立体人类基因组结构图 近日,美国科学家通过将人类基因组分成数百万个片段并重新排列组合,成功描绘出清晰度和分辨率最高的基因组三维图像。该图是引人入胜的分形体图像,这种技术能帮助科学家探索基因组的形状而不仅仅是其DNA含量对人类进化和疾病的影响。人类基因组中序列翻转的规律人类基因组中序列翻转的规律以缺失(deletion)、重复(duplication)和翻转(inversion)为主要形式的多态性结构突变体在人群中广泛存在。 首份个人基因图问世 2007年05月28日15:29 来源:法制晚报 詹姆斯·沃森   耗时不到两年 完成60亿个碱基对的测序 “DNA之父”获得“生命天书”   首份个人基因图问世 2007年05月28日15:29 来源:法制晚报 詹姆斯·沃森   耗时不到两年 完成60亿个碱基对的测序 “DNA之父”获得“生命天书”   人类基因组测序“完成”了吗?人类基因组测序“完成”了吗?关于如何界定人类基因组测序完成,有多种定义。根据不同的定义,人类基因组的测序是否完成有不同的看法。曾有多个大众媒体报道人类基因组计划“完成”,而且由国际人类基因组计划所采用的定义,基因组的测序已经完成。有统计数据显示, 截至2003年底,绝大部分的人类基因组已获得测定;但基因组中仍有许多的区域未获得测序。这其中的首要原因是在每条染色体的中心区域(称为着丝粒)含有大量重复DNA序列,用目前的技术进行测序的难度较大。着丝粒含有数百万(可能接近千万)的碱基对,其中的大多数完全没有得到测序。第二个原因是在染色体末端区域(称为端粒)同样含有高度重复的DNA序列。而且在46条染色体中,其末端大都不完整,因此无法精确地知道在端粒前还有多少序列; null与着丝粒的情况类似,目前的技术很难测定这些序列。第三个原因是在每个人的基因组中都含有多个包含多基因家族成员的位点,这些位点的测序问题用霰弹枪测序法难以解决,而包含于这些位点中的多基因家族成员往往编码具有重要免疫功能的蛋白质。对于前两个原因,可以通过发展新的技术来解决测序问题。除了以上区域,还有一些间隙散布于基因组中,部分间隙较大,但有希望在数年内解决。总而言之,对于全基因组的大小的估计显示了92%的基因组已经获得测定,余下的高度重复的DNA序列不大可能含有基因,但在完成所有的测序之前,没有什么是确定无误的。 null基因组时代(Venter,2003)的标志 全基因组层面的系统生物学观点;同一性(unity)和多样性(diversity)的问题;抽象思维与动态观点;结构与功能统一的观点。思想理论方法策略 大规模测序;蛋白质组分析;芯片技术;代谢群;生物信息学。技术层面 大规模;高通量;系统分析。“后基因组计划”时代“后基因组计划”时代完成测序后意味着结构基因组学的结束。所以,人们在从事人类基因组计划的同时,又同时盯上了人类基因组计划以后的领域,也就是所谓“后基因组计划”。使用“功能基因组学”一词也许能更好的表达这一设想的实质。 在阅读了人类基因组全序列后,我们还想知道这些序列起到的作用是什么?具有那一类的功能?生命的整体现象是如何形成的?等等,这一定将成为功能基因组学的主流。 基因组工作框架图基因组工作框架图基因组蛋白质组基本生物学特征 2. 与人体的相关关系 3. 生物界中进化的过程转 录 组重要功能基因生物信息学线索: 诊断 ?? 新药 基因诊断 基因诊断 疾病的根本原因: 疾病的各种表型的改变 是基因的改变造成的null基因诊断: 采用分子生物学的技术方法来分析受检者的某一特定基因的结构(DNA水平)或功能(RNA水平)是否异常,以此来对相应的疾病进行诊断。是病因的诊断。 基因治疗基因治疗 1986年著名的病毒学家Dulbecco提出由人类基因组序列获得的信息将有助于解释癌症的基本问题 ,其实这也就涉及到了基因治疗。null对于非传染性的人体自发性的疾病,主要是人自身的基因及其表达产物出了问题。而得到人类基因组的完整信息人们便可以找到致病基因, 克隆得到大量与致病基因相应的正常基因, 采取适当方法把正常基因放回到病人身体内去, 然后让进入体内的正常基因正常表达。这就是基因治疗(Gene therapy)。