丙氨酸氨基转移酶测定

丙氨酸氨基转移酶测定 标准操作程序(SOP)文件 单位:故城县生育技术服务站 编写者:宿金涛 日期:2012年5月28日 一、方法学原理 丙氨酸+2-氧代戌二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 + + LDH 丙酮酸+NADH+HL-乳酸+NAD+HO 2+ NADH氧化成NAD引起340nm处吸光度的下降,其下降速率与样品中ALT活性 成正比。 二、试剂 深圳迈瑞 规格:R1:6*40mL，R2:2*32mL， 试剂文号:粤食药监械(准)字2009第2400553号 主要组成成分: (R1):Tris缓冲液 150mmol/L 试剂1 L-丙氨酸 750mmol/L 乳酸脱氢酶 LDH ?1200U/L 试剂2(R2):α-酮戌二酸 90mmol/L NADH 0.9 mmol/L 三、仪器 迈瑞BS-390生化分析仪 四、样本 不溶血血清或肝素抗凝血浆。样品中丙氨酸氨基转移酶在2-8?可稳定7天。 五、检验方法: 测定条件:主波长 340nm 温度 37? 分析类型 连续监测法 检测 扣队空白杯 六、操作步骤: 空白/校准/样本 20uL 试剂1 200uL 混匀，37?孵育1min 试剂2 50uL 混匀，37?孵育1min后,连续测定3min内的吸光度，计算吸光度变化率(ΔA/min)。 *ΔA/min-ΔA/min-ΔA/min样本营空白管 计算:建议使用校准品校准仪器，以吸光度变化率(ΔA/min)为Y轴，浓 度为X轴，在生化分析仪上建立校准曲线，根据样本的ΔA/min在校准曲线上得 到相应的浓度。 七、参考范围 男性 女性 37? <40U/L <28U/L 30? <29U/L <20U/L 仅供参考，建议各实验室对此予以确认或建立所服务人群的参考值。 八、用途 本试剂用于人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶的活性测定。 丙氨酸氨基转移酶在肝脏有较高的含量，而在心、肾、骨骼肌、胰、脾、肺中则含量较少。丙氨酸氨基转移酶活性升高可由某些与肝脏有关的疾病，如:肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎、阻塞性黄疸等引起。而广泛性损伤和肌肉疾病、伴有休克、氧不足的循环衰竭、心肌梗塞和溶血性疾病等也会导致丙氨酸氨基转移酶活性的升高。 九、注意事项 1、试剂和样品可因仪器要求不同，按比例增减，计算公式不变。 02、试剂请放2-8C储存，避免冷冻、污染，否则将导致失效 3、高脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸收值。在这些样本的 测定中，高活性的丙氨酸氨基转移酶虽然可能将底物耗尽，但在340nm处仍有较高吸收值，此时样本应稀释后再测试。 十、参考文献 深圳迈瑞公司试剂盒操作说明