紫外分光光度法测定牛黄消炎片中胆酸的含量

中国医药指南 2010 年 8 月第 8 卷 第 23 期 Guide of China Medicine, August 2010, Vol.8, No.236 论 著 目前认为，糖尿病足的处理需要多学科协作，综合治疗。 局部创面的良好处理在糖尿病足溃疡治疗中起着至关重要的作 用，对保全肢体有重要意义。1962 年Winter[4]通过动物实验证实，创 面的湿性环境可减少组织坏死，加快新生上皮的形成，伤口愈合速度 是干性环境下的2倍。其后的临床应用[5]表明，和干性环境相比，湿性 环境可减轻组织脱水、细胞死亡、加快血管再生和促进坏死组织的分 解，减轻疼痛，并强化各种生长因子对伤口组织内靶细胞的作用。湿 性环境有利于伤口愈合已被广泛接受[6,7]。　 目前已有很多敷料用于临床以保持创面湿性环境。美宝创面速愈 贴[8,9]，一种以徐荣祥教授创建的原位再生医学理念，适用于皮肤 原位再生复原技术的新一代功能性创面生理湿润敷料，为特有的专利 “网中网结构”功能性敷料，其效果的发挥依靠“三隔离、一呼吸” 的性能，即隔离空气（氧气）对创面的氧化刺激，隔离创面代谢产物 对创面自身的损伤，隔离外界病原菌等物质对创面的污染；网中网结 构与内含的芝麻油在创面上产生呼吸生理代谢作用，产生创面伤口立 体生理湿润环境，保护并促进创面的生理性愈合，已广泛应用于烧 伤、褥疮等创面，取得了很好的疗效。 本研究结果表明，应用美宝创面速愈贴对糖尿病足2~3级溃疡局 部处理，与传统方法相比，对促进溃疡愈合有明显效果，从而减轻患 者痛苦，减少医疗花费。 参考文献 [1] 许樟荣,敬华,译.定义与标准[M]//.见:国际糖尿病足工作组编写. 糖尿病足国际临床指南.北京:人民军医出版社,2003:6-9. [2] 许樟荣,敬华,译.糖尿病足的流行病学[M]//.见:国际糖尿病足工作 组编写.糖尿病足国际临床指南.北京:人民军医出版社,2003:10-15. [3] LeMaster JW,Reiber GE.Epidemiology and economic impact of foot ulcers[M]//.In: Boulton AJM.,Cavanagh PR,Rayman G.,eds. The foot in diabetes.4th ed.London,England: John Wiley & Sons Ltd,2006:1-16. [4] Winter GD.Formation of the Scab and the Rate of Epithelization of Superficial Wound in the Skin of the Young Domestic Pig[J]. Nature,1962,193: 293–294. [5] Field FK,Kerstein MD.Overview of wound healing in moist environment[J].Am J Surg,1994,167(1A):2S-6S. [6] Vogot PM,A ndree C,Breuing K.Dry,moist,and wet skin wound repair[J].Ann Plast Surg,1995,34 (5):493-499.　 [7] 朱斌,朱家源,唐庆等.湿性环境在创面愈合中的作用[J].广州医 学院学报,1999,27 (3):53-55. [8] 肖摩.外科换药技术的革命 介绍功能性复合敷料——美宝创面 速愈贴[J].中国烧伤创疡杂志,2008,20(1):274-277. [9] 陈永舯,廖毅,唐修俊等.生理湿润环境对急慢性损伤愈合的临 床观察[J].中国烧伤创疡杂志,2008,20(4):322-327. 紫外分光光度法测定牛黄消炎片中胆酸的含量 刘力丰 【摘要】目的 建立牛黄消炎片中胆酸的含量测定方法。方法 本实验采用紫外分光光度法，以硫酸溶液显色，对样品的提取检测波长为 385nm。结果 牛黄消炎片中胆酸的含量限度为不低于 0.51mg/ 片，胆酸浓度在 0.0209~0.1604mg/mL 范围内与吸收度呈良好的线性关系 （r=0.9999，n=5），平均回收率为 98.97%（RSD=0.24%，n=9）。结论 该法简便、快速、稳定、可靠，可用于测定牛黄消炎片中胆酸的含量。 【关键词】牛黄消炎片；人工牛黄；胆酸；紫外分光光度法 中图分类号：R282.710.3 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2010）23-0006-02 The Content of Bile Acid in Taurine Niuhuang Xiaoyan Tablets Detected by Ultraviolet Spectrophotometry LIU Li-feng (Department of Pharmacy, The Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, Changchun 130021, China) [Abstract] Objective A method of determination of bile acid in Niuhuang Xiaoyan Tablets. Methods Bile acid was determined by UV spectrophotometry. The detection wavelength was 385nm. Results The average levels of bile acid in the Niuhuang Xiaoyan Tablets is 0.51mg one tablet. For the bile acid, the linear ranged over0.0209~0.1604mg/mL with r=0.9999, n=5.The average recovery (n=9) was 98.97%(RSD=0.24%).Conclusion The methods were proved to be simple, precise sensitive and reproducible. It can be used for the quality control of Niuhuang Xiaoyan Tablets. [Key words] Niuhuang Xiaoyan tablets; Artifi cial bezoar; Bile acid; UV spectrophotomet 牛黄消炎片中是由人工牛黄、珍珠母、蟾酥等7味中药组成的中药 复方制剂，具有清热解毒、消肿止痛的功效。