为了正常的体验网站,请在浏览器设置里面开启Javascript功能!

反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量

2017-12-13 10页 doc 26KB 22阅读

用户头像

is_083599

暂无简介

举报
反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量 反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中 五味子甲素和五味子酯甲含量 中南药学2010年7月第8卷第7期CentralSouthPharmacy.July2010,Vo1.8No.7 反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中 五昧子甲素和五味子酯甲含量 陈玉平,黄开毅,刘亚东,王曙宾(以岭医药集团北京以岭研究院,北京102600) 摘要:目的建立高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量的方法.方法采用RP- HPLC法,色谱柱:Agilent...
反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量
反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量 反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中 五味子甲素和五味子酯甲含量 中南药学2010年7月第8卷第7期CentralSouthPharmacy.July2010,Vo1.8No.7 反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中 五昧子甲素和五味子酯甲含量 陈玉平,黄开毅,刘亚东,王曙宾(以岭医药集团北京以岭研究院,北京102600) 摘要:目的建立高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量的.方法采用RP- HPLC法,色谱柱:AgilentExtendC18(250rrllYi×4.6iTlrn,5/xm);流动相:乙腈一水,梯度洗脱;流速:1.0mL? min-.;检测波长:230nn2;柱温:35?.结果五味子甲素进样量在0.0202,O.1617肛g与峰面积线性关系良 好,r=0.9995,平均加样回收率为100.8%0,RSD=0.3;五味子酯甲进样量在0.0210,0.1680g与峰面积线 性关系良好,r一0.9996,平均加样回收率为101.8,RSD一0.3.结论所建立的含量测定方法简便可行, 结果准确可靠,可用于参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲的含量测定. 关键词:参松养心胶囊;五味子甲素;五味子酯甲;反相高效液相色谱 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1672—2981(2010)07—0517-03 doi:10.3969/j.issn.1672—2981.2010.07.011 Determinationofde0xyschizandrinandschisantherinAin ShensongYangxinJiaonangbyRP—HPLC CHENYu-ping,HUANGKai—yi,LIUYa-dong,WANGShu-bin(YilingInstituteofPharmaceuticalSciences, YilingPharmaceuticalGroup,Beijing102600) Abstract:ObjectiveTodevelopanRP_HPLCmethodforthedeterminationofsodiumdeoxys ehizandrinandschisan— therinAinShensongYangxinJiaonang.MethodsRP_HPLCmethodwasusedwithAgilentE xtendC18column(250 millX4.6rain,5um).Themobilephaseconsistedofacetonitrileandwaterwithgradientelutio n,theflowratewas 1.0mL?min,,andthewavelengthwas230nlTLResultsTheaveragerecoveryofdeoxyschi zandrinwas100.8 withRSD一0.3,theaveragerecoveryofschisantherinAwas101.8withRSD一 0.3.ConclusionThemeth— odiSsimple,accurateandcanbeusedtoforthecontentdeterminationofdeoxyschizandrinan dschisantherinAin ShensongYangxinJiaonang. Keywords:ShensongYangxinJiaonang;deoxyschizandrin;schisantherinA;RPHPLC 参松养心胶囊由人参,麦冬,山茱萸,南五味子,丹 参,赤芍,黄连等12味中药组成,具有益气养阴,活血通 络,清心安神之功,用于治疗气阴两虚,心络瘀阻引起的冠 心病室性早搏等证.已有报道,五味子中某些成分有良好的 药理作用l_1].