促红细胞生成素受体在肿瘤细胞株中的表达

中华胃肠外科杂志 2006年 7月第 9卷第4期 Chin JGastrointest su职，July 2006，Vol 9，No．4 355 · 短 篇 论 著 · 促红细胞生成素受体在肿瘤细胞株中的达 李勇 马建华 龙跃平 【摘要】 目的 研究促红细胞生成素受体(EPOR)在肿 瘤细胞中的表达。方法 用 RT．PCR方法测定多种肿瘤细胞 株 EPOR mRNA的表达。结果 16种恶性肿瘤细胞有 EPOR mRNA表达 ，2种耐药恶性肿瘤细胞株和嗜铬细胞瘤元表 达。结论 促红细胞生成素受体在多种恶性肿瘤细胞内表 达，可能参与肿瘤贫血的发病机制。 【关键词】 促红细胞生成素受体；RNA，信使；表达，肿瘤 重组人促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)用于癌症患 者贫血的治疗，疗效确切 ⋯。EPO与细胞表面的 EPO受体 (erythmpoietin receptor，EPOR)结合而发挥作用。本实验研究 EPOR在多种恶性肿瘤细胞株中的表达，为进一步研究EPOR 在肿瘤细胞中表现的生物学行为打下基础。 一 、资料与方法 1．资料：本科室培养的 19种肿瘤细胞株，其中16种为恶性 肿瘤细胞株，2种为恶性肿瘤耐药细胞株，1种为嗜铬细胞瘤。正 常人骨髓作为阳性对照，小鼠骨肉瘤细胞作为阴性对照。 2．方法：RT．PCR扩增方法见 [21。引物序列：上游引物 5'-CCTCCTC．CTCATCTGCrI1rG．3’；下游引物 5~GGCCTCGCCA TCCCTGrrrCCATAAG3’；产物长度为 404 bp，用 1．5％的琼脂 糖凝胶 电泳照相。提取总 RNA的 TR~OL购 自美 国 Invitrogen公司，聚合酶链反应的 Taq酶购自美国 Promega公 司，M．MLV逆转录酶购自美国 Invitrogen公司。引物由上海博 亚生物合成。PCR扩增仪为美国P．E公司 PE一2400型。 二、结果 16种恶性肿瘤细胞有 EPOR表达，2种耐药恶性细胞株 和嗜铬细胞瘤元表达。见表 1。 表 1 各种肿瘤细胞 EPOR mRNA表达结果 作者单位：430022 武汉 ，华中科技大学同济医学院附属协和 医院普通外科 三、讨论 晚期癌症患者多伴有贫血 ，其原因可能是 EPO分泌相对 不足，骨髓对 EPO反应性降低，细胞因子抑制骨髓造血的作 用等 ⋯。临床上应用重组人红细胞生成素治疗癌性贫血，疗 效确切 【‘． 。但 EPO与 EPOR在肿瘤贫血机制中的作用还需 要深入的研究。 EPO是一种蛋白类激素，含 165个氨基酸，与靶细胞表 面的 EPOR结合而发挥作用。一个 EPO分子在细胞表面结合 两个受体 。目前发现，EPOR在多种细胞表面表达 】。本实 验亦证实在肝癌、肺癌、宫颈癌、胆囊癌、乳腺癌、卵巢癌、胰 腺癌均有 EPORmRNA表达。EPO对肿瘤细胞的生物学效应 报道不一。Arcasoy等“ 发现在鼠合成 R3230Ac乳腺癌细胞 内加入抗 EPO抗体、可溶性 EPOR及 Jak2抑制剂，肿瘤生长 迟缓。Ribatti等⋯ 发现 EPOR在血管内皮及肿瘤细胞上的表 达与肿瘤恶性程度呈正相关，且与肿瘤血管生成范围高度相 关，认为 EPO在胃肠道肿瘤血管生成中有营养作用。本实验 结果中，在恶性肿瘤细胞耐药株及嗜硌细胞瘤中没有 El'OR 表达，其机制需要进一步研究阐明。 参 考 文 献 l 赵学伟，何建苗 ．重组人促红细胞生成素治疗肿瘤相关性贫血 ． 中国生化药物杂志，2003年，24：54．55． 2 J．萨姆布鲁克 D．w拉塞尔著．黄培堂译 ．分子克隆实验指南． 第 3版 ．北京：科学出版社，2002．161．170． 3 李黎波，罗荣城 ．癌性贫血患者血清促红细胞生成素的检测及 临床意义 ．第一军医大学学报，2003，23：954．955． 4 Cretkovic RS， Goa KL． Darbepoietin alfa in patients with chemotherapy-related anaemia．Drugs，2003，63：1067．1074． 5 王朝霞，施为建 ．促红细胞生成素治疗晚期非小细胞肺癌化疗 所致的贫血 ．中国癌症杂志，2003，13：356．358． 6 Masuda S， Okan o M， Yamagishi K， et a1． A novel site of erythmpoietin production． Oxygen·dependent production in cultured rat astmcytes．J Biol Chem，1994，269：19488·19493． 7 李静 ．促红细胞生成素与红细胞生成的调控 ．国外医学临床 生物化学与检验学分册，2001。22：239．240． 8 Batra S，Perelman N，Luck LR，et a1．Pedia c tumor cells express erythmpoietin and a functional erythmpoietin receptor that promotes angiogenesis and tumor cell surviva1．Lab Invest，2003，83：1477· 1487． 9 Arcasoy MO， Jiang X， Haroon ZA．Expression of erythyropoitin receptor splice variants in human cancer． Biochem Biophys Res Commun，2003，307：999·1007． 10 Arcasoy MO，Amin K，Kamyal AF，et a1．Functional significance of erythmpoietin receptor expression in breast cancer． Lab Invest， 2002．82：91l-918． 1 l Ribatti D， Marzullo A， Nico B。 et a1． Erythyopoietin as an angiogenic factor in gastric cacinoma．Histopathology，2003，42： 246．250． (收稿日期：2005．02．18) 维普资讯 http://www.cqvip.com