碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的表达及其意义

碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的达及其意义 碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的 表达及其意义 中国医科大学研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同 工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并 表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名: 磁 El期: 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即:研究 生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保 证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科 大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许 论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容 保密 内容除外 ，以采用影印、缩印或其他手段保存论文。 论文作者签名: 指导教师签名: 日 期: 四、 五、 ―王( ,、、 个人简 介…………………………………………………………………………25 ??中文论著摘要?? 碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的 表达及其意义 目 的 通过检测类风湿关节炎 RA 、强直性脊柱炎 AS 患者及系统性红斑狼疮 平，探讨其水平变化在RA、AS及SLE，PSS患者发病中的作用，并与上述疾病活 动性指标做相关性。 方法 应用酶联免疫法分别检测bFGF在健康人群、类风湿关节炎 RA 、强直性脊 柱炎 AS 、及系统性红斑狼疮 SLE 、干燥综合征 PSS 患者血清中的表达水平， 及其与上述风湿性疾病活动性指标的线性关系。 挂 里 日7卜 水平与活动性指标免疫球蛋白呈正相关。 结论 bFGF与风湿性疾病患者的活动性有关，尤其在风湿性疾病伴有肺间质 纤维化 的患者。说明bFGF参与了风湿性疾病的发病过程。 ??英文论著摘要?? Alkalinefibroblastfactorin with growth patients rheumatoid andits disease，the expression AIM To the ofserumbFGFlevelsin with studychanges RA，AS，SLE， orSS， patients thefunctionof bFGF the ofthe the diseases，and investigate duringprogression analyze correlationofbFGFlevelsanddiseases indicators activity METHoDS TheserumbFGFlevelsof73 25casesof casesof RA，20 AS，5 patients，including casesof casesofSLEand15 controlsweredetected(TheserumbFGF PSS，23 healthy levels weredetectedELIS by RESULTS 1(SerumbFGFlevelsof SS were RA，AS，SLE，and patientssignificantlyhigher thanthecontrol bFGFlevelin SS group p 0(05 (2(SerumRA，AS，SLE，andpatients 晰m inRA serumbFGFlevel was pulmonarytients P 0(05 (3(The patientspositively correlatedwim RF(4(TheserumbFGFlevelinAS activityindicators(ESR,CRP,and Was correlated、杭tllESR(5(ThescrambFGFlevelinSLE patientspositively