高效液相色谱法测定银杏叶胶囊中银杏内酯的含量

2o09年第 7期 11 24 )。③先天因素。空肠憩室因憩室炎引起大网膜粘连．网 膜部分或环柬状压迫空肠，引起该段肠管排便受限、肠管扩 张，其壁变薄，以致大便经常在此堵塞，细菌及毒素从近端或 憩室渗透到腹腔，致腹腔与空肠粘连。本组患者 2例(占总数 的 5 )。 治疗原则是早期明确诊断，除有肠绞窄、坏死、腹膜炎、中 毒性休克等表现外均积极行保守治疗，尽量不施行手术，因为 手术治疗并不能消除粘连，相反地 ，术后必然还要形成新的粘 连，所以对单纯性肠梗阻，不完全性梗阻，特别是广泛性粘连 者，一般选用非手术治疗。粘连性肠梗阻如经非手术治疗不 见好转甚至病情加重，或怀疑为较窄性肠梗阻，特别是闭袢性 梗阻，手术须及早进行，以免发生肠坏死[3]，对反复频繁发作 的粘连性肠梗阻也应考虑手术治疗。 非手术治疗主要包括以下内容：①胃肠减压 ，通过胃肠减 压吸出胃肠内气体和液体，可以降低胃肠内压力，减轻腹胀， 改善肠壁血液循环。在此期间要定时观察 胃肠液的颜色，一 旦发现胃肠液为血性则表明有绞窄的可能[|]。②矫正水，电 解质紊乱和酸碱平衡。大多数肠梗阻患者都有水电紊乱及酸 碱失衡。③抗菌素的应用。有效的抗菌素应用，可预防和治 疗细菌感染，减少毒素的产生和吸收。本组 36例中通过非手 术治疗 l8例(占 50 )治愈。 手术治疗．手术是引起肠粘连的主要原因，但手术也是治 疗粘连性肠梗阻的重要手段。因为粘连性肠梗阻有约 1O ～ 25％可以发生绞窄性肠梗阻。加之粘连性肠梗阻多伴有不 同程度的肠扭曲，易发生肠扭转。本组 36例中手术治疗 18 例(占5O )。手术方法应按粘连的具体情况而定：①粘连带 和小片粘连可施行简单的切断和分离。②广泛粘连不易分 离，且容易损伤肠壁浆膜和引起渗血或肠瘘，并再度引起粘 连，所以对那些并未引起梗阻的部分，不应分离；如因广泛粘 连而屡次引起肠梗阻，可采用 Noble法，行小肠折叠排列术， 将小肠顺序折叠排列，缝合固定于此位置，以避免梗阻再发 生。③如一组肠袢紧密粘连成团引起梗阻，又不能分离，可将 此段肠切除做一期肠吻合；倘若无法切除，则作梗阻部分近、 远端肠侧吻合的捷径手术，或在梗阻部位以上切断肠管，远断 端闭合 ，近断端与梗阻以下的肠管作端侧吻合[5]。在手术时 需用大量温盐水冲洗腹腔，以减少腹腔内渗出液中毒素吸收。 总之，我院治疗粘连性肠梗阻的常规是：尽量采取非手术 治疗，严密观察病情变化。一旦发现病变 ，应根据情况及时行 手术治疗。尽可能减轻患者的痛苦，减少患者医疗费用。 参考文献 [1] 王德娟．剖腹术后腹膜粘连发生机制和预防的研究现状 及进展．中华小儿外科杂志，2OO5；5(5)：273． [2] 曲永利．肠梗阻189例诊治分析．实用中西医结合临床， 2OO8；8(3)：77～78． [3] 邱应福．腔镜下粘连松解术治疗粘连性肠梗 阻的探讨． 腹腔镜外科杂志，2o08；13(4)：325～326． [4] 袁胜平．急性肠梗 阻手术治疗临床分析．实用临床 医 学，20O8；9(9)：71～72． [5] 王丽亚，霍习敏．40O例小儿粘连性肠梗阻病因分析．中 国全科医学论文，2003；9(9)：72． 高效液相色谱法测定银杏叶胶囊中银杏内酯的含量 朱洲华 杨 娟 摘要：目的：应用 HPLC—ELSD法测定银各叶胶囊中银杏 内酯 A、B、C及白果内酯的含量。方法：采用 Cl8色谱柱(Kr0masil， 4．6×25Omm，5 m)，以甲醇一水为流动相梯度洗脱，ELSD雾化温度为 5O℃，裁气 N2流速为 1．2L／Min。结果：测得银杏内酯 A、B、C及白果内酯分别在 2．18 g—l6．35 g、2．10 g—l5．60 g、0．59 g一8．85 g、O．73 g一9．9O g线性关系良好；银杏内酯 A、B、C及白果内酯的平均回收率分别为97。28 、97．68 、98．34％、99．52 。结论：该方法简单、准确可靠，分离效果好；本方 法可用于银杏叶胶囊的质量评价。 关键词：银杏叶胶囊；银杏内酯 A；银杏内酯 B；银杏内酯C；白果内酯；HPLC— ELSD法 Detem inati帆 Of Ginkgo BiIOba CapsuIes in GinkgOlides ZHU Zhouhua YANG Juan The Sec0nd PeOpI s H0spital 0f Guangshui 432721 Abstract：0bjective：T0 estabiish the quantitative method of Terpene Lact0nes in Ginkgo Capsule by HPLC—ELSD．