丹参酮微乳的制备及大鼠在体肠吸收

第 �� 卷第 期 大刃! 年 ∀ 月 中 国 中 药 杂 志 #恤∃ %侧目∃ &∋ 吐 #址此舰 (到比州巨( 侧山)& ∗ + ∋∃ �� , 肠叨, ∋∋ 】− , 岌刃! . /0舫)& 廿+ 1 +2 3 & )4+ /+ 4+ 56 4,7 81 恤 054 访#& 9+ 1 2+ 4 ,布,) 9:, 0 翻比 扮∃ ∃ 儿如即”53 ) 翻甲训如舰3 ;及尹川耐川 .加扮∃ < 」 = 冰月: , ∋∋ 9 >助 , ?. ≅Α Β‘魂叱 , ΧΒ.≅ Α 6& 。冲 , >Δ≅Α Ε 5 , Ε. ≅ Α #Φ曲Γ, +2 丹口蒯叮 % 咖咯 从即蒯 ,凡毋认 肠曲叮 朋加阮川 9 耐哪”匆 , Η8 加 , 加�� , #肠阴 Ι ?+ 7 ϑ9 < Κ ϑΦ, 奴坛怕卫哈司 户川阴能忱∃ +2 此 哪曲口‘∃ 0 找兄侧∃ 2+4 ,压沈9:, 0时 丘叨∃ )呷记山呱 (< 触日 Λ 9 ∃ 8叱 司晌耳‘佣 例卿比8石∃ 即< <枷甲‘+ 1 1吐,Μ Ι 尸 ΔΚ山币1 , “, 拍1 山旧∋声∃ 目巨 , 户脚8二记 以目 凡如卯月助∃ 如山哪画Γ − &7 阮 01 ∃ 曰4Κ 6# 找犯 1 ∋1Ν 沁山Δ ,7 , ∃议 , 油 , 二 ∃明, Κ闭 , 助< ϑΦ& +两3 加妇 加1山< + ∃ +2 &< 助咧+1 朋< <彻栖+ 1 +2 ϑΦ, ,任沈 Γϑ8 :, 8呼袖即∃ − 川”山诫 肠∃ 目ϑ Λ Ο Π 81 > = , : , 乎川】朋脚涵佣 阵面− 伪 朋< − 叱∋忱曰 ϑ+ 054 听 ϑΦ, ,肠吮‘:, 钾< 81剐加湘姗 )呷记山呱 口伟 吧 件币口画 , 川∃ 此∃ ∃ − ∃ ∃ 阁油Θ司 。 阮 肠9+Ρ 8昭 Λ Σ∗ ;Θ以刃:+∋ − Ι − 0∋, , Τ∋ 泊加ϑ ∃ 户州昭<场盯翔沙‘以− 杭ϑΦ + 1佣心 +2 � ∃ Υ Σ: · Θ 一, , �= 面1 过, 4 , ϑΦ, )+∋ − − Ρ ∃ Φ闭 袱ϑΦ Χ Σ: Ρ创比4 , � Σ: �= ς < 坛川。 , 6 Σ:Ω= ς ,山阴< , � Σ∗ != ς ∃山目加】皿< Ω Σ ∗ ΞΩ ς ,山∃ 怕】,心侧, 9:, ∋Κ∃ 肠, 以地山 ∃ 曰匆ς 助< 仍ς ,山∃ 阅9, < 5奴, Ρ, 4, )+ 1 ), 1 ϑ4& 抚刁 ϑ+ 户翻 ϑΘ, 训48 ∀ ,< ,2 介ϑ8 : , 脚Δ4ϑ ∃ #加< ∃ 山∃ 犷几, 0 5“ϑΚ +2 ϑΦ& 州ϑ&∋ ,任比9, 三吧曰,1ϑ& 81 ϑΦ, 0耐5 ) ϑ − 5/ ϑ+ �∀ ∃ Μ! ς ∃ (‘, 卯− , 81 > = , +川< 反 机9 5创月 81 7, 四刚吨 即< 卿梅8刀‘ϑΦ& ,压戈9:, 脚Δ4ϑ 玩肋 八如即− 侧叩记山姗∃〔众 , , 。八如」 八心即− )呼汕映绷 Ψ 旧化成闹 Ψ 即卜山‘ 1 Ψ 助血卿山。此 Ψ 皿昭3 即以∃ 。