patiems Was correlatedwith serumbFGF negatively level activityindicators(complemem(6(The iIlSS Was correlatedwith patientspositively immuneglobulin( Conclusion thelevelofserumbFGFcorrelated、j~rimdisease inRheumatic activity patients in with which bFGFis fibrosis，in especiallypatientspulmonary higherexpressed( bFGFinvolvedinthe and ofrheumaticdiseases( pathogenesis progression 2 b 3 ??英文缩略语?? 英文缩略语 英文全称 汉语 ELISA immunosorbcnt 酶 联免疫法 enzyme―linked assay bFGF Alkalinefibroblastfactor 碱性成纤 维细胞生长因子 growth 4 ??论文?? 碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的 表达及其意义 刖 置 碱性成纤维细胞生长因子 bFGF 是一种作用广泛的细胞因子，它的书写 形式有bFGF和FGF(2两种。bFGF是成纤维细胞生长因子家族中的一员。早 在1940年，Hoffmail等在脑和垂体的抽提物中发现一种能够促进成纤维细胞生 长的物质。1974年该物质被分离纯化，并命名为成纤维细胞生长因子。目前已 知该家族至少有23个成员。尽管这一家族成员的功能类似，但其表达模式给予 他们独自的功能，而bFGF的功能是现在研究最多的。在正常生理情况下其最显 著的生物作用是促进细胞增殖分裂，而在病理情况下它参与肿瘤，炎性疾病，肺部 疾患等多种疾病的发生发展、促进损伤组织修复，从而备受关注。bFGF是细胞 生长和分化的重要调节因子，具有促血管生成、细胞增殖、细胞趋化、细胞迁移 等活性，在细胞分化和机体发育过程中发挥重要作用。且也有文献报道bFGF引 起成纤维细胞的增殖及胶原合成的增加导致肺纤维化。而风湿性疾病 RA，AS，SS，SLE 的基本病理改变都是血管炎和细胞增殖。风湿性疾病曾称胶原 病。所以推测到bFGF参与了风湿性疾病的发病过程。特别是对风湿性疾病伴有 肺间质纤维化的发病起了一定的作用。 材料与方法 一、材料 1月至2010年2月在中国医科大学附属盛京医院风湿免疫科住院患者。临床诊断 符合国际风湿病学诊断。选择正常对照者15例，均为健康体检中心的健康体 检者，各组在年龄、。性别构成上均无统计学差异。 Biotech 公 实验器材:碱性成纤维细胞生长因子ELISA试剂盒 由美国Ray S 司提供 ，离心机，移液器，一次性移液枪头，量筒，EP管，低温冰箱，吸水纸， 计时器，恒温水浴箱，蒸馏水。 二、方法 1、采清晨空腹静脉血3mL，离心后取上清，置PC管中(20?保存。 2、试剂及标本在使用前平衡至室温，并配置标准品，将浓洗涤液用蒸馏水 稀释25倍。 3、加样，恒温水浴箱中37摄氏度反应120分钟。反应时配置检测溶液A。 4、弃液、洗板，甩干，每孔加检测溶液A100微升，恒温水浴箱中37摄氏 度反应60分钟。洗板。 5、每孑LDII底物溶液90微升，37摄氏度避光反应30分钟。 6、每-TL力I终止溶液50微升。 7、用酶联仪在450rim波长依序测量各孔的光密度 OD值 。在加终止液 后15分钟以内进行检测。 1 8、统计学分析:试验数据采用SPSS6(0统计软件进行分析，所有数据均采 室指标之间关系分析采用直线相关分析并计算Pearson相关系数r，以P 0(05为 具有统计学意义。 实验结果 bFGF在风湿性疾病患者及健康者血清学的表达，其在风湿性疾病与健康对照 者的水平有显著性差异。见表1 表1，几种风湿性疾病患者血清中bFGF水平 X士S Table1 TheserumleversofbFGFinsome rheumatic frequent disease x+s 6 SLE 23 35(7374-13(197 patients 说明bFGF在风湿性疾病患者组中高表达，参与风湿性疾病的发病过程。。 bFGF的变化与几种风湿病患者血清中其他活动性指标均有相关性。