某中药栓剂对家兔阴道和直肠给药长期毒性实验研究

某中药栓剂对家兔阴道和直肠给药长期毒性实验研究 论文汇编第五届中南地区实验动物科技交流会某中药栓剂对家兔阴道和直肠给药长期毒性实验研究孙凡中卢笑丛张金明田辉唐利军戴涌湖北省实验动物研究中心【摘要】依照中药新药研究指南》进行了某中药拴剂对实验兔阴道和直肠用药的长期毒性试验。按、倍临床用药剂量设低生药、高生药两个剂量组及基质对照组连续给药个月恢复期天结果为各给药组夏基质对照组在试验期内均未出现妾验兔死亡其行为、活动、被毛、粪便等未见异常进食量度体重变化未见明显差异血液学试验期周、个月及恢复期各用药组与对照组比较无显著差异血液生化测定值试验期周、个月及恢复期各用药组与对照组比较无显著差异各给药组实验兔系统尸检用药期对照组和用药组各脏器未见明显病变病理组织学检查用药期对照组和用药组未见病理性改变。结论该中药栓剂对实验免阴道和直肠连续用药个月均无明显毒性反应。通过对实验兔连续直肠和阴道给某中药栓剂个月观察其一般形态、进食量、体重、血液学厦血液生化学、系统尸检及病理组织学等情况。了解实验兔直肠和阴道长期给予某中药栓剂的毒理反应及其严重程度。材料受试动物大耳白兔体重一雌雄各只由湖北省医学实验动物中心提供合格证号为医动字—号。饲养管理单笼饲养实验室温度—相对湿度—饲喂湖北省医学实验动物中心提供的兔全价颗粒饲料其实验和饲料条件合格证号分别为医动字、号。受试药物某中药浓缩膏及基质由湖北省某制药厂提供批号为。设高、低两个浓度每克含生药分别为、每膏含生药分别为、给药时用塑料注射器吸取受试物其中低浓度是临床用栓剂浓度的倍。实验仪器厦设备离心机、电子夭秤粗、电子天平、意大利产型全自动生化仪、一血球计数仪病理切片设备试剂血细胞分析仪用稀释液一购自上海东湖仪器试剂科技有限责任昼司血液生化检测试荆生化检测试剂为上海长征生化试剂公司生产的相应试剂盆。方法实验动物称重、编号、分组称重用最小刻度为的电子天平称量免体重。分组将只实验兔按性别分为两大组即阴道给药组雌和直肠给药组雄每组各只每大组再随机分为高、低剂量组和基质对照组只组用药剂量分别为生药、生药基质不含生药。第五届中南地区实验动物科技交流套论文汇编编号用记号笔在兔耳标上兔号。给药按体重及组别计算每只实验兔给药量将受试物置于。水浴锅加热然后用塑料注射器最小刻度为切除前端并磨平按剂量吸取受试物并将受试物推人实验兔阴道雌和直肠雄为防止动物排粪排尿影响给药效果给药之前小时使动物断水、断料。临床观察指标主要观察动物的外观体征、行为活动、粪便、进食量、体重等。迸食量的测定每周测定一次实验兔的进食量方法是定时饲喂足够多的兔料第二天再称量剩余兔料计算差值既为该兔当天的进食量。体重的测定每周空腹称量次实测体重与基础体重之差即为兔的体重增长值。血液学指标检测在用药中期、用药结束时和恢复期分别进行血液学指标检测共有白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度、血小板计数、淋巴细胞比率—、嗜中性粒细胞比率—、淋巴细胞计数—、嗜中性白细胞计数—、红细胞体积分布宽度变异数—、血小板体积分布宽度、血小板平均体积等项指标。血液生化指标检测在用药中期、用药结束时和恢复期分别进行血液生化检测共有天门冬氨酸氨基转换酶、丙氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿素氮、总蛋白、自蛋白、血糖、总胆红素—、肌酐、总胆固醇—等项指标。系统尸拴及病理组织学检查系统尸检在实验兔处死后立即进行观察胸腔、腹腔、颅腔及其各脏器的位置、形状、大小、质地、色泽等情况对实验 兔心、肝、脾、肺、肾、胸腺等脏器称重并计算脏器系数对心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胸腺、前列腺雄、脑、胃、结肠、睾丸和附睾雄、子宫雌、卵巢雌、直肠粘膜雄、阴道粘膜雌等种组织进行病理组织学检查。