复方利多卡因乳膏体外透皮吸收研究

复方利多卡因乳膏体外透皮吸收研究 中国药科大学. JournalofChinaPharmaceuticalUniversity2002,33(6):489,49l489 复方利多卡因乳膏体外透皮吸收研究 刁雨辉',袁荣冈4,周建平 (南京大学医学院附属鼓楼医院,南京210008;中国药科大学药剂学教研室,南京210009) 摘要目的研制复方利多卡因乳膏,并考察促渗剂对其经皮渗透的影响.方法以Franz扩散池和离体 小鼠皮肤进行体外渗透试验,采用HPLC法同时测定利多卡因和布比卡因的透皮量.结果Azone可显着提高药 物的透皮作用,2%浓度时有最大促渗效果,与不含Azone的乳膏相比,利多卡因和布比卡因的稳态渗透流量(J) 分别提高1.99和2.11倍.结论含2Azone的复方利多卡因乳膏有望成为有效的浅表性局麻药新制剂. 关键词利多卡因;布比卡因;乳膏;Azone;透皮吸收 中图分类号:R944.21文献标识码:A文章编号:1000—5048(2002)06—0489—03 在激光治疗手术前,常规的表面麻醉药给药方 法是皮下或皮内注射,该方法不仅给药不便且使患 者畏惧,采用透皮技术使局麻药渗透进入皮肤组织 产生局麻作用,是目前临床浅表性麻醉用药的新趋 势[1].瑞典AstraZeneca公司采用利多卡因和丙胺 卡因,研制,生产了复方局麻药乳膏(恩纳霜, EMLAcream)和贴片(恩纳贴片,EMLAdisc),并已 取得较好的I临床局麻效果].本文根据盐酸利多卡 因和盐酸布比卡因作用时效的互补性,制备了复方 利多卡因乳膏,并着重研究了Azone对本乳膏有效 成分的透皮促渗作用,为优化复方利多卡因乳膏处 方和临床使用提供实验依据. l仪器,试药与动物 1.1仪器 LC一10AD型高效液相色谱仪(日本岛津公 司),HW色谱工作站(南京千谱软件有限公司), TP一2A型智能透皮实验仪(南京红蓝电子科技中 心),Delta一320pH计(N-特勒一托利多仪器上海有限 公司). 1.2药品与试剂 盐酸利多卡因(江苏济川制药厂);盐酸布比卡 因(上海三维制药有限公司);Azone(扬州化学试剂 厂);复方利多卡因乳膏(自制).甲醇为色谱纯;醋 酸,磷酸盐,氯化钠等均为纯. 1.3动物 昆明种小鼠,雄性,体重为18~20g(中国药科 收稿日期2002—05—30通讯作者Tel:025—3304616—66669 大学实验动物中心提供). 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:KromasilCl8柱(250mm×4.6mm,5 m);流动相:甲醇一醋酸盐缓冲液(pH4.6)一65: 35;流速:1.0ml/min;检测波长:245nm;进样量: 20,ul;柱温:40oC. 2.2专属性试验 对照品溶液制备:精密称取盐酸利多卡因,盐 酸布比卡因适量,用流动相稀释成每lml含盐酸 利多卡因,盐酸布比卡因各约0.1mg的溶液,摇 匀,作为对照品溶液. 样品溶液:取乳膏剂适量(0.5g),均匀地涂布 于Franz扩散池的鼠皮上,l2h取接收液适量,0.2 tam滤膜滤过,取续滤液作为样品溶液. 空白基质液:取空白基质0.5g,均匀地涂布于 Franz扩散池的鼠皮上,12h取接收液适量,0.2tam 滤膜滤过,取续滤液作为空白基质液. 分别取上述对照品溶液,样品溶液,空白基质 液20进样,色谱图,结果见图l(A,B,c).结 果表明空白基质及皮肤不干扰测定. 2.3标准曲线的制备 精密称取盐酸利多卡因,盐酸布比卡因各l00 mg,置lo0ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻 度,摇匀,得标准储备液.精密吸取标准储备液 0.05,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0ml置l0ml量瓶 490中国药科大学33卷 A Fig1.HPLCofchemicalreferencesubstance(A),blankingredient(B)andsample(C) 1Lidocaine;2-Bupivacaine;3-blankingredient 中,加流动相稀释至刻度,摇匀.取20l进样,按峰 面积()对浓度()进行回归.线性范围均为5, 300pg/ml,标准曲线方程为:利多卡因:一0.7976 +0.000506A(r一0.9999);布比卡因:C一0.3748 +0.000548A(r一0.9999). 2.4体外透皮实验[3] 2.4.1离体皮肤的制备小鼠断颈处死后,用剪 刀减去小鼠腹部的毛,涂上脱毛液,放置l,2min 后用水冲洗,剪下腹部皮肤,除净皮下脂肪,洗净, 将其内表面贴于用0.9生理盐水湿润的滤纸上, 置培养皿中,备用. 2.4.2透皮扩散装置同Franz扩散装置,释药 面积为2cm,接受介质体积为l6ml,搅拌速度为 400r/min,37-+-0.5?恒温. 2.4.3实验步骤将皮肤固定在37C恒温接受 池上,在皮肤表面均匀涂布0.5g软膏剂,加l6ml 磷酸盐缓冲液(pH一7.4)于接收池,启动TP一2A型 智能透皮实验仪,并开始计时.分别于l,2,4,6,8, l0,l2h取样,每次取2.0ml,再立即补充2.0ml缓 冲液.样品用0.2pm微孔滤膜过滤,取续滤液20l 进样(必要时加流动相定量稀释),记录峰面积,用 标准曲线求出相应的药物浓度,并按下式计算出各 时间点的累积渗透量(Q): "一l —C×V+V0× I:l C:第个取样点测得的药物浓度(pg/m1);Ci: 第i个取样点测得的药物浓度(pg/m1);V:接收室 中的缓冲液体积(m1);Vo:取样体积(m1). 以Q,t作线性回归,直线的斜率即为稳态渗 透流量(J,pg/h).将稳态直线推至时间轴,得渗透 时滞t(h).结果见图2,3和表l,2. 