见 表2 表2，bFGF在几种风湿性疾病中与其活动性指标变化的相关性 Table2The betweenbFGFandtheactiveindexsinsomerheumatic relationship disease x4-s 将bFGF与风湿性疾病活动性指标进行相关性分析，得出如下结果。q RA 关性系数r 0(674，说明在类风湿性关节炎患者中，其疾病越严重 受累的系统越 是AS的活动性指标，一定程度上反映了疾病的严重性。bFGF与其正相关。?SS 了疾病的严重程度，bFGF与其正相关，相对的bFGF也反映了SS患者的疾病严 斑狼疮患者中，疾病越重 受累的系统越多 补体C3越小，bFGF与补体C3呈负相 关。说明在系统性红斑狼疮患者中，疾病越重的，其bFGF值越高。 讨 论 分别经过正常组与RA组、AS组、PSS组及SLE组的T检验。可以从上述结果， 1 bFGF是细胞生长和分化的重要调节因子，具有促血管生成、细胞增殖、细胞趋 7 化、细胞迁移等活性，在细胞分化和机体发育过程中发挥重要作用。已有研究证 实bFGF在参与了血管的生成，骨组织的修复，脂肪分化，肿瘤的生长以及肺间质 纤维化的发病过程。b2FGF的生物学功能:b2FGF是一种促进细胞生长作用很强 的蛋白因子，具有广泛的生物学效应。具有的生物学功能如下:@b2FGF是一种广 谱的有丝分裂原;?促进新生血管形成的作用;?促进细胞外基质的生成;?促进 骨和软骨组织损伤修复;?促进神经组织损伤修复等等。 类风湿关节炎的病理基础是滑膜炎。滑膜的血管增生和炎性细胞的浸润以及 滑膜炎导致滑膜、软骨及至软骨下骨组织的破坏。类风湿关节炎患者的呼吸系统 表现主要是肺间质纤维化及胸膜炎常见。而bFGF在血管增生及肺间质纤维化的发 病过程中起到了引起成纤维细胞的增殖及胶原合成的增加导致肺纤维化。且上述 实验结果可见类风湿关节炎伴肺间质纤维化的患者bFGF高表达。故而可推测到 bFGF参与了类风湿关节炎的发病尤其是对类风湿关节炎伴有肺间质纤维化的患 者。强直性脊柱炎的病理标志是骶髂关节炎，且肺问质纤维化是强直性脊柱炎患 者晚期的关节外表现，也是强直性脊柱炎的活动期表现。 3 有研究证实bFGF在 活动期AS患者骶髂关节滑膜组织中表达明显高于对照组，说明bFGF在AS患者关 节病理性成骨过程中起着重要作用。机制可能如下:AS患者关节炎症刺激邻近的 骨细胞、骨膜细胞等分泌bFGF。成纤维细胞是高级的成骨细胞，局部高浓度bFGF 促进成纤维细胞向成骨细胞转化，生成病理性骨组织，导致关节骨性强直而且本实 验可以看到强直性脊柱炎伴有肺问质纤维化的患者bFGF浓度高于非活动期的强 制性脊柱炎患者。SS主要是淋巴细胞的异常增殖、趋化、迁移，浸润腺体引起腺 体的破坏，分泌功能减退。呼吸系统受损的病例基础是呼吸道粘膜淋巴细胞 浸润 及外分泌腺萎缩。，从而导致肺间质性病变。而bFGF具有促血管生成、细胞增殖、 细胞趋化、细胞迁移等活性，因此可推测道他参与了SS的发病过称。血管炎是系 统性红斑狼疮的常见病理改变，也是判断SLE患者病情活动性和严重程度的首要 指标。SLE患者有各种类型的血管炎，包括皮肤血管炎或,和内脏血管炎。bFGF是 细胞生长因子，已有研究证实他参与了血管的生成。而且此实验已证实了在系统 性红斑狼疮的患者中其疾病越严重，代表狼疮活动性指标的补体C3越低的患者其 bFGF的浓度越高。 8 9 ??本研究创新性的自我评价?? 在风湿性疾病发病机制的研究中，碱性成纤维细胞生长因子对骨损伤与修复 及血管疾病研究较多，尤其是bFGF在风湿性疾病中合并肺间质纤维化的研究目 前还不十分清楚，通过本实验研究结果进一步认识了bFGF在风湿性疾病发病中 的作用，为今后风湿性疾病，尤其是风湿性疾病合并肺间质纤维化的研究及治疗 方面提供了新的思路。 10 2 3 4 5754―576 5 Debiais J(Fibroblastfactor-2 F，LefevreG，Lemonnier growth inducesosteoblastsurvival a through phosphatidylinositol signaling CellRes pathway(Exp2004;297 I :235??246 6 a1(Enhancementof TH，et andbone TangCH，YangRS，Huang fibronectinfibriliogenesis formationbasicfibroblastfactor kinase inrat by growth viaproteinC―dependentpathway osteoblasts(Mol Pharmac012004;66 3 :440-449 7 Zou a1(Effectofbasicfibroblasthfactoront