二乙酰一肟-异丙醇-安替比林法测定游泳水中尿素.doc

二乙酰一肟-异丙醇-安替比林法测定游泳水中尿素.doc 游泳池水中尿素的测定 随着人民生活水平的提高，游泳已成为人们消暑、娱乐、锻炼的一种方式，但游泳池水极易被污染，引起多种疾病的发生，因此，必须加强对游泳池水的卫生指标的监测。尿素是其中的一项卫生理化指标，游泳池水中尿素主要来自人体分泌物、排泄物，特别是汗液和尿液的污染，因而测定水中尿素是了解人为污染的重要指标。二乙酰一肟-安替比林分光光度法(GB/T 18204.29-2000)是游泳场所尿素测定的国家检验。该法虽具有标准系列线性好，灵敏度、重现性、回收率高等优点，但同时又有遇光退色，需特备棕色比色管操作，线性范围未包括卫生标准允许浓度，沸水浴时间较长等缺憾。本文选择异丙醇作显色稳定剂对游泳池水中尿素进行测定，并与标准方法作了对照试验，获得了满意的结果。 1 材料与方法 1.1 仪器 723A型分光光度计、水浴锅、25ml无色具塞比色管。 1.2 试剂 1.2.1 二乙酰一肟-异丙醇溶液 称取1.0g二乙酰一肟溶于1+9乙酸溶液中，并使其总量为100ml，于此溶液中加入异丙醇50ml，混匀，棕色瓶中保存。 1.2.2 安替比林溶液 称取0.2g安替比林溶于1+1硫酸中，并使其总量为100ml，棕色瓶中保存。 1.2.3 尿素标准贮备液 称取0.1000g尿素，溶于少量水后移入1000ml容量瓶中，加0.1ml氯仿并用水定容，冷藏保存，此液1.00ml含0.100mg尿素。 1.2.4 尿素标准使用液 吸取尿素标准贮备液10.00ml于100ml容量瓶中，以水定容，此液1.00ml含10. 0ug尿素。 1.2.5 实验用水均为去离子水。 1.3 测定步骤 1.3.1 吸取水样10.0ml于25ml无色具塞比色管中，另取同型比色管分别加入尿素标准使用液0、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，以水定容至25ml。 1.3.2 于上述各管中加入二乙酰一肟-异丙醇溶液1.50ml，混匀。再加入安替比林溶液2.00ml，混匀。 1.3.3 各管加塞后同时置沸水浴中加热20min，取出，在流动的自来水中冷却2min。以水为对照，于460nm处，用1cm比色皿测定各管吸光度。 1.3.4 计算标准系列直线回归方程，以水样吸光度代入方程，求出水样尿素含量。 2 结果 2.1 最大吸收波长 以30.0ug管作最大吸收波长测定，结果见表1。其λmax在460nm左右，与标准方法基本一致。 表1:30.0ug尿素在不同波长下的吸光度 λ(nm) 430 440 445 450 455 460 465 470 475 480 490 吸光度 0.243 0.318 0.350 0.381 0.403 0.410 0.395 0.352 0.290 0.202 0.084 2.2 标准系列 本法标准系列测定结果见表2。尿素在0~50ug范围内与吸光度的关系符合比尔定律。直线回归方程Y,0.013567X，0.008，相关系数γ,0.99969。 表2:尿素标准溶液的吸光度 尿素(ug) 0 2 5 10 20 30 40 50 吸光度 0 0.042 0.075 0.143 0.283 0.410 0.560 0.680 2.3 重现性和回收率 取人工游泳池水样6份，各作6次平行测定，计算重现性评 。从表3可看出，其RSD值均,5%，加价指标，并作加标回收测定，结果见表3 标量在0.5~3.0时，回收率在95.7%~104.1%之间。其重现性和回收率均较好。 