SBT 10387-2004 畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定

ICS 67.120 X 04 备案号:14168-2004 中华人民共和国国内贸易行业 SB/T 10387-2004 畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定 Determination of furazolidonein meat of livestock poultry and aquatic products 2004-08-04发布 2004-09-01实施 中华人民共和国商务部 发 布 SB/T 10387-2004 月U 青 本标准由中华人民共和国商务部提出。 本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾 病预防控制中心参加起草 本标准主要起草人:周深、金社胜、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。 本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。 SB/T 10387-2004 畜禽肉和水产品中肤喃哇酮的测定 1 范围 本标准规定了畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的测定方法。 本标准适用于畜禽肉和水产品中吠喃哇酮的检验。 2 原理 样品中吠喃噢酮用二氯甲烷提取，经无水硫酸钠柱净化，用正己烷去脂肪后，。45 pm微孔滤膜过 滤，滤液进行HPLC。 3 试荆与试液 以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。 3.1 乙睛:优级纯，作流动相用。 3.2 乙腊:色谱纯。 3.3 乙睛水溶液:乙腊+水((80+20,V/V), 3.4 正己烷。 3.5 甲醇:色谱纯。 3.6 无水硫酸钠:经650℃灼烧4h后，，贮于密闭容器中备用。 3.7 无水硫酸钠柱:6 cmX1.8 cm，内装5 cm高的无水硫酸钠(如果无合适的玻璃柱，可以用10 mL 注射器代替) 3.8 二氯甲烷。 3.9 磷酸。 3. 10 吠喃哩酮标准品:纯度99.'7%0 3. 11 吠喃哇酮标准储备液:称取10. 0 mg峡喃哇酮，用乙睛水溶液((3.3)溶解并稀释定容至50 mL棕 色容量瓶中，保存于冰箱中。该液1. 0 mL相当于200 fag吠喃哇酮。 3. 12 吹喃哇酮标准工作液系列:精确吸取吠喃噢酮标准储备液2. 0 mL于50 mL棕色容量瓶中，加水 至刻度，摇匀，即得8. 0 pg/mL的溶液，然后精确吸取此液。.05,0.10,0.20,0.50,1.0,2.0 mL，分别放 在10. 0 mL棕色容量瓶内，分别加水至刻度，摇匀，即得每毫升含0.04,0.08,0. 16,0.40,0.80,1.60 pg 的标准系列溶液。 4 仪器和设备 4. 1 高效液相色谱仪:附紫外检测器。 4.2 超声波清洗器。 4.3 旋涡混匀器。 4.4 离心机。 4.5旋转蒸发仪。 4.6 微量进样器:25 pL, 5 测定步骤 51 提取与净化 取200 g试样纹碎，称取混匀的绞碎的试样10 g(精确至0. 01 g)，于100 mL具塞锥形瓶中，加 1 SB/T 10387-2004 25 mL=氯甲烷，超声提取5 min,提取液通过无水硫酸钠柱滤人100 mL蒸发瓶中，继用25 ml二氯甲 烷重复提取一次，均通过无水硫酸钠柱滤人同一蒸发瓶中，用二氯甲烷 15 mL淋洗无水硫酸钠柱。淋 洗液合并于同一蒸发瓶，滤液于旋转蒸发仪上蒸发至干(水浴温度为300C-350C). 然后准确加人1.0 mL乙睛水溶液和1. 0 ml正己烷于旋涡混匀器上混匀2 min，转入5 ml离心 管中，3 000 r/min离心2 min后(鳗鱼需离心10 min)，用吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加人 1 mL正己烷，混匀2 min，离心，用吸管移去上层正己烷层，下层清液通过。.45 pm微孔滤膜过滤，滤液 供HPLC分析用。 5.2 色谱测定 5.2.1 液相色谱参考条件 a) 色谱柱:Hypersil ODS2 C18,250 mm X 4.6 mm,粒径5 pm; b) 流动相:乙睛+水(40+60)，每1 000 mL加1. 0 mL磷酸; c) 流速 :1.0 mL/min; d) 检测波长:365 nm; e) 柱温:室温。 5.2.2 肤喃哇酮标准曲线的制备 依照上述色谱条件，分别进标准工作液各个点。每个标准液进20 pL,测定其峰面积，然后以标准 液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数。 5.2.3 样品测定 在上述色谱条件下，准确吸取20 pL试样溶液，进行HPLC分析。 结果 3.1 计算 将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(1)计算供试样品中吠喃哇酮的 含量。 cX V X 1 000 m X 1 000 (1) 式中 : X— 样品中含有吠喃哇酮的含量，单位为毫克每千克(mg/kg) ; c— 被测液中相当于标准曲线的吠喃哇酮，单位为微克每毫升(pg/mL) ; V— 被测液的体积，单位为毫升(mL) ; rn— 样品质量，单位为克(9)。 2 检 出限 本方法的检测限为。. 01 pg/mL，当取样量为10 g时，最低检测量为1. 0 ug/kg 允许差 同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的15%0