he H'Nie Y，et XH，Zhang growt and modulationsmoothmusclecellS(ChinMed proliferation，migrationphenotypie ofairway 1:4242429( J En91 ，2008，12 8 a1(Fibroblasthfactor2 t C，Stankova and Boss6Y，ThompsonJ，et growt ransforminggrowt hfactorbetal inhumanbronchialsmoothmusclecell J synergism proliferation(AmRespir CellMol Biol，2006，34:7462753 9 Natsuko factor-2 Kakudo，Ayuko Kusumoto，et Shimotsuma,Kenjia1(Fibroblastgrowth stimulates differentiationof stem and adipogenic humanadipose-derivedcells【J】(Biochemical ResearchCommunieations，2007，359:239-244( Bioph ，sical 10??孙钦策l田卫东2 1四川大学生命科学学院四川成都610065;2四川大学华西口腔医 学院四川成都610065 碱性成纤维细胞生长因子研究进展现代生物医学进展 ?r、Vw(biomed(net(cninModemBiomedicine2009V01(9No(15 Progress ll 叶安霞、谢安福碱性成纤维细胞生长因子在肺部疾病中的研究进展，国际呼吸杂志2006 第26卷7期 12李建明，初同伟?;周跃 第三军医大学新桥医院骨科，重庆400037 bFGF在强直性脊柱 炎活动期病理性表达及意义四川医学2007年11月第28卷 第1l期 13李贤让，陈鸿辉碱性成纤维细胞生长因子及血管内皮因子对兔韧带细胞增殖的影响滨州 医学院学报2009年8月第32卷4期 14张强碱性成纤维细胞生长因子血管新生与应用的研究进展实用医药杂志2004年11月第2l 卷11期 12 ??综述?? 碱性成纤维细胞生长因子在骨组织损伤 及肺部疾病的研究进展 摘要:最近有大量的研究表明碱性成纤维细胞生长因子 bFGF 参与血管重 塑、骨骼形成、神经发育、肿瘤代谢，肺部疾病等生理和病理过程。本文对bFGF 在骨组织损伤与修复及肺部疾病中的病理生理做一综述。 关键词:碱性成纤维细胞生长因子，组织损伤修复，肺部疾病 Growth 成纤维细胞生长因子 Fibroblast 编码的结构相关的一组蛋白质多肽。目前已知该家族至少包括23个成员。碱性成 Growth 纤维细胞生长因子 BasicFibroblastFactor，FGF(2 是FGFs家族中的一员， 最初是由牛脑垂体和脑组织提取物中分离得到的一个肝素结合多肽，其等电点为 9(6，因为能促进成纤维细胞的分裂增殖而得名。FGF(2广泛分布于中胚层和神经 外胚层来源的多种组织和器官，也存在于肿瘤组织中，它具有促进细胞增殖、 分 化、迁移等多种生物学效应，并参与血管重塑、骨骼形成、神经发育、肿瘤代谢 等生理和病理过程。 一、FGF(2的生物学基础 FGF(2基因具有高度保守性，人、牛、鼠的FGF-2核苷酸序列高度同源，均 为单拷贝基因。人源性成纤维细胞生长因子2基因定位于4号染色体的短臂上 kb，有2个内含子和3个外显子，mRNA全长67(74kb， 4q26(27 ，全长71(53 5’端和3’端都有对基因转录起调控作用的非编码序列，比较有趣的是在其开放阅 读框内，它不但有一个常见的AUG起始密码子，在AUG前面的不同位置还至 少存 在3个不常见的CUG起始密码子 啮齿类动物中有2个 。这些可供选择的起 始 Molecular WeightFGF一2， ,30KD 、18KD，其中前四种被称为高分子量FGF一2 High 13 HMWFGF(2 ，1 Molecular 8KD则被称为低分子量FGF(2 Low FGF(2， Weight LMW 末端 氨基酸序列完全一致，不同的FGF(2具有不同的亚细胞定位和生物学功能， 则主要位于胞浆和细胞外，是FGF(2的主要形式，也是现今研究最多的FGF(2， 具有多种生物学功能。FGF(2为一种碱性多肽，等电点9(D9(8，对热及酸敏感， 对肝素及肝素样分子有高亲力。与其他FGFs不同，FGF(2缺少典型的信号肽序列， 不能通过高尔基(内质网途径分泌到胞外，却能以自分泌或者旁分泌的形式出现 在胞外，例如FGF(2能够从损害的细胞释放到胞外。