通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏细胞外基质成分及代谢的影响

� � 基金项目: 国家重点基础研究发展计划 ( 973 计划) 项目 ( No. 2005CB523301) , 河北省科学技术研究与发展计划资助项目 ( No. 06276101D) 作者单位:河北以岭医药研究院(石家庄 050035) 通讯作者:吴以岭, Tel: 0311- 85901553, E-m ail: w ei_alice_0@ 163. com 通肾络胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏 细胞外基质成分及代谢的影响 吴以岭 � 魏 � 聪 � 王宏涛 � 贾振华 � 高怀林 � 袁国强 摘要 目的 观察中药通肾络胶囊对糖尿病肾病( DN)大鼠模型肾脏细胞外基质( ECM )成分及代谢的 影响,探讨通肾络胶囊对 DN 大鼠肾脏保护作用机制。 采用单侧肾脏切除并腹腔注射链脲佐菌素 ( STZ)的方法复制 DN 大鼠模型,分为假手术、模型、缬沙坦、糖适平及通肾络胶囊组,每组 10只。动态检测 各组大鼠空腹血糖 ( FBG )、24h 尿微量白蛋白 ( 24h mAlb) , 末次给药后测定大鼠血浆糖化血红蛋白 ( HbA1c)、透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构改变, 应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠 肾脏组织中�型胶原( �-C)、纤维连接蛋白( FN)、层粘连蛋白( LN)的表达,测定影响 ECM 代谢的基质金属 蛋白酶-2( MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2( T IMP-2)及转化生长因子 �1( TGF-�1)的表达。结果 通肾络 胶囊可降低 DN 大鼠 FBG、HbA1c、24h mAlb 的水平( P< 0�05或 P< 0�01) , 减轻肾小球基底膜增厚程度, 减少 ECM 成分,降低 TGF-�1、TIMP-2的表达, 升高 MMP-2的表达( P< 0�05或 P< 0�01)。结论 通肾络 胶囊可能通过减少 ECM 成分表达、调节 ECM 代谢,从而发挥对 DN 大鼠肾脏的保护作用。 关键词 糖尿病肾病; 通肾络胶囊; 细胞外基质;成分; 代谢 Effect of Tongshenluo Capsule on the Components of Extracel lular Matrix and Their Metabolism in Kidney of Rats with Diabetic NephropathyWU Y-i ling , WEI Cong , WANG Hong- tao, et al Hebei Yil ing Medical Re- sear ch A cademy , Shij iaz huang ( 050035 ) Abstract � Objective To investigate the ef fect of Tongshenluo Capsule ( TSL) on the components of ext ra- cellular matrix ( ECM) and their metabolism in kidney of rats w ith diabet ic nephropathy ( DN) , and to explore its mechanism of kidney protect ing. Methods The DN model rats established by one side nephrectomy and in- traperitoneal inject ion of streptozotocin w ere randomly divided into 5 groups, the