扶正养阴方辅助高强度聚焦超声治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

墅蕉题苤查2塑堡垒旦箜!鲞筮垒塑鱼垫』堂!趔剑垒：盘逊垫鳗：燮：2№：璺 扶正养阴方辅助高强度聚焦超声治疗 兔肝VX2肿瘤的实验研究 ‘ 刘艳红，潘锦瑶，杨齐华，贾林 基金项目：广东省中医药管理局资助项目(No．401019) 作者单位：510180广州市第一人民医院中医科 通讯作者：潘锦瑶，E-mail：panjy5152@sina．咖 【摘要】 目的探讨扶正养阴方联用高强度聚焦超声(mFU)治疗兔肝VXz肿瘤的治疗效果。方 法 30只兔肝VX2肿瘤模型随机分为HIFU组(}玎Fu照射)、联用组(mFU照射+扶正养阴方)和对照组 (不予任何治疗)，每组10只，治疗后监测肿瘤体积、丙氨酸氨基转移酶(A工T)，脏器转移及组织病理学改 变等。结果HIFU组与联用组的肿瘤体积较对照组缩小，差异有统计学意义(P(0．05)，但HIFU组与 联用组差异无统计学意义。治疗后28d，联用组和HIFU组的ALT低于对照组(P<0．05)且联用组降低 更明显(P<0．01)。联用组未发生肺转移，HIFU组有2只发生肺转移，对照组全部发生肺转移。超声 和病理检查均提示HIFU治疗后肿瘤组织变性坏死。结论扶正养阴方联用HIFU能有效地抑制兔肝 VX2肿瘤的生长，可为mFU联用中药治疗肝癌的临床研究提供实验依据。 【关键词】高强度聚焦超声；VX2肿瘤：扶正养阴方；兔 【中图分类号】R454．3；R735．7【文献标识码】A【文章编号】1671—6450(2008)04一0207—03 1kⅡ比瑚阳蚯cem!ctofnl曲蛐髀ngy劬decoctionm鳓antwithlli；曲intensityfocusedultrmmmdOnVX2liv- crclBloerInrabbits：锄experimentalstudyHUYan-hong，PANJin-yao，YANG函缸船，eta1．O|晖,anmentof TraditionalChineseMedicine，g'neFirstPeople’5HospitalofQ埘咖，Guangdong，C删／gT．hou510180，China 【Abstract】ObjectiveToexperimentthetherapeuticeffectofFuzhengyangyindecoctionassistantwithlash intensityfocusultrasound(HIFU)ontheVX2liverct锄iicerinrabbits．～k岫odsTotally30rabbitswhichinducedwith VX2锄c盯inliverwel'edividedinto3groups，HIFUgroup(HIFUtherapy)，combinationgroup(HIFUassistantwith Fuzhengyangyindecoction)，andcontrolgroup(withoutanytreatment)，each殍Dupinvolved10rabbits．Thevolumeof tumor，ALT，metastasis，andpathologicalchangeswerefollowedupduringthestageoftreatment．ResultsThevolume ofB．unoI"inthecombinationgroupandHIFUgroupdecreasedobviouslythanthecontrolgroup(P<0．05)，although therew私110significantstatisticaldifferencebetweenthesetwotreatmentgroups．Fourweekslater．theALTofHIFU tg"oupandthecombinationgrouplowerthanthecontrolt目roup(P<0．05)。andthecombinationgroupgotmoresig— nificantresults(P<0．01)．Therewerenometastasisincombinationgroup，but2ofHIFUgroupandallcontrol groupwel'emetastasizedIolung．Ultrasoundandpathologicalreportsupportedthefinalresults．ConclusionThe FuzhengyangyindecoctionassistantwithHIFUhadbettertherapeuticeffectinVX2livercallcerinrabbitliver．