疏肝解郁活血法抗衰老机制研究——柴胡疏肝散加味对小鼠血清SOD，MDA影响（可编辑）

疏肝解郁活血法抗衰老机制研究——柴胡疏肝散加味对小鼠血清SOD，MDA影响（可编辑） 成都中医药大学 硕士学位论文 疏肝解郁活血法抗衰老机制研究??柴胡疏肝散加味对小鼠血 清SOD,MDA影响 姓名:冯鹰 学位级别:硕士 专业:中医基础理论 指导:王承平;林齐鸣 20030401 中文摘要 目的:依据中医理论,结合现代研究,探讨疏肝解郁活血法抗衰 老的作用机理。方法:将小鼠按照月龄分为青年、中年、老年三个大组, 并在每一大组中设立疏肝解郁活血大、中、小剂量组、六睬地黄丸组、vE 组、空白对照组。灌胃给药四周后,小鼠剪股动脉法取血处死,检测血清 超氧化物歧化酶soD的活性、丙二醛MDA的含量,结果:采用PENS 医学统计软件计量的方差分析。结果显示,在青年缉,j、鼠,各甩药组 与对照组无差异p,o.05:在中年组小鼠,各用药组与对照组均有差异, 其中疏肝解郁活血中剂量组与对照纽SOD和MDA均有显著性差异po.01: 在老年组小鼠,六味地黄丸组与对照组有显著性差异fpco.01、疏肝解郁 活血小剂量组与对照组SOD有显著性差异pco.01,MDA有差异pcD.05; vE组、疏肝解郁牾血中剂量组与对照组有差异po.05;疏肝解郁活血大 剂量组与对照组无差异p,o.051。结论:青年组小鼠的实验结果提示: 在青年期使用药物来抗衰老没有必要。中年组小鼠的结果提示:肝郁血瘀 是人体衰老的启动环节,同时提示较早介入衰老过程的于预,在人体早衰 的阶段采取必要的抗衰老的措施有助于延缓衰老的发生。老年组小鼠的结 果提示:滋补肝肾之阴以及小裁量瑰肝解郁活血药物在老年期具有较好的 抗衰老的效果;面垤和中等剂量的疏肝解郁活血药物有?定抗衰老作用, 大齐j蚕的疏肝解郁活血药物没有抗衰老作用。从本实验可以推知巯肝解郁 活血法能延缓实验小鼠衰老的进程,抗衰老开始的最佳时机应该在衰老征 象产生之前,即中年期,方能取得最佳的效果。 关键词:疏肝解郁活血,抗衰老,超氧化物歧化酶SOD、丙二 醛MDA Abstract Objective:InthelightofthetraditionalChinesemedicine theory,unitedcontemporaryresearch,thean i-agingvalidityofliver invigoratethecirculationofbloodandeliminateQistagnationisscattered inthecertification,Moreovertestifythismeans'mechanism.Methods: Thelittleratinaccordancetomonthlyagearedividedintoyounggroup、 Middleagegroup、Oldagegroup.Andeachofthesegroupsaboveare dividedintothefoHowingsmallroupsastheinvigoratethecirculationof bloodandsootheliverg oups,therearsmall,middle,andbigdoses; Linweidihuangwangroup、vEgroup、theblankcomparisongroup.Pours themedicinetothestomachwithi脚ectiontubes.Afterfourweeks,kill theseratesbycuthefemoralandtestSOD、MDAinblood.Result: Fortheyounggroup珏ttierat,thereisnotobviousdivergenceagainstthe comparisongroupp0.05;Formiddleagrats,therepossessdivergence betweenthemedicineseriesagainstthecomparisonseries?Amongthem themiddledosesoothingl verandmovingbloodstasisseriesagainstthe blankseriesthereissignificancedivergence?0.01.Foroldageseries, theLluweidihuanwangroupandthesmalldosesoothingf verandmovin8 bloodstastshaveanotablydifferencepO.01fromthecompa