sham-operat ion g roup, the model group, the Valsartan group, the Gliquidon g roup, and the T SL group, 10 in each group. Levels of fast- ing blood glucose ( FBG) and 24-h urinary micro-content of albumin ( 24 h mAlb) were determined dynamically; the serum glycosyl hemoglobin ( HbA1c) was determ ined after the last medicat ion; the ultrastructural changes of kidney w ere observed by transmission electron microscope; the expressions of collagen � ( �-C) , fibronct in ( FN) , laminin( LN) , and the ECM metabolism inf luencing factors, including MMP-2, tissue inhibitor of met- alloproteinase ( TIMP-2) , t ransfer grow th factor-�1 ( TGF-�1 ) in renal tissue w ere detected by immunohistolo- gical chemistry and image collecting analyt ical system. Results TSL could decrease the levels of FBG, HbAlc, 24 h mAlb ( P< 0�05 or P< 0�01) , ameliorate the thickness of glomerular basement membrane ( GBM ) , de- crease the components of ECM, down-regulate TGF-�1 and TIM P-2 expression, and up-regulate MMP-2 ex- pression ( P< 0�05 or P< 0�01) . Conclusion TSL plays a role of kidney protect ion by decreasing the ECM components expression and regulate ECM metabolism. Key words diabet ic nephropathy; Tong shenluo Capsule; ext racellular matrix; component ; metabolism 糖尿病肾病( DN)作为糖尿病( DM )最为严重的微 血管并发症之一, 成为 DM 患者主要致死原因之一。 DN 基本病理特点是肾小球基底膜( GBM )增厚和以肾 小球系膜区为主的细胞外基质( ECM)积聚, 导致弥漫 性或结节性肾小球硬化。ECM 代谢失常并引发其过 度积聚是肾小球硬化的前奏, 成为 DN 肾小球病变发 �326� 中国中西医结合杂志 2007年 4月第 27卷第 4期 CJITWM , April 2007, Vol. 21, No. 4 生机制中的重要环节和病理特征。基质金属蛋白酶-2 ( MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2( TIMP-2)及转化 生长因子�1( TGF-�1)的异常表达在 ECM 代谢过程中 发挥重要的作用�1�。本实验采用单侧肾脏切除合并腹 腔注射 STZ 建立 DN 大鼠模型, 观察通肾络胶囊对 ECM 成分及代谢的影响, 从而探讨通肾络胶囊对 DN 大鼠肾脏保护作用机制。 