检测时问试验给药期为个月在最后一次给药后每组剖杀只即实验兔检测各项指标每组留只继续观察天再剖杀检查。统计学分析计算各试验组的体重、进食量、血液学及血液生化指标、脏器重量及脏器系数的均值和标准差。各给药组与空白对照组问进行显著性检验检验病理组织学检查进行定性观察。实验结果一般形态各组实验兔在试验期间均未出现死亡被毛有光泽活动正常粪便大小、色泽、硬度也未见异常。体重增长及进食量无差异结果见表、表、表、表。论文汇编第五届中南地区实验动物科技交流会’表家兔体重增重经时变化阴道给药。?组别及剂量生药生药基质对照组基础体重用药期恢复期周增重周增重周增重周增重周增重周增重注各给药组与基质对熙组比较均表家免体重增重经时变化直肠给药?组别及剂量药生药基质对照组基础体重用药期恢复期周增重周增重周增重周增重 周增重士???土旦堡里旦塑塑塑旦注各给药组与基质对照组比较均表家免进食量测定结果阴道给药组别及剂量药生囊基质对照组给药前。?用药期兰恢复期周周周周周土????土旦堕竺竺注各给药组与基质对照组比较均第五届中南地区实验动物科技交流喜论文汇编表家兔进食量测定结果直肠给药?组别及荆量生药生药基质对照组给药前用周 药周期周周恢复期周周注各给药组与基质对照组比较。均体重及进食量测定结果某中药栓剂阴道给药雌和直肠给药雄的低、高剂量组与基质空白对照组比较用药期和恢复期生长及进食量情况相近均无显著性差异。血液学指标检测”用日本东亚医用电子公司生产的一型血球计数仪测定各组受试免的白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度、血小板计数、淋巴细胞比率—、嗜中性粒细胞比率—、淋巴细胞计数—、嗜中性白细胞计数—、红细胞体积分布宽度变异数—、血小板体积分布宽度、血小板平均体积结果见表、表、表。表长期毒性试验血液学指标阴道给药。注表中各给药组与基质对照组比较。均论文汇编第五届中南地区实验动物科技交流会注表中各给药组与基质对照组比较。均表长期毒性试验血液学指标恢复期。注表中各给药组与基质对熙组比较均结果表明用药中期、用药结束时及恢复期阴道给药雌和直肠给药雄各用药组与空白对照第五届中南地区实验动物科技交流会论文汇编组问比较各项指标均无显著性差异。血液生化学指标检测【??】进行试验期项指标检测各项测定和指标分别是、、、、、、、—、、—测定时使用德国产型半自动生化分析仪试剂盒由北京中生生物制品有限公司提供。结果见表、表、表。表长期毒性试验血液生化标【阴道给药。?表长期毒性试验血液生化标直肠给药。?注表、表中各给药组与基质对照组比较均论文汇编第五届中南地区实验动物科技史漉会注表中各给药组与基质对照组比较均结果表明用药中期、用药结束时和恢复期各给药组和基质空白对照组的测定值基本一致统计学分析无显著性差异。系统尸检用药期结束后各组处死实验兔只对心、肝、脾、肺、肾、输尿管、膀胱、肾上腺、胃、肠管、胸腺、甲状腺、气管、脑、前列腺雄、睾丸雄、直肠粘膜雄、子宫、卵巢、阴道粘膜雌等进行 观察各用药组和基质对照组脏器未见明显的眼观变化用药部位粘膜也无明显眼观变化。对心、肝、脾、肺、肾、胸腺等器官称重并计算脏器系数结果见表“、表、表、表。表家兔主要脏器重量测定结果阴道给药注各给药组与基质时照组比较均第五届中南地区实验动物科技交流套论文汇编注各给药组与基质对兆楸冉暇砑颐庵饕嗥飨凳扑憬峁疽醯栏戟妾觥雷?鞲?橛牖识哉兆楸冉暇畚幕惚嗟谖褰熘心系厍笛槎锟萍冀涣魈子靡?讵怼～馈馈馈馈馈郎鲈嗒皙戟妗馈馈馈廓搿佬叵侏皙戟妗廓睢馈劳舾鞲?橛牖识哉兆楸冉稀,嗥髦亓考跋凳峁砻饔靡?诩盎指雌诟鞲?橛牖士瞻锥哉兆楸冉稀,嗥髦亓考霸嗥飨凳 尴灾圆钜臁,?碜橹觳樵诖筇逍翁鄄旌罅?