isongroup- alsoVEgroupandthemiddleoseofthesoothingHverandmovingblood grouphaveasignificancefromtheblankgroupp0.05.Conclusion suggeststhatyouthisaparticularperiodthatthereisnoneedto takethl medicinestor sistsenility.Forthemiddleagedpromptinghatthelive qistagnationandthekidneyyindeficiencyisthestartupofthea乎n processofhuman,moreoverpr mptingearlyintervenesofati-agin processc髓helpdenythecomingofthesenilitythishowsthatforol, 2 peopletonourishtheYinofthefiverandkidneycanstoptheagingprocess; theVEandthemiddledoseofthesoothingliverandmovingbloodstasis grouphasdifferencefromthecomparisongroup,thiss owsforoldpeople usesomeVEorsmalldoseofsoothingliverandmovingbloodstasis medicinecarlhelpanti-aging;thebigdosofthesoothingl verandmoving bloodstasisgrouphasnodifferencefromthecomparisongroup,thisshows thatforoldpeople.theyhaveabasicbodyconditionhatisYindeficiency SOtoomuchmovingbloodandsoothingfiverherbsisharmfulorYin。 Soothingliverandmovingbloodstaslsherbshasthefunctiontodelaythe agingprocess.Thebesttimetobegintointerveneintheagingprocessis beforetheagingprocessbegins,andchoosedifferenth rbsindifferent stagesofthelifetimewillhaveabestresult. Keywords:anti-senility,soothingtheliverandmovbloodstasis, SODsuperoxidedimutoses,MDA 3 l前言 人类对自身衰老过程的认识和抗衰老的科学探索随着科技的进步而 不断完善和发展。20世纪,随着生物技术,分子生物学和近代医学的发展, 人们对衰老的了解有了飞跃的发展,然而这些研究成果距离满足人们抗衰 老的要求,还有一定差距。进入21世纪后,人类面临人口老龄化的严峻挑 战,包括我国在内的许多国家已经进入老龄化李?会年龄在60岁以上的老 年人占人口总数的10%以上Il】。目前,我国老年人已达1亿3千多万人, 这些老年人,包括一部分中年人,受瓤衰老的严重困扰,因而寻我~种有 效的抗衰老方法,在今天仍然具有其实际意义。 现代医学研究证实,衰老发生的具体过程是机体内外环境诸多因索相 互作用的结果,其中遗传基因对机体衰老起着主导作用,社会心理因索、 环境因紊对人体的衰老过程起着重要的影响作用。人类具有相对固定的寿 命上限,有着生长壮老已的生命规德,通过各种凋摄,改善内外环境因素, 可以增强人的体质,减少或避免疾病的发生,使机体的生命活动过程处于 阴阳协调、体甩和谐、身心健康的最佳状态,从而达到“尽终其天年”的 目的。中医理论认为,肝能调畅气机,调畅情志,调和气血,协调五脏六 腑的功能;实验研究亦证实肝与衰老过程中的多个环节,如应激反应、神 经一内分泌~免疫网络系统等密切相关,故肝在养生抗衰老中应具有重要 地位。但目前中医药抗衰老的实验研究所涉及的理论主要集中在脾肾虚衰、 邪气积聚等方面。对于肝在人体衰老中的地位,以及采用疏翮稃郭活血法 来进行抗衰老是否有效及其机理有待于更进~步研究。本实验立足于此, 以期开辟又~抗衰老的新方法。 2理论研究 2.1中医对衰老机制的认识 中医学在长期的医疗实践中,对人类衰老机制形成许多独特认识。归 纳起来,传统中医的衰老理论主要有: 2.1.1脾肾虚衰 在《素问?上古天真论》中说“丈夫??五八,肾气衰,发堕齿槁七八,肝气衰,筋不能动??八八,则齿发去。”