与方法 1� 材料 � ( 1)动物: 成年雄性 SD大鼠 50 只, 体 重250~ 300 g,由北京维通利华实验动物技术有限公 司提供。( 2)药物:通肾络胶囊药粉(主要药物组成:黄 芪、生地、水蛭、胆南星、刘寄奴、泽兰等)由河北以岭医 药研究院药学部提供, 生产批号: 20041115 。缬沙坦 胶囊( Valsartan capsule) 80 mg/粒, 由北京诺华制药有 限公司生产, 生产批号: S0011。糖适平 ( Gliquidone tablet) 30 mg/片,由北京万辉双鹤药业有限责任公司 生产,生产批号: 041010。( 3)试剂及仪器:链脲佐菌素 ( STZ) ,购自 Sigma公司; 稳豪牌血糖试纸, 购自美国 强生公司; 糖化血红蛋白( HbA1c)测定试剂盒, 购自南 京建成生物工程研究所; 尿微量白蛋白( mAlb)放免试 剂盒, 购自北京福瑞生物工程公司; �型胶原( �-C)、 纤维连接蛋白( FN)、层粘连蛋白( LN )抗体购自武汉 博士德生物公司; MMP-2、TIM P-2 及 TGF-�1 抗体购 自北京中山生物技术有限公司。稳豪牌血糖仪,美国 强生公司生产; Nikon光镜照相; BI2000图像分析系统 为成都泰盟科技有限公司生产。 2 � 糖尿病肾病大鼠模型的建立 � 大鼠正常饮食并 适应环境 1周后开始实验。大鼠麻醉后行左侧肾脏切 除术,术后恢复 2周。将 STZ溶于 0�1 mol/ L 柠檬酸缓 冲液( pH 4�4)中,避光条件下迅速配成浓度为 1% STZ 溶液。动物禁食 12 h后,按照 60 mg/ kg 剂量予以 STZ 腹腔注射; 72 h后,尾静脉取血, 测定空腹血糖( FBG) , FBG �16�7 mmol/ L 作为 DN 大鼠造模成功。 3 � 分组及给药方法 � 将 40只模型大鼠随机分为 4组,每组 10 只, 即模型组采用 0�5% 羧甲基纤维素 钠( CMC-Na)、缬沙坦组采用缬沙坦 15 mg/ ( kg�d)、糖 适平组采用糖适平 8 mg / ( kg�d)、通肾络胶囊组采用 通肾络胶囊 27�5 g 生药/ ( kg�d) ,河北以岭医药研究 院提供。选取 10只正常大鼠作为假手术组, 仅切开大 鼠皮层、肌层, 不切除肾脏, 随后缝合, 每日同体积 0�5% CMC-Na灌胃。各组连续灌胃给药 8周。 4 � 观察项目 4. 1 � FBG测定 � 分别于造模前, 注射 STZ 72 h 后,给药 4、8周末, 禁食 12 h 后, 尾静脉取血, 血糖仪 (美国强生公司)测定 FBG。 4. 2 � HbA1c测定 � 于末次给药后,颈动脉取血 3 mL 肝素抗凝, 1 000 r/ min离心 10 min,弃上清,留取 沉淀的红细胞, 用生理盐水反复洗涤 2~ 3次,取压积 红细胞 1 ml加冷蒸馏水 1�5 ml,用旋涡混匀器充分混 匀,制成溶血液,严格按照试剂盒(南京建成生物公司) 说明书要求进行检测。 4. 3 � 24 hmAlb 测定 分别于造模前、给药 4 周 末、给药 8 周末留取尿液标本, 2 000 r/ min 离心 10 min,取上清液稀释若干倍后,应用大鼠尿微量白蛋 白放射性免疫分析试剂盒(北京市福瑞生物工程公司) 检测。 4. 4 � 透射电镜观察 � 于末次给药后,摘取右肾, 取一小块肾皮质迅速浸入电镜液中, 修成 1mm � 1mm � 1 mm 大小组织块,置电镜液中 4 � 保存。采用 日立H-7500型透射电镜放大 20 000 倍进行镜下观 察。 4. 5 � 肾脏组织�-C、FN、LN、TGF-�1、MMP-2及 T IMP-2表达的测定 � 采用免疫组化方法, 并使用图 像采集系统测定每个肾小球中着色的阳性物质光密度 值,每张切片随机选取5 个视野, 每组分析 10个标本。 5� 统计学方法 � 所有数据运用 SPSS 12�0统计 软件进行统计分析,采用 One-way ANOVA统计方法, 组间差别的两两比较使用 q 检验。 结 果 1 � 通肾络胶囊对DN 大鼠FBG的影响 � 见表 1。 