电针对大鼠脑缺血-再灌注过程中体感诱发电位P1-N1、N1-P2峰峰值变化的影响

电针对大鼠脑缺血-再灌注过程中体感诱发电位P1-N1、N1-P2峰峰值变化的影响 电针对大鼠脑缺血-再灌注过程中体感诱发 电位P1-N1、N1-P2峰峰值变化的影响 ? 542? 文章编号:1005—0957(2010)08—0542—04 Shan~haiJAcu.mox.Aug2010,Vol29,No8 ? 动物实验? 电针对大鼠脑缺血一再灌注过程中体感诱发电位P卜N1,N1_P2 峰峰值变化的影响 徐佳,徐鸣曙 (上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院,上海200437) 【摘要】目的研究大鼠脑缺血及再灌注过程中体感诱发电位的动态变化,以及电针干预对这一动态变化的影响.方法50 只雄性sD大鼠随机分为正常组,假缺血组,假缺血+电针组,模型组,模型+电针组:线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉脑缺 血再灌注模型,缺血90min,再灌注225min:电针大鼠风池穴20min,停止10min,再电针20min:各组分别于处理前,术 后30min,术后60min,再灌注期间及实验结束时检测大鼠体感诱发电位:分析P卜N1,N卜P2峰峰值.结果正常组,假 缺血组和假缺血+电针组大鼠P卜N1,N卜P2峰峰值变化在监测时 段内没有显着差异.模型组,模型+电钊?组缺血30min P卜N1,N1P2峰峰值出现明显下降:缺血60min时该峰峰值出现明 显恢复:缺血90min拔出栓线血液再灌注后,模型组P1一N1, N卜P2峰峰值再次出现明显下降,并延续到实验结束:模型+电针组 再灌注的同时给予电针干预,P卜N1,N1一P2峰峰值逐渐恢 复至正常水平.结论大鼠脑缺血一再灌注过程中P卜N1,N卜P2峰 峰值出现”降低恢复一再降低”的动态变化,电针风池穴可 特异性地逆转再灌注P卜N1,N卜P2峰峰值降低. 【关键词】大鼠:脑缺m再灌注:体感诱发电位:电针 【中图分类号】R2—03【文献标志码】A doi:10.3969/3.issn.1005—0957.2010.08.542 EffectofElectroacupunctureonSomatosensoryEvokedPotentialP1-N1andN1.P2Peak.to.peakAmplitudesDuring CerebralIschemiaandReperfusioninRatsXUJia.XUMing—shu.Yueyang HospitalofCombinedTraditionalChineseand WesternMedicineAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai200437,China 【Abstract】 ObjectiveToinvestigatedynamicchangesinsomatosensoryevokedpotentialsduringcerebralischemiaand reperfusioninratsandtheeffectofelectroacupunctureinterventiononthecha nges.MethodsFiftymaleSDratswererandomly dividedintonormal,shamischemia,shamischemiapluselectrOacupuncture,modelandmodelpluse1ectrOacupuncturegroups.A ratmodelofcerebralischemiaandreperfusionwasmadeby90minthreadocclusionoftherightmiddlecerebralarteryand225min reperfusion.ElectroacupuncturewasperformedatratpointFengchifGB20)for20min.stoppedfor10minandagainfor20min. Ratsomatosensoryevokedpotentialswereexaminedbeforetreatment.at30minand60minafteroperation.duringreperfusionand attheendofexperiment.P1一 N1andN1-P2peak—to—peakamplitudeswereanalyzed.ResultsTherewerenosignificant differencesinP1一N1andN1一 P2peak—to—peakamplitudesduringthemonitoringprocessbetweenthenorma1.shamiscbemiaand