此段明确指出了机体生、 长、壮、老、已的自然规律与肾中精气密切相关。东汉王充则在《论衡?气 寿篇》中指出“夫桌气渥则其体强,体强则其命长;气薄则其体弱,体弱 则命短。”《医学正传?卷一》中有“肾气盛则寿延,肾气衰则寿天”之说。 脾为后天之本,气血生化之源,人体的生长发育,及其维持生命活动的一 切物质均有赖于脾胃之运化。《景岳全书?论脾胃》中指出“土气为万物 之源,胃气为养生之主,胃强则强,胃弱则衰,有胃则生,无胃则死。是 以养生家当以脾胃为先。”《临证指南医案》指出“高年阳明气衰。”基于 这些传统理论,中医学在清代以前的抗衰老药物以补脾益肾为主,按李千 [21、戴慎[31等统计,补肾、补脾和脾肾双补三类方,占清之前历代抗衰老 方剂的90%。从上世纪80年代末期至90年代的10余年间延续了这一理 论传统,进行了大量以补益脾肾为机理的抗衰老研究。其实验结果显示: 1、补肾在抗衰老方面的积极作用主要有:改善衰老见症积分值、增强免 疫机能、改善神经内分泌功能、增高性激素水平、延缓大脑组织的衰老、 降低自由基和过氧化脂质LPO水乎、升高超氧化物歧化酶SOD活 性、改善老年人的视力、握力、记忆力、性功能和肺活量、增强耐疲劳、 耐缺氧能力等。2、补脾益气类实验结果显示,主要有较好的改善衰老症 状和非特异性免疫的作用。此外,有少部分实验报道有改善记忆力、视力、 动作协调能力的作用。对比益气健脾法和补野法的抗衰老作用,初步显示, 益气健脾具有一定的抗衰老作用,但侧重于补肾比侧重于益气健脾的抗衰 老作用更为广泛、显著。3、脾肾双补法研究结果显示,其抗衰老作用基 本类似于补肾法而优于益气健脾法。据瞿延飞州统计在此期间的抗衰老研 究的56首方剂中补肾类方剂共计33首,占总现代研究抗衰老方的60%。 其中,】7酋专补肾,】6首以补肾为主,同时兼以补肝、补心、活血等。 益气健脾类方剂共12首,占总现代研究抗衰老方的21.4%,此类方剂的 绝大多数是I以益气为主或益气与健弹并重。肆肾双李类方剡6首,古总现 代研究抗衰老方的lO.7%。以上补肾、益气健脾和脾。肾双补的方剂共51 首,占总现代方剂的91.1%。这一结果基本上与清以前抗衰老方剂的统计 结果一致,显示出在抗衰老研究的早期阶段尽管涌现出了大量的抗衰老新 方、新药,但是其机制并没有突破中医传统的抗衰老思维局限。 2.1.2邪气停聚 这一系列理论认为衰老是由于体内元气或脏气虚衰所致有形或无形 的邪气停聚,影螭了脏腑气盔的正撵哆参艘所致。这些郛气包括血瘀、痰湿、 气郁等。内生之邪产生后壅塞于体内,更加耗伤正气,成为导致机体衰老 的重要因素。老年人由于高年、脏腑功能低下,推动无力可致瘀:或气枕 升降失司,致血液无以营运亦可导致血瘀。《医林改错》指出“元气既虚, 必不能达于血管,血管无气,必停留而淤。”《灵枢?天年》也认为“血气 虚,脉不通,真邪相攻,乱而相引,故中寿而尽也。”从上一世纪八十年 代末期开始,许多学者提出了活血化瘀法延缓衰老的理论,并进行了实验 研究。磬德馨岱1提出“气虚血瘀是衰老的根本原因”,认为人体随着年龄 增长,长期受七情、六淫、外伤、房室等多种致病因素及各种疾病的困扰 易致气血失调,流通受阻,瘀血阻滞。瘀血又可使脏腑得不到正常濡葬阻 致脏腑虚衰,精、气、棹亏耗,气的生化作用减退,形成气虚血瘀,虚实 夹杂的局面。欲谋长寿,必须消除血瘀。实验证实:固本清源、益气化瘀 之法,有改善血液流变性、增强机体应激能力、增强免疫力、促进细胞脂 褐素排泄、改善老年人衰老症状等抗衰老作用。韩明向‘司等提出“虚?瘀 一衰老模式”的观点,认为年高之人气阴两虚,气虚则血无力运化而血行 瘀滞,阴虚则血液粘稠度增高,也易致瘀。经实验证实,益气养阴活血之 法有改善衰老症状、提高老年人记忆力及动作反应能力、延长动物寿命, 增强抗氧化能力,改善血液流变性及心肌耐缺氧能力的功效,表现为有一 定的抗衰老作用。薛红丽【.1等认为肾虚血瘀是衰老的基础,认为肾虚血瘀 对衰老的影响与自由基代谢紊乱有关。当机体老化,抗氧化能力下降时, 过剩的自由基就会损伤组织。实验研究证实,某些活血化瘀药物,有清除 自由基、抑制自由基代谢产物的作用。补肾活血方药在改善老年人自由基 代谢方面踢显优于单纯补肾褥单纯活血的方药。脏气虚衰、血流部涝则津 液布散失其常道,或停或聚,发为痰饮。朱丹溪在《格致余论?养老论》 中说“夫老人内虐脾弱阴亏性急??阴虚难降则气郁丽成痰。”痰浊既是 衰老的致病因素,又是衰老的病理产物。其病理基础在于老年人气血亏虚, 脏腑功能失常,从而导致水谷津液不能正常输布,聚而成痰生浊。皮明均 删等人实验显示化痰开窍法可显著抑制血清和脑过氧化脂质CLIO含量的 升高,提高脑组织超氧化物歧化酶SOD活性及谷胱甘肢过氧化物酶 OSH-PJ0活性,从雨显示化痰逐瘀法有一定的挽衰老意义。