Method：The * 广水市第二人民医院(432721) 2O09年 6月 19日收稿 12 内蒙古中医药 column used was a Diamonsil Cl8(4．6×25Omm)paked with a 5 m stationary phase．The mobile phase consisted of Me0H — H20．The temperature of ELSD was 5O℃ and the nebulizer nitrogen flow rate was l_2L／Min。Result：The liner range of the four c0mp0nents was 2．18 g一16．35 g 、2．1O g— l5．6O g、O．59 g一 8．85 g、O．73 g一 9．9O g respectively．The mean recoveries of the f0ur c0mponents were97．28 、97．68％、98．34 、99．52％respectively．C0nclusion：It was proved that the meth0d with HPLC — ELSD was reliable，simple．well separated and precise，which could be used as principle of quantitative analysis． Key wor．ds：GinkgO Capsule；Ginkgolide A ；Ginkg0lideB ；Ginkgolide C；Bil0balide；HPLC— ELSD 中圈分类号：R927．2 文献标识码：B 文章编号：1006—0979(2oO9)07—00l1—04 银杏叶胶囊是由银杏叶提取物与适量的基质混匀后经压 制而成的。银杏叶提取物中含有银杏内酯和银杏黄酮等成 分，其中银杏内酯包括银杏内酯 A、B、C和白果内酯等，具有 扩张冠状动脉血管，增大脑血流量及改善脑营养与明显的抗 血小板活化因子等药理作用。银杏内酯的含量测定方法有很 多，如薄层色谱法Ⅲ、HPLC— UV法Ⅲ、HPLC— RI法 、 GC— MS法[4]等。近几年来，有报道采用 HPLC—ELSD测 定银杏叶提取物中银杏内酯的含量[5 ]。但在制剂中测定银 杏内酯含量的报道较少，由于制剂中其他成分的干扰，使测定 四种成分不易成功，如文献[ ]报道用 HPLC— ELSD仅测定 了银杏内酯 A和 B两种成分。因此，本文经过优化提取条 件，使基质对测定无干扰，并采用 HPLC— ELSD测定了银杏 内酯 A、B、C和白果内酯四种成分。结果表明该方法分离效 果好，稳定性和重现性好，可以为建立银杏叶胶囊质量控制方 法提供依据。 l 仪器、试药与试样 MettIer T_oled0 Al2O4型电子分析天平，戴安 TCC一1oO 检测器，戴安 P68O泵 ，戴安变色龙色谱数据工作站银杏叶胶 囊(芜湖绿叶制药有限公司生产)。 对照品：银杏内酯 A、银杏内酯 B、银杏内酯 C、白果内酯 (供含量测定用中国药品生物制品检定所)甲醇(HPLC级，山 东禹王实业有限公司) 2 色谱条件 色谱柱：C18(Kromasil，4．6×250mm，s m)；流动相：甲 醇一水 ，洗脱梯度为：甲酵 3O％(维持 llmin)，甲醇 3O 一 4O (9min)，甲醇 4O (维持6min)，甲醇40％一3O％(4nlin)， 甲醇 30 (1Omin)，流速 1．O mL t min_。。ELSD检测器，雾化 温度为5O℃，载气 N2流速为 1．2L／Min。 进样量为对照品 1O L，l5 L'8 L，5 L．样品 1O L。 3 方法与结果 3．1 对照品溶液的制备：分别精密称取银杏内酯 A、B、C及 自果内酯对照品适量，加甲醇制成每 lm1分别含 1．09mg、1． O4mg、O。59mg和O．66mg的混合溶液，即得 。 3．2 供试品溶液的制备；取本品内容物约 2．4o62g，精密称 定。精密加人甲醇 5Oml，称定重量．超声处理 2Omin，敖冷，再 称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，滤液蒸 残 渣加水 1Oml，水液加 2 盐酸溶液 2滴，用乙酸乙酯萃取4次 (15ml、1Oml、10ml、1Om1)，合并萃取液，乙酸乙酯液用 5 醋 酸钠溶液 2Oml洗涤，分取醋酸钠液，再用乙酸乙酯 1Oml洗 涤。