Thispri— marilyexperimentalstudyprovidesthefoundationresultstOtheclinicresearchofthecombinationtherapyonlivertu· mot． 【Keyword8】Hi【ghintensityfocusedultrasound；VX2tumor；Fuzhengyangyindecoction；Rabbim 肝癌是我国高发的恶性肿瘤，迄今其死亡率已 上升至恶性肿瘤的第2位。临床上肝癌的治疗常采 用手术、放疗、化疗、介入等综合治疗措施，但预后极 差⋯。高强度聚焦超声(HIFU)治疗肝癌是目前临 床证实有效的治疗之一，但从中医观点看，HI． FU为热毒之邪，耗伤阴津。本研究采用兔肝VX2肿 瘤模型，探讨扶正养阴方联用HIFU照射治疗兔肝 VX2肿瘤的疗效。 1材料与方法 1．1材料(1)实验动物：纯种新西兰大白兔30 万方数据 ·208· 筮堕瘟盘查垄堂堡垒旦筮Z鲞箜垒塑堂』丛￡趔划鱼：蛔!!鲤：巡：2№：垒 只，雌雄不限，体质量1．5～2．0kg，月龄3～4个月。 由广州医学院动物中心提供和饲养。(2)细胞株： VX2肿瘤细胞株由中山医科大学提供，VX2肿瘤起 源Shop病毒诱导的兔乳头状瘤衍生的鳞癌，是一种 可移植的肿瘤细胞株，具有浸润性生长、高转移等特 点。(3)HIFU治疗机：HIFU治疗系统为海扶JC．1型 高强度聚焦超声肿瘤治疗系统，治疗参数：频率1．6 MHz，焦距105inn'l，输出功率170W。 1．2兔肝VX2肿瘤模型建立将VX2肿瘤细胞悬 液[(2—3)×l@／m1]接种于大白兔后腿外侧肌肉内， 2周后可扪及一实质性包块，即制成皮下移植瘤模 型。取出瘤体，在无菌条件下去包膜，剪成l··吼3的 均匀组织瘤块，准备原位移植。30只实验兔移植前 10min给予麻醉，待完全麻醉后将其仰卧位固定于 动物手术台上，于兔上腹部剑突下1cm处作一纵行 切口，长约2．5cm，暴露肝脏，将右中央肝叶牵出体 外，在其隔面距上缘约lcm处作一小切i=i，将肿瘤 块植入肝实质内，缝合肝包膜，肝叶放回腹腔，依次 缝合切口。术后3d内实验兔注射青霉素60万U／ 只，荷瘤兔2周后进行治疗。 1．3实验分组及处理将荷瘤动物随机分为3组： (1)对照组(10只)：不给予任何治疗。(2)HIFU组 (10只)：行HIFU治疗，将荷瘤兔麻醉后仰卧固定于 治疗床上，启动超声定位监视系统，确定病灶部位， HIFU治疗探头作x、Y、z轴立体扫描运动，确定治 疗范围。然后治疗探头从体外依层面顺序适形治疗 每个层面的肿瘤组织，使整个肿瘤发生凝固性坏死。 (3)联用组(10只)：HIFU治疗加用扶正养阴方治疗。 治疗前1d开始灌服扶正养阴中药汤剂(主要包括 黄芪、太子参、石斛、花粉、麦冬、茵陈、蛇舌草、鳖甲、 全蝎、半枝莲、虎杖、板蓝根，炙甘草等)，每日1次， 每次15fIIl，连续灌服28d。 1．4观察指标(1)观察动物的精神状态及饮食等 一般情况；(2)治疗前及治疗后7d、14d、28d测体 质量变化、肿瘤大小变化。使用超声仪器测量肿瘤 的体积，大小用公式：V=心／2(a、b分别为超声测量 所得的肿瘤最长径和最短径)；(3)监测丙氨酸氨基 转移酶(ALT)；(4)术后28d解剖荷瘤兔，观察肿瘤 内脏转移情况；并取肝脏肿瘤病灶在光学显微镜和 透射电子显微镜下(H-600HⅡ’Acm)观察组织结构 改变。 1．5统计学方法采用SPSSi1．5统计软件。计量 资料用均数4-差表示，多组均数比较采用单因 素方差，组间两两比较采用SNK法。P<0．05 为差异有统计学意义。 2结果 2．1一般情况对照组食欲逐渐降低，活动少，精 神状态差，HIFU组和联用组则较前有好转，并较对 照组有明显的改善。 2．2体质量变化治疗前3组兔体质量差异无统 计学意义(P>0．05)。治疗后联用组和HIFU组体 质量增加，对照组减轻，3组比较差异有统计学意义 (P<0．05或0．01)。见表1。 表1术前及术后7、14、28d体质馈变化情况(j+，，k) 组别n 术前 7d 14d 28d 对照组lO 1．582±0．03l1．487士0．0281．4474-0．0251．416±0．044 }删组101．579±0，0361．620±0．034。i．660±0．032。1．714±0．036‘ 壁!基丝!!!：墅圭!：堕!：塑!!：堡竖：!：!兰!!：堕竺!：婴!!：塑：? 注：与对照组比较，‘P0．05)，治疗后7d开始联用组和 HIFU组肿瘤体积与对照组比较，差异有统计学意义 (P<0．05或0．01)。见表2。 