EDTA-K_2对外周血异型淋巴细胞计数的影响

EDTA-K_2对外周血异型淋巴细胞计数的影响 EDTA-K_2对外周血异型淋巴细胞计数的 影响 检验医学与临床2011年6月第8卷第12期LabMedClin,June2011,Vo1.8,No.12 EDTA—K对外周血异型淋巴细胞计数的影响 杨秋连,5t日军.(1.湖南省常德市第一中医院检验科415000;2.湖南省常德市 Il盏澧县中医院检验科415200) ? 论着? 【摘要】目的}匕较未抗凝外周血与不同时段乙二胺四乙酸二钾(EDTA—K)抗凝外周血中异型淋巴细胞计 数的差异,探讨EDTA—K.对异型淋巴细胞计数的影响.分别对未抗凝外周血与EDTA—K:抗凝15,30,45 rain的外周血涂片,染色后计数100个淋巴细胞,并对其中的异型淋巴细胞进行分型计数.结果I型异型淋巴细 胞和?型异型淋巴细胞未抗凝外周血与不同时段EDTA-K抗凝外周血异淋计数,差异无统计学意义(P>0.05); ?型异型淋巴细胞未抗凝外周血与不同时段EDTA—Kz抗凝外周血异淋计数,差异有统计学意义(P<0.05);不同 时段异型淋巴细胞总数计数,差异有统计学意义(P<0.05).结论对于Downey分型的异型淋巴细胞计数可以用 EDTAK.抗凝的外周血进行初步筛查.当?型异型淋巴细胞较多时,则应用未抗凝外周血涂片,染色,镜检.以便 确诊. 【关键词】未抗凝外周血;EDTAK!抗凝外周血;异型淋巴细胞 DOI:10.3969/j.issn.1672—9455.2011.12.025文献标志码:A文章编号:1672—9455(2011)12一l46302 TheinfluenceofEDTA.K2onperipheralbloodatypicallymphocytecountYANGQiu— lian,LJUJ"(1.Depart— meritofClinicalLaboratory,ChangdeFirstHospitalofTraditionalChineseMedicine,Changde,Hunan415000, China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,LinliHospitalofTraditionalChineseMedicine,Changde,Hunan 415200,China) [Abstract]ObjectiveTocomparethedifferenceofatypicallymphocytecountbetweenperipheralbloodwith— outanticoagulantandEDTA— K2anticoagulatedperipheralbloodatdifferenttimes,andtOinvestigatetheinfluenceof EDTA— K2onatypicallymphocytecount.MethodsAfterbloodsmearofperipheralbloodwithoutanticoagulantand EDTA— K2anticoagu1atedperipheralbloodat15min,30min,45minrespectively,wecounted100oflymphocyte,and theatypicallymphocyteswereclassified,counted.ResultsThecountresultoftypeIandHIatypicallymphocytesin peripheralbloodwithoutanticoagulantandtheEDTA— K2anticoagulatedatdifferenttimesshowednodifference(P> 