金蝉止痒胶囊抗病原体作用研究

金蝉止痒胶囊抗病原体作用研究 金蝉止痒胶囊抗病原体作用研究( 巨少华1谯志文2胡勇1吕姗珊2任香怡1杨发龙3陈思敏1徐世军1? (1。成都中医药大学药学院，四川成都611137:2。重庆希尔安药业有限公司，重庆401121: 3(西南民族大 学生命科学与技术学院，四川成都610041) ?通讯作者 摘要目的:考查金蝉止痒胶囊的抗病原体作用，为其临床应用提供实验依据。 方法:采用体外细菌和真菌培养的方法，考察金蝉止痒胶囊对常见致痒细菌(脓 链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、奇异变形杆菌和克雷伯氏 菌)和真菌的抑制作用，评价其抗病原微生物作用。结果:金蝉止痒胶囊对化脓 链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌具有较好的体外抑菌效果， 而对奇异变形杆菌和克雷伯氏菌的抗菌效果不明显;对白色念珠菌和近平滑念珠 菌有一定的抑制作用作用，但对皮肤毛孢子菌在该药物浓度剂量下，未见明显抗 菌活性。结论:金蝉止痒胶囊具有一定的抗细菌和抗真菌作用。 关键词:金蝉止痒胶囊;细菌;真菌;药效学 the of effect of Experimental study anti—pathogen JinChanZhiYang capsule Ju Shao—hual，Qiao Zhi—we一，Hu Shan—shah2，RenYon91，Lv Xiang—yil， Si(minl，Xu Shi(junl? Fa-lon93，ChenYang of of Traditional Chinese (Pharmaceutical College Chengdu University Medicine， Sichuan 1 Healn Pharmaceutical 61 Chengdu 137;2(Chongqing Co(，Ltd，Chongqing 40 1 1 2 of Life Science and of Southwest for 1;3(College Technology University Nationalities，Sichuan Chengdu 610041) Abstract effect of Objective:To study。the anti-pathogen JinChanZhiYang Capsule clinical of and data for use(Method:The inhibition supply experimental for commoll itch JinChanZhiYang capsule causing bacteria(Streptococcus pyogenes， mirabilis coli,Pseudomonas aureus，Proteus aeruginosa，Staphylococcus Escherichia in culture its evaluated and were used vitro methods，and Klebsiella)and fungi has antibacterial ineffect(Result:JinChanZhiYang capsule obviously anti-pathogen vitro on coli，Pseudomonas aeruginosa， Streptococcus pyogenes，Escherichia albicans and Candida for Proteus Staph)’lococcus aureus，Candida parapsilosis(But and Skin Hair has little effect(Conclusion: spores，it mirabil西，Klebsiella have anti-bacterial and effects( anti?fungal JinChanZhiYang capsule Key words:JinChanZhiYang capsule;Bacteria;Fungi;Pharmacodynamic 荨麻疹是一种临床常见的皮肤黏膜过敏性疾病。中医学称“瘾疹”，俗称“风 疹块”，其发病急，来势快，伴有剧烈瘙痒，具有“风候”的特点 。其病情反复， 病程长短不一，严重影响人们的工作与生活质量，有研究显示，15,,20,的人一 生中至少发作过一次此疾病【2】。金蝉止痒胶囊由金银花、蝉蜕、栀子等制成的制 剂，具有清热解毒，燥湿止痒的功效，临床上主要用于治疗湿热内蕴所引起的丘 疹性荨麻疹，夏季皮炎等皮肤瘙痒症状。为进一步了解其药理作用并为临床治疗 提供理论依据，本课题组对其抗病原体作用进行了实验研究。 1与方法 1(1试验药物 金蝉止痒胶囊(JCZY)，重庆希尔安药物有限公司提供，批号:120223; 盐酸环丙沙星片，丞洼直史塞荭些查阻坌鱼生产，批号:1203015;伊曲康唑， 11 成都倍特药业有限公司生产，批号:201 101。 1(2菌株 金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、大肠杆菌(ATCC25922)、铜绿假单胞 菌(ATCC27853)、化脓链球菌、克雷伯氏菌、奇异变形杆菌均由成都医学院 惠赠;白色念珠菌ATCC 90029、近平滑念珠菌ATCC 22019均由中国国家菌种库 提供。其它真菌受试菌株均为2012年7月""2012年8月从四川省内三级甲等医院住 院患者体内分离的临床致病真菌，标本主要由皮肤、生殖系统等感染病患者的分 泌物临床标本中分离。所有分离菌株经分离单位鉴定，并含有一定比例耐药菌株。 