临床上用于治疗咽喉肿 痛、疔、痈疥疮各证[1]。具有服用剂量少，疗效肯定等优点。本品的 质量标准收载于《卫生部药品标准•中药成方制剂》第7册和《中华人 民共和国药典》（2005版）中。本品中人工牛黄含有效成份胆酸，但 是均未收录牛黄消炎片中胆酸的含量测定方法。为能更好地效控制本 制剂质量，本文采用紫外分光光度法测定牛黄消炎片中胆酸的含量。 1 仪器与试剂 德国赛多利斯仪器有限公司BP211D型十万分之一电子天平， 美国瓦里安公司紫外可见分光光度计（Cary 50 UV-Vis），电热恒 温水浴锅（江苏南通县通海电器厂）等；胆酸标准品（中国药品 生物制品检定所）批号为0078-9312，牛黄消炎片（A药业，批号 为090402、090405、090406），硫酸溶液（取水65mL，加浓硫酸 50mL，摇匀，即得）。 2 方法与结果 2.1 溶液的制备 吉林省长春中医药大学附属医院药剂科（130021） 中国医药指南 2010 年 8 月第 8 卷 第 23 期 Guide of China Medicine, August 2010, Vol.8, No.23 7论 著 图 1 胆酸标准曲线 标准溶液的制备：精密称取胆酸标准品25mg，置25mL量瓶中， 加60%冰醋酸使溶解，并加至刻度，摇匀。精密吸取5mL，置另一 25mL量瓶中，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。 样品溶液制备：取血栓心脉宁胶囊10粒，精密称定，求得平均装 量，取内容物研细，精密称取约相当于5粒内容物的重量，置25mL量 瓶中，加60%冰醋酸适量，置70℃水浴中不断振摇，加热20min，取 出，放冷，过滤，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。 2.2 测定波长的选择 精密吸取胆酸标准液1mL，置具塞刻度试管中，加硫酸溶液 14.0mL，摇匀，置70℃水浴中加热10min，取出放冷，以相应的试剂 为空白，扫描，200~800nm波长范围内测定吸收光谱。结果胆酸对照 品溶液在385nm波长处有最大吸收峰，故以385nm为测定波长。 2.3 标准曲线的制备 精密吸取胆酸标准液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8mL，分别置具塞 刻度试管中，加60%醋酸到l.0mL，再加硫酸溶液14.0mL，摇匀， 置70℃水浴中加热10min，取出放冷，照分光光度法（附录Ⅴ）在 385nm波长处测定吸收度A，以A为纵座标，浓度C为横座标，绘制 标准曲线，得回归方程为Y = 1.8265 X + 0.0121，r= 0.9999。结果表 明，胆酸浓度在0.0209~0.1604mg/mL范围内浓度与吸收度有良好的 线性关系，见图1。 2.3 精密度实验 取胆酸对照品溶液，按上述的方法重复测定6次吸光度的RSD为 0.40%，见表1。 2.4 重现性试验 分别精密吸取胆酸标准液0.5mL 6份，按标准曲线项下操作，测得 吸光度的RSD为1.34%，见表2。 2.5 溶液的稳定性试验 取标准曲线项下的胆酸溶液，按上述条件每间隔20min测定一次 吸收度，结果表明在3h内吸收值稳定。 2.6 回收率测定 精密称取空白样品细分约1片重量及胆酸标准品约0.05mg，置 25mL量瓶中，按样品溶液制备项下操作，所得滤液按标准曲线项下 测定，结果见表3。 2.7 样品测定 取3批样品，按样品溶液制备项下操作，平行制备3份，所得滤液 按标准曲线项下测定吸收度，并根据回归方程计算每片牛黄消炎片中 胆酸含量（mg），见表4。 3 讨 论 按方法同时制备空白样品溶液，在200~800nm的波长范围内扫 描，无紫外吸收，不干扰胆酸的含量测定，故选择385nm波长作为胆 酸的含量测定的检测波长是合理的。 牛黄消炎片的原标准中无胆酸的含量测定，因此无法控制该品种的 质量。经多次测定，牛黄消炎片中胆酸的含量限度为不低于0.51mg/片。 通过上述方法学考察，建立了牛黄消炎片中胆酸的含量测定方 法，使其质量标准更趋严谨科学完整，并且该方法简便快捷，结果准 确，重现性、回收率好，能有效控制牛黄消炎片的质量。 参考文献 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京:化学工业 出版社,2005. 表1 精密度考察 序号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD（％） 吸收度 0.0824 0.0819 0.0822 0.0828 0.0820 0.0822 0.0823 0.40 结果表明，本方法精密度良好。 表2 重现性考察 编号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD（％） 吸收度 0.1948 0.1944 0.1945 0.1951 0.1947 0.1949 0.1947 1.34 结果表明，此方法有较好的重现性。 表3 回收率实验结果 mg 供试品编号 含量(mg) 对照品加入量(mg) 测得量(mg) 回收率（%） 平均回收率（%） RSD（%） 090402 0.524 0.0504 0.5737 98．61 0.531 0.0508 0.5812 98．81 0.523 0.0511 0.5735 98．83 090405 0.518 0.0514 0.5691 99．42 0.513 0.0503 0.5628 99．01 98.97 0.24 0.52 0.0518 0.5714 99．23 090406 0.519 0.0512 0.5697 99．02 0.524 0.0513 0.5747 98．83 0.517 0.0506 0.5671 99．01 表4 牛黄消炎片中每片胆酸的含量 批号 胆酸含量（mg/片） 平均含量 （mg/片） 1 2 3 090402 0.524 0.531 0.523 0.526 090405 0.518 0.513 0.520 0.517 090406 0.519 0.524 0.517 0.520