0.05).ThecountresultoftypeUatypicallymphocytesinperipheralbloodwithoutanticoagulantandtheEDTAK2 anticoagulatedatdifferenttimesshowedsignificantdifference(P<O.05).Theresultoftotalnumherofatypical1ym phocytescountatdifferenttimewassignificantlydifferent(P<0.05).ConclusionWecoulduseEDTAK2anticoag— ulatedperipheralbloodonpreliminaryscreeningforDowneytypeofatypicallymphocytescount.Whentherearemore type? atypicallymphocytes,thebloodsmears,staining,microscopicexaminationoftheperipheral bloodwithoutanti— coagulantshouldbeusedfordiagnosis. [Keywords]peripheralbloodwithoutanticoagulation;EDTAK2anticoagulatedperipheral blood;atypical lymphocyte 异型淋巴细胞又称为反应性淋巴细胞,是在病毒,原虫感 染,药物反应,结缔组织疾病;免疫系统强应激状态或过敏原等 因素的刺激下,淋巴细胞增生并发生形态上的变化,主要表现 为胞体增大,胞质量增加;嗜碱性增强;细胞核母细胞化.异型 淋巴细胞增多主要见于传染性单核细胞增多症,病毒性肝炎, 流行性出血热,湿疹,人类疱疹病毒,人免疫缺陷病毒,梅毒螺 旋体,弓形虫等病毒性,过敏性疾病以及感染和接种疫苗等都 可引起外周血异型淋巴细胞增多.过去使用为抗凝血进行细 胞计数,就没有抗凝剂对细胞形态的影响,使用抗凝剂以后,有 报道称:手指末梢血涂片异型淋巴细胞检出率明显低于乙二胺 四乙酸二钾(EDTA—K:)抗凝血的标本,j;提示异型淋巴细胞 形态受EI)TA—K抗凝剂的影响较大,EDTA—K.抗凝血不适宜 用于异型淋巴细胞的检查.但是没有文献具体说明抗凝剂 EDTAK?对哪种类型的异型淋巴细胞影响较大,EDTA—K抗 凝血不能用于异型淋巴细胞计数,能否用做异型淋巴细胞计数 的初步筛查,因此,本文就此问题收集本院部分病例进行探讨. 1材料与方法 1.1标本来源收集常德市第一中医院2009年12月至2010 年3月住院及门诊患者标本71例,女27例,男44例,年龄0 , 8岁. 1.2方法 1.2.1试剂与仪器瑞士染液,OlympusX21显微镜,ED TAK抗凝剂. 1.2.2标本采集与处理严格按照手指末梢血采血法对患者 进行采血,并分别对其未抗凝血,EDTA—K:抗凝后15,3O,45 min的血液标本进行涂片,瑞士染色,镜检并计数异型淋巴细 胞并分型. 1.3统计学方法数据表示用?S表示,用SPSS13.0分析 处理数据. 2结果 2.1比较各组数据(表1),可见在外周血中异型淋巴细胞主 要以I型异型淋巴细胞为主,?型异型淋巴细胞次之,?型异 ? 1464? 型淋巴细胞最少见. 表1各组异形淋巴细胞水平(j?s) 检验医学与临床2011年6月第8卷第12期LabMedClin,June201l,Vo1.8,No.12 2.2由表2可见,未抗凝外周血与EDTA-K抗凝15,3O,45 min的外周血中的I型异型淋巴细胞和?型异型淋巴细胞计 数差异无统计学意义,t检验可见其P>0.05,其差异没有统计 学意义,而?