以前只对本制剂五味子中某个成分进行含量 测定|7.,为更全面的控制药品内在质量,本文采用RP- HPLC法对其中五味子甲素和五味子酯甲2种有效成分的含 量进行同时测定.建立的测定方法简便可行,结果准确,为 参松养心胶囊质量控制标准提供了依据. 1仪器与材料 Waterse2695高效液相色谱仪(美国Waters公司,包 括Waters2489紫外检测器,Empower工作站), KQ3200DE型医用数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有 限公司),五味子甲素对照品,五味子酯甲对照品(批号: 110764-200408,111529-200302,中国药品生物制品检定所, 供含量测定用),甲醇为色谱纯,水为屈臣氏重蒸水,其余 试剂为分析纯.参松养心胶囊(石家庄以岭药业股份有限公 司,:0.4g?粒_.,批号:090316,090242,090245, 090247090312090307090240090239,090241,. 090311). 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱:AgilentExtendC18(250nlixl×4.6mm, 5Urn);流动相A为乙腈,B为水,洗脱梯度:0,15min, 45一5OA;15,40min,50一55%A;40,50min, 55一8OA;检测波长:230nm;流速:1.0mL? min,;柱温:35?;进样量:20L.理论塔板数按五味子 酯甲峰计应?3500. 作者简介:陈玉平,男,博士,主要从事中药药效物质基础及其创新药物研究,Tel:(010)59705134,E-mail:pingchy@126.corn *通讯作者:王曙宾,男,博士,主要从事中药,天然药物新剂型,新技术研究,Tel:(010)59705134,E-mail:shubinwang@ 126.corn CentralSouthPharmacy.July2010,Vo1.8No.7中南药学2010年7月第8卷第7期 2.2对照品混合溶液的制备 精密称取五味子甲素对照品12.63mg,置5OmL容量 瓶中,加甲醇超声溶解并稀释至刻度,摇匀,制成五味子甲 素对照品储备液;精密称取五味子酯甲13.13mg,置 5OmL容量瓶中,加甲醇超声溶解并稀释至刻度,摇匀,制 成五味子酯甲对照品储备液;分别精密量取上述2种对照品 储备液各1mL,置5OmL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀, 即得混合对照品溶液. 2.3供试品溶液的制备 取本品2O粒,倾出内容物,充分混匀,取约0.8g,精 密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入7O甲醇50mL,密 塞,称定重量,超声3Omin,冷却至室温,用70甲醇补 足重量,摇匀,取2mL,0.22p_m微孔滤膜过滤,取续滤 液,即得. 2.4阴性样品溶液的制备 按参松养心胶囊的处方比例及工艺制成不含南五味子的 阴性样品,按"2.3"项下方法制备阴性样品溶液. 2.5系统适用性试验 吸取供试品,阴性样品溶液各2OL及混合对照品溶液 1OL,注入高效液相色谱仪,按"2.1"项下色谱条件测 定.色谱图,结果明参松养心胶囊中的五味子酯甲及 五味子甲素的色谱峰分离良好,分离度均>1.5,且阴性样 品无干扰(见图1). 0.o0lO.0020.00 图1参松养心胶囊HPLC图 FiglHPLCofsampleofShensongYangxinJiaonang A对照品(reference);B供试品(sample);C.阴性样品 (negativesample);1.五味子酯甲(schisantherinA);2.五味子甲 素(deoxysehizandrin) 2.6线性关系考察 分别精密吸取五味子甲素和五味子酯甲对照品混合溶液 4,8,12,16,20,24,32"L,注入高效液相色谱仪,按 "2.1"项下的色谱条件测定,记录五味子甲素和五味子酯甲 色谱峰面积,以进样量(g)为横坐标(,以峰面积为纵 坐标(y),绘制标准曲线并进行线性回归,得回归方程.五 味子甲素:Y一5.553×10X+9.808×10.,r一0.9995, ,2—7;五味子酯甲:Y一5.885×10X+9.938×10.,r一 0.9996,"一7.结果表明五味子甲素进样量在0.0202, 0.1617g,五味子酯甲进样量在0.021O,O.1680均与 峰面积呈良好的线性关系. 2.7精密度试验 精密吸取供试品溶液(批号:090316)20L,进样, 重复6次,按"2.1''项下色谱条件测定,记录色谱峰面积, 结果五味子甲素,五味子酯甲的RSD分别为O.97, 0.92,表明精密度良好. 2.8稳定性试验 精密吸取供试品溶液(批号:090316)2OgL,分别于 配制后0,4,8,12,16,20h进样,测定峰面积,结果五 味子甲素,五味子酯甲的RSD分别为0.15,0.20,表 明样品在20h稳定. 2.9重复性试验 取同一批(批号:090316)样品6份,分别按"2.3" 项下方法制备供试品溶液,按"2.1"项下的色谱条件测定, 结果五味子甲素的含量为0.39mg?g,RSD为0.44; 五味子酯甲的含量为0.43mg?g一,RSD为0.69,表明 方法重复性良好. 2.1O加样回收试验 取样品(批号:0900316)6份(五味子甲素和五味子 酯甲的含量分别为0.39和0.43mg?g),每份约0.4g, 精密称定,分别精密加入对照品混合溶液适量,按"2.3" 项下方法制备供试品溶液,按"2.1"项下的色谱条件测定, 计算2种成分的回收率,结果见表1. 