轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书

轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书 轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书 【试剂盒名称】 通用名:轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书 【原理及用途】 本试剂盒采用间接ELRSA方法检测轮状病毒IgM抗体，具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简便等优点。适用于血清类标本，对轮状病毒IgM抗体的诊断及流行病学调查具有重大意义，适合一般实验室开展。 【试剂盒组成】 1. 包被版 48孔板条 96孔板条 2. 阳性对照血清 一支0.5ml 一支0.5ml 3. 阴性对照血清 一支0.5ml 一支0.5ml 4. 酶结合物 一瓶6.0ml 一瓶12ml 5. 标本稀释液 一瓶6.0ml 一瓶12ml 6. 底物A液 一瓶3.0ml 一瓶6.0ml 7. 底物B液 一瓶3.0ml 一瓶6.0ml 8. 终止液 一瓶3.0ml 一瓶6.0ml 9. 浓缩洗涤液20倍 一瓶30ml 一瓶50ml 10. 说明书 一份 【样品要求】 病人标本无需特殊制备处理，采用正确医用技术收集全血标本，离心分离后，提取血清用于检测。待测血清存放于4?冰箱，采血后24h内测定。若需长时间保存，则应冻于-20?一下，避免反复冻融。使用前恢复到室温。 【操作步骤】 1) 加样:将标本稀释液100ul(或两滴)加到包被板孔内(预留阴、阳性及空 白对照2-5孔)，将待测血清用 PBS或生理盐水按1:20稀释后取10ul加入 反应孔内。阴性对照1-3孔阳性对照1孔，各加100ul对照血清。空白对照 1孔空置。 2) 孵育:将反应板震荡使样品混匀后置37?温箱或水浴反应30分钟。 3) 洗涤:用蒸馏水将浓缩洗涤液30ml(50ml)稀释至60ml(1000ml)。机洗: 5次，每孔注入洗涤液300ul或注满，停留30秒后吸尽拍干。 4) 加酶结合物:每孔加入100ul(或2滴)酶结合物，空白不加。 5) 孵育:置37?温箱反应30分钟。 6) 洗版5次:洗板操作同步骤3。 7) 显色:每孔加底物A、B液各50ul(或一滴)，充分混匀，37?避光显色10 分钟。 8) 终止:每孔加入终止液50ul(或一滴)混匀终止反应。 【结果判断】 1. 酶标仪设定波长450nm，先用空白孔调零，然后测定各孔OD值:如果选 用双波长测定，不必设值空白对照孔。 2. 当阴性对照平均OD值小于0.08，阴性对照(PC)OD值，说明试剂盒有 效且实验操作正确，否则应当重复实验。 3. 临界值(COT-OFFVALUE)等于0.10加阴性对照平均(NC)OD值。(当阴 性平均OD小于0.05时，按0.05计算，当阴性平均OD值大于或等于0.05 时按实际值计算)。 4. 标本OD值小于临界值为阴性，标本OD值大于等于临界值为阳性。 【注意事项】 1. 操作前请仔细阅读说明书，应严格控制反应温度和时间。 2. 试剂盒使用前要充分回复到室温。 3. 不同批号试剂请勿混用。 4. 请将拆封后未用完的包被板放入塑料袋内封紧保存。 【储存于有效期】 试剂盒支2-8?避光储存，有效期6个月。