氨咖愈敏溶液中对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因、马来酸氯苯那敏含量测定方法的研究[精品资料]

氨咖愈敏溶液中对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因、马来酸氯苯那敏含量测定的研究[精品资料] 氨咖愈敏溶液中对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因、马来酸氯苯那敏含量测定方法的研究-精品资料 本文档格式为WORD,感谢你的阅读。 [摘要] 目的 研究分析氨咖愈敏溶液含量测定方法，优化色谱分离条件。方法 采用C18柱，流动相为磷酸二氢铵溶液-乙腈-甲醇(70:10:20)，检测波长为271 nm，测定对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、无水咖啡因含量;采用C18柱，流动相为磷酸二氢铵缓冲液(0.1%三乙胺)-乙腈(73:27) ，检测波长为221 nm，测定马来酸氯苯那敏含量。结果 对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因分别在0.030 51,0.3051 mg/ml(r=1)、0.009 748,0.097 48 mg/ml(r=1)、0.003 838,0.038 38 mg/ml(r=1)与峰面积有良好的线性关系，平均回收率分别为101.5%、100.6%、100.7%(n=9)，马来酸氯苯那敏在0.003 968,0.039 68 mg/ml(r=1)与峰面积有良好的线性关系，平均回收率为100.1%(n=9)。结论 该方法操作简便、准确、重复性好，可用于氨咖愈敏溶液的质量控制。 [关键词] 氨咖愈敏溶液;对乙酰氨基酚;愈创甘油醚;咖啡因;马来酸氯苯那敏;含量测定;高效液相色谱法 [] R92 [] A [] 1674-4721(2013)12(a)-0013-04 氨咖愈敏溶液由对乙酰氨基酚、无水咖啡因、愈创木酚甘油醚、马来来酸氯苯那敏及适量辅料及水制成，用于缓解感冒引起的发热、头痛、咽痛等症状。现执行为《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第八册，标准编号为WS-10001-(HD-0758)-2002，国外药典均未见收载[1-2]。现行质量标准中的含量测定方法为HPLC法，色谱系统较复杂并 使用了离子对试剂，且马来酸氯苯那敏需用氯仿进行提取。因此本研究对原标准含量测定方法进行考察和研究，优化色谱分离条件，改进含量测定方法。 1材料与方法 1.1 仪器与试剂 1.1.1 色谱仪 美国Waters Alliance液相色谱仪，包括Waters 2695分离单元，Waters 2996二极管阵列检测器，Empower色谱工作站。 1.1.2试剂 对乙酰氨基酚对照品(批号:100018-200408)，咖啡因对照品(批号:171215-200507)，愈创甘油醚对照品(批号:100528-200401)，马来酸氯苯那敏对照品(批号:100047-200606)，均由中国药品生物制品检定所提供;甲醇、乙腈为色谱纯;其他试剂均为分析;氨咖愈敏溶液来自3个生产厂家的8批样品(A:贵州泛德制药有限公司，批号10030601、10010602、10110603;B:北京九龙制药有限公司，批号101111、101112、101113;C:杭州娃哈哈医药保健品有限公司，批号20100501、20100702)。 1.2 对乙酰氨基酚、咖啡因、愈创甘油醚的含量测定方法 1.2.1 色谱条件 色谱柱:CNW C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，S/N:MD1A01，安谱公司产品，以磷酸二氢铵溶液(取磷酸二氢铵11.5 g，加水适量使溶解，加入磷酸1 ml，加水稀释到1000 ml)-乙腈-甲醇(70?10?20)为流动相;检测波长为271 nm，进样量:20 μl，流速:1.0 ml/min，柱温:30?。 1.2.2 混合对照品溶液 取对乙酚氨基酚对照品、咖啡因对照品和愈创甘油醚对照品适量，精密称定，加水制成每1毫升含对乙酚氨基酚1.2 mg、咖啡因0.18 mg、愈创甘油醚0.375 mg的混合对照品溶液。 1.2.3 供试品溶液 精密量取本品10 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10 ml，置100 ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。 1.2.4 辅料溶液的制备 取处方辅料用量比例，按1.2.2的制备方法，配制三家药厂的空白辅料溶液。 1.2.5 检测波长的选择 对乙酰氨基酚的最大吸收波长近199 nm和243 nm，愈创甘油醚在194、221和271 nm附近有最大吸收，咖啡因在202、271 nm附近有最大吸收波长，考虑到愈创甘油醚和咖啡因在药品处方中占的比例较少，因此选用愈创甘油醚、咖啡因吸收值均较大、干扰较小的波长271 nm作为3种成分同时测定的检测波长[3]。 