如 耽脚曰如1 助< 0也访)西+ 1〔资任幼辑 的 , 〕 丹参酮微乳的制备及大鼠在体肠吸收 李红磊 ’,� , 张忠义 , ‘ , 马蓄蓄, , 陈小宇’ ; ∃ 南方医科大学珠江医院 药荆科 , 广东 广州 Ω =� Μ� Ψ � ∃ 解放军总后勒娜第 门诊部 , 北京 仪ΗΙ �∀ Ι 〔摘要 目的 Λ 制备丹参酮徽乳 ;?助一(Ζ Ι ,并考察其性质及大鼠在体肠吸收特性。 方法 Λ友娜山 多功能电 位 [粒度分析仪浦定 ?助一(Ζ 的较度及其分布 , 原子力显徽镜观察徽乳较子形态 ,建立侧定肠回流液中丹参酮 1 ‘的 Β/∴#侧定方法。 绪∃ 二?&1 一桃乳摘平均粒径为;�� ∃ �Ω 土 ∀ ∃ ΩΞ Ι 13 , 粒度均匀 。 肠吸收实脸结果表明%、1 一(Ζ 能 促进丹参酮在大鼠小肠的吸收 ,但 ∃ 恤刀∋一(Ζ 吸收速率受 ,∋袖一(Ζ 水相含ϑ 形响较大 。 摘论山叨 ∃ (Ζ 制荆能够促进丹 参酮在大鼠小肠的吸收 , 提高丹参附的生物利用度 。 【关 ∃ 甸 ] 丹参酮 Ψ 徽乳 Ψ 肠吸收 【中圈分类号』Ο �Μ � ⊥文橄标识妈』. ⊥文章幼号」 == 一�=� ;双刃! Ι 一= �Υ很 丹参酮 1 ‘ ;枉叹∃ 拍− , 1 ‘ Ι是丹参脂溶性有效成分之一 , 具有扩张冠状动脉 ,增加心肌收缩力等作 用 , 是临床治疗冠心病的常用药物。 由于丹参酮 1 . 在水中的溶解度小 , 含丹参酮 1 Ψ 的普通制荆;如片 剂、胶囊 、顺粒剂等Ι生物利用度不高 , 直接形响了 ⊥收稿日用 ] �加巧仍 一 Μ 〔逻讯作者 ] ∃ 张忠义 ,刊 Λ ;似ΠΙ∀ ∀Υ �Υ ΞΞ · = � Υ · 临床疗效 。 徽乳;而)− 5】78+1 Ι是由水相 、油相 、表面活性剂及助表面活性剂以适当的比例形成的一种 透明或半透明 、低猫度的热力学和动力学稳定的系 统 , 乳滴粒径范围为 = 一 ++ 13 。 采用微乳作为药 物载体可增大药物的溶解度 , 提高药物的生物利用 度 , 且具有靶向作用川 。 本实验采用体内可生物降 解且有良好生理相容性的油酸乙醋和油酸为油相 、 脚5加 Ω Ω 为表面活性剂 、乙醉为助表面活性剂 第 �� 卷第 1 期 �= = ! 年 ∀ 月 中 国 中 药 杂 ,志 #Φ8 1 & %+ 5门& ∋ +2 #创恤侧犯 ( & ϑ, < & (侧山)& ∗ ΠΔ ∃ � � , Δ77 5 , %5 1 , , �;ΗΙ ! 制备了丹参酮 ∋∋ . 微乳 ;ϑ&1 7Φ8 1 + 1 , 7 ∋∋ . 而,4+ , 3 5∋ Γ 78 + 1 , ?& 1 一(Ζ Ι , 测定了平均粒径 , 研究了 ? & 1 一(Ζ 的 理化性质 , 并对 ?& 1 一(Ζ 的大鼠在体肠吸收行为进 行了初步考察 。 仪器与材料 恒温水浴锅;Σ 5 ,Φ 8 Β , & ϑ8 1 Ν Σ&ϑΦ Σ 一 Υ Ξ = , Σ 5 , Φ8 俪ϑ_ , < &1 < Ι Ψ (&∋ :, 1 一 �《ΗΤ 〕Β 6 光子相关分光光度计 ;(&∋ : , 1 Δ1 7ϑ45 3 , 1ϑ ∴ϑ< , 9⎯ Ι Ψ Β ∴ 一 Δ型恒流蠕动泵 ;上海沪西生化仪器厂 Ι Ψ ΜΩ 一 型恒温磁力搅拌器 ;常州国华有限公司 Ι Ψ ∴# 一 ∀ . 