【doc】胶体染料免疫渗滤法与IHA检测血吸虫抗体效果比较

【doc】胶体染料免疫渗滤法与IHA检测血吸虫抗体效果比较 胶体染料免疫渗滤法与IHA检测血吸虫抗 体效果比较 实用寄生虫病杂志2002年第1O卷第3期?107? ? 实验研究? 胶体染料免疫渗滤法与IHA检测血吸虫抗体效果比较 叶红专陶有文 (芜湖市地方病防治站 宁淦新黎庆龄 安徽芜湖241001) 摘要:目的探讨一种经济,简便,快速诊断血吸虫病的免疫学检测方法,为基层血防查病服务.方法用CDIFA 和IHA两种方法进行个体对比观察,检验CDIFA法检测人血清中抗日本血吸虫抗体特异性.结果150例中, CDIFA法和IHA法均阳性者25例,均阴性者120例(P>O.05),差异无显着性.结论CDIFA法和IHA法检测 人血清中抗日本血吸虫抗体具有高度的符合性,并且CDIFA法检测速度快,经济,方便,适合基层大规模查病. 关键词:胶体染料免疫渗滤法(CDIFA);IHA;血吸虫抗体;特异性 中图分类号:R532.21文献标识码:B文章编号:1005—2534(2002)03—0107—02 血吸虫病的免疫诊断是以抗体检测为主,常用的方法 有酶联免疫吸附试验(ELIsA),环卵沉淀试验(cOPT)和 间接血凝试验(IHA).这些方法,操作较烦琐,对大规模的 现场查病来说仍不十分理想.胶体染料免疫渗滤法(Col, loidalDyelmmunofiltrationAssay,CDIFA)是一种新近研 制的检测人血清中抗日本血吸虫抗体的检测方法,具有操 作简便,快速和廉价等优点.为检验CDIFA法检测血吸虫 抗体的特异性和效果,2001年6月,我们在芜湖市,南陵 县,芜湖县,繁昌县血吸虫病流行区各抽取部分人群,用 CDIFA法和IHA两种方法进行个体对比观察.现将结果 报告如下. l材料与方法 1.1CDIFA法 1.1.1CDIFA试剂盒检测板5O块,洗涤液2瓶,检测 液1瓶.由安徽省血吸虫病防治研究所血吸虫病研究室提 供. 1.1.2实验原理双抗原夹心法检测抗SEA抗体.SEA 包被在微孔滤膜上,检测时将血清滴于滤膜上,再加胶体 染料标记的SEA,若血清中有特异性抗体存在,则可在膜 上形成红色斑点[. 1.1.3操作(检测)步骤在膜的中央加1滴洗涤液 (O.01mol/LPBS)活化膜面;再加待测血清标本1滴; 然后加入标记染料2滴,待渗入后,再用3,5滴洗涤液洗 涤即显示结果. 1.1.4结果判定阳性者在膜中央的检测点和膜下方的 质控点均出现红色斑点;仅质控点出现红色斑点为阴性反 应;无红色斑点出现表明实验无效(图见封3). 1.2间接血凝试验(IHA) 按《血吸虫病防治》免疫学诊断要求操作[.日本 作者简介:叶红专(196O一)男,汉族,副主任医师.副站长,主要从 事血吸虫病和碘缺乏病等工作. 血吸虫间接血凝抗原由安徽省血吸虫病防治研究所研制, 经全国血吸虫病免疫诊断检测中心检测合格,批号 010312,效价:1:640. 1.3待测血清 在芜湖市湾里镇广福村,南陵县弋江镇蒲东村,芜湖 县和平乡王胜村,繁昌县新林乡九塘村各采集5O,60份 血样.实际采集合格血样共计150份,其中芜湖市54份, 南陵县18份,芜湖县4O份,繁昌县38份. 每份血样160~1,离心3mln,取得待检血清.每份血清 同时用CDIFA法和IHA法检测.实验时,工作人员分为 CDIFA组和IHA组;检测前,两组人员均不知道血清是 否是阳性或阴性;CDIFA组结果先出来,但不让IHA组 人员知道,以免判定结果时受到影响. 2结果 150例检测对象中,男性CDIFA阳性率为17.28 (14/81),女性为2O.29(14/69),男女合计为18.67 (28/15O). 