研究表明外源性FGF(2能够 易位到细胞核内，激活靶蛋白或基因并与其相互作用。然而，FGF(2的分泌机制以 及其在细胞核内的重要生理作用至今仍没有明确的解释。 二、FGF(2受体的种类及其结构 b2FGF的两类受体:一类是高亲和力受体，即成纤维细胞生长因子跨膜受体 FGFR ，属跨膜性酪氨酸蛋白激酶类受体，其胞内部分有一段较长的近膜区和一个 被分割的酪氨酸激酶结构域，被认为是与胞内的各种激酶特异作用有关的部位之 sulfate 一。另一类是低亲和力受体即肝素硫酸蛋白多糖 heparin 胞周围的基质中。 三、FGF(2相关的信号转导途径 遗传学和生物化学研究表明，FGF(2诱导的信号途径是正常细胞生长、分化 所必需的，几乎存在于所有细胞中。FGF信号转导主要包括以下三条途径: 一 Ras(MAPK途径 该路径主要包括细胞外信号调节蛋白激酶 extracellularsignalregulated protein N(terminal kinase，ERKl,2 、c(Jun氨基末端激酶 c(Junkinase，JNK 、P38、 ERKS,BMKl 4个MAPK亚族。其激活过程如下:FGFRs被激活后，鸟嘌呤核苷 酸交换因子Sos移至胞膜靠近Ras蛋白，促进鸟嘌呤核苷酸与Ras交换而使其成 14 位点的丝氨酸残基磷酸化而被激活，进而引发一系列级联反应，最终抑制或激活 某些转录因子。 ( 二 PLC(Y途径 列，并与之结合，形成受体(PLCq,2复合物，使PLC-T2酪氨酸磷酸化而被激活， 结合刺激细胞内的钙库释放Ca2+,钙调蛋白依赖性蛋白激酶。此外，Ca2+与DAG 因子外，还可激活多种细胞内的反应。 三 J?删STAT途径 非受体酪氨酸蛋白激酶JAK Janus1【iI粥e，JAK ,信号转导子和转录激活子 of transducersandactivators signal 其自身磷酸化而使JAK活化，活化的JAK使其特异的受体或几种细胞因子共用的 受体二聚化、多聚化，促使JAK分子上的自身磷酸化位点被交叉磷酸化而产生活 性，形成特异性信号蛋白的吸附位点，包括STAT蛋白，从而对受体(激酶复合 物中所募集的受体和其它细胞内底物进行磷酸化。STAT蛋白能使C端保存的酪 氨酸残基磷酸化，STATs被磷酸化后即脱离它所在的受体形成稳定的同源或异源 的二聚体式并定位于细胞核，与^r干扰素激活部位 GAS 增强子家族成员结合 并激活靶基因的转录。此外，FGFRs信号转导除上述3条主要通路外，尚有其他 inositol，Pt 的途径，如磷脂酰肌醇 phosphatidyl 子缔合蛋白 通过原癌基因Cbl的负性调节途径等。它们彼此间相互作用，从而 形成复杂的网络调节机制。 四、FGF(2的主要生物学功能 l、b2FGF是一种广谱的有丝分裂原;?促进新生血管形成的作用;?促进细胞 15 外基质的生成;?促进骨和软骨组织损伤修复;?促进神经组织损伤修复等等。 五、b2FGF的作用机制 细胞内合成的b2FGF需分泌至细胞外才能发挥其生物学作用，但b2FGF的 mRNA翻译产物缺少引导它们向细胞外分泌的信号序列，其分泌途径除了可能是细 胞受损或死亡后释出，可能还有自分泌和旁分泌起作用。b2FGF生物学作用的发挥 结合时需低亲和力受体HSPG的参与。由于目前尚未提出关于b2FGF完整的信号 T K,STA 转导机制，推测可能是通过PLC,PKC，PTK,RAS,MAPK，P13K,PKB，JA 等一系列细胞内蛋白质级联反应传递给细胞核，其具体作用机制有待进一步研究。 六、bFGF与组织损伤修复 1、bFGF促进骨折愈合的可能信号转导途径bFGF是骨细胞发挥其作用及骨 形成的重要调节者。近些年来，国内外研究主要集中在bFGF激活成骨细胞的信号 kinase C，PKC 途径、丝裂原活化蛋白激 转导通路，可能包括磷酸蛋白激酶 Protein 酶 mitogen2activatedproteinkinase，MAPK 途径等。 2、bFGF在骨折愈合过程中的作用骨折愈合从组织学上可概括为血肿和炎症 期、纤维性及骨性骨痂形成期和骨痂改建期等几个阶段。bFGF可通过其趋化作用 促进细胞迁移，使间充质细胞、巨噬细胞、成纤维细胞等向创伤部位聚集，从而 启动创伤愈合过程。骨愈合实质是骨损伤后的再生过程，也是骨组织的形成过程。 大量研究数据表明，无论在骨折愈合的哪个阶段，bFGF都是骨细胞功能的重要调 节者。bFGF能促进骨祖细胞，原始干细胞在骨损伤部位的聚集。