合并两次乙酸乙酯液 ，用纯水水洗 2次(2Oml、2om1)。上 述所有水液合并后用乙酸乙酯洗涤 1次(1Om1)。合并乙酸乙 酯液蒸干，残渣用甲醇溶解并定容至 5mL。即得。 按以上色谱条件得到对照品及银杏胶囊 的色谱分离图， 如附图所示： 3 稳定性试验 取待测供试品溶液，定时(O、1、2、4、6、24小时)进行测定， 银杏内酯 A、B、C及白果内酯的峰面积积分值的平均值分别 为 16．O36(RSD一2．4％)、18．287(RSD一2．7 )，14．99O (RSD=2．8 )1．162(RSD一2．9 )。 4 精密度试验 精密吸取对照品溶液 1O L，重复进样 5次，银杏内酯 A、 B、c及白果内酯的峰面积积分值 的平均值分别为：16．O96 (RSD一1．7 )、18．283(RSD—1．8 )、15．866(RSD一1．6 ) 和 1．183(RSD一1．5 )。 5 线性关系的考察 分别精密吸取对照品溶液 2、5、8、1O、l5 L，依次注人液 相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积的常用对数 为纵坐标，以进样量的常用对数为横坐标，绘制曲线，回 归方程见表 l。 裹 l 6 重现性试验 取同一批次的银杏叶软胶囊各 5份，按供试品溶液制备 项下操作，按前述测定方法测定，银杏内酯 A、B、C及白果内 酯的含量分别为 4．46o6 mg／g，5．O7O2mg／g，3．8Oo9mg／g，2． 2326 mg g 结果表明此法重现性良好。 7 回收率试验 采用加样阿收试验法，精密称取已知含量的同一批银杏 2OO9年第 7期 13 叶胶囊 lg(银杏内酯 A、B、C及白果内酯的含量分别为：4． 46O6 mg／g，5．07O2mg／g。3．8OO9mg／g，2．2326 mg／g．，精密加 人对照品溶液 lml(每 lm1分别含银杏内酯 A、B、C及 白果内 酯对照品 6．69oomg、7．6O53mg、5．7O11mg和 3．3489mg)，按 供试品溶液制备项下操作，测定，测定结果见表 2。 8 样品测定结果 分别精密吸取对照 品溶液 5 L、15flL与供试 品溶液 10 L，注人液相色谱仪，依上述色谱条件侧定，以外标两点法 对数方程分别计算银杏内酯 A、B、C及白果内酯的含量，测定 的样品结果见表 3。 4 讨 论 4．1 蒸发光散射检测器的载气流速和漂移管温度是影 响实验结果的两个重要可调节参数。实验中经过反复、仔细 调节参数，可得到最优信噪比及平稳基线。 4．2 实验结果表明采用不同的银杏叶提取物做成的制剂中 银杏内酯 A、B、C及白果内酯之间的比例及总量均存在差异。 参考文献 [1] 颜玉贞，谢培山，钱浩泉．银杏叶提取物及制剂枯类内酯 薄层色谱荧光扫描定量测定研究．中国中药杂志，1997， 寰 2 22(3)：159 池静端，刘爱茹，徐礼梁．HPLC法测定银杏叶三种 内酯 成分．药物分析杂志，l998，18(6)：367 Van Beek T A，Scheeren H A，Rant T，et aI．Determi— nation ofginkgolides and bilobalide in ginkgo bno ba leaves and Ph0tophamaeeutieals．J Chromatogr，l991， 543(2)：375 Chauret N，J Carrier M Maneini，et al，Gas chr0mac0一 graphicmass speetr0metric anaIysis 0f ginkgoIides pro— duced by Ginkgobiloba CeU Culture． J Chll0matogr， 1991，588：281 田南卉，王劫，厉进忠．高效液相色谱珐蒸发光散射检测 器测定银奋叶提取物 中内酯的含量．药物分析 杂志， 1997， l7(4)：282 颜玉贞，谢培山．HPLC— ELSD法测定银杏叶中的 4 种格类内酯含量．药物分析杂志，200l，21(3)：l73 吕伏生，陈伟，冯芳等．ELSD检测法测定银杏酮酯注射 液中银杏内酯 A，B的含量．中国药科大学学报，2OO1， 32(1)：34 ] ] ] ] ] 】 嘲 嘲 嗍 嘲 Ⅲ 内蒙古中医药 a 日 业 忸 目地 一— ⋯ U一 一⋯ 一一 ⋯ — 一 一 一 b 附图 银杏软腔囊 HPLC色谱 图 a．对照品 b．供试品 c．阴性泣 1．