造模前, 各组动物 FBG 比较, 差异无显著性 ( P > 0�05) ;造模后, 模型组 FBG与假手术组比较显著升高 ( P< 0�01) ; 给药 4 周后, 与模型组比较, 缬沙坦组 FBG水平显著降低( P< 0�05) , 糖适平组与通肾络胶 囊组降低不明显( P> 0�05) ; 给药 8周后,与模型组比 较,糖适平组、通肾络胶囊组 FBG 水平均显著降低 ( P< 0�05或 P< 0�01) , 但两组间比较差异无显著性。 表 1 各组 DN大鼠 FBG 比较 ( mmol/ L, �x � s) 组别 n FBG造模前 注射 STZ 72 h后� �给药 4周后 给药 8周后 假手术 10 4. 5 � 1. 2 4. 8 � 1. 0 4. 4 � 0. 9 5. 6 � 1. 6 模 型 10 4. 9 � 1. 5 25. 3 � 5. 0� 27. 5 � 4. 9� 26. 8 � 3. 2� 缬沙坦 10 4. 3 � 1. 0 25. 4 � 4. 9 22. 1 � 5. 2* 25. 0 � 6. 5 糖适平 10 4. 7 � 2. 0 25. 0 � 4. 9 23. 3 � 5. 6 18. 6 � 6. 0* 通肾络胶囊 10 5. 2 � 0. 9 24. 7 � 4. 9 23. 5 � 7. 0 19. 7 � 3. 8** � � 注: 与模型组比较, * P < 0�05, ** P < 0�01; 与假手术组比较, �P < 0�01 2 � 通肾络胶囊对 DN大鼠HbA1c含量比较 � �327�中国中西医结合杂志 2007年 4月第 27卷第 4期CJ IT WM, April 2007, Vol. 27, No. 4 见表 2。与假手术组比较,模型组 HbA1c显著升高( P < 0�01)。与模型组比较, 糖适平组、通肾络胶囊组 HbA1c显著降低( P< 0�05) ,两组间比较,差异无显著 性; 缬沙坦组与模型组比较, 差异无显著性 ( P > 0�05)。 表 2 各组 DN 大鼠 HbA1c含量比较 ( % , �x � s ) 组别 n HbA1c 假手术 10 48. 9 � 6. 9 模型 10 87. 1 � 28. 2� 缬沙坦 10 64. 6 � 22. 5 糖适平 10 57. 3 � 21. 5* 通肾络胶囊 10 59. 5 � 19. 1* � � 注:与模型组比较, * P< 0�05;与假手术组比较, � P< 0�01 3� 通肾络胶囊对 DN 大鼠 24 h mAlb的影响 � 见表 3。造模前,各组大鼠 24 h mAlb差异无显著性。 给药 4、8周后, 与假手术组比较,模型组 24 h mAlb显 著增加( P< 0�01) ; 与模型组比较, 缬沙坦组、通肾络 胶囊组 24h mAlb水平显著降低( P< 0�05) ,但两组间 差异无显著性; 糖适平组与模型组比较,差异无显著性 ( P> 0�05)。 表 3 各组 DN 大鼠 24 h mAlb 比较 ( ng/ 24 h, �x � s) 组别 n 24 h mAlb造模前 给药4 周后 给药8 周后 假手术 10 92. 83 � 32. 43 139. 35� 39. 87 114. 71� 31. 11 模型 10 98. 11 � 33. 34 758. 98� 149. 34 � 953. 12� 133. 76 � 缬沙坦 10 90. 82 � 33. 25 398. 40� 94. 81* 449. 57� 167. 50* 糖适平 10 87. 24 � 29. 98 529. 46� 126. 70 661. 80� 153. 13 通肾络胶囊 10 101. 28 � 34. 20 404. 43� 118. 27* 654. 73� 162. 13* � � 注:与模型组比较, * P< 0�05;与假手术组比较, � P< 0�01 4 � 各组 DN 大鼠肾脏超微结构比较 � 透射电镜 下观察假手术组肾脏组织结构正常, 肾小球 GBM 均 匀无增厚, 上皮足突分布均匀(见图 1-1)。