高效液相色谱仪 ;6Φ83 &< _ 5 Ι , 6/> 一 ∀ . 紫外检测器 ;6Φ83 & < Χ 5 Ι , # Γ Ο∀ . #Β Ο Π(.?Π /. , 积分仪 ;6Φ83 & <7 5 Ι Ψ原子力显 微镜;6/( 一 Ξ Ω;ΗΙ %6 6Φ83 & < _ 5 Ι 。 丹参酮超临界 #= �提取物;实验室自制 , 含丹参 酮 1 . !� ∃ = ς Ι , 油酸乙醋 ;#/ , 上海飞祥化工厂 Ι , 三油酸甘油醋 ;#/ , 中国医药集团上海化学试剂公 司 Ι , 十四酸异丙醋;Δ/ ( , 美国 918 α, 3 & 公司 , 进 口 分装 Ι , 油酸 ;#/ , 汕头市光华化学厂 Ι , 6+ Φ8 ϑΔ’+ Β 6 Γ Ω ;Ο Ι;聚氧乙烯一 � 一经基硬脂酸醋 , 德国 Σ .6β公 司Ι , 无水乙醇;. Ο , 天津福晨化学试剂厂 Ι , 甲醇为 色谱纯;天津四友化学试剂厂 Ι , 其他试剂均为分析 纯 。 6> 大鼠 , 雄性 , 体重 ;��= 土 �= Ι Ν , 由南方医科 大学实验动物中心提供 ,许可证号 �《Η抖.= ∀ ! 。 � 方法与结果 � ∃ 微乳相图的研究 以 6+∋ 5 ϑ4+ ∋ Β 7 巧 为表面活性剂 、乙醇为助表面 活性剂 、油酸乙醋为油相 、蒸馏水为水相考察不同的 表面活性剂[ 醇;人万乙Ι对微乳形成区域的影响 , 见图 。 由图可以看出 , 当增加表面活性剂的用量时 , 即 随着 天万乙的增大 , 微乳区的面积增加 , 同时容易形成 粘稠的凝胶区 , 继续加水稀释后仍可形成澄明的 Π[ Ρ 型微乳 。 而随着 为介 的减小 , 即随着乙醇比例 的增加 ,凝胶区不断变小 , 同时微乳所能承载的最大 水相的量不断降低 , 该现象与文献报道的异丙醇和 丙醇作助表面活性剂情况相似川 。 同法 , 还考察 天玩 二 Μ Λ �时 , 油相分别为油酸乙酷 、十四酸异丙脂 ;Δ/( Ι 、油酸三甘油醋时的相图 ;图略Ι ,三者形成微 乳区域大小依次为 Λ Δ/( χ 油酸乙醋 χ 油酸三甘油 醋 ,其原因可能是油相物质的分子结构不同造成的。 但 Δ/ ( 形成的微乳区的微乳并不稳定 , 放置 ! < 后 出现轻微分层现象 ,其原因尚不清楚 。 图 不同孟万砚对微乳形成区域的影响 ;(Ζ 为微乳区 Ψ Α 为凝胶区 ΨΖ 为乳液区 Ι � ∃ Χ ?巨1 ‘(Ζ 的制备 表面活性剂的用量 , 选用 为1 二 Μ Λ � 制备 ? & 1 一(Ζ 。 根据微乳相图的研究结果 , 综合考虑体系中的 为提高微乳载药能力 , 作者采用油酸 一油酸乙醋 ;∋Λ · = � Ω · 第 �� 卷第 期 �;ΗΙ ! 年 ∀ 月 中 国 中 药 杂 志 #址 1 & %∃ 盯, &∋ +2 #址砚舰 (& ϑ, < & (侧叮)& ∗ ΠΔ ∃ � � , Θ 叨, %− , �加! �Ι 混合油脂为油相 , 将油酸乙醋 、油酸 、6+ ∋5 ϑ4Π Δ Β6 巧 和无水乙醉混合均匀后 , 再加人适量的丹参酮提 取物 , 超声溶解后 , 按比例加人熬馏水 , 边加边轻微 搅拌 , 即可得到红色澄明 ? &1 一(Ζ 。 � ∃ � ?&1 一(Ζ 形态学研究 将制备的 ?&1 一(Ζ 适当稀释后滴于新鲜解理的 云母表面 , 在空气中自然挥发至近干时 , 于室温进行 原子力显微镜侧量 , 观察到所制备的 ?. ≅一(Ζ 乳滴 呈均匀规则的球形粒子 , 见图 � 。 按照文献δ�] , 取 自然饮水条件下禁食 � Φ 的健康 6 > 大鼠�= 只 , 随机分为 Υ 组 ,每组 Ω 只 。 腹腔注射 = ς 水合抓醛溶液 ;= ∃ ΥΠ 3∴ · ε Ν 一 ’Ι麻醉 , 麻醉后 固定 , 沿腹中线打开腹腔;约 � ∃ Ω ) 3 长 Ι , 在十二指 肠上部和回肠下部分别插管结扎 ,用 �! ℃生理盐水 洗净肠内容物 。 将播管接蟋动泵 , 以切 3Δ% 的带刻 度量筒作为贮液装ϑ , 分别用前述的 ?胡 一( Ζ Δ , 1 , 皿和混悬液等Υ 种供试液各 Ω= 功∴ 进行回流 , 流 速为 == 3 ∴ · Φ 一’ , 待量筒内供试液体积示数稳定 后开始计时 , 回流 Χ Φ , 每隔 巧 面1 取样 ∋ 3∋∃ , 并补 加 毗 空白回流液 , 同时记下取样时量筒内供试液 体积示数 。 用 Β 0 ∴#测定样品中丹参酮 1 .的含量 。 表 在体肠回流液处方组成 供试液 丹参翻 肠∋5园 乙醉 油酸 油酸乙酸 燕馏水提取物[ 叱 Β6 Ω [ Ν [ Ν [ Ν [ Ν 电 混悬液 �! ∃ Ω ! ! ∃ � ∃ Μ = = Υ Ω ∃ = 徽乳 �;Ι Υ Ω ! ∃ � ∃ Μ ∃ Ω Υ ∃ Ω ΥΩ ∃ = 徽乳 1 Υ ∃ �Υ ! ‘ � ∃ Μ ∃ Ω Υ ∃ Ω ∀! ∃ Ω 徽乳且 Ω � ∃ =� ! ∃ � ∃ Μ ∃ Ω Υ ∃ Ω 兜 ∃ = � ∃ Ω ∃ � 肠回流液中丹参酮 1 .的含量测定 方法专 属性考察结果表明 , 在本色谱体条件下 , 空白回流液 对丹参酮 1 ‘的含全测定没有干扰 。 丹参酮 1 Ψ 在 � ∃ Μ� 、 ∀ ∃ � 叱 · 3 ∴ 一 ’ , 峰面积 ;. Ι对质量浓度 ;# Ι有良好的线性关系 , 回归方程 . 二 一 Ξ �Ω� ∃ � φ ΥΥ Υ Ω= Υ如# , Ψ γ = ∃ ΞΞΞ Ξ , 高、中 、低 � 种不同含量溶 液的 平 均 回 收 率 分 别 为 ΞΜ ∃ ∀Ω ς , = ∃ �Μ ς , ΞΞ ∃ ! Μ ς , Ο6 > 分别为 = ∃ Ω ς , = ∃ ! ς , = ∃ Ω ς 。 � ∃ Ω ∃ Υ 数据分析 根据 Β /∴# 测定的各时间点丹 参酮 1 ‘的质ϑ 浓度和供试液体积的变化 , 计算各时 间点丹参酮 1 ‘的残留率 ;Ο Λ Ι , Ο Λ 二 Λ 时残留药量 ;, ∃ Ι[ 零时药盆;ς Ι , Ο ‘与时间 Λ 的关系见图 Υ 。 以 , Λ值的对数对取样时间 。进行线性拟合 , 得到丹参 酮混悬液和 初 一(Ζ 大鼠在体肠吸收的曲线方程 Λ Κ γ 凡 Δ1 ;= φ Θ。 , ⎯∃ 为表观吸收速率常数 , Θ。