表2术前及术后7、14、28d肿瘤体积 变化情况(i±，，r甜) 组别n 术前 7d 14d 28d 对照组lO mnI组10 联用组lO 注：与对照组比较．’P<0．06，’P<0．01；与HIFU组比较 2．4 ALT变化治疗前各组ALT轻度升高，3组比 较差异无统计学意义(P>0．05)。治疗后第1天 联用组和HIFU组ALT均明显升高，7d后逐渐下 降，2组比较差异有统计学意义(P<0．01)，而对照 组ALT逐渐升高，3组间比较差异有统计学意义 (P<0．05)。见表3。 表3术前及术后1、7、14、28dALT情况(。±。，U／L) 组别n 术前 术后1d 术后7d 术后14d 术后28d HIFU组1044．8±2．384．8±2．3。81．4士3．3”75．6±3．7’39．8±2．0’ 堡旦望!!箜：!!!：!翌：!!j：!：!堑：!!!：竺!塑：!!!：!：!!!：!!!：!：! 注：与对照组比较，’P<0．01；与HIFU组比较．oP<0．01 2．5转移情况术后1个月解剖大白兔，对照组全 部发生肺转移，HIFU组有2例发生肺转移，联用组 未发现转移情况。 2．6超声观察肿瘤表现为圆形或近似圆形的均 匀低回声病灶，无包膜回声，周围可见声晕。经m— FU治疗后，靶区的超声灰度立即增强，随时间延长， 灰度逐渐减弱．2min后超声灰度变化稳定。彩色多 普勒显示肿瘤周围及内部血流信号不论是静脉或动 脉均显示减少，周围正常肝组织内可见较多的血管 勰吼掰枷曲却俩咐m 2 2 l{宝吼拼 O O O +一 ± ±劲掰姗魄嘟啷枷枷却嘶％％ l O O咖眦瞄蚰枷如Ⅲ蜘渤 O O 0 万方数据 墅壁瘟盘查2坚生垒旦筮2鲞箜垒塑鱼也』垡鱼!型蚓垒：△四12鲣：型：!№：璺 影。图l，2见封3。 2．7病理观察处死荷瘤兔，剖腹见肿瘤在肝实质 内呈结节状，无包膜。肿瘤结节灰白色，鱼肉样，质 硬，其内可见丰富的供瘤血管，剖开肿瘤中心可见灶 性坏死。光镜下HE染色可见肝内浸润性癌巢，与 肝实质无明显边界，癌细胞核大，深染伴核异型。电 镜下观察治疗后靶区细胞出现不可逆损伤，细胞膜、 核膜、细胞器消失，细胞核碎裂、核溶解。图3～6见 封3。 3讨论 VX2肿瘤病理形态为低分化鳞癌，新生血管丰 富，其血供主要来源于肝动脉，兔肝VX2肿瘤与结 节型进展期肝细胞癌较为相似，目前作为理想的原 位肝肿瘤实验模型，广泛应用于肝癌的影像学和局 部治疗研究怛J。 HIFU照射是一种无创、安全、有效的体外“切 除”肿瘤新技术，将体外低能量非电离辐射超声波聚 集于体内靶组织或肿瘤病灶而形成高能量区，利用 热效应、空化效应、声化学效应及机械效应等生物学 效应，使局部靶组织出现凝固性坏死，达到灭活癌细 胞目的[3】。治疗过程中，诊断超声实时定位，实时判 断治疗效果和反馈性控制治疗剂量，对任意大小和 形状的肿瘤病灶实行三维适形扫描治疗，而不损伤 靶区外组织HJ。 中医认为肝癌属于肝积、癜瘕、积聚、膨胀、黄疸 等范围，HIFU是对瘤体进行高温烧灼，属热毒之邪， 易伤阴耗气、损液灼津。荷瘤兔经HIFU治疗后出 现肝损伤，ALT升高，导致HIFU相关性肝炎等不良 反应。扶正养阴方可充分发挥中药在扶正固本、清 ·209· 热护肝、养阴生津等方面的优势。方中黄芪、太子 参、石斛、花粉、麦冬为益气养阴之品，可培本固源， 为君药；茵陈、蛇舌草、虎杖、半枝莲、板蓝根为清热 解毒之品，可驱除HTFlJ治疗引起的热毒之邪，为臣 药；鳖甲、全蝎活血软坚，是为佐药；炙甘草调和诸 药，为使。全方攻补兼施，培补而不助邪，攻伐而不 伤正。实验证明扶正养阴方可降低转氨酶，改善术 后的肝损害。 杨齐华等『51研究表明，扶正养阴方能够调整荷 瘤兔的整体功能，纠正免疫功能的紊乱。本实验表 明：扶正养阴方与HIFU联用从扶正、祛邪两方面使 肿瘤缩小，减少远处转移(肺转移抑制率为100％)， 改善动物食欲和精神状态。因此，充分发挥HIFU 和扶正养阴方2种治疗方法结合的优势，取长补短， 以争取在中西医结合治疗肿瘤方面取得重大发展， 提高远期疗效。 参考文献 1王太洪，章明，李伟兵，等．高强度聚焦超声治疗肝脏肿瘤76例 [J]．现代联学，2006。34(5)：346-347． 2裴小青，李安华，梁惠宏，等．超声造影评价兔肝VX2肿瘤射频消 融疗效的研究[J]．中国超声医学杂志，2006，13(8)：573—576． 王PichardoS，Mi]]eretR·CuridL，eta1．Invitroexpeaimentalstudyonthe treatmentofsuperficialVPmg]IUSinsmCficiencywithhigh-·intensityfocusedul—- na&mnd[J]．UltrasoundMet]Biol，2006，32(6)：883．