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葛根解酒功效的研究

2017-09-20 4页 doc 15KB 20阅读

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葛根解酒功效的研究葛根解酒功效的研究 1,葛根提取液的配制 考虑到乙醇作为提取溶剂会影响葛根解酒功效的实验结果,故选用蒸馏水作为提取溶 剂;另外为保证提取率,增加了提取次数。 称取葛根饮片(小方块长约3一scm)1209于大烧杯中,用蒸馏水在超声清洗器中超声 提取3次,每次3Omm,超声温度70?,固液比为1:10,每次都要经4000转m/m离心机离心过滤30min,然后弃去滤渣,将滤液合并,在真空旋转蒸发仪浓缩至120IllL。得到浓度相当于1克生药/ml的溶液,备用。 2动物管理 小鼠购得后,先在动物室适应3天。动物室温度20?,...
葛根解酒功效的研究
葛根解酒功效的研究 1,葛根提取液的配制 考虑到乙醇作为提取溶剂会影响葛根解酒功效的实验结果,故选用蒸馏水作为提取溶 剂;另外为保证提取率,增加了提取次数。 称取葛根饮片(小方块长约3一scm)1209于大烧杯中,用蒸馏水在超声清洗器中超声 提取3次,每次3Omm,超声温度70?,固液比为1:10,每次都要经4000转m/m离心机离心过滤30min,然后弃去滤渣,将滤液合并,在真空旋转蒸发仪浓缩至120IllL。得到浓度相当于1克生药/ml的溶液,备用。 2动物管理 小鼠购得后,先在动物室适应3天。动物室温度20?,湿度为60%,通风良好。小鼠采用 分笼饲养,每天早晚各添加饲料一次,自由进食和饮水。3天后开始正式作实验 4饮用酒用量的选择 取小鼠(雌雄兼用)25只,随机分为5组,每组5只。禁食12小时后,各组分别按比 例(酒量:体重)灌胃饮用白酒北京红星二锅头01毗/109、o15mL/10g、oZmL/10g、 025毗/lg0?O3mL/10g,观察小鼠醉酒率及死亡情况。小鼠醉酒与否以翻正反射消失作为指 标,即将小鼠背向下轻轻放在动物笼里,若仰位姿势保持305以上,则认为翻正反射消失。 5防醉药效实验 防醉药效实验即先灌胃药物再灌胃饮用酒。取小鼠(雌雄兼用)20只,随机分为2组, 每组10只。分别为:空白对照组和葛根提取液受试药物组。禁食1h2后,空白对照组灌胃 0lmL/10g蒸馏水;受试药物组灌胃ollllL/109葛根提取液。2组均在3omm后以。巧mL/109 剂量灌胃饮用酒。记录各组的醉酒(翻正反射消失)和醒酒(翻正反射恢复)时间(以给酒后 开始计时)。 .2.2.76醒酒药效实验 醒酒药效实验即先灌胃饮用酒再灌胃药物。分组同防醉实验,只是将2组先灌胃 O巧mL/109剂量饮用酒,30mm后再灌胃olmL/1g0药物。记录2组的醒酒(翻正反射恢复) 时间(以给酒后开始计时)。 7对小鼠血液乙醇浓度的影响 乙醇脂溶性较大,可透过血脑屏障入脑,其在脑内的浓度与血中浓度差别不大,因此可以 根据血中乙醇浓度推断酒醉状态,作为考察葛根解酒防醉药效的指标。 东北农业大学工学硕士学位论文 (1)动物分组 将40只小鼠(雌雄兼用)随机分为2组:空白对照组和葛根提取液受试药物组。每组 20只。禁食12小时后,受试药物组先灌胃葛根提取液ollllL/109,空白对照组灌胃同剂量蒸 馏水,30mm后再均灌胃饮用酒。巧mL/109。方法同防醉酒实验。然后分别于灌胃饮用酒 3Omln、6Omln、gomln、12Omln、18Omln后每组各取4只断头取血。 (2)血乙醇(ALc)定量试剂盒原理及方法 A血乙醇(ALc)定量试剂盒原理: 乙醇一NAD+?乙醛+NADH+ 在34n0m波长下,测定每分钟NADH吸光度的变化值(AA/分钟)大小与乙醇含量成正 仁匕。 B工作试剂的制备: 根据血乙醇(ALc)定量试剂盒说明书操作,ALc干粉用smL缓冲液(试剂盒自带) 溶解,放置3一smm后即可应用。在2一SC,48小时内稳定。吸取20林L乙醇浓缩液(试剂盒自带)加30IllL蒸馏水混合,配制成标准应用液。其浓度为:IOmmoL几。当日应用。 3)样品的测定 小鼠断头取血后,血样收于15mL离心管中,放在离心管架上,置于4一8?C冰箱中过夜, 使血清充出,小心避免溶血,次日将血样经4o00/rmm离心机离心10min,进一步沉淀分 离红细胞。取上层血清50林L,加入至500林L的血乙醇(ALc)工作试剂中,即可在半自动 生化分析仪上进行检测。进样前后均以蒸馏水充分清洗比色池,以50匹蒸馏水加入至500林L 的血乙醇(ALc)工作试剂作为空白调零;以50林L配制好的标准应用液加入至500林L的血 乙醇(ALc)工作试剂作为标准。无样品空白输入。直接所得读数即为样品血乙醇的浓度。 8解酒功效实验结果数据处理 解酒功效实验数据结果均用统计学处理,实验数据用均数士标准差表示(万士S)表示, 采用t检验判断组间是否存在差异性。 2饮用酒量的选择 按照阵274}所述方法进行。结果显示以OlmL/10g、O巧mL/10g、02毗/109、O25mL/10g、 03毗/lg0分别给小鼠灌胃饮用白酒。结果显示:oZmL/10g以上剂量组即有小鼠发生急性酒 精中毒死亡。而。.15mL/109剂量既有翻正反射消失,使小鼠呈现醉酒状态(翻正反射消失) 而又无小鼠死亡,所以本实验选用O巧毗/109饮用酒量为宜。 3防醉药效实验 按照【2275]所述方法进行。结果见表3一20。 结果与分析 表3一20防醉药效实验结果 Tab3一20The resul of drug eeffect of Prventing drunk 组别 动物数(只) 醉酒数(只) 醉酒时间(min) 醒酒时间(min) 空白对照组 10 10 94士427 28480士3429 受试药物组 10 10 156士384 24230士1394 注:*受试药物组同空白对照组比p<005:**受试药物组同空白对照组比p<001 结果可以看出:受试药物组与空白对照组相比较,从正常到醉酒时间相对延长了6596%, 而醒酒时间相对提前了1492%。醉酒时间和醒酒时间二个指标均存在着明显的显著性差异 (p<001)。说明了葛根提取液的确可以在饮酒前起到显著的防醉效果。
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