基因治疗基因治疗基因出现的问题,有几种可能:一是自身基因的异常或缺失。二是外源基因的攻击。 相应的对策:对于基因异常或缺失,就是设法加入正常的基因或产物,或补充缺失的基因或其产物,使其发挥应有的正常功能,例如直接加入最终表达物蛋白质。对于外源致病基因或自身病变基因,可以想办法使其不起作用,例如用化学药物阻止这些基因的复制、转录或翻译,或阻断其下游作用通路。 基因治疗基因治疗 基因置换:正常基因取代致病基因 基因修正:纠正致病基因的突变碱基序列 基因修饰:目的基因表达产物补偿致病基因 的功能 基因抑制:外源基因干扰、抑制有害基因的 表达 基因封闭:封闭特定基因的表达 人类基因治疗实例人类基因治疗实例1、复合免疫缺陷综合征的基因治疗 ADA缺乏症-——致死性疾病,患者由于腺苷酸脱氨酶(ADA)缺乏。 nullnullADA-Gene + vector (逆转录病毒) 重组分子 患者T Ly C IL-2刺激C分裂 导入 细胞生长分裂 10天 Gene表达 回输患儿体内 1~2月治疗一次, 10个月 患儿体内ADA水平达正常人的25% 腺苷脱氨酶(ADA)缺乏的 严重联合免疫缺陷(SCID)腺苷脱氨酶(ADA)缺乏的 严重联合免疫缺陷(SCID)病因: 淋巴细胞缺乏ADA酶 腺苷、dATP堆积 破坏免疫功能 患儿很少活到成年第一个基因临床治疗的(1990.9.14,NIH)治疗策略: 淋巴细胞ADA酶 恢复至正常水平的 5%-10% 维持免疫系统功能 改善病人症状2、黑色素瘤的基因治疗2、黑色素瘤的基因治疗肿瘤Gene治疗是人们十分关注的问题,进行了广泛的探索。研究发现,肿瘤浸润淋巴细胞——TIL,它积聚肿瘤部位,并在该处持续存在而无副作用,利用此特点协助治疗肿瘤。例:细胞因子基因治疗和肿瘤坏死因子基因治疗 例:细胞因子基因治疗和肿瘤坏死因子基因治疗 ①IL-2 Gene ②TNF-Gene (白介2) (肿瘤坏死因子) 逆转录病毒载体 导入 TIL(体外培养的自体细胞) 回植患者体内 TIL进入自体肿瘤部位,提高细胞因子杀伤肿瘤细胞 的作用。遗传信息迅猛增长 ——生物芯片开发的动力遗传信息迅猛增长 ——生物芯片开发的动力HGP使动植物、微生物基因组序列得以测定,基因、蛋白质序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。 生物芯片生物芯片生物芯片能通过平面微细加工技术在固体芯片表面构建的微流体分析单元和系统,以实现对细胞、蛋白质、核酸以及其他生物组分的准确、快速、大信息量的检测。null生物芯片的类型生物 芯片DNA芯片蛋白质芯片组织芯片细胞芯片其它芯片样品制备芯片核酸扩增芯片毛细管电泳芯片微缩芯片实验室基因科研用于人类疾病治疗取得重要进展 基因科研用于人类疾病治疗取得重要进展 科学家在对一些遗传性很高或较高的疾病的研究中,如地中海贫血、肌肉萎缩、乳腺癌等疾病的研究中,各国科学家已找到了200至300个致病基因,约占遗传病的1%。其它疾病如白血病通过基因分析,也对发病机理有了新的认识。 各国科学通过基因检测和使用基因药物,已能治疗一些疾病。如用基因注射法治疗一碰就出血的血友病。美国科学家运用破坏性基因治疗脑肿瘤,将外来破坏性基因接入脑肿瘤细胞,已取得了比单纯开刀更好的疗效。 在今后5至10年中,各国科学家在基因研究中将携手攻关的重点放在糖尿病、动脉硬化、焦虑症与抑郁症、高血压、老年痴呆、精神分裂症、乳腺癌,以及其它一些癌症的探索上。 法医学上的应用法医学上的应用个人认识 亲子鉴定 性别鉴定 除了上面基因治疗的例子外,我们还有一些有趣的问题 一些人类的不良行为是否与基因有关呢? 我们能否通过服食一颗药丸来实现减肥计划?美国研究发现不良行为与基因变异有关 !美国研究发现不良行为与基因变异有关 !     美国研究人员说,有3个基因或许可以帮助解释,为什么一些生长在混乱社区或残缺家庭的年轻男子会成为暴力犯罪者,而其他人则不会如此。            据报道,北卡罗来纳大学的研究显示,一个叫MAOA的基因可影响反社会行为,而且它的存在相当普遍。研究人员说,拥有MAOA的一种叫2R的变异基因的人倾向于发生犯罪和违法行为。            