模型组大 鼠肾脏组织表现为部分 GBM 增厚明显, 厚薄不均,呈 驼峰状,部分足突、次级突起融合明显, 部分血管内皮 细胞增生、裂孔减少明显(见图 1-2)。其他各治疗组 表现为节段性 GBM 中等增厚, 足突融合较明显,血管 内皮细胞增生较模型组减轻(见图 1-3~ 5)。 5� 各组 DN 大鼠肾脏组织�-C、FN 及 LN 表达 比较 � 见表 4。与假手术组比较, 模型组大鼠肾脏组 织中�-C、FN、LN 表达均显著增加, 差异有显著性 ( P< 0�01)。与模型组比较, 缬沙坦组和通肾络胶囊 组�-C、LN 表达降低( P< 0�01或 P< 0�05) , 但两组 间比较差异无显著性 ( P> 0�05) ;糖适平组降低不明 显( P> 0�05)。3 个治疗组与模型组比较, FN 表达均 降低 ( P < 0�01) , 但各治疗组间比较差异无显著性 ( P> 0�05)。 表 4 各组 DN 大鼠肾脏组织中�-C、FN 及 LN 表达比较 ( OD值, �x � s ) 组别 n �-C FN LN 假手术 10 0. 080 � 0. 022 0. 110 � 0. 041 0. 104� 0. 020 模型 10 0. 168 � 0. 014� 0. 194 � 0. 030� 0. 156� 0. 017� 缬沙坦 10 0. 117 � 0. 016** 0. 144 � 0. 015** 0. 133� 0. 021* 糖适平 10 0. 149 � 0. 029� 0. 139 � 0. 023** 0. 147� 0. 026� 通肾络胶囊 10 0. 140 � 0. 025* 0. 135 � 0. 019** 0. 133� 0. 013* � � 注:与模型组比较, * P< 0�05, ** P < 0�01;与假手术组比较, �P < 0�01 6� 各组 DN 大鼠肾脏组织 MMP-2、TIM P-2 及 T GF-�1 表达比较 � 见表 5。与假手术组比较,模型组 MMP-2表达显著降低 ( P < 0�01) ;与模型组比较, 各 治疗组 MMP-2均显著增加( P< 0�01) ,各治疗组间比 较,差异无显著性。与假手术组比较, 模型组 TIM P-2 表达显著增加( P < 0�01) ; 与模型组比较, 各治疗组 T IMP-2 显著降低( P< 0�05或 P < 0�01) , 各治疗组 间差异无显著性。与假手术组比较, 模型组 TGF-�1 表达显著增加( P< 0�01) ; 与模型组比较,缬沙坦组与 糖适平组 TGF-�1 表达降低不明显( P> 0�05) , 而通肾 络胶囊组 TGF-�1 表达显著降低( P< 0�05) ,且与上两 组比较差异有显著性( P< 0�05)。 �328� 中国中西医结合杂志 2007年 4月第 27卷第 4期 CJITWM , April 2007, Vol. 21, No. 4 表 5 各组 DN 大鼠肾脏组织中 MMP-2、T IMP-2 及 TGF-�1表达比较 ( OD值, �x � s) 组别 n MMP- 2 T IMP-2 TGF-�1 假手术 10 0. 16 � 0. 02 0. 08 � 0. 01 0. 14 � 0. 04 模型 10 0. 09 � 0. 02� 0. 17 � 0. 02� 0. 24 � 0. 05� 缬沙坦 10 0. 13 � 0. 01** 0. 14 � 0. 03* 0. 21 � 0. 03� 糖适平 10 0. 14 � 0. 02** 0. 14 � 0. 02** 0. 21 � 0. 04� 通肾络胶囊 10 0. 13 � 0. 02** 0. 12 � 0. 01** 0. 19 � 0. 05* � � 注:与模型组比较, * P < 0. 05, ** P < 0. 01; 与假手术组比较, � P < 0. 01;与通肾络胶囊组比较, � P< 0. 