1.3马来酸氯苯那敏含量测定方法 1.3.1 色谱条件 色谱柱:CNW C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，S/N:MD1A01，安谱公司产品;以磷酸二氢铵缓冲液(取磷酸二氢铵11.5 g，加水适量使溶解，加入磷酸0.5 ml和三乙胺溶液1 ml，加水稀释到1000 ml)-乙腈(73?27)为流动相;检测波长为221 nm，进样量:20 μl 流速:1.0 ml/min，柱温:30?。 1.3.2 对照品溶液的制备 取马来酸氯苯那敏对照品适量，精密称定，加水成每制成每1毫升中含马来酸氯苯那敏0.012 mg对照品溶液，即得。 1.3.3 供试品溶液的制备 精密量取本品5 ml，置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过。取续滤液作为供试品溶液。 1.3.4检测波长的选择 马来酸氯苯那敏在221 nm和261 nm波长有最大吸收，其中221 nm的响应值较大，由于本品制备的供试品溶液待测成分较低，故以221 nm作为检测波长进行考察[4]。 2 结果 2.1对乙酰氨基酚、咖啡因、愈创甘油醚的含量测定结果 2.1.1专属性实验 分别取对照品溶液、供试品溶液和辅料溶液各20 μl进行测定。结果明，在此试验条件下，对乙酰氨基酚、愈创甘油醚和无水咖啡的峰形良好，辅料对含量测定无干扰(图1)。 A 图1 对乙酰氨基酚、愈创甘油醚和无水咖啡因含量测定辅料干扰 试验色谱图 A.对照品溶液;B.供试品;C.C厂辅料溶液;D.A厂辅料溶液;E.B厂辅料溶液 2.1.2 线性关系考察 精密量取混合对照品溶液适量，分别加水配制成含对乙酰氨基酚0.03、0.06、0.12、0.18、0.24、0.3 mg/ml，愈创甘油醚0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/ml，咖啡因0.04、0.08、0.015、0.013、0.030、0.040 mg/ml 的溶液，按1.2.1色谱条件进行测定，以对照品的浓度(C)(mg/ml)为横坐标，测得的峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:对乙酰氨基酚线性方程A=2×107 C -29 061，r=1;愈创甘油醚线性方程A=1×107 C-11 654，r=1;咖啡因线性方程A=6×107 C -17 833，r=1。结果表明，对乙酰氨基酚的浓度在0.03 051, 0.3 051 mg/ml范围内与峰面积线性关系良好，愈创甘油醚的浓度在0.009 748,0.097 48 mg/ml范围内与峰面积线性关系良好，咖啡因的浓度在0.003 838,0.03 838 mg/ml范围内与峰面积线性关系良好。 2.1.3 精密度试验 取供试品溶液重复测定6次，对乙酰氨基酚的平均含量为97.54%，RSD为0.11%(n=6);无水咖啡因平均含量为95.41%，RSD为0.15%(n=6);愈创甘油醚平均含量为101.1%，RSD为0.16%(n=6)。该方法精密度符合要求。 2.1.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液，按1.2.1色谱条件，分别在0、2、4、12、15、24 h进样测定。结果测得的对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因面积的RSD分别为 1.5%、0.97%、1.5%，表明供试品溶液自制备后24 h内结果稳定。 2.1.5 重复性试验 取同一批样品 (A厂家，批号10030601)6份，按1.2.1条件测定。结果对乙酰氨基酚的平均含量为97.22%，RSD为0.63%;无水咖啡因平均含量为95.01%，RSD为0.72%;愈创甘油醚平均含量为101.0%，RSD为0.50%，表明重复性良好。 2.1.6 耐用性试验 取取同一份供试品溶液在不同的仪器、不同色谱柱:安谱公司CNW C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，安谱公司CNW C18柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，美国热电公司Thermo AQ柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)上试验，结果所得色谱图峰形对称，测定结果基本一致。表明本方法耐用性好。 2.1.7 回收率试验 取同一批(C厂家批号20100702)已知含量(1.894 mg/ml)的供试品9份，每份0.5 ml，置于100 ml量瓶中，分别精密加入混合对照品溶液3、5、7 ml，加水稀释至刻度，摇匀，取续滤液作为回收率测定供试品溶液;取上述溶液，按1.2.1条件测定，测得对乙酰氨基酚、愈创甘油醚、咖啡因平均回收率分别为101.5%、100.6%、100.7%，RSD分别为1.4%、1.4%、1.1%(n=9)(表1)。 2.1.8样品测定 取3个厂家的8批样品，精密量取10 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。按1.2.1条件测定，结果见表2。 2.2马来酸氯苯那敏含量测定结果 2.2.1专属性实验 分别取对照品溶液、供试品溶液和辅料溶液各20 μl进行测定。