男性IHA阳性率为17.28(14/81),女性为 18.84(13/69),男女合计为18.OO(27/150). CDIFA和IHA均阳性25例;CDWA和IHA均阴性 120例;二者符合率为96.67,CDIFA阳性IHA阴性3 例;CDIFA阴性IHA阳性2例(见表1).对结果进行卡方 检验(尸>O.05),差异无显着性. 表1CDIFA和IHA法结果统计 3讨论 实验结果表明,CDIFA和IHA检测人血清中抗日本 血吸虫抗体具有高度的符合性,并且CDIFA检测速度快, ? 1O8? 从采血样到检测结果报告只需10rain,而IHA则需要 60rain,从而节省工作人员和被检测者的时间,用于门诊可 节约就诊者时间,方便病人. 目前血吸虫病流行区普遍应用ELISA,IHA和 COPT等方法检测血清中特异性抗体来诊断血吸虫病,但 这些方法操作比较复杂,必须由专业技术人员借助一定的 仪器设备方能完成,尚不能满足对大量接触疫水人群的快 速筛检.CDIFA法具有操作简便和廉价的优点,肉眼观察 结果,不需另配试剂和任何仪器设备.CDIFA设有内质控 点,可指示实验的有效性;同时备有阳性和阴性对照血清, 结果观察一目了然,故工作人员不需经过特殊,只要 仔细阅读使用说明就能操作并得到正确结果.CDIFA试 剂稳定,在常温下至少可保存半年以上,且检测结果可长 实用寄生虫病杂志2002年第1O卷第3期 期保存,便于进行质量控制和管理,加上检测时占用空间 小,不需用水,电等优点,因此适合于基层单位和现场应 用. 本次对比观察缺少粪检阳性与CDIFA之间的比较, 今后还将扩大实验,进行跟踪研究. 本次实验得到安徽省血研所肖祥副主任医师.汪天平主任医 师的指导,南陵县,繁昌县,芜湖县血吸虫病防治站提供实验血 样,在此一并致谢1 4参考文献 [1]肖祥,汪天平.血吸虫病快速免疫诊断一胶体染料免疫 渗滤法的初步研究口].安徽医学.2001,22(3)57—58. [2]中华人民共和国卫生部疾病控制司.编.血吸虫病防治手 册I-M].第3版.上海:上海科学技术出版社.2000.88—91. 广汉市双泉乡血吸虫病2001年监测结果 邓启华,~tJd,波,代凯,罗光毅,黄明 (四川省广汉市血吸虫病防治站,四川广汉618300) 中图分类号:R532.21文献标识码E文章编号:1005—2534(2002)03—0108一Ol 双泉乡属历史重流行区,1977年人群感染率19.5%. 经多年艰苦防治,于1986年达到传播控制(基本消灭)标 准.但时隔1O年后,于1996年8月暴发急性血吸虫病45 例,采用人,畜同步普治,易感地带灭螺和部分沟渠硬化处 理,于1998年控制了急性血吸虫病的发生.现将2001年 监测结果报告于下. 1监测和方法 人群监测采用Kato—Katz法(3片)普查监测点内 5,65岁居民.耕牛监测用顶管孵化法(一送三检)普查 点内全部耕牛,与人群查病同步.螺情监测于5月份采 ,lOm设框普查钉螺,捕获的钉 用环境机械抽样,间隔5 螺全部用压碎法检查有无血吸虫尾蚴.防治措施人畜采 用对象治疗,用吡喹酮同步治疗所查出的病人和病牛.对 阳性螺点和易感环境用氯硝柳胺喷洒灭螺. 2监测结果 2.1钉螺监测结果 共查螺98340m,查出有螺面积14660m.捕获活螺 4128只,感染性钉螺8只,感染率0.1938.阳性钉螺密 度0.0008只/O.1lm,活螺密度0.41只/O.1lm.感染性 钉螺主要分布在沟渠中. 2.2人群感染率 该监测点总人口876人,5,65岁的居民应检人数为 .辐寺.,'人 763人,实际粪检人数为654人,受检率85.71%,粪阳6 人,感染率为0.92%.