05 讨 论 本研究采用国际常用的单侧肾脏切除并腹腔注射 STZ 的方法复制 DN 动物模型, 模型动物表现为多 饮、多食、多尿, 明显消瘦, 空腹血糖显著升高,大量蛋 白尿,且本研究中模型出现明显节段性 GBM 增厚、 ECM 增生及局灶性肾小球硬化等典型病理形态学改 变,证明所造模型是成功的。 ECM 是系膜区围绕系膜细胞一种非弥散的固相 介质, 为组织、器官甚至整个机体的完整提供力学支 持,并调节系膜的增生和分泌的各种活性物质。肾小 球 ECM 积聚是引起肾小球系膜区扩张、毛细血管 GBM 增厚, 从而成为引起 DN 的主要病理基础。 ECM 主要由胶原、蛋白多糖、糖蛋白等物质组成。其 胶原组成中以�型为主, 它作为肾小球的结构支架,是 DN时 ECM 增殖的主要成分�2�。有研究表明, 在 DN 的发生和发展过程中伴有血、尿�-C 代谢的异常�3, 4�。 FN主要位于系膜基质, 是一种细胞外糖蛋白基质成 分,彼此以纤维状结构相连,对维持肾小球正常结构起 重要作用, 并参与细胞周围基质的形成过程。有研究 表明高糖能促进系膜细胞的 FN mRNA 水平升高�5�。 LN属大分子糖蛋白( > 850 000M r) , 是 GBM 的主要 成分。LN在 GBM 中借短臂与�-C结合,借长臂与硫 酸乙酰肝素蛋白多糖( HSPG)结合, 共同维持 GBM 的 通透性�6�。 在本研究中, 免疫组化显示 DN 模型大鼠肾脏 ECM 主要成分�-C、FN 及 LN 的表达显著高于假手 术组,经通肾络胶囊与缬沙坦治疗后,上述三者水平皆 显著降低,且两组间比较差异无显著性,而糖适平只可 降低 FN。由此可见通肾络胶囊可通过降低�-C、FN 及 LN 的表达直接抑制 ECM 增加,延缓 DN大鼠肾脏 病理改变的进程, 从而发挥对 DN 大鼠肾脏的保护作 用,其作用与缬沙坦相当且优于糖适平。 高糖环境下, 肾小球 ECM 代谢紊乱所引起的 ECM 合成增加和(或)降解减少并导致其过度积聚,是 发生 DN的主要病理机制,而ECM 代谢状态的紊乱是 这一过程的关键因素。大量实验证明 MMPs在大多 数组织 ECM 降解中起重要作用,它能够降解 ECM 中 至少一种成分, 其活性能被组织型 MMPs 抑制物 T IMP 以高亲和力结合所抑制�7�。TIM P-2 既阻止酶 原与细胞表面接触, 又能特异性地抑制 MMPs 的活 性,促进 ECM 的合成, 抑制其降解�1, 8�。本研究中, 免 疫组化结果显示 DN大鼠肾组织中 MMP-2表达显著 降低, T IMP-2 表达显著增加, 且 TIMP-2 的表达与 ECM 成分的表达水平相一致, 提示 MMP-2 表达降低 和T IMP-2表达增加与肾小球 ECM 积聚有密切关系。 而通肾络胶囊可提高 MMP-2表达水平, 下调 TIM P-2 表达, 从而促进 ECM 降解,减轻 ECM 积聚,这可能是 通肾络胶囊发挥延缓肾小球硬化进程, 进而保护受损 肾脏的重要机制之一。 T GF-�是一组多肽生长因子, 通过自分泌或旁分 泌作用调节细胞分化、生长与 ECM 代谢。肾脏组织 中以 TGF-�1 为主, 主要由肾小球系膜细胞和肾小管 上皮细胞分泌。TGF-�1具有直接促进ECM 成分增加 的作用, 同时还可通过抑制 MMP-2 的表达, 促进 T IMP-2的表达间接促进 ECM 合成, 抑制其降解�9�。 本研究结果显示, DN 大鼠肾脏 TGF-�1 表达显著升 高,通肾络胶囊治疗后 TGF-�1 表达显著降低,可见通 肾络胶囊通过抑制 TGF-�1 的表达, 进而减少 ECM 成 分、促进 MMP-2 的表达及抑制 T IM P-2 的表达对 ECM 代谢进行干预,亦是其对 DN大鼠肾脏产生良好 保护作用的重要机制。本实验中缬沙坦和糖适平治疗 后T GF-�1 无明显变化, 通肾络胶囊在通过 T GF-�1 对 ECM 进行调控方面优于上述两种西药。 综上所述,通肾络胶囊能显著降低 DN大鼠FBG、 HbA1c及 24h mAlb,减轻肾脏组织的病理学改变, 减 少�-C、LN、FN 等 ECM 成分的增加, 表明通肾络胶 囊对 DN 具有良好的保护作用。