多脏虚损兼 挟实邪衰老论:俞征宙嗍等对878例中老年人进行了中医症候流行病学调 查,发现随着年龄增长,机体各脏器虚损及气滞、血瘀、痰浊等虚实挟杂 证的患病率不断提高,呈显著性正相关。故提出中医衰老机理为多脏器虚 损与痰浊、气滞、血瘀等相互作用,本虚标实,循环反复,终至全身功戤 减退以至衰竭。 2.1.3情志失调 中医学历来重视情志摄养,认为情志失调是导致人体早衰的重要诱 因。其理论依据主要有二,一形神失调。形神统一是摄养的重要方法之一, 形神失弼可以导致病理往妁衰老,彤是棹产生敲物质基础,两挣又对形具 有重要的调节作用。形神不可须臾分离。《苟子?天论》说:“形具而神生。” 范缜《神灭论》中说“神即形也,形郎棒也。是以形存搿秤存,形谢则棹 灭。”形神统一的物质基础是“精气”。精可化气,气可生精,精气互化。 精气生神,精气养神,神又统驭精气。历代中医的养生家都非常重视精、 气、神的调摄,称其为“三宝”。而其中龙为强调“神”在保持人体健康、 养生延年方面的重要作用。《养生三要?存神》中强调指出:“聚精在于养 气,养气在于存棒。神之于气,犹母之于子也。教捧凝则气聚,神散则气 消,若宝惜精气而不知存神,是茹其华而妄其根矣。”理论之二:七情致 病。七情是指人的喜、怒、优、思、怒、恐、谅等七种情志变化。七倩静 物质基础是五脏精气,七情是脏腑功能的重要外在表现。《索问?阴阳应 象大论》说:“人有五脏,化五气,以生喜怒悲忧恐。”七情正常则五脏气 血和利,精气充沛,功能正常。丽当七博太过时也会使脏腑气饥升降失常, 气、血、精、津运行逆乱受阻,?从而使五脏功能异常,产生疾病。《灵枢?1:3 问》篇指出:“大惊卒恐,则血气分离,阴龋破效,经鳍厥篼,霈道不通, 阴用楣逆,卫气稽留,经脉虚空,血气不次,乃失其常。”《淮南子’精神 训》说:“人大怒破阴,大喜坠阳,大忧内崩,大怖生狂。”《素问‘生气 通天论》中也说:“大怒则形气绝,而血菀于上,使人薄厥。”情志遽变使 人阴阳乖逆,气血逆乱,从而导致疾病和早衰的发生。故精讳摄养对于保 持人俸健康,延年益寿具有重要意义。正如《灵枢?根结》所说“调阴与 阳,精气乃光,合形与气,使神内藏。” 另外,现代医学研究显示入的铸志因素在导致衰老的迸崔中具有重 要意义。我国延缓衰老的理论与实践家,百岁老人著名生物化学家郑集教 授”川通过对109位老人的调查发现,被调查的老人都是性格开职、乐观积 极的。而我国对88名百岁老人的研究表明,性格开朗者占95.5%,孤僻忧 郁者仅占4.5%。李电东【1”研究发现,以急躁、好胜、爱发脾气为特征的A 型性格者易患心血管疾病。不良心理因素易导致各器官产生种种生理、病 理变化,如睛绪激动、大喜大怒,可使肾上腺分泌儿茶酚胺骤然上升,使 血压升赢,诱发心律失常、心肌梗死、脑溢盎,甚至猝死,还可以通过挣 经内分泌系统干扰免疫系统,使免疫功能下降导致恶性肿瘤的发生。因此, 保持良好的心理状态,稳定安和的情绪,能使人体生理代谢她于平衡稽I定 状态,有助予减少疾病的发生,促进健康长寿。 肝是中医学中与人体|暗志关系最为密切的脏,肝在衰老中的作用亦受 到入们越来越多的关注。徐中环指出“衰老应责之于肝部”【121,从传统 理论的角度对肝在衰老中的作用进行了探讨;袁静[131从肝为女子之先天以 及女性易肝郁的角度出发认为女性衰老自g始动因素应当责之于肝郁。 2.2现代医学对衰老机制的认识 衰老aging是指机体生长发育成熟后,机体的生理功能逐渐下降, 组织器官逐步发生逦行性改变,并最终走向死亡的]过翟。正常衰老R鲫n趟 aging是~个生理过程,具有普遍性、累积性、渐进性和不可逆性,直至 生命的终点,这是最理想的过程,称之为健康老化succesdulagin93。但 是,由于种种内外因素的作用,能够活到应有寿限115?120岁的人却很 少Il41。关于衰老的机理,国内外已经作了大量研究,提出了200多种衰老 的学说,诸如生物铎学说、基因调控障碍学说。自由基学说、细胞凋亡学 说、端粒学说、代谢失衡学说、免疫功能紊乱学说、“微损伤”衰老学说、 9 缺血损伤学说、糖基化衰老学说、羰基毒化衰老学说等等。这些学说之间 一般都存在着内在的联系,并互为因果。下面仅介绍与本试验有关也是目 前受到大家公认的几种学说: 2.2.1遗传程序学说 此学说认为人类的生长、发育、衰老和各阶段是由遗传程序规定,具 有一定规律的过程,是按已定的时间表顺序产生的生命现象。生物的衰老 与遗传因素密切相关,衰老是在遗传上“程序化”了的过程,也就是说衰 老是机体固有的随时间而演进的退化过程的结果。不同种属的生物具有不 同的寿命,是由于它们按照预先已安排好了的程序,走完“出生、发育、 成熟、衰老与死亡”的生命全过程。其代表理论有:细胞内有衰老基因; 基因密码受到限制:重复基因耗损:DNA脱氧核糖核酸修复功能下降 【151等。