黑眶蟾蜍圆核神经元形态_Cajal_氨酒精法

黑眶蟾蜍圆核神经元形态_Cajal_氨酒精法 黑眶蟾蜍圆核神经元形态 —Caj al ?氨酒精法 黄鹏良 ( )柳州职业技术学院 , 广西 柳州 5450027 [ 摘 要 ]用 Caj al ?氨酒精法将黑眶蟾蜍脑做成切片 , 在光学显微镜下观察 , 可确定两栖类圆核 的位置 , 并可了解到黑眶蟾蜍圆核内神经元形态主要为四种 , 各神经元主要特征及占总细胞百分 比如下 : ?圆形细胞 :胞体圆形 , 无树突 , 占细胞总数 22 . 3 % ; ?单极细胞 :胞体梨形或椭圆形 , 梨形胞体有短而粗树突 , 椭圆形胞体有一细而长树突占细 胞总数 36 . 4 % ; ?双极细胞 :胞体棱形或不规则 , 有两树突 , 主树突无分枝 , 占细胞总数 14 . 1 % ?多极细胞 :胞体近似圆形或多边形 , 有三个或以上树突 , 主树突无分枝 , 占细胞总数 27 . 2 % 。 圆核内各种类型细胞直径主要在 10,20 u m 范围之间 。 [ 关键词 ]黑眶蟾蜍 ; 圆核 ; 神经元形态 ; Caj al ?氨酒精法 本实验的目的在于以黑眶蟾蜍为代表 , 在解剖学上用 Caj al ?氨酒精法了解两栖类圆 的神经元形态 , 从而为更进一步了解两栖类圆核的构筑及功能做一些准备材料 , 而且还可以 [ 1 ] 圆核的解剖学研究在方法上除了传统的 N issl 法和 Gol gl - cox 法外 , 提供一种新的研究法 —Caj al ?氨酒精法 , 此法比前两种方法更易于将树突 、轴突 、髓鞘等细微细胞结构染色 1 材料和方法 材料来源于桂林郊区 , 用体重平均为 32 —50 g 的黑眶蟾蜍 28 只 。雌雄不限 , 将材料 重 、测量 、麻醉 、灌注 , 开颅取脑 , Caj al ?氨酒精法镀银 、水洗 , 按常规石蜡切片 , 镜检 , 观察 量 , 统计整理数据 , 拍照 。 灌注时 , 先用 20 m l 017 %生理盐水灌注后 , 再用 30 m l 30 %酒精灌注 , 以便将脑固定 。 镀银时间为 48 h , 30 , 镀银后还原为 10 h 。 2 结果 211 圆核定位 用 10 ×4 低倍镜下观察 , 可确定出黑眶蟾蜍的圆核是位于丘脑中央前背侧 一个较大的核团 。 照片 ?为横切方向以背面为上 , 腹面为下丘脑左半部 ,从此照片可以看到有三个核团或 ( ) ( 区紧贴着圆核 nucleus rot undus ,nue ,rot,圆核上面为前背外侧核 nucleus do rsolateralis aut ) () o r ,nuc. do rsolat ,ant,圆核下面为前腹侧区 auterio r vent ral area ,a . veut aut,前腹侧区下面 ( ) 顶盖前核大细胞部 nucleus magnocellularis p reop ticus , nue , mag. p reop t 另外 ,从此照片还可 ( ) (看到内侧前脑束 medial fo rebrain bundle ,M . F. B . 和外前脑束 lateral fo rebrain bundle . L ) B . 。 () ( 核正内侧为腹外侧区 ieat rolateral area ,a ,vent rolat . ,圆核内侧上方为腹内侧区 vent ro medial ) ( )area ,a . vent rolate . ,圆核上方为前背外侧核 nucleus do rsolateralis anterio r , nuc do rsolat . aut . ()圆核上外侧为僵核 lateral divisio n of vent ral habenular nucleus ,nuc. hab. veut . p . lat ( ) 照片 ?为水平切方向的丘脑切面 ,从此照片可以看有三个核团在圆核 nucleus rot undus () 的周围 ,圆核外侧上方为前角内核 auterio r eutopeduncular nucleus , nuc. entoped. aut . ,圆核区 ( ) ( 外侧为后外侧核 nucleus po rterolateralis , nuc. po st - lat , 后外侧核下方为后中间核 nucleus ) po stero cevt ral : s ,nuc po st - ceat。 212 圆核神经元形态 用 10 ×40 高倍镜观察圆核的神经元类型主要有 4 种 : 圆形 、单极 、双 极 、多极细胞 。各种细胞主要特征如下 : 21211 圆形细胞 胞体较小 ,核较大 ,多位于胞体中央或稍偏向一侧 。 