从酶,砹秩芤汗潭ㄊ 袂衅瑏9?染色光镜下观察组织学变化并进行显微照相显示正常结构及病理改变根据毒理学技术先进行高剂量组‖与基质空白对照组的对比观察保留其它组织样本组织学结果综合如下心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、甲状腺、胸腺前列腺雄、脑、胃、结肠、睾丸和附睾雄、子宫雌、卵巢雌等脏器高剂量组及基质空白对照组均未见阴显病变。阴道粘膜高、低剂量组与基质空白对照组阴道粘膜肉眼均未见到红肿、水泡、丘疹、溃烂、粘膜增厚等异常现象高剂量组与空白对照组的组织切片镜检均未见到有明显病变。直肠粘膜高、低剂量组与基质空白对照组直肠黏膜肉眼均未见到红肿、水泡、丘疹、溃烂、粘膜增厚等异常现象高剂量组与空白对照组的组织切片镜检均未见到有明显病变。结论某中药栓剂以生药倍于临床剂量和生药倍于临床等效剂量剂量对实验兔连续给药个月未见实验兔出现外观、体重增长、血液学和血液生化学、病理组织学的毒性反应。讨论由于该中药栓剂在临床上主要是直肠或阴道用药所以在兔实验给药时应与临床给药一致即直肠雄或阴道雌给药。但家兔在受到刺激后有排粪和排尿的习性一般情况下直肠给药容易排出达不到长期毒性实验给药作用时间的要求因此在实验给药前小时给实验兔断水、断料。并在实验给药后按压住兔肛门约分钟待中药浓缩膏在直肠内充分溶化再放入兔笼内饲养。在该实验研究中兔肛门及阴道给药方法是非常重要在本次实验给药时用的是浓缩膏。给药时用的一次性塑料注射器不要针头部分并切去针筒前面的尖端部分并磨平吸取浓缩膏塞峪蟮蟮蟮妒妒妒舻脏脏脏脏心肝脾肺第五届中南地区实验动物科技交流会论文汇编人试验兔肛门或阴道操作起来比较方便但实验人员动作要轻在兔努责时不要强行塞人否则会对实验结果有很大影响。该试验的目的主要是找出该中药可能存在的长期用药后的全身毒性作用及毒性作用靶器官我们按中药新药审批要求进行了长期毒性实验研究各项检测指标均在正常值范围内。且与对照组比较均无显著的差异。表明该中药栓剂长期用药后无明显的毒性作用。参考文献卫生部药政局中药新药研究指南丁正梁臻著实验动物临床医学检验上海言牧兽医学会实验动物科学学组第一版田岛嘉雄主骗实验动物的生物学特性资料采验动物中央研究所。第一版施新懿编著医用实验澍物学。陕西科学技术出版社第一版脑啡肽酶与老年痴呆昊玉娥综逮黄韧审校阿尔茨海默氏病是一种多发生在老年的中枢神经系统退行性疾病。其发病机制尚未阐明。细胞外淀粉样蛋白一沉积是主要病理学特征之一。体内的稳态水平取决于合成和分解活动之闯的代谢平衡。几乎在所有家族性中合成代谢增加被认为是引起沉积的主要原因但在散发中较少证据支持生成增多的作用。因此近年来降解减少在中的作用逐渐引起人们 的重视。与艮降解有关的酶也得到了广泛的研究。也称脑啡肽酶。本世纪以来它在分解代谢中的作用逐渐引起人们的重视。研究表明其数量改变或活性变化在沉积中扮演重要角色。本文仅就与分解代谢和沉积的关系及其在预防和治疗方面的应用前景做一筒要综述。的结构及特点属哺乳动物中性内肽酶亚日是一个分子量为道尔顿的含锌离子的细胞表面型膜蛋白由个氨基酸组成”。 等通过克隆几个物种的互补确定了它的氨基酸序列。由一个短的氮末端胞质结构域一个跨膜螺旋和一个大的碳末端胞外催化结构域组成。其中细胞外结构域含有个半胱氨酸残基参与构成二硫键还包含一个基序这个基序与锌离子结合及催化作用有关一。在体外可以降解或灭活许多生物活性肽。能够被裂解的底物包括脑啡肽、物质、内皮索和心房利钠因子等。同时也具有广泛的组织分布特性。在肾中浓度最高其次是睾丸肾上腺和肺脑和脊髓中浓度较低。在不同的组织发挥不同的生理作用。在肾和血管内皮主要通过调节心房利钠肽的水解而发挥作用在中枢神经系统主要参与调节脑啡肽诱发的阵痛作用在肺组织中。参与物质代谢水平的调节”在脑中表达于神经元的突触前膜和突触后膜主要