以上观点均说明了任何生物体的寿命是有上限的,不可能无限地延 长。 2.2.2自由基学.说 1956年英国学者Harman首先提出衰老的自由基freeradicaltheory 学说,该学说认为,人体在内外环境的作用下生成的自由基如:超氧阴离 子?02一、羟基?OH-、单线态氧】0r和过氧化氢?02等。 在生理情况下,机体内产生少量氧自由基,能被体内抗氧化酶和抗氧化剂 迅速清除.一般不会产生细胞损伤作用。体内存在的抗氧化酶类包括过氧 化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-PX 等.当自由基在体内生成后,过氧化物鳗亿酶SOD可使之发生歧化反 应生成水和?02,H202可以迅速被细胞内的过氧化氢酶CAT或谷睢甘肽 过氧化物酶GSH?P等清除。抗氧化剂包括维生索C、E、辅酶Q10、硒、 琉基化合物等。随着年龄增长,由于抗氧化酶的活性不断下降,体内产生 的过量氧自由基无法得到及时清除,以至大量的?02-迅速与体内的核 酸、蛋白质、氮基酸、脂质等产生反应,生成氧化物或过氡化物。由于生 物膜中不饱和脂肪酸被氧化生成过氧化物时,可使细胞膜的通透性改变, 线粒体、微粒体膜膨胀破裂,造成缅臆代谢和功能形态的改变,从而引起 细胞的衰老死亡。脂质过氧化作用,还能使结缔组织中的胶原蛋白产生交 联而收缩,使皮肤发皱、酶活力降低、蛋白质变性。过氧化脂质还可与蛋 白质发生交联形成脂褐素,沉积于心、脑、心肌、骨骼肌、肾上腺、睾丸、 卵巢、肝、肾等细胞内,最终会破坏细胞的正常代谢,加速细胞乃至整个 机体的衰老进程。自由基导致脂质过氧化,引起细胞破裂和进行性病变是 衰老的主要原因。因此,自由基学说已被公认为人类衰老机理现代理论中 具有代表倥的学说之一。 2,2.3神经学说 生理解剖证明,老年人随着增龄,脑重量逐渐减少,30岁与80岁脑 重量比较,脑重量减少约20%一25%,脑回缩小秘籍室系统扩大。并伴有 神经细胞数减少,出现老年斑、脂核紊增加、神经纤维缠结的颗粒空泡变 性的增加。神经生化的退变表现为脑生化成分的改变,如脑内蛋白质减少 1/4。1/3,脑脂质减少28%。中枢神经递质的含量变化是神经系统衰老 的重要标志,老年人脑内如皮层、尾状核、纹状体、丘脑等区域去甲肾上 腺素、多巴胺和脑帮乙酰胆碱含量均照增龄而有所减少。而5一羟色胺含 量明显增加。中枢递质受体在老年期普遍表现为受体数目减少,亲活力有 所降低。 2.2.4免疫学说 随着年龄的增长,机体的免疫系统功能逐渐衰退.具体表现在免疫器 官的中枢一胸腺随增龄而逐渐退化、萎缩,胸稼激素分泌减少,使未成熟 的淋巴细胞分化能力减弱,自身花环形成细胞明显增多;T淋巴细胞随增 龄对有丝分裂索及抗CD3抗体的增殖反应能力下降,外周血淋巴细胞、T 细胞的比例的绝对数亦随增龄而下降。T细胞生长因子如?~2自细胞介 素2的生成以及诱导NK细胞自然杀伤细胞产生、NK细胞的话性等 均有不同程度的减退;老年人外周血B淋巴细飑对抗原的增殖反应弱,血 清中抗体水平有增龄性改变,同时由于增龄时胸腺It趋退化,T细胞亚群 失调.引起抑制性T细胞明显减少,从f碍致老年人自身抗体的形戒增加 和自身免疫性疾病的发生。 2.2.5应激反应学说 该学说认为老年人随着年龄的增长,机体交感肾上腺髓质及下丘脑一 垂体一肾上腺皮质系统对各种应激因子的适应能力明显减退。可表现出体 力下降、预备力减少、适应力和抵抗力低下,过量或长期的有害刺激可引 起代谢紊乱性疾病、感染性疾病、心血管疾病、肿瘤等的发生。而这些疾 病的发生与发展,反过来又进一步由?速了衰老的进程。 2.2.6血流变学说 临床研究表明,某些衰老征侯如皮肤色素沉着、粗糙、老年斑、巩膜 混浊等,以及老年性疾病如动脉硬化、高血压、冠心病、骨质增生、前列 腺肥大等,都是体内瘀血深化的表现,也是最常见的导致衰老的死亡的原 12 因。新近的动物实验也证明了这一观点。实验发现,老年太鼠豹血液流焚 学有显著性变化,表现为血清或血浆的粘度增高,易形成体内、外血栓, 红细胞压积增高,红细胞变形能力降低,血浆纤维蛋白及胆固矽增高,大 鼠随增龄逐渐形成粘、浓、凝、聚之血液流变性改变‘161。 2.3肝气主疏泄是抗衰的生理基础 2.3.1肝主升泄调畅五脏之气 肝属木,居五行之首,其位东方,于时应春。春为四季之始,内孕生 升之机,生气和则五化皆平。《素问?四气调神大论》说:“春三月,此为 发陈,天地俱生,万物以荣。”春气内应于肝,肝为厥阴,主气之升发,又 称为阴中之少阳。肝的主要生理功能为升泄。肝气升发透泄,能凋畅全身 之气,使之通而不滞,散而不郁。气、血、津、精的升降环流有序,诸脏 之气生升有由,化育既旌则气血冲和,五脏安定面生机不息,《杂病源流犀 烛?