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HPV检查.doc HPV检查 HPV检测方法临床上可以采用不同技术，从分子、细胞、组织、临床等水平检测HPV的存在。 1分子水平的检剐方法包括免疫组化、PCR、杂交捕获，DNA芯片分型、原位杂交等方法。目前常用的是前三种方法。 (1)免疫组化检测:是利用抗体和抗原结合的原理，对l临床组织病理切片检测HPV衣壳抗原，如阳性，提示存在HPV感染，并可进行定位。其局限性在于.如检测阴性?仅提示能检测到HPV，并不排除是否真的不存在这种病毒。因为:?HPVDNA复制成熟后，才有衣壳装备.因此其敏感性及阳性强度均低。?这种检测一般只能检测有限的几种病毒，检测阴性只是提示所检测的特定亚型的HPV不存在，但不能排除是否存在其他类型的病毒感染。 (2)聚合酶链反应(PCR)技术:PCR是基于核酸杂交的原理，设计与HPV DNA互补的一对特异性核苷酸引物，如果体内存在HPV，则可以HPV DNA为进行体外扩增，检测结果阳性。PCR方法敏感性高，可进行HPV分型检测a其缺点为样品间易交叉污染导致假阳性。另外-试验可以设计不同的引物，反应体系及产物检测方法也不同，缺乏一致的诊断标准.特异性低，假阳性率较高。 (3)杂交捕获(hybrid capture)DNA:是目前临床常用的检测方法.是惟一获得美国FDA认证的HPV—DNA检测方法，也是目前惟一以商品形式提供的应用于临床的检测系统。 一部分人群只是携带有HPV，但并不引起子宫颈细胞、组织学发生病理性改变.这部分人群借助上述检查方法可以明确有无病毒的存在。当HPV感染引起子宫颈发生细胞、组织学改变时，临床上可以通过子宫颈脱落细胞学检查、阴道镜观察、子宫颈活检组织病理学检查以明确病变的情况。 2.细胞学检查子宫颈脱落细胞学检查也就是常说的子宫颈防癌涂片。是采集子宫颈脱落细胞，进行固定、染色.在显微镜下进行检查。镜下HPV感染现为挖空细胞(棱周空泡细胞)t角化不良细胞。传统的巴氏涂片法简单易行，但涂片质量差，细胞丢失多.假阴性率可高达2s%,!ion;，特异性亦差，假阳性率达15蹦。薄层涂片液基细胞学检查可保留取材器上所得到的几乎全部标本，且涂片中的细胞结构背景清晰，更利于宫颈病变的筛查。由于HPV所致的病变越重，涂片中挖空细胞出现机会则越少;而HPV感染病变越轻，涂片中挖空细胞出现机会越多，所以单靠细胞学诊断HPV感染敏感性较差。 细胞学是实验室诊断通过显微镜对子宫颈脱落细胞的形态学观察，评估病变程度.但仍不能作为临床处理的依据。而阴道镜则是沟通细胞学和病理学联系的桥粱。 3阴道镜检查 阴道镜检查是在强光源照射下，应用放大技术，将下生殖道上皮放大10,40倍，直接观察病变部位，以便发现肉眼看不到的微小病变，在可疑部位活检并进行病理学检查从而提高确诊率。经过不断发展.目前阴道镜主要分为光学阴道镜、电子阴道镜、光电一体式阴道镜。 (1)光学阴道镜:通过显微成像技术，对图像的观察清晰，立体感强，层次分明，便于细微病变部位的精细观察。其缺点是不能准确记录病变图像.检查医师凭印象自行绘制阴道镜檎 。 (2)电子阴遭镜:采用数码电子成像技术，即时拍照并储存。便于教学和会诊。 (3)光电一体阴道镜;结合两者优点，利用光学显微成像’同时转变为数字信号传输到计算机图像处理工作站?将病变组织图像显示于屏幕，双重观察，分辨率高于单纯电子阴道镜。 阴道镜检查属于临床诊断，直接观察子宫颈表面血管和形态，评价病变程度，在可疑部位定点活检，进行病理学检查，有效提高阳性检出率.指导临床处理。阴道镜对子宫颈的观学主要从子宫颈颜色及色调、表面构型、边界、血管等四方面进行。不同的子官颈疾病，具有不同的典型阴道镜图像。对于HPV感染.阴道镜下可以表现为醋白上皮、醋白粟粒、点状血管等，头染色可以表现为不染色或花染，但以上表现并非HPV感染的特异性表现，因此.进行临床治疗必须以组织学诊断作为标准。 4.病理组织学检查HPV通过生殖道黏膜的微小病损侵人黏膜上皮，感染宿主细胞，可以引起宿主细胞形态学改变，并导致异常生长。通过显微镜观察组织切片，可以发现鳞状上皮疣状乳头状增生，表皮角化不全，棘层不规则增厚，基底层增生，上皮脚延长，中上层出现灶状分布的挖空细胞，并有一足细胞异型性，其中棘层中出现的挖空细胞是诊断HPV感染的重要组织学依据。