shamischemiapluselectroacupuncturegroups.P1一 N1andN1.P2peak—to—peakamplitudesdecreasedmarkedlyat30minafterthe arteryocclusionandrecoveredtoalargedegreeat60minafterthearteryocclusioninthemodelandmodelpluselectroacupuncture groups.Duringreperfusionfollowingtheremovaloftheintravascularthreadat90minafterthearteryocclusion.P1一NrandN1一P2 peak—to—peakamplitudesdecreasedmarkedlyagaininthemodelgroup,whichcontinuedtotheendoftheexperiment.Duringthe reperfusion.P1一NlandN1一 P2peak—to—peakamplitudesreturngraduallytoanormallevelinthemodelpluselectroacupuncture groupgivenelectroacupunctureatthesametime.ConclusionsDuringcerebralischemiaandreperfusioninrats.P1一N1andN1一P2 peak—to—peakamplitudeshavedynamicchangesof”decrease—recovery —decreaseagain??.ElectroacupunctureatpointFengchican specificallyreversedecreasesinP1一N1andN1一 P2peakto—peakamplitudesduringthereperfusion. 【Keywords1Rats;Cerebralischemiaandreperfusion;Somatosensoryevokedpotential;Electroacupuncture 脑缺血一再灌注损伤对于躯体感觉和运动通路的 完整性和功能状态产生了一定的影响.体感诱发电位 (somatosensoryevokedpotentials,SEP)对脑缺血十 分敏感,可以反映躯体感觉神经通路的完整性和功能 状态,可以作为临床和实验中的监控指标.我们已有的 研究表明,电针尽早干预可发挥脑保护作用,减轻神经 功能的损伤”...有研究发现,P卜N1峰峰值在脑缺血一 基金项目:上海市重点学科建设项目资助($30304) 作者简介:徐佳(1962一),女,副研究员 再灌注损伤时显着下降,对脑缺血的预后判断有参考 价值.我们采用多时段检测方法,观察大鼠脑缺血一 再灌注过程中体感诱发电位的动态变化,并研究电针 对其影响. 1材料与方法 1.1实验动物 健康SD雄性大鼠5O只,体重(300?20)g.由中科 上海针灸杂志2010年8月第29卷第8期 院上海实验动物中心提供.动物清洁级实验室饲养, 温度20~25~C,湿度40%~70%,噪声<60分贝,换气次 数10~20次/h. 1.2实验试剂 1%肝素纳溶液,10%水合氯醛,玻璃离子体水门汀, 硫酸庆大霉素注射液,30%H.0. 1.3实验仪器设备 sD一78双极电凝器,PowerLab生理信息采集仪(澳 大利亚ADInstrument公司),G6805—1A型电针仪(上 海华谊医用仪器厂),SAS一4100型大鼠脑立体定位仪 (美国ASIInstruments公司),CA8020型示波器(江 苏扬州光电子仪器厂),YPI2OIN电子天平(精度0.1g, 上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂),40—90—8C 型大鼠体温控制垫(美国FrederickHaer公司),针灸 针(环球牌,苏州针灸用品厂,0.30film×13mm). 1.4动物模型制备 大鼠麻醉用10%水合氯醛(3mL/kg)腹腔注射.栓 线制备取4,0号单尼龙线(美国DG公司)3.0cm,,端 用加热法制成光滑圆球型,生理盐水冲洗后置于装有 1%肝素钠溶液的试管中备用.参照LongaEZ的方法 制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型. 1.5电针干预方案 大鼠风池穴定位参考人体风池穴定位方法,于大 鼠项部枕骨下,斜方肌上端和胸锁乳突肌之问凹陷中. 针灸针垂直皮肤剌入约8mill,接电针仪,2Hz连续波, 电流强度3.0mA(示波器检测),可见大鼠耳廓轻度抖 动,电针20min,停止10min,再电针20min. 1.6体感诱发电位引导 将大鼠头部固定于大鼠脑立体定位仪上,剪去头 顶前囟区域皮毛,暴露颅骨约1.5cm×2cm大小:去除 颅骨表面附着之结缔组织,并以H.0.