韫 杳内醋 C 2．白果 内酯 3．银杏 内醣 A 4．韫杏内酯 B 医院感染监测统计分析 杜 勇英 杨 南’ 谢 蓉 C 摘要：目的：了解我院院感发生率、抗生素使用情况以及发生医院感染耐药茵的情况。方法：以回顾性调查的方法，对我院 2OO7 年 14352份住院病人病历抽查结果进行统计分析，抽查病历 l449份。结果：14352位住院病人，282人发生医院感染，总感染率 为 1．96％。l449份病例抽查结果统计，医院感染发生率前三位分别是呼吸内科 8．72％，风湿血液科 8．52 ，消化科 5．56 。 医院感染部位前三位分别是下呼吸道感染 63．82 ，泌尿道感染 14．54 ，上呼吸道 6．4 ；抗 生素使用率前三位为普外科 1OO％，泌尿外科 98．85 ，呼吸内科 93．2O ；医院感染病原茵主要是革兰氏阴性 茵 58．33％；结论：切实落实医院感染控制措 施，加强抗生素合理使用，是降低医院感染发生率的关键。 关键词：医院感染；监测资料；统计分析 Statical Analysis 0n M onitOring Data Of H0spitaI Infecti0n DU Yongying YANG Nan XIE Rong The 416th HOspital Of Nuclear Indust1．y，Chengdu，61O051 Abs￡l。act：Purpose：Discussed situati0n 0f the hospital infection，the way 0f using antibiotics and the drug— resistant strain occur— ration in N0．4l6 hospitaI． Meth0ds：Picked up 1449 samples from 14352 paitients in the year of 2OO7 in rand0m and analyzed the result by statistical meth0ds．Resuh：In l4352 patients。282 of them occurred h0spital infection(1．96％)．In 1449 samples，there were 3 departments of h0spital which got high hospital infectIon．There were：the department 0f respiratory(8．72％)，the depart— ment of rheumat0id hemato10gists(8．52 )and the department of gastroenterol0gy(5．56 )．The hospital infection often hap— perled in 10wer respiratory tract cavity(63．82 )，urinary tract(14．54 )and upper respiratory tract cavity(6．4％)．There were 3 departments 0f hospital which got high usage of antibiotics．There were：the department 0f general surgery(1O0 )，the depart— ment 0f urinary surgery(98．85 )and the department of respiratory(93．20 )．The h0spitals infection strain were mainly gram— negative bacteria(58．33 )．Result：To find a way to control the hospital infection in an effective way and use the antibi0tics rea— s0nably is the most impOrtant way in reducing the hospital infection． Key wor‘ds：Hospital infection；Monitoring data；Statistical Analysis 中图分类号：R195 4 文献标识码：B 文章编号：lO06一O979(2O09)07一O014一O3 * 成都市核工业四一六医院(6l005】) 2009年6月 22日收稿 一 n筻