肝病源流》中说:“一阳发生之气,起于厥阴,而一身上下,其气无所 不乘。肝和则生气,发育万物,为诸脏之生化。” 肝能协调通达五脏之气维持五脏功能间的平衡:1肝与肺:肝气升 泄,助肺肃降,协调气机。肺位于上,肃降之气,于右而降,肝位在下, 升发之气,于左而升,升降协调,气机调畅。2肝与心:肝气升泄,升 发相火,资助心君;主持谋虑,辅佐心神。肝气升发,性喜条达,功善升 发阳气,宣散郁滞,通利气血。并辅助心气发动,使虫行有力。《明医杂著?医 论》薛已注:“肝气通则心气和,肝气滞则心气乏。”另外,肝贮藏血液, 调节血量,收摄血液,也能助心调控血液的环行。肝主谋虑,主思维筹划, 比较鉴别,分析推理。谋虑之神,需赖肝气的升泄,方能付诸实施。肝气 调畅,血行通达,情志舒畅,有辅助心神之功。3肝与脾:肝气升泄, 疏达中土,助脖运化,肝气舟,使脾升则毽,水谷之精褥以上归心肺化生 气血;升已助胃降,浊气下达,水谷乃化。如唐容川说:“木之性主疏泄, 食气入胃,全赖肝木之气疏泄之,而水谷乃化。”4肝与肾:肝气升泄, 启发肾阳,升举元气;精血互化,藏泄适度,生殖有常。肝气升,肾中之 元阳得以升启,随三焦之道布达全身,推动激发脏腑使之做功,鼓舞脏腑 气化,为人体生命活动之源。另外,肝肾同居下焦,肝藏血,肾藏精,精 可化血,血可充调肾精。精血充足,闭藏于肾,疏泄于肝,经络疏通,冲 任脉盛,则精窍启闭有常,精液藏泄适度。肝与五脏的关系,《张氏医通?卷 十一》概括为:“肝脏升发之气,生气旺则五脏环周,生气阻则五脏留著。” 综上,因肝属木,其母为水,其子为火,介于水火之中,阴阳之间。从阴 阳论,肝经为厥阴,肝脏为少阳,为阴中之少阳,是阴阳变化的转折点。 故五脏之肝,实为阴尽阳生,阴阳合一之脏。所以肝之升泄,能调畅气机, 调和气血,维持血行,协调功能,调节阴阳。气血调,阴阳平,机能旺, 则能延年益寿,防止衰老。 现代医学对肝主疏泄的本质进行了广泛而深人地研究。结果显示肝主 疏泄的功能与内分泌一神经~免疫网络系统的功能密切相关,故而肝有可 能通过对内分泌、神经、免疫等系统的调节,而影响衰老的迸程?陈家旭 【171等通过从文献、l|缶床的角度对肝主疏泄的实质进行研究,认为肝对情志 的调节,与高级神经活动有关肝脏对内分泌有调节作用。黄柄山“射等对 肝郁气滞及其相关证候进行了以现代病理生理学为基础的l缶床X览察,认为 肝主疏泄的功能与大脑皮层的兴奋、抑制以及植物神经尤其是交感神经等 多种因素有很密切的关系。乔明琦?91等通过对肝郁证动物模型的研究,提 出“肝主疏泄与调节单胺类神经递质有关”的假说,认为由于肝郁证模型 单胺类神经递质改变,推知正常情况下肝主疏泄的功能是通过调节机体及 外周器官中该类递质的含量,代谢及生理活性而实现的。疏泄正常、气机 调畅的实质是该类递质的生理活性,及其参与支配的器官功能正常;疏泄 不及,气机郁结的实质则是因郁影响了肝对该类递质的正常调节,导致中 枢和器官中肾上腺素、5一羟色胺、和多巴胺等的含量和活性改变。由衰老 的机理可知,人体在老年时大多出现神经、免疫、内分泌系统功能的低下, 疏肝解郁有助于提高神经~内分泌一免疫网络的活力,从丽延缓衰老的到 来。 从对肝脏的现代研究可以看出,肝主疏泄的实质与衰老的机理有许多 相关之处,如前文所涉及的衰老机理中的免疫学说、神经学说等等。肝在 衰老中的具体作用以及疏肝解郁活血方法能否有效地延缓衰老还有待于实 验研究的证实。 2.3.2肝主疏泄词畅情志 肝调畅情志的功能,是肝主疏泄功能的一个重要方面。《素问?宜明 五气篇》日:“肝藏魂。”所谓魂,是古人对人体心理现象的一种认识。《灵 抠?本掉》云“随神往来者潺之魂。”《素问?灵兰秘典论》中也提到“肝 者,将军之宫,谋虑出焉。”情志活动分属于五脏,总统于心,调控于肝。 正常的情志活动,需要依赖于气、血、精、津的旺盛及调畅;情志异常对 机体生理活动的主要影响也在于扰乱气、血、津、精的运行,或伤及内脏 致气、血、津、精的生成障碍。肝主疏泄的功能之所以能调节人体的情志 活动,与肝调畅气机,调和气血的功能密切相关。肝的疏泄功能正常,则 气机调畅,气血和调,心情开朗。正如《灵抠?平^绝谷》中说:“血脉和 利,精神乃居。”肝失疏泄,气机不畅,在情志上则表现为郁郁寡欢,情绪 压抑。反之,情志活动的异常,易致气机失调,也会影响肝疏泄的功能。 如郁怒引起气滞、气郁,导致肝失疏泄;暴怒引起肝气横逆,或肝火上犯。 《灵柩?论勇》云:“怒则气盛而胸张,肝举而胆横,眦裂而目扬,毛起而 面苍。”另外其他的情志刺激也可伤及肝产生病变。如《灵枢‘本神》云: “悲哀动中则伤魂”,南宋陈无择在《三因极一病证方论》中也提出:“优 t5 思伤肝”。甚至有些医家对七情分属五脏提出质疑。