这个团队以约2万名7年级到12年级的男孩为研究对象。他们定期对这些人进行访问,并采集了一些血样。他们发现3种基因(MAOA、DAT1和DRD2)中一些特定变异类型同不良行为相关,但只有当这些男孩遭遇家庭、社交和学习成绩问题等压力时,不良行为才会出现。   肥胖蛋白—leptin肥胖蛋白—leptin肥胖蛋白leptin是脂肪细胞产生 的,如果你越胖的话,你产生的肥胖蛋白leptin也越多。如果遗传上的脂肪含量不变,暂时的体重减轻只是临时的,短暂的。血栓形成也与基因有关 ! 血栓形成也与基因有关 ! 迄今为止,我们只知道老年人、血脂高者和缺乏锻炼者,其体内较容易形成血栓,但最新一期《自然》杂志却报道说,科学家们已识别并成功地定位出了一个名为“VKORC1”的基因。 它在危害人体的血栓形成的过程中发挥着重要作用。这一发现将有助于人们进一步寻找出治疗心律不齐及冠心病等疾病的新疗法。 德国、英国和美国的科学家在各自独立的实验中,以产生了抗药性的实验鼠和血栓患者的基因为研究对象,并与天生就具有抗血栓特性人的基因进行比较,结果科学家们说,这个基因可以帮助人们理解血液稀释药物的工作原理。 我国国际上首次确定雀斑致病基因位置 我国国际上首次确定雀斑致病基因位置 人人都想拥有一张净白无瑕的脸,雀斑一直困扰着这些爱美人士。最近,我国科学家在国际上首次确定雀斑致病基因位置,发现在人类第4号染色体的某个区域中存在雀斑致病基因。为找到雀斑致病基因并最终根治雀斑奠定了重要的基础。 所以,市面上的激光去斑、药物去斑等方法都只是治标不治本。只有从基因上入手,才可能彻底根治雀斑。为此,科学家采用全基因组扫描技术,通过对一个中国汉族雀斑大家族的样本进行分型和连锁分析,导致弱智与癫痫的基因变异 导致弱智与癫痫的基因变异 近日科学家首次发现人体内一个基因如果发生变异,有可能会同时导致弱智与癫痫。这个新基因,位于人体X染色体上。他们对全球范围内9个有遗传病史的家族进行研究后发现,该基因发生特定的变异,不仅会引发多种癫痫症状,而且也会导致弱智。 他们的研究还显示,该基因似乎对与人大脑正常认知功能相关的其他一些基因具有调控作用,可以影响这些基因的工作时间和方式等。科学家们因此推测,受新发现的这种基因控制的其他基因,在癫痫或弱智的发病过程中可能也起到了一定作用。 科学家指出,识别出该基因,将有助于更好地对有相关病史的家族进行癫痫或弱智的诊治。 语言产生可能与基因变异有关 !语言产生可能与基因变异有关 !为什么人类可以说话,而动物则不能?德国科学家最新研究发现,20万年前发生在一个基因上的两次关键的变异可能和语言的产生有关。这一研究为说明该基因在人类语言能力的发展中所扮演的重要角色提供了强有力的证据。研究人员认为,语言的优势使人类能够排挤掉那些比较原始的竞争对手。变异基因赋予人类祖先更好的控制嘴巴和喉咙肌肉的能力,从而使他们能够发出更丰富、更多变的声音,为语言的产生打下基础。 PROBLEMPROBLEM体细胞Gene治疗符合伦理道德,没有争议。 生殖细胞Gene治疗可能改变正常人的遗传特征,存在某些争议。然而生殖细胞的基因治疗又是一个不容回避的课题,因为它比体细胞基因治疗更为彻底。所以,随着分子生物学技术的发展,Gene治疗技术的成熟,将回答伦理道德方面的问题,相信生殖细胞的基因治疗将会被人们接受。 null进一步寻找切实有效的基因 精密调控外源基因在人体内的表达 体细胞移植和重建的生物学研究 减少外源基因对机体的不利影响 PROSPECT ?=无限商机  科学家是否在扮演上帝 ?   你打算生出“优化基因”的孩子吗? 个人基因信息属不属于个人隐私? ………… questions The end The end
/
本文档为【人类基因组】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。 本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。 网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。

历史搜索

    清空历史搜索