为常数 相 ,结果见表 � 。 � 小结与讨论 在制备 飞助一(Ζ 过程中 , 本研究采用拟三元相 图优化法考察不同油相沐玩 值等对徽乳形成区域 的影响 , 结果表明� 油酸乙醋为油相时微乳形成区 域面积较大 , 适于 � ! 一∀# 的制备 ∃ % 当油相固定 时声孙‘增大 , 微乳区的面积增加 , 同时凝胶区面积 也增加渭万毛减小 , 即乙醉的比例增加 , 凝胶区变小 , 溉泪旧旧烟&∋∋ 脚因� 图 � !∀一#∃ 原子显徽镜照片 � % & ∋ ( 一#∃ 粒径及其分布测定 ∋( 一#∃ 粒径及其分布采用 )∗ +∋, −二 .一《// ,0 1 光 子相关光谱仪测定 2吸取 ∋( 一#∃ 原液 3 4 5 至侧+ 杯中 ,选用 677 (4 激光光源 , 测试温度为 �8 ℃ , 经 样品散射后的光在 99 “ 范围内变化不同的角度检 测 。 测得的 ∋( % #∃ 平均粒径为 : 7� % �8 土 6 % 8; < ( 4 , 且粒度分布均匀 , 如图 7 。 %余如 图 7 朋一#∃ 乳滴粒径分布图 � % 8 ∋( 一#∃ 大鼠在体肠吸收行为研究 � % 8 % 3 肠回流液中丹参酮 ( !的含量测定 色谱条 件为 0=>吧 ., −? ≅ Α 1 色谱柱 : & % 6 44 Β �8 Χ (Δ( , 8卿 < , 甲醇一水 : Ε 8 2 �8 < , 检侧波长 �Ε8 ( 4 , 流速 3 % Χ4 5 · 而( 一 ’, 进样量 3Χ 卜5 , 柱温 7 Χ ℃ 。 � % 8 % � 在体肠回流试验方法 按表 3 所示各供试 液处方 , 按照 � % � 所述方法分别制备丹参酮 ( ‘浓度 相同而水相含量不同的 7 种 ∋( 一#∃ 液 : ∋ ( , #∃ Φ 、介( 一#∃ ( 、 ∋( 一#∃ Δ? < 以及棍悬液为供试液 。 · 3Χ � 6 · 第 �� 卷第 期 �;ΗΙ ! 年 ∀ 月 中 国 中 药 杂 ,志 # Φ8 1 & %+5 4 1 & ∋ +2 # Φ 81 , 7, ( & ϑ, 48 & (,< 8)& ∗ + ∋∃ � � %5 1 , , Δ7 7 5 , �;ΗΙ ! 均高于混悬液组 , 表明微乳给药体系可明显促进丹 参酮的吸收 , 且有机相和水相的比例不同 , 微乳载药 体系对促进药物吸收能力也不同 Λ有机相 比例较大 时;如微乳 Δ Ι , 微乳载药体系仅表现出提高药物吸 收速率的趋势 , 但效果并不显著 , 而当水相比例达到 一定程度时;如微乳 1 、微乳 Ι , 微乳载药体系可 显著促进药物在肠道的吸收 , 其原因可能是有机相 比例较大时 ,微乳勃度较大 , 不利于 ?& 1 一( Ζ 液滴被 摄取吸收 Ψ增加水相的含量 , 可降低微乳的勃度 , 从 而有利于微乳被肠道摄取吸收 , 但当水相 含量达到 一定程度时 , 微乳勃度随水相变化甚微 ⊥’] , 这时改 变有机相和水相比例对改善药物速率影响甚微 , 如 微乳 1 和微乳 ∋ 的 ⎯ 。没有显著性差异 。 