斯络舒牌丹参麻葛降压胶囊中丹酚酸B含量的测定--1

斯络舒牌丹参麻葛降压胶囊中丹酚酸B含量的测定 A2 丹酚酸B的测定 照高效液相色谱法（附录Ⅵ D）测定。 1. 试剂与材料 1.1乙腈、甲醇、甲酸：为色谱纯。 1.2水：为实验室用水，过膜。 1.3丹酚酸B对照品：中国药品生物制品检定所； 1.4对照品溶液的制备：精密称取丹酚酸B对照品适量，加75%甲醇制成每1ml含0.14mg的溶液，即得。 1.5供试品溶液的制备：取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流1小时，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 精密称定约0.5 g物，置于25 mL具塞试管中，加入75%甲醇水超声提取3次（每次15mL），合并滤液于50 mL容量瓶中，用75%甲醇水定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 um）滤过，取续滤液进HPLC分析。 2. 仪器与设备 2.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器。 2.2 超声波清洗器。 1仪器与试药 岛津20A高效液相色谱仪；AL204电子分析天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）；KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所，批号：MUST-12020104）；供试品；乙腈、甲醇、甲酸为色谱纯，纯水过膜。 2色谱条件 色谱柱：月旭XB-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相：甲醇-乙腈-甲酸-水（30：10：1：59），检测波长：286 nm，柱温：25 ℃，进样量：20 μL，总流速：1.0 mL·min-1，按以下流动相梯度分离： Time Module Action Value 0.01 Pumps B.ConC 30 30 Pumps B.ConC 80 35 Pumps B.ConC 30 50 Pumps B.ConC 30 50.01 Controller Stop 3.1对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定0.0038 g，加75%甲醇水溶解制得760 ug/ml的丹酚酸B对照品溶液。 3.2样品溶液的制备 取斯络舒牌丹参麻葛降压胶囊，精密称定约0.5 g内容物，置于25 mL具塞试管中，加入75%甲醇水超声提取3次（每次15mL），合并滤液于50 mL容量瓶中，用75%甲醇水定容，摇匀，微孔滤膜（0.45 um）滤过，取续滤液进HPLC分析。 4实验结果 4.1线性关系考察 精密吸取丹酚酸B对照品（760 ug/ml）溶液0.050 ml，0.100ml，0.170 ml，0.300 ml，0.340ml分别加入75%甲醇水1.950 ml，1.900 ml，1.830 ml，1.700ml，1.660 ml，微孔滤膜（0.45 um）滤过，取续滤液，即得标准溶液。精取各浓度对照品溶液20 μL，按“2”色谱条件进行测定,得色谱图1，分别平行进样两次，记录峰面积，取平均值。得下1和图2。 图1 标准品色谱图 表1 丹酚酸B标准品浓度与峰面积关系表 浓度/(ppm) 19 38 64.6 114 129.2 峰面积 228614 535587 1105288 2128537 2410578 图2 丹酚酸B标准品浓度与峰面积关系图 以峰面积（A）对浓度（c）进行线性回归计算，得丹酚酸B回归方程为：A=20177c-190424，R^2=0.9991，结果表明丹酚酸B在19-129.2 μg/mL与峰面积呈良好的线性关系。 4.2样品含量测定 按“3.2”项下方法制备供试品溶液，取20uL平行进样2次，按“2”项下方法测定丹酚酸B含量，得样品色谱图3。将样品和标准品色谱图做比较，保留时间约为16.0 min，可进行定性。将测得的样品峰面积（若大于线性范围内标准的峰面积，需对样品容易进行稀释），代入丹酚酸B回归方程得出样品溶液的浓度，乘上样品的稀释倍数后得斯络舒牌丹参麻葛降压胶囊中丹酚酸B的含量。 图3 样品色谱图