结果表明，在此试验条件下，对马来酸氯苯那敏的峰形良好，辅料对含量测定无干扰(图2)。 图2 马来酸氯苯那敏含量测定辅料干扰试验图 A.对照品溶液;B.供试品;C.C厂辅料溶液;D.A厂辅料溶液;E.B厂辅料溶液 2.2.2线性关系考察 精密量取马来酸氯苯那敏对照品溶液适量，分别加水配制成0.003、0.006、0.012、0.018、0.021、0.03 mg/ml的溶液，按1.3.1色谱条件进行测定，以对照品浓度(C)(mg/ml)为横坐标，测得的峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程:A=3.5×107C -16 428，r=1;马来酸氯苯那敏的浓度在0.003 968,0.03 968 mg/ml范围内与峰面积线性关系良好。 2.2.3精密度试验 取本品供试品，重复测定6次，马来酸氯苯那敏的平均含量为99.99%，RSD为0.75%(n=6)，结果表明仪器精密性良好。 2.2.4稳定性试验 取同一份供试品溶液，按1.3.1色谱条件，分别在0、3、6、12、24 h分别进样测定，结果测得马来酸氯苯那敏的RSD为1.3%，表明供试品溶液自制备后24 h内基本稳定。 2.2.5重复性试验 取供试品，制备供试品溶液6份，按1.3.1条件测定。结果马来酸氯苯那敏的平均含量为102.4%，RSD为0.97%，表明重复性良好。 2.2.6 回收率试验 取同一批(C厂家，批号20100702)已知含量(0.2880 mg/ml)的供试品9份，每份2.5 ml，分别置50 ml容量瓶中，分别精密量取1.3.2项下马来酸氯苯那敏对照品溶液3、5、7 ml各3份于供试品量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为回收率测定供试品溶液;取上述溶液，按1.3.1条件测定，测得马来酸氯苯那敏平均回收率为100.1%，RSD为1.4%(n=9)(表3)。 表3 氨咖愈敏溶液中马来酸氯苯那敏回收率测定结果 2.2.7样品测定 取3个厂家8批样品，精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。按1.3.1条件测定，结果见表4。 表4 氨咖愈敏溶液中马来酸氯苯那敏含量测定结果(n=2) 3 讨论 现行质量标准中的含量测定方法为HPLC法，在一个色谱条件下同时测定对乙酰氨基酚、无水咖啡因、愈创甘油醚3个成分;在另一个色谱条件测定马来酸氯苯那敏。两系统中都使用了离子对试剂对色谱柱伤害较大，影响色谱柱寿命，马来酸氯苯那敏需用氯仿进行提取，毒性大。因此对原含量测定方法进行了考察和修订[5-6]。 马来酸氯苯那敏在处方中量最小，与处方中的其他成分有十几倍到上百倍的差别，且辅料脱氢醋酸钠有干扰，故四个成分难于在同一色谱条件下测定，现仍采用两个色谱系统，对流动相进行优化。所用方法操作简便，准确性、重复性好[5-8]。 [参考文献] [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:化学工业出版社，2010:正文49-50. [2] 氨咖愈敏溶液.WS-10001-(HD-0758)-2002[S].北京. [3] 郭丙炎，胡翮，邱蓓.HPLC法测定氨咖黄敏胶囊中人工牛黄的含量[J].药物分析杂志，2009，29(8):1367-1369. [4] 欧阳吉德，王灿，胡雯婷，等.小儿氨酚黄那敏颗粒质量标准的研究[J].药物分析杂志，2009，29(8):1352-1355. [5] 谢华，傅萍，张悦杨，等.HPLC法测定复方氨酚烷氨片中对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏[J].华西药学杂志，2012，27(3):307-308. [6] 辛俊衡.RP-HPLC法同时测定氨咖敏片中3组分的含量[J].中国药师，2006，9(12):1119-1120 [7] 熊灿琼，许文艺.HPLC法同时测定复方氨酚苯海拉明片中对乙酰氨基酚和咖啡因含量[J].中国药师，2006，9(10):931-932 [8] 钱忠义，葛薇薇.高效液相色谱法测定复方对乙酰氨基酚片的含量和溶出度[J].药物分析杂志，2012，32(1):161-164. (收稿日期:2013-08-07 本文编辑:魏玉坡) 阅读相关文档:多索茶碱与氨茶碱治疗支气管哮喘的效果观察 枸橼酸莫沙必利联合复方阿嗪米特治疗功能性消化不良的临床效果观察 阿奇霉素治疗小儿支原体肺炎的效果观察 米非司酮和孕三烯酮对子宫内膜异位症患者激素水平和妊娠情况影响的比较 噻托溴铵联合沙美特罗替卡松粉吸入剂吸入治疗中重度稳定期COPD的临床研究 枯草杆菌二联活菌颗粒联合蒙脱石散在小儿腹泻中的应用效果 盐酸米诺环素与氢氧化钙治疗窦道性根尖周炎的效果观察 来曲唑联合人绝经期促性腺激素在多囊卵巢综合征不孕症中的应用价值 法莫替丁联合奥硝唑治疗慢性胃炎的效果分析 阿德福韦酯与替比夫定治疗慢性乙肝的临床效果与安全性对比分析 甲氨蝶呤联合米非司酮 最新最全【学术论文】【报告】 【演讲致辞】【领导讲话】 【#体会#】 【党建材料】 【常用范文】【分析报告】 【应用文档】 免费阅读下载 *本文收集于因特网，所有权为原作者所有。若侵犯了您的权益，请留言。我将尽快处理，多谢。*