【参考文献 ] ϑ===,+,+幼的知,+加 才、并翻恨 恤Ρ 比 1 , , ( % , Ο , , 7 Α > ∃ ( 8,溉3 5 ∋7 8+ 1 一Θ朋,< 3 , < 8& &7 1 + : , ∋ < 45 Ν < ,∋8: , 4Κ 7Κ7 ϑ, 3 7 ⊥ %〕∃ . <Κ > 45 Ν >, ∋8: Ο , : , � ;Η Τ Ι , Υ Ω ;∋Ι Λ Μ Ξ 鲁 莹 , 吉小欣 , 高 申 , 等 ∃ 利多卡因—卵磷脂微乳处方的初步研究〔%〕∃ 药学实践杂志 , �以” , � � ;� Ι Λ Υ ∃ 杜志永 , 刘建平 , 朱家璧 , 等 ∃ 丹参酮 1 . 固体脂质纳米粒的制 备及大鼠在体肠吸收研究【%〕∃ 中国药学杂志 , �侧Β , �Ξ ;Μ Ι Λ ∀ ∃ 李红磊 , 张忠义 , 成海民 ∃ 丹参酮和丹酚酸复合微乳的初步研 究⊥ %] ∃ 中药材 , �以巧 , � Ξ ;Υ Ι Λ �! ∀ ∃ 月2%,7,7%�冉,Γ.%%55∗,∗,Η 图 & 不同时间 ∋? ? ?? !的残留率曲线 表 � 丹参酮混悬液和 ∋( 一# ∃ 在大鼠肠 吸收曲线方程参数 : ( 二 8< 供试液 Ι9 ϑ9 混悬液 3Ε % ;伪 8 土 � % � 7 Χ � 一 Χ % Κ Κ 7 Ε 士 Χ % 7 � 3 ; 微乳 3 ?Κ % &:< Κ Χ 士 � % � Κ 7 8 一 3 % &; � ; 土 Χ」翔 < 6 微乳 33 � � % �� ; ; 土 Χ % ; 7 ; & , ·� < 一 � % � 6 7 6 士 Χ % 7 8 7 Ε 微乳 3 � 3 % ΚΕ & 7 土 Χ % ; 8 7 Χ , ·� < 一 � % Χ ΚΚ Χ 土 Χ 7 Κ � Κ 注 2 ’》> Λ Χ % Χ8 , 与混悬液组比较 Μ � < > Λ Χ % Χ8 , 与微乳 Φ 相比 同时微乳所能承载的最大水相的量降低 。 综合考虑 微乳的形成区域 、载药能力以及可稀释性 : 即有较 大的水相含量变化范围 < , 最终采用 19 ?Δ +.9 ? 0 1 382 无水乙醇 2 油酸乙醋‘油酸比例约为 & 2 3 2 7 2 3 , 制备 了粒度均匀 、粒径较小的〔平均粒径 :犯 % �8 土 6 % 8; < ( 4 Ν ∋ ( 一# ∃ 。 在大鼠在体肠 吸收行为研究中 , 由图 & 和表 � 可以得知 , ∋ ( 一# ∃ Φ , ( , 333 的大鼠在体肠吸收速率 Ο.∗ Ο∋ . ∋ +− 9 ( 9Π +∋ (, Θ− ( 9 ( ∗ 而 Ρ . 9 ∗ 4 Δ? , −9 ( ∋( Σ −+, ∋ ϑ , 9 . Ο+−9 ( −( .∋ + −( + ∗ ,+−( ∗ −( ,−+Δ Δ 0 9 ( Τ 一?∗ − ? · � , Υ 0 ! ∀ Ρ Υ Θ9 ( Τ 一=− ? , #ς 玩− 一?∗ − ? , ∗ 0 ∃ ∀ Β −∋9 一扣 : 3 % Α叮犯材、瓜 9Π ΟΘ∋ 刀翔叫夺 , )Θ 可她(Τ 0≅ 1Ο −+∋? , ,9 时Θ∗ .( #七Σ −Ρ ∋? Ω( 诚., −+Β , ‘叨御夕加 “ 83 Χ� Κ� , ΞΘ −(∋ Μ � % Ψ− .,+ Ρ?