6000 5000 竺4000 3000 2000 l000 0 一 ?一0一一一1一?一2一×一5 Fig2.Thepenetrationprofilesoflidocainefromthecreamcontaining differentconcentrationofAzonethroughthemiceskin 一 ?一0一一一1%一?一2一×一5 Fig3.Thepenetrationprofilesofhupivacainefromthecreamcontaining differentconcentrationofAzonethroughthemiceskin 结果表明:利多卡因和布比卡因的渗透无时 滞,在0,12h范围内,不同浓度的Azone对利多卡 因和布比卡因的渗透速率(J)和药物12h渗透总量 (Qz)的影响大小依次为2,5,1,0.可见 Azone浓度为2时,对软膏剂中的利多卡因和布 比卡因有最佳促渗作用. 3讨论 利多卡因是常用的局麻药,一般药效维持时间 6期刁雨辉等:复方利多卡因乳膏体外透皮吸收研究491 Tab1.Thepenetrationparametersoflidocaine("=4) Tab2.Thepenetrationparametersofbupivacaine("一4) 在1.5h,属于短效局麻药;布比卡因为目前已知局 麻药中时效最长的药物(可达5h以上),麻醉强度 为利多卡因的4倍,安全范围较利多卡因大].两者 合用具有起效快,麻醉作用时间长,临床适用性广 等特点.因此本文根据两药的作用特点及临床时效 的互补性,制备了含利多卡因和布比卡因的外用软 膏,以满足临床用药之需求. 在本乳膏剂处方中,利多卡因和布比卡因小鼠 离体透皮实验无时滞(tlag<0),且利多卡因较布比 卡因更易透过小鼠皮肤,利多卡因12h累积透皮 量约为布比卡因3.2倍(稳态渗透流量之比为3.1 倍),表明本乳膏能发挥利多卡因快速起效和布比 卡因延长麻醉时间之作用,符合处方设计目的和临 床用药要求. Azone为典型的透皮促渗剂,对大部分药物具 有良好的透皮促渗作用].在乳膏剂处方中,不同 浓度的Azone对利多卡因和布比卡因均有明显的 促渗作用.2Azone对药物具有最大促渗作用,利 多卡因12d,时累积透皮量(Q12)为5379嵋,稳态渗 透流量(J)为412g/h;布比卡因12h累积透皮量 (Q12)为1846嵋,稳态渗透流量(J)为142.6嵋/h; 与不含Azone的乳膏相比,利多卡因和布比卡因稳 态渗透流量分别提高1.99倍和2.12倍,表明Azone 对布比卡因的促渗作用较利多卡因稍强.同时证明 了Azone浓度在O,2范围内,对药物的透皮具有 浓度依赖性,浓度愈高,透皮促渗作用愈强;但5 Azone对药物的促渗作用有降低趋势,其原因可能 是高浓度Azone对药物具有较高的溶解度,而 Azone一般较难透过皮肤,导致药物透皮性下降. 参考文献 L1]FleischerAB,FordPG.Howtominimizeadverseeffectsof topicalanesthetics[J].Sk/nandAging,1998,6(3):54—61. [23虞瑞尧.5恩纳霜在皮肤科临床的应用[J].中国新药杂志 (CldnNewDrugs.,),2000,9(9):608—610. [3]周建平,钟鸣,黄建华.尼莫地平透皮制剂的研究[J].中国 药科大学(.,ChinaPlurrmUnw),2000,31(5):348—351. [4]上海医科大学.药理学:[M].北京:人民卫生出版社, 1979. [53毕殿洲.药剂学:第四版[M].北京:人民卫生出版社,1999. StudiesonPenetrationoftheCreamContainingLidocaineand BupivacainethroughtheMiceSkin DIAOYu—Hui,YUANRong—Gang,ZHOUJian—Ping TheAffiliatedGulouHos~talofNanjingUniversity,Nanjing210008;DepartmentofPharwu~ceutics,China PharmaceutwalUniversity,Nanjing210009,China ABSTRACTAIMTodevelopthecompoundlidocainecreamcontaininglidocaineandbupivacaineandtostudy theeffectofenhancers.METH0DThepermeationofthecreamwasstudiedwithFranzdiffusingcellandmice skin.TheamountoflidocaineandbupivacainewasdeterminedbyHPLC.RESULTSAzonecanenhance markedlythelidocaineandbupivacainethroughthemiceskin.Whenthecreamcontaining2Azone,thecream hadthebestpermeationratiothroughthemiceskin.Thesteady— statepercutaneousflowsoflidocaineand bupivacaineinthecreamcontaining2Azonewere1.99and2.1ltimesthanthoseofthemintheblankcream respectively.CONcLusIONThecompoundlidocainecreamcontaining2Azonewillbeaneffectivenew preparationforclinics. KEYWORD_sLidocaine;Bupivacaine;Cream;Azone;HPLC;Penetration