由于bFGF是一 种广谱的有丝分裂原，对来源于中胚层及神经外胚层细胞具有明显的促增殖作用， 也可以促进骨祖细胞、原始干细胞的增殖。碱性成纤维细胞生长因子具有多种生 物活性，包括促进细胞的有丝分裂、细胞增殖与分化作用，间充质干细胞向成骨 细胞定向分化的过程中，bFGF主要通过刺激间充质干细胞尤其是早期骨祖细胞 的增殖，促进毛细血管增殖及向骨移植物中长入，加快需要血供的软骨内骨化，从而 增加成骨量并加快骨折的愈合。此外，bFGF也可维持间充质干细胞的体外多分 16 化潜能。bFGF可以直接刺激成软骨细胞的增殖和分化，使其转化成软骨细胞或使 成软骨细胞自身数量增加。研究发现含bFGF的软骨细胞显示了对I型和II型胶 原蛋白、纤维结合蛋白及纤维蛋白原具有更强的黏附作用，黏附了这些蛋白后的软 骨细胞能显著扩大自身的增殖效应。bFGF在关节软骨细胞外的动力传导系统起着 重要的调节作用，并有促进关节软骨生长与形成的作用。成骨细胞胞膜表面存在 FGFR,成骨细胞合成的bFGF通过旁分泌或自分泌释放到细胞外，与受体结合，通 过上述的信号传递途径作用到细胞内，可促进骨祖细胞分化为成骨细胞，诱导成骨 细胞分裂、增殖，合成骨基质。有研究发现bFGF能促进成纤维细胞和成骨细胞的 增殖及胶原合成，进而提高骨痂的力学稳定性。bFGF能增加骨折局部骨含量及骨 密度:骨痂建成后，骨折的断端仅被幼稚的、排列不规则的编织骨连接起来。为了 符合人体生理要求而具有更牢固的结构和功能，编织骨进一步改建成为成熟的板 层骨。在破骨细胞的骨质吸收及骨母细胞新骨质形成的协调作用下进行了骨的改 建，即骨折骨所承受应力最大部位有更多的新骨形成而机械性功能不需要的骨质 则被吸收。bFGF有加速骨折愈合和增加骨折部位矿化密度的作用。有研究显示， bFGF作为一种毛细血管增殖刺激剂能促使毛细血管向断端内以及移植物中长入， 使骨修复早期的组织中软骨岛数量增多，并使断端骨痂和骨移植物中提前血 管重 建时限，从而促进了需要血供的软骨内化骨，加速了软骨痂的成熟和骨化。此 外，bFGF还能够通过上调血管内皮细胞生长因子 VEGF 的表达来促进移植骨的 血管化，促进新骨形成。bFGF对成纤维细胞有明显的促增殖及分化作用，而成纤维 细胞能明显加速骨折愈合。 七、bFGF与肺部疾病的关系 一 ”GF与哮喘 多项研究表明b2FGF与哮喘有密切关系。研究发现呼吸道合胞病毒感染能使 先前未全身致敏的大鼠通过气道致敏而发生气道重塑，而且在气道重塑发生过程 患者支气管上皮和内皮层。有研究者认为，支气管上皮细胞是启动哮喘气道慢性炎 症和气道重塑过程的关键因素，而上皮细胞也是产生b2FGF的一种重要细胞。这些 17 研究都说明b2FGF在哮喘的发生和发展过程中发挥作用。1(b2FGF与气道平滑肌 smoothmusclecell 细胞 airway s,ASMC :ASMC是哮喘非特异炎症的靶细胞。气 道平滑肌增生肥厚是哮喘气道重塑的一个重要的病理特征，也是气道高反应性的 原因之一，表现为ASMC的数量增多、体积肥大、分泌多种炎性细胞因子及产生大 量的细胞外基质。b2FGF作为细胞的一个特殊趋化和促有丝分裂因子，可以直接刺 生，而且近来研究发现b2FGF也可通过增力HASMC增生的能力来适应哮喘过程中 各方面不同的调节作用。有资料显示b2FGF和转化生长因子1在ASMC的增殖中 发挥协同作用，二者之间的协同作用可通过上调血小板衍生生长因子 PDGF 和配 通过激活核因子r(B NF2r((B 而促使靶细胞如ASMC等增生，而过度的增生使管壁 结构变化和血管增生，最终导致气道重塑。b2FGF和VEGF的表达增加确实与哮喘 气道的血管生成密切相关。在气道重塑中,b2FGF与多种血管生成因子的相互作用 在损伤基础上引起的血管重塑已经受到了关注。血管生成的调节是一个复杂的网 络，许多促血管生成因子参与了这个过程，而各因子之间的相互作用机制还不明确， 有待进一步的研究。 二 弥漫性肺间质疾病 二氧化硅，石棉能刺激巨噬细胞产生而引起成纤维细胞的增殖及胶原合成的 增加导致肺纤维，但FGF只能在局部发挥作用。有学者发现，青石棉在体外都能 使肺泡巨噬细胞产生bFGF。Qu等研究发现，特发性肺纤维化患者肺组织中的肥大 率仅为10,及以下。纤维化矽肺是矽尘作业中常见的，多发的重要职业病，至今 仍无有效的疗法。 八、结语 FGF(2自从被发现、纯化以来，就一直受到广大学者的高度重视。FGF(2是 一种具有广泛生物活性的生长因子，随着对其研究的不断深入，其新的生物学功 能不断被报道。