型异型淋巴细胞计数之间存在差异,t检验可见P <O.05,其差异有统计学意义,未抗凝外周血与EDTA—K抗 凝外周血异型淋巴细胞总数t检验示P<O.05,其差异有统计 学意义. 表2未抗凝组与EDTA—K2抗凝后外周血异型淋巴细胞计数数据分析 3讨论 异型淋巴细胞的形成是由于病毒与B淋巴细胞受体结 合,在不断增殖与复制的过程中,被T异型淋巴细胞识别,激 发抑制性T细胞(Ts/c)增殖并自身发生转化,形成细胞毒效 应,出现在循环血液中的大多为受刺激后异常增殖的T细胞 和少许颇似B细胞异型淋巴细胞l_2].异型淋巴细胞在光镜下 的特点主要是:胞体较大,核染色质未成熟;胞浆呈嗜碱性,有 嗜天青颗粒出现.异型淋巴细胞Downey分型为:I型又称为 泡沫型或浆细胞型,?型又称为单核细胞型或不规则型,?型 又称为未成熟细胞型或幼淋巴细胞型.异型淋巴细胞的超微 结构表现为均匀一致的结构,近年来,大量文献报道异型淋巴 细胞是活化的淋巴细胞,Tosato发现IM患者从第二周起以异 型淋巴细胞为主要特征的T细胞增生表现为Ts活性增加. 有文献E33指出:异型淋巴细胞是肾脏移植排斥的信号,异 型淋巴细胞可以作为免疫抑制剂的用药指标;EHF患者异型 淋巴细胞的总检出率为93%,100,异型淋巴细胞的检出对 本病有早期诊断的价值;病毒性肝炎患者的异型淋巴细胞存在 于黄疸前期和黄疸早期,且异型淋巴细胞出现的数量与肝坏死 的程度一致.综上所述,异型淋巴细胞计数对于指导临床工作 有着重要的意义. 以往外周血细胞计数都是用未抗凝外周血来进行涂片染 色计数的,异型淋巴细胞形态典型,且不存在抗凝剂等的影响. 但是,随着医院规模的扩大,实验室技术的不断提高,全自动血 液分析仪愈来愈普及,对于血液标本收集的化,以及使用 不同的抗凝剂对血液样本进行抗凝处理,本文对于血液标本实 验室检查结果的手工显微镜镜检复查以及异型淋巴细胞计数 大都使用EDTA—K抗凝外周血进行检测,那么血液常规检验 中用到的抗凝剂EDTA—K是否可以用于实验室外周血细胞 计数.正确的认识EDTA—K对于外周血细胞形态的大小就 十分重要. 由表2可见,不同时间段未抗凝外周血与EDTA—Kz抗凝 外周血异型淋巴细胞总数计数的t检验示P<O.05,其差异有 统计学意义.说明EDTA-K对异型淋巴细胞计数有影响,且 影响不可忽略,EDTA-Kz不能用于异型淋巴细胞总数计数. ,未抗凝外周血与EDTA-Kz抗凝15,3O,45rain外 由表2可见 周血中的I型异型淋巴细胞和?型异型淋巴细胞计数差异无 统计学意义,t检验可见其P>0.05,其差异没有统计学意义, 而?型异型淋巴细胞计数之间差异有统计学意义,t检验可见 P<O.05,其差异有统计学意义.结合实验数据以及观察血涂 片中细胞形态可以看出抗凝剂EDTA—K对于I型异型淋巴 细胞和?型异型淋巴细胞计数影响不大,对?型异型淋巴细胞 计数影响较大,主要表现在细胞肿胀,胞质以及颗粒增多.这 与文献E43报道的"在常温下不同时间的EDTA—Kz抗凝血液 涂片中淋巴细胞的形态变化表现为核退变,细胞质中出现空泡 变性以及颗粒增多等现象,异型淋巴细胞形态受EDTA—K.抗 凝剂的影响较大"结论是相符合.同样有报道指出EDTA-K 抗凝血异型淋巴细胞增高的主要原因可能有.]:(1)标本放置 时间过长,细胞退化,活化;(2)离体血与玻管(异物)接触,活 化;(3)抗凝剂物质的刺激,活化,退化;(4)体内,外温差,活 化等.这些影响不仅仅存在于EDTA—Kz抗凝的外周血中,其 他抗凝剂也同样如此,但是,这些影响都不会导致其计数结果 的差异有统计学意义,否则EDTA—Kz抗凝的外周血不能用于 血涂片检查,那么血液分析仪检测结果显微镜涂片复检规则就 不能成立了.