21212 单极细胞 此类细胞主要有梨形和蝌蚪形两种形态 。梨形细胞胞体较大 ,从胞体周围 发出一短而粗的树突 ,蝌蚪形细胞从胞体周围发出一细而长的树突 ,核位于胞体中央或稍偏向 一侧 ,核膜 、核质分界明显 ,在高倍镜下观察 ,此类细胞最清晰 ,特别是蝌蚪形细胞的细而长的 树突 ,染色非常清晰 。 21213 双极细胞 胞体呈棱形 ,从胞体周围发出两条树突 ,核圆形或棱形 ,多位于胞体中央 ,核 膜分界明显 ,此类细胞比前两类细胞略少 。 21214 多极细胞 胞体近似圆形或多边形 ,从胞体周围发出三条或以上树突 ,树突粗细长短不 一 ,核为圆形或多边形 。 总的来说 ,圆核内各种神经细胞核膜分界清晰 ,神经细胞内充满神经纤维 ,单极和多极细 胞占比例较多 ;圆形 、双极细胞略少 。各种类型神经细胞主要形态见下图 : A 组 :单极细胞主要形态 B 组 :双极细胞主要形态 C 组 :多极细胞主要形态 3 讨论 311 本实验表明 ,黑眶蟾蜍圆核内各种类型神经元细胞中单极和多极所占比例较多 ,圆形和 极所占比例略少 , 这结果与 Nissl 法中统计出蛤蚧圆核的各种类型神经元所占比例略有 2 异 。现将两种方法各种类型细胞所占比例比较如下 : Cajal ?氨酒精法 法 Nissl 2213 % 圆形 C 0 2614 % 1214 % 单极 C 1411 % 1108 % 双极 C 多极 C 2712 % 86151 % 出现这种情况 ,也许和 Cajal ?氨酒精法还不成熟有关 ,因此造成有些细胞树突染色不 清晰 ,观察不到或测量时受胞体间神经纤维的影响 ,造成偶然误差引起 。 312 实验结果表明 ,Cajal ?氨酒精法能较好地浸染黑眶蟾蜍的树突 ,特别是单极细胞的梨形 蝌蚪形胞体和树突非常清晰 。可以尝试将此法应用到别的神经解剖学染色方法上 。 313 用 Cajal ?氨酒精法得出的结果表明 ,黑眶蟾蜍的圆核纤维走向为从脑中线垂直向脑周 延伸 ,这和用 Galgl - co x 法黑眶蟾蜍为材料所观察到的结果一致 。但和用冰冻切片法以蛤 3 为材料得出的蛤蚧的圆核纤维走向有横向和纵向方向有别 。在蛤蚧圆核中 ,纤维走向在向为从脑中线垂直向脑外侧延伸 ,这和黑眶蟾蜍结果一致 ; 在纵向方面 ,蛤蚧为与脑中线平 4 从圆核向脑背腹两侧延伸 ,这一点是黑眶蟾蜍圆核所不具备的 。这是否为爬行类圆核比栖类圆核进化的一方面呢 ? 照片 ? 照片说明 : ?:以黑眶蟾蜍脑背部为上 ,腹部为下的横切面的左半部 ,标尺 :50um 。 A : nucleus clo rolateralis auterio r B : nucleus rot undus C :auterio r vent ral area D : nucleus magnocellularis p reopticus E : medial fo rebrair bundle F :lateral fo rebair bundle ?:从矢状切方向切下来的切面 ,标尺 :50um A : vent rolateral area B : vent ro medial area C : nucleus do rsolateralis auterio r D :cateral divisio n of ueut ral habenular nucleus E : nucleus rot undus ?:从水平方向切下来的切面 。标尺 :50um A : nucleus po sterocent ralis B : nucleus po sterolateralis C :cuterio r eutopeduncular nucleus D : nucleus rot undus [ 参考文献 ] 1 芮萄生等 . 组织切片技术. 人民教育出版社 ,1980() 2 姜世英等 . 鸽子丘脑圆核细胞视觉反应 . 广西师大学报 自然科学版,第 9 卷 ,第 2 期 3 San J uan. Puerto Bico , 1952 A S TVD Y O F T HE ANV RAN D I ENCEP HAL ON . COM PARA T IV E N ECROL O GY ,VOL . 96 ,NO ,1 :48,57 4 W. TODD RA IN E Y , 1979 Or ganiratio n of Nucleas Rot undus ,a Tectof ugal Thalamic Nucleus in Turtles. J OV RNAL O F MOR P HOL O GY ,VOL 160 , NO ,2 :120,130 . [ 责任编辑 韦文生 ]