清洗,干棉球擦拭 干净.按大鼠A为一2.0;R为4确定体感诱发电位的 记录点,将针形电极针置于记录点的大脑硬膜外.在电 极针旁将两螺丝固定于颅骨表面,调和适量玻璃离子 体水门汀,涂敷于电极针周围及颅骨表面螺丝,待凝固 固定.刺激电极安放在大鼠左前肢腕上正中神经分布 区.参考电极夹于头皮切口边缘,地线接于大鼠鼻端皮 肤.刺激参数为单脉冲方波,持续时间0.1ms,频率 2Hz,延迟20ms,强度3mA.记录参数为高频滤波频 率1kHz,分析时间100ms. 1.7分组处理 根据随机数字表分为正常组,假缺血组,假缺血 +电针组,模型组,模型+电针组,每组10只.模型 组行脑缺血一再灌注模型手术:模型+电针组手术同模 型组,并于再灌注时开始电针干预:假缺血组手术插入 ?543? 栓线,但不到达大脑中动脉即退出假缺血+电针组手 术同假缺血组,并于手术结束即给予电针干预:正常组 不进行颈内动脉分离手术. 1.8检测体感诱发电位P卜N1和N1-P2的峰峰值 使用PowerLab生理信息采集仪和Scope软件,记 录SEP图形.测定SEP的P1-NI和N卜P2的峰峰值. 各组动物在处理前,手术后30min,手术后 60min,再灌注时以及实验结束(再灌注后225min) 等5个时段分别检测记录.在整个实验过程中,由于记 录电极脱落等原因导致3只大鼠不能按计划完成实 验.总计完成实验的大鼠为47只. 1.9统计学方法 所有计量数据以均数?差(?s)表示,应 用SPSS13.0对数据进行统计.处理后各时段与处理前 的比较采用配对检验.相应时段内不同组之间的比 较,如果各组数据的方差齐采用单因素方差分析,如果 方差不齐则使用秩和检验. 2结果 再禧注时 I 2?嬲0 图1模型组大鼠体感诱发电位不同时间段的变化 专I 雹l 2Om 图2模型+电针组大鼠体感诱发电位不同时间段的变化 图1和图2分别是模型组和模型+电针组体感诱 发电位的典型图. ?544? 2.1各组大鼠体感诱发电位Pl-R1 段的变化 峰峰值不同时间3讨论 正常组监测各时段基本一致,无波动.假缺血组, 假缺血+电针组检测各时段的相对变化与正常组相比 均无显着差异(0.05).模型组P卜N1峰峰值在缺血 后30min出现明显下降,与正常组相比差异有统计学 意义(0.05):术后60min时该峰峰值出现明显恢复, 与『F常组相比斧异无统计学意义(尸>0.05):缺血 90min行血液再灌注后,P卜N1峰峰值再次出现明显下 降,并延续到再灌注后225min,与正常组相比差异有 统计学意义(P<O.05).模犁+电针组在缺血30min, 60min,再灌注即刻的变化与模型组之问差异无统计 学意义(P>0.05).模型+电针组血液再灌注后电针干 预,Pl—N1峰峰值降低不明显,与模型组相比差异有统 计学意义(0.05).详见图3. 2.2各组大鼠体感诱发电位N卜P2峰峰值不同时间 段的变化 各组大鼠N1一P2峰峰值的动态变化与上述P卜Nl 峰峰值的变化一致.模型+电针组N卜P2峰峰值在术 后30min和再灌注时的下降程度大于模型组,但统计 学比较无差异(P>0.05).洋见图4. 40.00? 趔 20?0暇 g 0.0 o.o o-o 0.0 一 ?一正常组—E卜一假缺血组-_?-假缺血+电针组 — 卜模型组一??檬型峭 ,:?,__:台:一l--..;. 束 \./\/ - ? (O.05与同时段正常组比,#O.05与同时段模型组比) 图3各组大鼠体感诱发电位P卜N1峰峰值不同时间段变化 40.?I i四20_? 霎…铡 台一20-? 一 40.00?1 粘一60.00, 一 1t0.00?i 一 10o.00l m l~.-正常组—且一假缺血组.盘.假缺血+电针组 — ?一模型钼--A.模型+电针组 ? .一,.? ... 一 /口 冬/秦\? „ 血SEPN1一P2渡振精的柜霹变化 (尸<0.05与同时段正常组比,gP<0.05与同时段模型组比) 图4各组大鼠体感诱发电位N卜P2峰峰值不同时间段变化 Shan~haiJACU—mox.Aug2010,Vol29,No8 大鼠大脑皮层体感诱发电位是通过刺激肢体感觉 神经,在大脑皮层获得电活动信号,叮以反映大脑皮层 参与生物电活动的神经元的多少和脑神经细胞的兴奋 程度,反映神经躯体感觉通路结构的完整性及其功能 状态,可被用于估计脑功能损害的变化. 有学者研究表明,大鼠脑缺血一再灌注的SEP某 些参数(Pl潜伏期,Nl潜伏期,幅度)与正常对照大鼠 相比差异显着,Pl波,N1波的潜伏期延长,波幅降低, 随缺血的加重(时间延长)及再灌注损害的出现而加重, 可能是由于脑缺血发生后可产生血管源性和细胞源性 脑水肿以及神经冗的损伤,引起脑内感觉传导通路的 功能障碍所致.P卜N1,N卜P2峰峰值在单个实验个体 上较为稳定,可以更好地反映脑内感觉传导通路的功 能状态. 我们的研究结果显示,『F常组P卜N1,N1-P2峰峰 值在整个处理过程中没有发生明显变化.