其作用的发挥可能与 通肾络胶囊抑制 TGF-�1 和 TIM P-2 的表达、升高 MMP-2水平,从而影响 ECM 代谢机制有关。 参 考 文 献 1 胡 � 玲, 柳 � 洁. MMPs/ T IMPs、TGF-�1 及 PKC 与糖尿病 肾病. 医学综述 2005; 11( 12)�1097� 1099. 2 陈雅静, 刘宽芝. �型胶原酶与糖尿病肾病. 国外医学内分 泌分册 2002; 22 ( 4)�256� 258. 3 Okonogi H, N ishimura M , U tsunomiya Y , et al. U r inary type �collag en excretion r eflects renal morphological alterations and type �collagen expression in pat ients wit h type 2 diabetes me-l litus. Clin Nephrol 2001; 55 ( 5)�357 � 364. �329�中国中西医结合杂志 2007年 4月第 27卷第 4期CJ IT WM, April 2007, Vol. 27, No. 4 4 李振江, 雷 � 洁, 钟芳红, 等. 糖尿病肾病 TGF-�1、�型胶 原水平变化的临床意义及辛伐他汀的治疗作用. 第四军医大 学学报 2004; 25 ( 10) �942 � 944. 5 魏日胞, 陈香美, 李文歌, 等. 高糖促进肾小球系膜细胞纤 维连接蛋白合成的实验研究. 解放军医学杂志 2002; 27 ( 1) �30� 31. 6 刘志红, 黎磊石. 糖尿病肾病发病机理. 中华肾脏病杂志 1999; 15 ( 2) �120 � 123. 7 Fornoni A , Striker L J, Zheng F, et al. Reversibility of glu- cose- induced changes in mesang ial cell extr acellular matrix de- pends on the genetic background. Diabetes 2002; 51( 2)�499 � 505. 8 刘楠梅. 基质金属蛋白酶-2 与糖尿病肾病. 中华实用医学 2003; 5( 16)�72� 74. 9 Isono M , Mogyor osi A , Han DC, et al. Stimulat ion of TGF-� type receptor by high g lucose in mouse mesang ial cells and in d-i abetic kidney . Am J Physiol Renal Physio l 2000; 278 ( 5) � F830� 838. (收稿: 2006- 07- 05 � 修回: 2006- 11- 30) 不同中医辨证分型胃溃疡患者胃镜象表现初探 郑 � 艳1 � 谢旭善1 � 刘 � 峰2 � � 作者单位: 1.山东省青岛市海慈医疗集团消化科 (山东 266033 ) ; 2�北京联合大学特殊教育学院生物医学系 胃溃疡主要指发生在胃的慢性溃疡性病变, 黏膜缺损的深 度超过肌层。临床上胃溃疡以胃脘部规律性疼痛为主要发病 特点,反复的临床实践中证实胃溃疡患者多具有较长时间的病 史,普遍伴随体乏无力, 胃脘部喜温喜按的特点, 为此, 2003 年 3 月 � 2005年 9月, 笔者开展胃镜下不同中医辨证分型胃溃疡 镜象典型表现的观察,现报告如下。 临床资料 150例均符合胃溃疡诊断(郑筱萸主编. 中 药新药临床研究指导原则. 北京:中国医药科技出版社, 2002� 151 � 152)。即: ( 1)长期反复发生的周期性、节律性慢性上腹 部疼痛,应用碱性物可缓解; ( 2)腹部有局限性深压痛; ( 3) X 线 钡餐造影见溃疡龛影; ( 4)内窥镜检查可见溃疡表现。 