如张景岳认为不能刻 板地认为某情定伤某脏,并提出:“恚怒忧恩,气逆肝胆二经。” 现代研究显示,人体调节心理应激反应的核心是肝脏,肝脏通过对气 机、血液和情志等的影响,调节人体的应激反应。人体气机的变化是应激 反应中重要的生理改变,并由此导致了机体其他的生理和病理变化。机体 的应激机制与一些社会、心理因素所导致的现代病、疑难病的发生、发展 和转归有着密切的关系[20]。疏肝能够提高机体的应激反应能力,从而增强 机体的抗病能力,达到延缓衰老的目的。 2.4肝郁血瘀是致衰的病理基础 2.4.1肝郁是五脏之病的起始 五脏是中医藏象理论的核心,肝是主疏泄,调畅人体气机,维持五脏 功能平衡的主要脏器。肝郁血瘀是五脏病变的先导。肝郁是指肝气郁积不 舒的状态,为气病的起始阶段。人体是一个有机的整体,人的生命活动依 赖气、血、津、精为物质基础。气、血、津、精四者中,气为首要,气机 调畅,则血液和津精的运行正常,全身各脏腑的功能协调,人即健康。气 机运行异常,贝0诸病从生。肝的疏泄功能,对全身脏腑组织的气机升降出 入之间的平衡协调起着重要的调节作用。肝气正常疏泄、升发,则五脏之 气畅达,气血冲和,机能协调,百病不生,故有“肝能生养五脏”、“肝为 十二经之养”之说,若肝失疏泄,气机不畅,气血不和,经络阻滞,脏腑 组织机能活动异常,在本脏会形成肝气郁结,气郁日久冲犯他脏,则形成 肝气乘脾犯胃、刑金肺、冲心、劫肾等各种复杂的五脏病变。肝失疏泄 欺强凌弱,五脏皆受其害。许多古今医家都认为各种疾患多与气机失调有 关,即如朱丹溪所言:“气为百病之母。”《知医必辨》中指出“人之五脏, 惟肝易动难静,其他脏有病,不过自病,惟肝一病即延及他脏。”清代林佩 琴在《类证治裁》中认为凡病无不起于郁,并将外感、内:.,诣病都与郁相 联系,指出:“诸病多从肝木”。任应秋教授在《读医随笔》中提出:“凡病 之气结,血凝,痰饮,浮肿,脘腹胀,痉厥,癫狂,积聚,痞满,眩晕, 呕吐哕呃,咳嗽,哮喘,血痹,虚损等等,都和肝气不能舒畅有关。”实验 研究证实:1肝郁患者具有多器官多系统的病变,其中一些病变具有与 衰老相同的机理。王霞灵【2”对50例妇科肝郁病和对照组50例同期双盲检 测血清PRL人垂体泌乳素,发现肝郁组48例高于正常,对照组仅3例 升高,且雌二醇饵2、雌酮E1和雌三醇E3、血清雌二醇E2吲 值均发生改变。吕志平研究肝郁动物模型发现:肝郁造模组大鼠肝细胞超 微结构观察显示线粒体较空白对照组明显肿胀,基质减少,线粒体部分溶 解,内外膜结构不清,核膜模糊,染色质减少,细胞膜溶会,胞浆内成分 严重脱落。肝郁大鼠模型的肝细胞、线粒体结构损伤?J:肝郁大鼠模型的 血浆、肝组织MDA丙二醛明显增高;SOD超氧化物歧化酶明显降 低四,肝郁时,去甲肾上腺素、肾上腺寨、5一羟色胺和多巴胺等中枢神经 递质,皮肤电位瞄】【捌,血中儿茶酚胺等,肾上腺的组织结构?以及CIM/CD8 等免疫细胞‘2引都出现异常。2肝郁时,肝脏失去肃清体内外邪气,调节 并维持机体功能,防止疾病产生的功能。童瑶f%过对近年来中医肝脏实 质研究成果的总结以及与现代医学对肝脏器官的认识进行比较分析,认为 实体肝脏与中医肝之间存在一定相关性,并推测:人体可能存在一条以肝 脏为中心的调节链,链上每一器官生理上相互协调、病理上相互影响。中 医肝证即是这一调节链功能紊乱而导致的一类病证。致病因素作用于人体, 通过神经、内分泌系统的中介作用对肝脏结构、功能造成损害,继而通过 以肝脏为中心的调节链引发一系歹!I病理改变。 综上,可知肝郁时机体发生多器官,多系统的功能障碍,肝郁在其中 居于主导和中心环节,疏肝解郁法有助于恢复肝脏调节链的功能,有利于 防止疾病的产生,从而阻止病理性衰老的出现。 2.4.2肝郁多兼血瘀 肝郁为病临床常见,且常兼血瘀。内伤外感,或虚或实,均可郁遏气 机,而致肝郁之证。气病则血病,肝气一有拂郁,血行迟滞,则成血瘀。 据须惠仁f3?实验显示,以激怒刺激造模的肝郁大鼠,全血粘度、血浆粘度、 血浆比粘度、热沉淀蛋白含量显著升高、扩大型血小板数量增多、血液存 在粘、稠、凝、聚倾向,认为肝部证的一个主要病理学改变就在于盘瘀舶 形成。血瘀一旦形成,则又阻碍气机,更加重了肝气的郁滞。 2.4.3血瘀是衰老缒重要见症 目前关于血瘀与衰老的实验研究结果已经证实,血瘀是衰老的重要征 象。其实验结果如下;老化机体随着年龄的增加,血液流变逐渐出现粘、 浓、凝、聚的改变,易于形成血栓以及微循环障碍,代谢废产物及其对机 体的损伤增加,即随着年龄的增加,机体内的瘀积逐渐增多,出现血瘀是 增龄的?个必然结果,意即“衰老必瘀”,血瘀是衰老的结果口“。 综上,由于在人体衰老的各个环节当中都有肝郁血瘀的参与-并发挥 着重要的病理作用,所以,以疏肝解郁活血法来调畅气机,使肝之升泄有 常,人体气血调和,功能健旺,阴乎阳秘,则能延年益寿- 3.