假缺血组及 假缺血术后电针干预对P卜N1,N卜P2峰峰值均没有明 显影响.模型组P1一Nl,N卜P2峰峰值在脑缺血后 30min明显降低,在缺血60min时基本恢复,缺血 90min拔出栓线实行血液再灌注时又再次迅速降低, 并一直在低水平维持到实验结束时:电针在血液再灌 注时干预,能使P卜Nl,N卜P2峰峰值得到明显上升, 并在实验结束时恢复到处理前水平,与模型组相比有 显着差异:说明电针风池穴可特异性地逆转再灌注 P卜N1,N卜P2峰峰值降低,减轻再灌注对脑功能损害. 与我们前期研究结果对比可以发现,再灌注后电针可 增强缺血周边区肾上腺素能神经元和多巴胺能神经元 的活性,同时使诱发电位有所恢复,这种恢复可能与针 刺增强.肾上腺素能神经元和多巴胺能神经元的活性, 促进神经早期可塑性变化有关.. 在大鼠大脑中动脉缺血及再灌注过程中,诱发电 位波幅不是持续降低的,而是一个动态的变化过程,在 缺血30min时降到谷底,至60min时有明显回升,缺 血90min后伴随再灌注的进行,其波幅再次下降.说 明缺血侧大脑皮层的兴奋性在缺血一再灌注过程中经 历了”抑制一兴奋一再抑制”的变化:表明大脑皮层兴奋 性在缺血缺氧状态下首先迅速下降,随后经高级神经 中枢活动有所恢复,再灌注的损伤使其兴奋性再次迅 速降低:在缺血过程中,高级中枢受抑制后的这种代偿 形式,町能与神经功能的可塑性及早期恢复有关.此 外,Fujioka等使用诱发电位的方法检测光化学诱导 法复制的脑缺血模型的动态变化,发现在缺血后1h 出现梗塞灶周边神经的高兴奋性:我们的结果与之十 分相似. 上海针灸杂志2010年8月第29卷第8期 参考文献 [1]徐佳,葛林宝,郑江澜,等.电针远近部位穴位对暂时性脑缺血大鼠 脑组织,血清一氧化氮含量影响的比较研究[J].针刺研究,2001, 26(4):243—246. 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[9]FujiokaH,KanekoH,SuzukiSS,eta1.Hyperexcitabilityassociated rapidplasticityafterafocalcerebralischemia[J].Stroke,2004,35(7) 346—348. 收稿日期2010—05—30 文章编号:1005—0957(2010)08-0545-01 针刺配合注射复方樟柳碱治疗lt~l/1.麻痹36例 李金颖,巩丹慧,池成涛 (黑龙江省牡丹江医学院附属红旗医院,门诊眼病中心,黑龙江157000) 【关键词】针刺:针药并用:眼肌麻痹 【中图分类号】R246.82【文献标志码】B doi:10.3969/j.issn.1005—0957.2010.08.545 笔者采用针刺配合颞旁注射复方樟柳碱治疗眼肌 麻痹36例,现报道如下. 1临床资料 病例来自2007年以来我院收治的36例眼肌麻痹 患者,男26例,女10例:年龄18~65岁:病程最短4d, 最长6个月:糖尿病16例,高血压9例,外伤8例,炎症 3例:动眼神经麻痹18例,外展神经麻痹14例,滑车神 经麻痹4例.所有病例符合眼肌麻痹的诊断标准,并检 查头颅CT排除颅内占位. 2治疗方法 2.1针刺 动眼神经麻痹取睛明,阳白,攒竹,鱼腰,丝竹 空,阳白沿皮下透刺鱼腰,攒竹沿眉弓透刺鱼腰,丝竹 空沿眉弓透刺鱼腰,睛明直刺不留针外展神经麻痹取 太阳,丝竹空,瞳子髂,太阳直刺,丝竹空透刺太阳, 瞳子骼向颞侧斜刺:滑车神经麻痹取攒竹,沿眉弓向外 横刺.配穴取合谷.每日治疗1次,10d为1个疗程, 疗程问休息2d. 2.2注射 采用复方樟柳碱注射液(北京紫竹药业)2mIJ,取 作者简介:李金颖(1972一),女,副主任医师,硕士 ? 临床报道? 患侧颞旁注射.每日治疗1次,10d为1个疗程. 3结果 痊愈(复视消失,眼球运动自如到位)24例,显效 (复视距离变小,眼球可向麻痹肌作用方向移动)8例, 好转(复视距离变小,眼球可向麻痹肌作用方向轻度移 动)3例,无效(复视距离无改变,眼球不动)l例.疗程 最少1个疗程,最多6个疗程. 4讨论 眼肌麻痹属中医学”睑废”“视一为二”范畴,多 由经络感受风邪,致使经络阻滞,气血凝涩,经筋失养, 肌肉纵缓不收.樟柳碱属莨菪类生物碱,能调节和维持 血管活力,增强推动血流的力量,对调整高级神经系统 有良好作用,营养神经细胞,促进神经细胞生长,使眼 肌功能得以恢复.而且颞浅动脉通过脑膜中动脉与眶 内动脉相连,所以比一般肌肉注射用量小,而效果更明 显.颞旁注射患者疼痛较轻,可避免多个穴位针灸治疗 的痛苦,患者易于接受.另一方面,依据针灸学”经脉 所过,主治所及”的治疗原则,取瞳子,鱼腰,攒竹, 阳白等局部诸穴,旨在疏通局部经气,直接兴奋受损神 经,促进血液循环,提高麻痹肌的肌张力,改善神经冲 动的传递.合谷属阳明经穴,为治疗口,眼,鼻部诸疾 之要穴,有”面口合谷收”之说,故选合谷作配穴.针 药并用治疗本病收到了较好的效果. 收稿日期20l0—03—10