1(3培养基 胰蛋白胨大豆肉汤(TSA):购自成都基特科技有限公司，批号:20120306; H肉汤培养基， M(H琼脂培养基，批号:CM0337A:胰蛋白胨，批号:LP42B;M( 批号:CM0405B;脑心浸出液肉汤培养基，批号:CM0225B，均购自Oxoid公司。 沙氏培养基，购自北京奥博星生物技术有限责任公司，批号:20120818; RPMI(1640液体培养基，购自Gibco公司，批号:31800(022。 2方法及结果 2(1对皮肤瘙痒常见细菌活性的影响 按照TSA产品#说明#配制培养液，用 TSA培养液对环丙沙星和JCZY分别进 行倍比稀释，TSA肉汤中按5,(v,v)加入过滤除茵的小牛血清。将化脓性链球 菌接种至TSB+血清培养基中，将奇异变形杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 铜绿假单胞菌、克雷伯氏菌接种至UTSB液体培养基中，置37。C恒温培养 h， 16—18 增菌后的菌液校正浓度至0(5麦氏比浊，采用微量稀释法测定药 物对上述各 种细菌的最小抑菌浓度(MIC)，见1。 表l金蝉止痒胶囊对6种常见皮肤瘙痒致病细菌的MIC 药物 MIC(I(tg?mL-1) 塑堕一 奇异变形杆菌 JCZY 256 环丙沙星 2 141 由表1可知，金蝉止痒胶囊对化脓链球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金 黄 色葡萄球菌具有较好的体外抑菌效果，而对奇异变形杆菌和克雷伯氏菌的抗 菌效 果不明显。 2(2对20株临床分离真菌的体外抗菌活性研究 体外药物敏感性实验的操作及 M27(A【3J进行。质 药敏试验结果解释参照CLSI 控菌白色念珠菌ATCC90029、近平滑念珠菌ATCC22019跟随每批实验，进行 CFU?mL‘1的菌悬液质 量控制。受试菌用生理盐水稀释制备成浓度为1(5x104 【4】，将5 ?L菌液接种于含药培养皿中，35。C条件下于孵箱中培养18,72 h，以抑制细菌 生 长的最小抗菌素浓度为MIC。采用CLSIM44(A2t5】推荐的纸片扩散法药敏试 验并 测定抑菌圈直径。结果见表2及图1。 表2受试化合物对真菌的体外敏感性的MIC50、MIC90和MIC。。。 受试药品 菌株数 MIC90 MIC50 MIC。。ge 伊曲康唑!兰丛墨:生:: !兰些星:生: 三二!i兰竖:生: 20 JCZY4(g生药?mL‘1)8(25(g生药?mLl) !二!:兰!!璺生垫:些 !!一 由表2可知，JCZY具有一定的抑菌作用。 142 图1抑菌圈直径 纸片法显示，JCZY对白色念珠菌和近平滑念珠菌可见抑菌圈，而对小孢子 菌未见抑菌圈。 3讨论 细菌及真菌广泛存在于人的口、鼻、咽、消化道、泌尿生殖道以及皮肤中， 在人体免疫功能正常的条件下并不引起疾病，有些甚至对人体有益。但当机体鱼 疫力降低，人与微生物之间的平衡关系被破坏时就会成为一些疾病的诱因。荨麻 疹患者常由于过敏、自身免疫、自身菌群失调等原因引起月巴太塑照依赖性和非肥 大细胞依赖性导致的炎症介质(组胺、5(羟色胺、激肽及慢反应性物质等)的释 放，造成血管扩张、血管通透性增加、炎症细胞浸润，产生局部或全身的红肿、 瘙痒等症，严重影响患者的身心健康。因此，细菌、真菌引起的荨麻疹不容忽视， 治疗荨麻疹的药物不仅要针对内源性引起的病症，更要能治疗外源性因素引起的 症状。 本实验从引起荨麻疹的外源性因素病原体入手，着重研究了金蝉止痒胶囊抗 病原体的作用，结果显示:金蝉止痒胶囊体外对化脓链球菌、大肠杆菌、铜绿假 单胞菌、金黄色葡萄球菌具有一定的抑制作用，对白色念珠菌和近平滑念珠菌也 有一定的抑制作用，提示金蝉止痒胶囊具有一定的抗细菌和抗真菌作用，为临床 上金蝉止痒胶囊治疗丘疹性荨麻疹，夏季皮炎等皮肤瘙痒症状提供了一定的药理 学依据。另外，金蝉止痒胶囊对细菌与真菌的体外实验仅仅反应其在体外对病原 143 体的抑制作用，经过复杂的代谢过程后，金蝉止痒胶囊在体内是否也具有抗细菌、 真菌的作用，体外相关指标与体内是否一致，本课题组将在后续工作中展开。此 外，本实验仅涉及了病原体这一类外源性因素，其它方面的诱导因素还有待进一 步的研究。 【参考文献】 1，31(12): 8-9(1钟卫红，莫惠芳，储开宇(从风邪论治荨麻疹[J](湖南中医药大学学报，201 2李乔，吕静，梁颖(慢性特发性荨麻疹的发病机制新进展阴(中国医药指南，2012，10(13): 70(71( 3 National committee for clinical standards(Reference method for broth dilution laboratory of Standard antifungal susceptibility testing yeast;Approved M27-A[S](Lancaster Avenue， Villanova，pennsylvania:NCCLS，1997，1-12( Fermandez—Tortes a1(Collaborative evaluation of 4B，Cabanes FJ，Carrillo?Munoz AJ，et optimal for conditionsantifungal susceptibiSty testing dermatophytes[J](Clin microbial，2012，40(1 1): 3999-4003( 5 Clincal Institute(Method for Diffusion andDiskLaboratory Stangdars Antufungal Susceptibility ofGuideline—SecondEdition(CLSIdocumentand M44-A2[J](Clincal TestingYeasts;Approved StandardsLaoratory Institute，Wayne，PA，USA，2009 ( 144