病人EPG(几何均数)15.03,人群 EPG(算术均数)0.22.男性感染率0.62%(2/324),女性 感染率1.21(4/330). 2.3耕牛感染情况 检查耕牛2O头,其中黄牛19头,水牛I头.无粪阳耕 牛出现. 2.4控制措施 按照对点内进行人畜对象治疗,共治病人6例. 耕牛无阳性,未治.由于发现8只阳性钉螺,为避免急血的 发生,对点内的全部有螺环境进行了3次喷洒灭螺. 3讨论 双泉乡属我市历史上的重疫区,1996年暴发急血后, 采取了人畜普治,灭螺和主要灌溉渠硬化的措施,疫情有 明显的减轻.经连续2年的监测观察,本次调查钉螺感染 率在去年(1.53%)的基础上有所下降,且病情也有所下 ,感染率为3.87%,今年查出6例 降.去年查出23例病人 病人,感染率为0.92%,但今年通过B超检查查出脾 脏>4.O的6人,这预示着晚血病人可能出现,防治工作决 不能掉以轻心. 通过今年的监测结果来看,如疫区能坚持每年1次的 普查治疗,对减轻疫情将有显着的作用. 南京市1997--2001年疟疾发病率及血检疟原虫结果分析 李燕青,高原,陈健 (江苏省南京市疾病预防控制中心,江苏南京210003) 中图分类号:一R531.3文献标识码:E文章编号:1005—2534(2002)03一封3一O1 '2O世纪9O年代以来,我市15个区县疟疾发病率一 直控制在1/万以下,并在全市范围内开展了灭疟后期管 理和监测工作.发热病人疟原虫阳性检出率降至0.1以 下.现将我市1997--2001年疟疾发病率及疟原虫检测结 果简要分析如下: 1材料与方法. 南京市各县区1997--2001年疟疾疫情报表. 按省疟疾镜检站操作规程对临床诊断为疟疾,疑似疟 疾,发热待诊,感冒发热的病人采取耳垂血,涂成厚,薄血 膜染色镜检疟原虫,并进行虫种分类. 2结果 2.1疟疾发病情况及血检疟原虫阳性情况 根据疫情报告1997—2001年疟疾发病人数逐年减 少,发病率明显下降,由1997年的0.176/万降至2001年 的0.O3O/万,血检疟原虫阳性率也由1997年的16.1/万 下降到2001年的5.4/万,年发病率和发热病人血检阳性 率下降趋势一致(见表1). 表1南京市1997--2001年疟疾发病与血检疟原虫阳性情况 共血检211946人,检出疟原虫阳性216人(均为间 日疟),平均阳性率为0.1o%.其中典型疟疾的检出率最 高,为8O.88%;疑似疟疾,发热待诊病人检出率分别为 1.45和0.04;感冒发热病人检出率为0.疟原虫阳性 ? 短文? 构成比分别是典型疟疾占50.9%,疑似疟疾占11.2%,发 热待诊占37.9,其中前两者合计为62.1(见表2). 表2疟原虫检出率比较及阳性构成比 2.3流动人口病例血检阳性情况 1997--2001年南京市流动人口病人血检阳性率均在 75以上(见表3). 表3流动人口病例血检疟原虫阳性情况 3讨论 南京市1997--2001年疟疾发病率及发热病人疟原虫 检出率均呈逐年下降的趋势,表明疟疾防治工作卓有成 效.亦说明疟原虫血检结果能反映疟疾发病情况,体现了 血检在疟防工作中的重要作用.在211946人中,检出疟 原虫阳性者216人,其中106人(占阳性人数的49.O7) 是从疑似疟疾(24例),发热待诊(82例)中检出的.随着疟 疾防治工作的不断深入,人群中残存的传染源日益减少, 疟疾的I『缶床症状不典型,增加了防治工作的难度,I临床诊 断易漏诊,因此,应继续开展血检.要加强流动人口抗疟管 理,加强流动人口中的发热病人疟原虫检查.及时根治病 人,消除传染源,防止输入性疟疾传播. 胶体染料免疫渗滤法与1HA检测血吸虫抗体效果比较(正文见第107页) 图1胶体染料免疫渗滤法检测结果A阳性,B阴性,C实验无效