2.11样品含量测定 分别精密称取10批参松养心胶囊,每批3份,按 "2.3"项下方法制得供试品溶液,将对照品混合溶液和供试 品溶液分别注入高效液相色谱仪,按"2.1"项下色谱条件 测定,进样量分别为对照品混合溶液1OL,供试品溶液 2OL,记录色谱峰面积,以外标法计算五味子甲素和五味 子酯甲的含量,测定结果见表2. 3讨论 3.1样品提取方法的选择 在样品提取时,曾选择70乙醇,无水乙醇,甲醇作 为提取溶剂进行比较,结果发现甲醇超声提取效果最好,故 选择甲醇作为提取溶剂.同时,对超声10,2O,3O,40min 提取所得的样品溶液测定峰面积比较,发现超声30min已 提取完全,因此选用超声提取时间为30min. 3.2流动相的选择 本制剂为中药复方制剂,方中干扰成分众多,有效成分 的化学性质差异较大,流动相的选择很重要,曾选择多种试 剂的混合溶剂作为流动相等度洗脱,效果均不理想,为了保 证待测的2种成分与其他成分有良好分离效果且又能够在尽 可能短的时间内完成分析,我们采用了乙腈一水梯度洗脱, 试验了很多洗脱梯度,最终确定为"2.1"项下的条件,待 中南药学2010年7月第8卷第7期CentralSouthPharmacy.July2010,Vo1.8No.7 五味子甲素 五味子酯甲 0.3923 0.3982 0.4005 0.4003 O.3961 0.3995 O.3923 0.3982 0.4005 0.4003 0.3961 O.3995 O.153O 0.1553 O.1562 0.1561 O.1545 O.1558 O.1687 O.1712 O.1722 O.1721 0.17O3 0.1718 O.1266 0.1266 0.1266 0.1266 0.1266 0.1266 O.13l6 0.1316 O.1316 0.1316 0.1316 O.1316 0.2801 0.2829 0.2840 0.2840 0.2824 0.2831 0.3031 0.3050 0.3056 0.3061 0.3042 0.3056 1OO.4 1OO.8 101.0 1O1.O 101.0 100.6 1O2.1 1O1.7 1O1.4 1O1.8 1O1.8 lO1.7 100.80.3 101.80.3 表2样品测定结果(n=3) 1b2S~plede--on(n=3) 测成分获得良好的分离. 3.3测定结果分析 在10批药材的含量测定结果中,其中1批样品较其他 批次的差异较大,初步分析可能有两方面的原因,一个是药 材中待测成分含量存在差异,另一个原因可能是由于生产过 程引起的误差所致.本复方制剂以前只对其中的人参药材的 一 些成分进行了质量控制,本试验增加了对其中南五味子药 材的2个有.效成分进行含量测定,方法简便可行,结果准 确,进一步完善了药品内在质量的控制方法. 参考文献 E12刘耕陶,CresteilT,LescaP.五味子有效成分对动物肝脏药 理作用研究的近况[J].中国中西医结合杂志,1983,26 (3):182185. E2]刘嘉森,方圣鼎,黄梅芬,等.华中五味子的研究,?.有效 成分五味子酯甲,乙,丙,丁,戊及有关化合物的结构[J]. 化学,1976,7(3):229240. E3]方圣鼎,黄梅芬,刘嘉森,等.华中五味子的研究I.有效成 分五味子酯甲的分离与结构EJ2.化学,1975,33(1): 57-60. [4]苏明威,王乃平,辛华雯,等.五味子药理作用研究近展 EJ2.中国药师,2009,12(7):960962. E5]沈报春,赵静峰,胡玮,等.五味子中木脂素的药理活性及临 床应用口].昆明医学院,2005,(1):102—104. E63苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术EM3.北京: 人民卫生出版社,2000:47. E73仰榴青,吴向阳,徐佐旗,等.五味子及其制剂中木脂素类成 分含量测定的研究进展EJ].中国中药杂志,2005,30(9): 650—653. E83高建平,王彦涵,郁韵秋,等.南五味子木脂素成分的HPLC 含量测定及其变异规律【J].中国天然药物,2003,1(2): 89—93. [9]宋万志,童玉懿.五味子及其亲缘植物中一些重要木脂素类成 分的存在与含量测定[J].药学,1983,18(2):138 143. D0]李炜,张利,白西仓,等.南五味子中五味子酯甲的含量测 定EJ].西北药学杂志,2007,22(5):250—251. El1]钟晋.五昧子丸中总木脂素与五味子酯甲的含量测定[J]. 浙江中医学院,2004,28(3):69. E123张延妮,岳宣峰,王抬之.反相高效液相色谱同时测定五味 子中五味子醇甲,五味子酯甲和五味子乙素的含量EJ3.分 析科学,2007,23(1):41—44. (收稿日期:2009—12-11;修回日期:2010—04—28)
/
本文档为【反相高效液相色谱法测定参松养心胶囊中五味子甲素和五味子酯甲含量】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑, 图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。 本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。 网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。

历史搜索

    清空历史搜索