中医辨证分型分为 4 型:肝胃气滞型 28 例, 其中男 13 例, 女 15 例;年龄 24~ 62 岁, 平均( 38� 1 � 5�7)岁; 病程 2~ 12 个 月,平均( 8�3 � 3�5)个月; 脾胃湿热型 32 例, 其中男 21 例, 女 11 例;年龄 27~ 60 岁, 平均( 41� 3 � 6�2)岁; 病程 3~ 11 个月, 平均( 6� 4� 4�1)个月; 脾胃气虚型 68 例, 其中男 37 例, 女 31 例;年龄 25~ 73 岁, 平均( 43�7 � 8� 4)岁, 病程 6�5~ 23 个月, 平均( 10�3 � 5� 7)个月; 胃阴亏虚型 22 例, 其中男 14 例, 女 8 例;年龄 32~ 67 岁, 平均 ( 42� 5 � 4� 6)岁, 病程 5~ 17 个月, 平 均( 11�2 � 4� 2)个月。 观察方法 � 根据中医辨证分型, 分为肝胃气滞组、脾胃湿 热组、脾胃气虚组、胃阴亏虚组。每组患者采用 Olympus E- VIS240 型内镜检查, 详细观察胃黏膜变化, 重点溃疡面积、溃 疡部位、溃疡色泽、黏膜状况等。并由胃镜检查的医师结 果。课组成员只负责所有临床资料的统计整理工作, 不参与 查体和胃镜操作。 所有数据计数资料用 � 2检验 ,计量资料用方差分析。 结 � 果 1� 各组患者溃疡面积( mm2 )比较 � 脾胃气虚组 106�47 � 54� 06; 肝胃气滞组 93� 54 � 43� 18; 脾胃湿热组 110� 41 � 63� 54; 胃阴亏虚组 115�95 � 53�27; 经 F 检验, 脾胃气虚组溃 疡面积与其他 3 组比较差异无显著性( F= 0�8075, P> 0�05)。 2� 各组患者溃疡色泽比较 � 脾胃气虚组溃疡色泽以白色 为主( 51 例) ; 脾胃湿热组、胃阴亏虚组以黄色为主(分别为 27 例、15 例) ,而白色为主的例数较少(分别为 5 例、7 例) ; 肝胃气 滞组溃疡色泽黄色与白色相当(白为主 13 例, 黄为主 15 例 )。 经 � 2检验, 脾胃气虚组白色溃疡阳性率与脾胃湿热组、胃阴亏 虚组比较,差异有显著性( P < 0� 05) ; 与肝胃气滞组比较, 差异 无显著性(P > 0� 05)。 3� 各组患者胃镜下水肿统计结果 � 除胃阴亏虚组黏膜水 肿( 5例)不明显外, 余 3 组均以水肿为主要表现。其中肝胃气 滞组 23 例,脾胃湿热组 27 例, 脾胃气虚组 60 例。经率的两两 比较( Scheffe法) ,黏膜水肿阳性率: 脾胃气虚组、脾胃湿热组、 肝胃气滞组与胃阴亏虚组比较,差异均有显著性( P < 0� 05) ; 肝 胃气滞组、脾胃湿热组及脾胃气虚阻两两比较, 差异均无显著 性(P > 0� 05)。 4� 各组患者溃疡覆苔统计结果 � 脾胃气虚组与胃阴亏虚 组以白苔为主 (分别为 50 例、16 例) ; 脾胃湿热组以黄苔为主 ( 26 例) ,白苔例数较少 ( 6 例) ; 而肝胃气滞组黄苔和白苔例数 相当(黄苔 13 例, 白苔 15 例)。经率的两两比较, 以白苔为主 阳性率:与脾胃湿热组比较, 肝胃气滞组、脾胃气虚组及胃阴亏 虚组差异均有显著性( P< 0� 05) ;脾胃气虚组、胃阴亏虚组及肝 胃气滞组两两比较,差异均无显著性( P > 0� 05)。 讨� 论 � 胃溃疡患者的中医证候分型与溃疡的面积大小 是否有必然的联系? 我们观察发现, 黏膜水肿、色泽以白为主, 溃疡上覆白苔的患者,是中医辨证为脾胃气虚患者比较明显的 胃镜象变化,采用补中益气的治疗方法,患者服用补中益气丸, 取得较好的临床效果, 临床症状和胃镜象均得到明显的改善。 中医传统理论中白色主虚是相吻合的。 迄今为止,人们还没有完全证实� 中医证型�与胃黏膜胃镜 象有必然的相关性。尽管以前在多次全国性学术会议上研究 过胃病中医证型的诊断与疗效评定标准, 但因为证候量、度的 判断及证型的确定仍有较大难度。因此对胃镜下溃疡表现的 研究,对中医证型的诊断及疗效评定具有一定的意义。 (收稿: 2006- 08- 02 � 修回: 2006- 12- 28) �330� 中国中西医结合杂志 2007年 4月第 27卷第 4期 CJITWM , April 2007, Vol. 21, No. 4