近年来，重组FGF(2已被应用于临床治疗创伤、溃疡及神经系统 18 等疾 然促 的定 和其 和进 之有 参考文献 1 Itoh N，OmitzD(M(Functional ofthemoBse evolutionary history family 【J】(DevDyn， Fgfgene 8-27 2008，237:1 2 OrnitzD N(Fibroblast M，Itoh growthfactors【J】(Genome Biol，2001，2 3 :1-12 3 Toufiol a1(Generationof C，BomesS，BonnalS，et isoform alternative protein diversityby initiationoftranslationatnon―AUG Biol codons【J】JCell，2003，95:169(178 4 Malkowski Jaworskia1(FGF A，SobolewskiK S，et bindingby ofWharton‘s Biochim components jelly【J】(Acta Pol，2007，54 2 :357(363 5 K，Soulet D，et ofcell basicfibroblast Bailly F，Leroy a1(Uncoupling proliferation growth factor【J】(FASEB2000，14:333―344 6 Takaishi a1(Identificationofanovel S，SawadaM，MofitaY，et ofhuman altemativesplicing FGF 4:solubleform inhuman cells receptor splice variantexpressedgastrointestinalepithelial 【J】(Biochem Commun，2000，267:658(662 BiophysRes 7 J(Commonand Schlessinger distinctelementsincellular viaEGFandFGF signaling 506-1507 receptors1【J】，Science，2004，306:1 8 J(Cell 1-225 Schlessinger by tyrosine signalingreceptor kinases[J】(Cell，2000，103:21 9 A B，Vercounter-Edouart a1(FGF cell and Biolly S，HondermarkH，et singnalforproliferation differem GrowthFactor migrationthrough pathwaysfJ】(Cytokine Rev,2000，1 1 4 : 295-302 10 tissue of R(Simon，J(Richter，U(Wagner，et a1(High-throughput microarrayanalysis3p25 in numberalteratiombladder RAFl and8p12 FGFRI copy urinary canoe[J】(CancerRes， 2001，61:4514-4519 11 Kisseleva JAK,STAT T，BhattacharyaB，BraunsteinJ，et a1(Singnalingthroughthe pathway， recentadvancesandthefuture challenges【J】(Gene，2002，285 1―2 :l-24 12 a1(FRS2 FGF A，LamotheB，LeeA，et attenuates Grb(2 Wong alpha receptorsignalingby mediatedrecruitmentofthe NatlAcad ubiquitinligaseCbl【J】(ProcSci，USA2002， 99: 6684(6689 13 Dono心TexidoG，Dussel凡et cerebralcortex blood a1(Impaired developmentandpressure‘ inFGF一2-deficient regulation mice【J】(Embo，1998，17:4213-4225 20 14 Pintucci a1(LackofERKactivationandcell in G，Moscatelli F，et D，Saponara migration FGF??2-deficientendothelial cells【J】(FASEB，2002，16:598-600 