有文献报道EDTA_K使外周血中的异型淋巴 细胞计数增加,本文数据(见表1)提示加入抗凝剂以后异型淋 巴细胞均值比未抗凝组稍有下降,结合阅片考虑有以下方面的 因素:(1)细胞退化:退化的淋巴细胞尚未计人到异型淋巴细胞 计数中;(2)染色质无明显变化,但胞浆出现改变的,本文认为 不是真的异型淋巴细胞,故未计入异型淋巴细胞计数;这些因 素导致的改变并不是淋巴细胞受刺激而引起的,而这一观点是 有关异型淋巴细胞研究文献没有擅明的.从表1以及相关文 献可以得知外周血异型淋巴细胞主要以I型异型淋巴细胞和 ?型异型淋巴细胞为主l_8],?型异型淋巴细胞最少见,而抗凝 剂EDTA—Kz对于I型异型淋巴细胞和?型异型淋巴细胞计 数影响不大,对?型异型淋巴细胞计数影响较大,因此可以得 出结论:EDTA—K.抗凝的外周血可以用于异型淋巴细胞计数 的初筛,当发现血涂片中?型异型淋巴细胞较多时,则可采集 新鲜未抗凝的外周血进行涂片计数. 参考文献 El3樊笑霞,吴飞,王凌.EDTA—Kz对异型淋巴细胞检测的干 扰EJ3.第二军医大学,2009,30(5):(下转第1466页) 检验医学与临床2011年6月第8卷第12期LabMedClin,June2011,Vo1.8,No.12 术结束.术中出血量:负压吸引瓶的出血量+钳夹时阴道流血 量.术后阴道流血大于10d或流血量多于月经量者为阴道流 血异常,宫颈管或宫腔黏连:术后1月多月经未来,且伴有下腹 胀痛,B超检查提示官腔积液.月经减少或闭经:人流术后月 经量明显减少,量少于以往月经的一半或不来月经. 1.6统计学方法结果采用t检验,P(0.01为差异有统计 学意义. 2结果 可视无痛人流组手术时间明显短于对照组,术中出血量少 于对照组,无子宫穿孔及吸宫不全或漏吸发生,术后阴道流血 时间异常发生少,宫腔或宫颈管黏连,月经减少及闭经发生明 显少于对照组.见表2. 表2两组手术时间,术中及术后并发症比较 3讨论 人工流产水平是评价生殖健康和优质服务的客观,是 一 个重要的生殖健康问题_5],全球每年约有4000~6000万例 人工流产,即全球妊娠的26以流产为结局l6],近年来有逐渐 增高的趋势.无痛人流是指在静脉麻醉下进行的人工流产术, 患者在睡眠中接受手术,痛苦小,当患者醒来时手术已结束"]. 普通的无痛人流术虽然也能减轻患者手术过程中的痛苦,避免 人流综合征,但是手术全依靠医生的感觉和经验,手术操作的 时间较长,且易发生子宫穿孔,漏吸,吸宫不全或反复搔刮宫腔 导致子宫内膜过度损伤,造成月经减少,闭经甚至官腔,宫颈黏 连,继发不孕或再次妊娠时子宫蜕膜发育不良,引起前置胎盘, 胎盘黏连或植入].经阴道B超引导下的可视无痛人流术, 医生术中可以调整阴道探头从B超显示屏了解子宫的位置大 小,形态和孕囊的位置,大小及有无胎芽等情况.手术者可以 将吸头口对准胚胎着床部位迅速吸出胚胎组织,确保找胚胎稳 准快,从而缩短手术时间,减少术中不必要的操着,减少术中出 血;而且还可以动态观察宫腔组织的清除过程及子宫收缩情 况,手术过程清楚地观察探针,刮匙,吸头的活动位置及于宫壁 的关系,有效地避免了子宫穿孔,同时通过不断地观察宫内胚 胎组织清除情况,避免了医生担心吸宫不全或漏吸而过度刮宫 造成术后月经减少或闭经,甚至宫腔黏连,引起继发不孕,再次 妊娠胎盘黏连植入等远期并发症.在阴道B超引导下的无痛 人流具有手术时间短,术中出血少吸宫不全,漏吸发生少,术后 阴道流血少,以及术后月经减少,闭经及官腔黏连发生少等优 点,既解除了患者痛苦,又减轻了医生的压力和风险,是值得在 基层医疗单位应用的手术方式. 参考文献 [1]丰有吉,沈铿.妇产科学[M].北京:人民卫生出版,2005: 417. 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