891． 4 LeslieTA，J(e帅曲JE．蛐ghintensityfocusedultrasoundinthetreatmeat 0fabdominalandgynaeemlogicaldiseases[J]．IraJHyperthem'fia。2007，23 (2)：173—182． 5杨齐华，潘锦瑶，贾林，等．扶JE养阴方联用高强度聚焦超声对兔 vx2肝癌体液免疫功能的影响[J]．中华实用医学，2005，12(1)： 3-5． (收稿日期：2007一鸺一27) 第四届国际络病学大会征文通知 为推动络病学学科深入发展，经中国科协批准，由中华中医药学会主办、中华中医药学会络病分会承办的第四届国际络 病学大会拟于2008牟lO月在南京召开(具体时间、地址另行通知)，参会者授予国家继续教育I类学分，现征集参会论文，具体 事宜如下： l征文内容(1)络脉及络病理论的文献整理研究；(2)络脉与络病的理论探讨；(3)运用络病理论指导诊治心血管、脑血管、 周围血管、糖尿病血管并发症、肿瘤等疑难病经验总结或验案报道；(4)运用络病理论指导治疗上述疑难病的创新药物研究； (5)通络治法及通络药物治疗疑难病的I临床研究；(6)／g用现代科学技术对络病理论及通络药物的研究；(7)国外中医药学发展 现状及络病理论的推广应用前景；(8)络病学教学经验与方法学探讨。 2征文要求(1)论文要求未公开发表，正文不超过4000字，摘要150～300字，附中英文摘要。(2)论文以wofd稿打印，注明 作者姓名、工作单位、通讯地址及邮编、第一作者电子邮箱。 3截稿时间2008年8月30日(以邮戳为准)。 4收稿地址论文(附论文软盘)寄至：050035石家庄天山大街238号，河北以岭医药集团络病研究室贾振华，信封注明 “国际络病学术大会”字样。 电子邮件发至：iiatcm@163．corn；邮件标题命名为“会议投稿”联系电话：0311—85901553；13933096670。 万方数据 扶正芥阴方辅助高强度聚焦超声治疗兔肝VX二肿瘤的实验研究 l正I配2l】7i) 图1 II,l，犏种mJ，j：川由i{’H超一圳钏像 图2 1TIl7U术竹m11i】l趟』*废度7墅化 图3 j、H0免、×J_t岍】|l|l蝴怀乍 图4 Jt镜I、皑忡j常IⅢ旭(_111x4(1( 粤 遗 图5 IllI、L}俐』‘』斤4Ⅷ靶K橱钏胞坏此菥图6}U镜观察IiIFuii刊J’jcj4Ⅷ钯】引旧细胞 悱 ‘o’．．缔“【∞!增乍if：rr(¨I、40q)) }r’-缃袭乩．尢完整的圳胞嚣(×4I)1)O 磁共振断层血管成像对而肌瘁挛病冈的诊断价值 3I)ro[¨。州娃一1 【谢量¨¨I引【．1H LMK^‘_IiJ、小帖^J、劫 I*饥⋯l H tⅢ摧 ‘o：_‰‰删斟、，r^№打¨世岫Ⅲ≮ ‘ __0 瞪 峪 i ∞|耋==!二图 万方数据 扶正养阴方辅助高强度聚焦超声治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究 作者： 刘艳红， 潘锦瑶， 杨齐华， 贾林 作者单位： 广州市第一人民医院中医科,510180 刊名： 疑难病杂志 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF DIFFICULT AND COMPLICATED CASES 年，卷(期)： 2008,7(4) 参考文献(5条) 1.杨齐华;潘锦瑶;贾林 扶正养阴方联用高强度聚焦超声对兔VX2肝癌体液免疫功能的影响 2005(01) 2.Leslie TA;Kennedy JE High intensity focused ultrasound in the treatment of abdominal and gynaecological diseases[外文期刊] 2007(02) 3.Pichardo S;Milleret R;Curiel L In vitro experimental study on the treatment of superficial venous insufficiency with high-intensity focused ultrasound[外文期刊] 2006(06) 4.裴小青;李安华;梁惠宏 超声造影评价兔肝VX2肿瘤射频消融疗效的研究[期刊论文]-中国超声医学杂志 2006(08) 5.王太洪;章明;李伟兵 高强度聚焦超声治疗肝脏肿瘤76例[期刊论文]-现代医学 2006(05) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_ynbzz200804006.aspx