低分子量姬松茸多糖对小鼠s180肉瘤的抑制作用及其机制的论文

低分子量姬松茸多糖对小鼠s180肉瘤的抑制作用及其机制的论文 低分子量姬松茸多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制的论文 低分子量姬松茸多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用及其机制的论文 【摘要】 目的 观察lmpab对小鼠s180肉瘤生长的抑制及诱导凋亡的作用。 balb/c小鼠右后侧腋窝皮下接种s180瘤株后，腹腔分别注射50、100和200mg/lmpab，连续7d，给药结束后24h处死小鼠，称肿瘤重量。annexin ? fitc/pi双染法(流式细胞仪)检测肿瘤组织细胞凋亡。结果 与模型组(1.038?0.262)比较，猪苓多糖组(0.704?0.262)和lmpab高剂量组(0.695?0.096)肿瘤重量明显减轻(p,0.01)。猪苓多糖组、姬松茸粗多糖组、lmpab低剂量组、lmpab中剂量组和lmpab高剂量组对s180肉瘤的平均抑制率分别为32%、23%、9.5%、23%和32%。与模型对照组比较，猪苓多糖组、姬松茸粗多糖组、lmpab低剂量组、lmpab中剂量组和lmpab高剂量组的肿瘤细胞凋亡率明显增加，差异具有统计学意义(p,0.01)。结论 lmpab对s180肉瘤生长具有抑制作用，其机制可能是通过促进肿瘤细胞凋亡而实现的。 【关键词】 姬松茸 多糖 细胞凋亡 抗肿瘤0 引言 自20世纪50年代末人们发现真菌多糖具有抗肿瘤活性以来，多糖的研究受到越来越广泛的关注。多糖是由单糖连接而成的生物大分子物质，多糖的糖链能控制细胞的增殖和分化，调节细胞的生长与衰老，在抗肿瘤和促进免疫力方面疗效明确，毒副作用小。WW.11665.姬松茸(agaricus blazei murill, abm)是一种药食兼用的真菌，在日本被作为恶性肿瘤化疗药物的辅助治疗品种。药理学研究明，姬松茸多糖是姬松茸抗肿瘤的活性成分,3,。姬松茸粗多糖中有大量的植物蛋白，使多糖纯度降低并存在诱发机体过敏反应的潜在危险。与姬松茸大分子量多糖相比较，低分子量的多糖具有溶解性好、黏度低和易吸收等特点。本研究以荷s180肉瘤小鼠为模型，通过称重法检测肿瘤重量和annexin v fitc双染色法流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡，探讨低分子量姬松茸多糖(lo molecular eight polysaccharide isolated from agaricus blazei murill，lmpab)对小鼠s180肉瘤的抑制作用及其机制。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 药物 lmpab由齐齐哈尔医学院医药科学研究所分离提取，猪苓多糖注射液购自江苏省正大天晴药业股份有限公司，姬松茸粗多糖购自浙江庆元博瑞药业有限公司。 1.1.2 实验动物及瘤株 balb/c雄性小鼠，spf级，6周龄，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号:scxk(京)2002 0003，隔离器内分笼饲养。s180腹水型瘤株购于黑龙江省肿瘤医院肿瘤研究所，由昆明小鼠腹水传代。 1.1.3 仪器和试剂 facs calibur流式细胞仪(美国bd公司)，ae 240型电子天平(梅特勒 托利多仪器有限公司)，annexin v fitc凋亡检测试剂盒(北京宝赛生物技术有限公司)。 1.2 方法 1.2.1 分组处理 72只小鼠随机分为模型组、lmpab低剂量组、lmpab中剂量组、lmpab高剂量组、姬松茸粗多糖对照组和猪苓多糖对照组，共6组，每组12只。 1.2.2 造模及给药 取荷腹水型s180瘤株小鼠的腹水0.2ml， 接种于昆明小鼠腹腔，7d后，处死精神状态良好和腹水饱满的荷瘤小鼠，消毒腹部，于超净工作台中抽取乳白色腹水为瘤源，生理盐水洗涤，离心，稀释成单细胞悬液。台盼蓝染色检测细胞数，活细胞数为98%以上可接种。调整细胞浓度为1×107 /ml，每只小鼠于右后侧腋窝皮下接种0.2ml，整个操作过程在30min内完成。小鼠接种s180肉瘤后第2天，lmpab低剂量组、lmpab中剂量组和lmpab高剂量组分别按50mg/细胞悬液制备 取新鲜肿瘤组织(尽量除去血管及凝血块)，加入新鲜配置的无菌pbs(2ml，4?)，采用剪切法分散肿瘤组织，经100目滤网过滤后，1500r/min 4?离心8min，弃上清;再加入2ml pbs，轻微振荡，1000r/min 4?离心5min，弃上清;再加入1ml pbs制成单细胞悬液，70%冷乙醇固定。 d葡聚糖，对其生物活性的研究表明10μg /ml该多糖对k562细胞有直接细胞毒作用。 本实验结果表明，lmpab具有抑制肉瘤s180生长的作用。姬松茸粗多糖对照组、lmpab低剂量组、lmpab中剂量组和lmpab高剂量组对s180的平均抑制率分别为23%、9.5%、23%和32%，其中lmpab高剂量组抑瘤率大于30%，符合抗癌药物筛选。与模型对照组比较，姬松茸粗多糖对照组、lmpab低剂量组、lmpab中剂量组和lmpab高剂量组的肿瘤细胞凋亡率明显增加，差异具有统计学意义(p,0.01)，表明lmpab具有诱导细胞凋亡作用，并呈量效依赖关系。【参考文献】 ,1, 白雪，林晨，江振友，等. 硒化麒麟菜多糖抑制人喉癌细胞株hep 2 增殖的作用. 肿瘤防治研究，2016，34(4):249 252. 郭峰，张乐 之，王海滨.红细胞在免疫治疗中的重要应用价值,j,.中国肿瘤生 物治疗杂志，2000，7(2):81 82. firenzuoli f, gori l, lombardo g. the medicinal mushroom agaricus blazei murrill: revie of literature and pharmaco toxicological problems.evid based plement alternat med, 2016, 5 : 3 15. 刘吉成，孙建宁. 低分 子量姬松茸多糖提取分离及抗肿瘤活性筛选研究. 中华中医药杂志， 2006，21(5):190 193. van ginkel pr, sareen d, subramanian l, et al. resveratrol inhibits tumor groth of human neuroblastoma and mediates apoptosis by directly targeting mitochondria. clin cancer res, 2016, 13 : 5162 5169. 江曼. 细 胞凋亡及其与肿瘤治疗. 肿瘤防治研究, 2001, 28(6):490 498.