表3:样品测定的重现性和回收率 本底 加标回收回收率样品号 s RSD(%) (mg/L) (mg/L) (mg/L) (mg/L) 1 3.76 0.049 1.33 0.46 0.45 97.8 2 0.66 0.019 2.92 0.49 0.51 104.1 3 2.97 0.058 1.90 1.41 1.35 95.7 4 1.63 0.064 3.95 1.45 1.39 95.9 5 1.07 0.026 2.43 2.97 2.98 100.3 6 0.14 0.012 8.57 3.00 3.03 101.0 2.4 对照试验 将上述水样同时以标准方法测定，取其均值与本法作对照试验，结果见表4。经作配对资料的统计学处理，结果表明:t,1.040,t(t,2.571)，0.05(5)0.05P,0.05，两法测定结果差别无显著性意义。 表4:本法与标准方法对照试验 样品号 本法(mg/L) 标准方法(mg/L) 1 3.76 3.71 2 0.66 0.68 3 2.97 2.98 4 1.63 1.58 5 1.07 1.05 6 0.14 0.15 2.5 干扰试验 向标准系列中加入下列浓度的干扰物(mg/L):NH-N 2、NO-N 1、32 -2+2+2+2+2+2+NO-N 40、Cl 400、ABS 2、Ca 400、Cu 2、Fe 1、 Mn 1、Zn 3、Ni 3、3 -有效氯15，对测定无干扰。大于上述浓度的NO 有负干扰，大于上述浓度的有效2 氯有正干扰。 3 讨论 3.1 尝试以异丙醇、异丁醇、正戊醇、丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、甲醛、正辛醇、异戊醇等十余种有机溶剂作显色稳定剂试验，结果显示:甲醛使显色无法进行;正辛醇、异戊醇水溶性差，溶液出现混浊;其余试剂均有显色稳定作 用，但以异丙醇显色后最稳定，灵敏度较高，水溶性好，且为常用试剂，无毒，易购得，故选之。异丙醇的使用，弥补了标准方法 4~0.6ml/管时，空白值较低，灵敏度较高，稳定性好，3.2 经实验，异丙醇用量在0. 故选其中间值(0.5ml/管)，按此比例将其与二乙酰一肟试剂混合后加入，操作方便，且不影响二乙酰一肟试剂的稳定性。 3.3 当二乙酰一肟溶液用量为1ml/管，其浓度为10g/L与20g/L时，灵敏度较高，且两者基本相同，而当其浓度为2g/L时，灵敏度大大降低，故选其浓度为10g/L。因其与异丙醇混合后一次加入，为达二物质最佳显色量，故该混合试剂加入量为1.5ml。 3.4 当安替比林溶液用量为2ml/管，浓度为2g/L与10g/L时，对测定基本无影响，故保持标准方法中该试剂2g/L的浓度。 3.5 实验表明，沸水浴时间从15~40min，随加热时间的延长，吸光度增加，标准斜率加大，继续延长加热时间，则线性变差。加热25min时，50ug管吸光度近0.8，仪器测定误差加大，故本法选用沸水浴加热20min，比标准方法的沸水浴50min时间大大缩短。因沸水浴时间不同，吸光度差别较大，故水样应与标准系列同批测定。同时，沸水浴容量应较大，避免过挤致受热不匀，使反应不均匀、完全。 3.6 作标准系列及水样显色定容后立即至26h稳定性试验，实验结果显示:在显色定容后2h内呈色稳定，测定偏差小，比色测定最好在此期间完成。延长至20h间，吸光度值逐渐增大，但在此期间只要标准系列与水样为同批测定，对低、中浓度样品结果基本无影响，高浓度样品偏差稍大，但尚可接受(相对偏差,5%)。若再延长时间则不可取。 3.7 《游泳场所卫生标准》(GB9667-1996)中规定尿素应?3.5mg/L。本法线性范围包容了上述浓度，对一般水样可直接一次测定完成，避免了标准方法测定尿素浓度在1.5~5mg/L水样时，因超出线性范围需将样品稀释后重新测定的麻烦及引入的误差。 本法从十余种有机溶剂中筛选出异丙醇作显色稳定剂，并经反复实验研究，对游泳池水中尿素测定的标准方法作了改进。与标准方法比较，有遇光不退色，可用普通无色比色管操作;线性范围扩大，一般游泳池水样可不经稀释一次完成测定;沸水浴时间大大缩短，节约时间等优点。应用于游泳池水中尿素的测定，其重现性、回收率、与标准方法的对照试验，均获得满意结果。