− (−Ρ Α 甲∋ .+ 4∗ (+ 9Π Ξ5Α 9Π Ο胡 , Ζ∗ 访(Τ ?: //< 7 6 , ΡΘ −(∋ < [! 加+.∋ ∗ +〕 9 ϑ∴ ∗Ρ Σ ] ∗ 2 Θ >.∗ >∋. ∗ +∋ ( ,Θ− ( 9 ( ∗ 4 −∗ .9 ∗ 4 Δ ?, −9 ( : ∋( 一# ∃ < ∋ ( Σ −( ]∗ , +−Τ ∋+ ∗ − +, > .9 伴 .− +− ∗ , ∋( Σ +Θ ∗ ∋ϑ , 9甲+ −9 ( ∗ Θ∋ . ⊥ ∋Ρ +∗ . − ( .∋ + − ( +∗ , +−( ∗ −( , −+ Δ % # ∗ +Θ 9Σ 2 Θ ∗ 4 − ∗.9∗ 4Δ ?, −9 (, _ ∗ .∗ >.∗ Ο∋.∗ Σ ∋ ( Σ ∗ Θ∋.∋Ρ +∗ . −Υ ∗ Σ Δ , −( Τ ) ∗ +∋ > ∋? , ) ∗ +∋ > 9 +∗ 以−∋?⎯ >∋.+ −∗ ?∗ , − Υ∗∋( ∋? =, −, ∋( Σ ∋+9 4 −∗ Π9 .Ρ ∗ 4 −∗既∗ 9 >∗ % ! 0 Ο5Ξ 4 ∗ +Θ ∗Σ Π9 . Σ ∗ +∗ .4 − ( ∋ +−9 ( 9 Π +∋( , Θ−( 9 ( ∗ 33 ! −( +Θ ∗ − ( + ∗ , +−( ∋? Π? ΔΒ _ ∋, ∗ , +∋ϑ ?− ,Θ∗ Σ % α∗ ⊥ ,Δ? + 2 Θ∗ ∋( 一#∃ _∋, Π− (∗ Σ4 > ?∗ + _ −+Θ ∋( ∋]∗ .∋罗 Σ.9 >?∗ + , −Υ ∗ 9 Π : 7� % �8 士 6 % 8; < ( 4 % Θ ∗ .∗ ,Δ ?+, 9Π ∋ ( 一# ∃ ∋ϑ , 9印+−9 ( −( ,4 ∋? ? −( ⊥+∗ , +− ( ∋? − ( Σ − ∗ ∋+ ∗ Σ +Θ ∋ + ∋ ( 一#∃ ∗ 9 Δ? Σ −4 > .9 ] ∗ +Θ∗ ∋ϑ ,9印+ −9 ( ≅Π +∋ ( ,Θ −( 9 ( ∗ ?? 、 − ( .∋ + , 4 ∋? ? −( +∗ , +−( ∗ , ϑ Δ + +Θ ∗ ∋ϑ ,9 印 +−9 ( ∗ 9 ∗ 伍∗ −∗ ( + 9 Π ∋( 一# ∃ , Ι∋ _∋, −(Π? Δ ∗ ( ∗ ∗Σ ϑ= +Θ ∗ .∋+ −9 ≅Π _ ∋ +∗. 一>Θ∋, ∗ −( ∋ ( 一# ∃ % Ξ 9 ( Ρ】画9( 2 ∋ ??一# ∃ ∗ 9 Δ ?Σ − 4 >.9 ] ∗ +Θ ∗ ∋ϑ , 9甲+ −9 ( 9 Π + ∋ ( ,Θ −( 9 ( ∗ 33 、 −( .∋ + 94 ∋? ? − ( +∗ , +− ( ∗ % Θ Δ , ϑ −9∋ ] ∋− ?∋ϑ −?− += 9 Π +∋( , Θ−( 9 ( ∗ _ ∋, −4 >印] ∗ Σ % [ Ι ∗= _ 9 .Σ, Ν 4 − ∗ .9∗ 4 Δ ?, −9 ( Μ +∋ ( , Θ− ( 9 ( ∗ ?? 、 Μ − ( +∗ , .−( ∋? ∋ϑ , 9印+− 9 ( 〔资任编辑 鲍 雷〕 · 3Χ � Ε ·