15 DelrieuI(The isoformsofbasic hi曲molecularweight fibroblastgrowthfactor FGF-2 :An intoarlintracrine 0 insight mechanism【J】(FEBSLett，2000，468:6-1 16 Polnaszek a1(Fibroblast 2 tumor N，Kwabi-AddoB，PetersonLE，el growthfactorpromotes infillautochthonous progression mousemodelof cancer【J】(CancerRes， 2003，63: prostate 5754―576 17 D(PurificationofafibroblastfactorfrombovineBiolChem Gospodarowicz growth pituitary(J 1 15―2520 975;250 7 :25 18 J(Gene andtissue DS，FuFH，Huard Musgrave therapy engineeringinorthopaedicsurgery(J AmAcadOrt hopSurg2002;10 I :6-15 19 Okada-Ban J(Fibmblastfactor-2(IntJBioehem JP，Jouanneau M，Thiery growth 2000;32 3 :263 20Debiais J(Fibroblastfactor-2inducesosteoblastsurvival F,LefevreG，Lemonnier growth a throughphosphatidylinositol signaling CellRes pathway(Exp2004;297 1 :235??246 21 a1(Enhancementof andbone TH，et TangCH，YangRS，Huang fibronectinfibrillogenesis formationbasicfibroblastfactor kinase inrat by growth C―dependent viaprotein pathway osteoblasts(Mol Pharmac012004;66 3 :440-449 22Zou a1(Effectofbasicfibroblasthfactoront he H，Nie Y，et XH，Zhang growt and h modulationsmootmusclecellS(ChinMed proliferation，migration phenotypic ofairway J En91 ，2008，121:4242429( 23 M(FGF2inasthmatic h2muscle2cell Boss6Y，Rola2Pleszczynski airway2smoot 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craniosynostosis[J】(Cell 30叶安霞，谢正福，赵华，等(碱性成纤维细胞生长因子在COPD大鼠模型气道重塑中的作用( 中国实用内科杂志，2007，27:7832786 ??在学期间科研成绩?? 碱性成纤维细胞生长因子在风湿性疾病患者血清中的表达及其意义已投稿中 国现代医学杂志 ??致谢?? 谨借本论文完成之际，衷心感谢我的恩师王晓非老师对我的教育和培养。在 恩师的精心指导和大力支持下，本课题才得以顺利完成。恩师认真负责的敬业精 神、严谨的态度、丰富的临床经验、和蔼可亲的待人方式、高尚的人格和宽阔的 胸怀，让我获益匪浅，由衷敬佩，是我终身学习的楷模。在即将完成学业之际， 真诚感谢恩师给予我悉心的鼓励和教诲，积极的指导，我的每一步成长无不倾注 着老师莫大的心血。在此，我谨向导师表示最由衷、最真诚的感谢! 衷心感谢盛京医院风湿免疫科各位老师的教育培养，大力支持和帮助! 真诚感谢父母家人多年来对我的养育和精神上的支持! 最后向参加答辩评审的各位专家和老师表示衷心的感谢! ??个人简介?? 姓 名: 张燕 性 别: 女 出生日期:1983年12月5日 籍 贯:甘肃省张掖市 教育经历: 1998年(2002年张掖市第二中学就读 2001年(2006年牡丹江医学院临床医学专业 2008年…(至今 中国医科大学内科学硕士在读 实习经历: 2005年9月―2006年7月牡丹江时第二医院实习 2009年2月――至今 中国医科大学附属盛京医院研究生实习