实验 3.1妨料与方法 3.1.1实验动物 昆明种小鼠:12月龄体重509+__59为老龄组、6月龄体重35g ?59为中年组、2月龄体重20g?59为青年组,全雌,由成都中医 药大学动物饲养中心提供。均为一级动物。 3.1..2药品 VE胶囊中国厦门鱼肝油厂批号t010702 柴胡疏肝颗粒太极集团重庆中药二厂拢号:0006020J2 六味地黄丸 太极集团重庆中药二厂批号:0201003 氯化钠注射液四『ff大药厂批号:,4020[1707 三七粉经成都中医药大学中药教研室鉴定为五加科植物人参三 七的根粉碎加工而成。 3.1.3实验药物制备 将柴胡疏肝颗粒按照成人剂量与老年组小鼠搏重进行换算后溶于纯净 水中,配制为浓度分别为0.49/ml,0.89/ml,.2cOma的药液。 三七粉以水煮醇提法,过滤,浓缩为含生药浓度为o.mgrh?,O.5跏d? 1咖1的药液待用。实验时以以上两种药液按各自组别1:1混合作为疏肝 解郁活血组的药物;VE胶囊以lmg/kg体重给药;六味地黄丸组药物制备 方法同柴胡疏肝颗粒组。 3.1.4小鼠分组 老、中、青年组小鼠各66只,随机分别分为疏肝解郁活血大剂量组、 疏肝解郁活血中剂量组、疏肝解郁活血小剂量组、六味地黄丸组、vE组、 空白对照组。 3.1.5实验方法 实验在成都中医药大学动物实验中心实验室内进行。实验过程保持25 ??4?室温,相对湿度65%~75%。所有小鼠均自由饮水、进食。小鼠适 应性饲养7日后,开始灌胃,空白组给生理盐水0Aml,给药组按组别分 别给药。老年组按组别每只小鼠灌胃药物0.4ml;青年组将所配药液稀释1 /2给药0.4rnl;中年组将药液稀释为原药滚的3/5后绘药0.4JnJ。试验 过程中死亡老鼠自然淘汰,不列入观察对象。4周后,剪股动脉取血 l血一I.5rrd处死小鼠,标本不抗凝立gF送检。 3.2指标选择 超氧化物歧化酶Superoxided岫utases,SOD,是体内清除自由基的 重要抗氧化酶之一,其活性的测定,被公认为是抗衰老药物研究的重要指 标之一;丙二醛MDA,是生物膜和亚缨飑骥中磷脂历禽多元不饱和脂 肪酸被自由基损伤、氧化而成的过氧化产物过氧化脂质在酸性加热条件下, 分解生成。其含量的测定,被公认是抗衰老药物研究?々重要指标之一。1321 3.3数据检测 由成都中医药大学附属医院检验科以普通化学法检测。 3.4统计学处理 采用PEMS医学统计专用软件对数据进行处理。采用计量组数据分析, 各实验组与对照组均数比较, 3.5实验结果 表一.青年组小鼠大中小剂量疏肝解郁活血药物、六味地黄丸组、VE组以 及对照组血清SOD,MDA值比较i?s 组别 样本数 SODnH/m1 ]V/DArm,oi/m1 对照组 疏肝活血大剂量组 8 疏肝活血中剂量组 10 疏肝活血小剂量组 9 VE组 10 139.13?8,298 2736020.4493 137.667?10.34652.7280"i'0.3583 139.05妇.7228 2.6558:?0,5469 133.78i-9,9895 2.7300"如.3129 六昧地黄丸组 i0 143.29?10.7010 2.8300-?0,3335 表一显示:青年组小鼠结果显示,各试验组与对照纽元差异? 表二:中年组小鼠大中小剂量疏肝解郁活血药物、六味地黄丸组、1_,E组以 及对照组血清SOD,MDA值i?s1 组别 样本数 SODnH/m1 MDAnmol/m1 对照组 10 87,2900?12.97724.4390?0.6707 疏肝活血大剂量组 8 疏肝活血中剂量组 7 疏肝活血小剂量组 10 VE组 六昧地黄丸组 8 8 102.8700士16.83ll+ 3.3725?0.68084+ 126.6100?12.6918'*3.2857?0.6389** I14.8800士14.2863$3.4320?o.7975** 115.1100?13.4973+ 104.0500?i5.1892+3.5713?0.610t* ”p0.01,4pO.05 表二显示:疏肝解郁活血中剂量组SOD、疏肝解郁活血大、中、小剂 量组MDA与对照组有显著性差异po.oi、疏肝解郁活血大、小剂量组SOD 与对照组有差异fpo.05、六味地黄丸组、VE组与对照组SOD、MDA有差 异po.05。 表兰:老年组小鼠大中小剂量疏肝解郁活血药物、六昧地黄丸组、VE组以 及对照组血清SOD,MDA值i?5 组别 样本数 SODnla/m1 MDAnmol/m1 对照组 9 79.38?12.5349 5.5667?0.9364 疏肝活血大剂量组8 90.44?14.7773 5.0125?1?0562 疏肝活血中剂量组 7 疏肝活血小剂量