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016尿α1微球蛋白测定

2017-12-27 6页 doc 18KB 35阅读

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016尿α1微球蛋白测定016尿α1微球蛋白测定 标题:尿α-微球蛋白测定 版本号:A 1 文件编号:PLA301-LJK-MY-16 发布日期:2003年3月1日 生效日期:2003年3月15日 发布部门:临检科质量管理小组 编制人:马骏龙、白洁、杨丽 审核人:马骏龙 批准人(签章):秦小玲 页码:第1页~共3页 尿α-微球蛋白测定 1 1 检验目的 α微球蛋白(αmicroglobulin~α-MG)是一种小分子量(3.3kD)糖蛋白~主要由肝脏和11 1 淋巴组织合成。血液中α-微球蛋白有游离和与IgA结合两种形式。游离的α微球蛋白...
016尿α1微球蛋白测定
016尿α1微球蛋白测定 标题:尿α-微球蛋白测定 版本号:A 1 文件编号:PLA301-LJK-MY-16 发布日期:2003年3月1日 生效日期:2003年3月15日 发布部门:临检科质量管理小组 编制人:马骏龙、白洁、杨丽 审核人:马骏龙 批准人(签章):秦小玲 页码:第1页~共3页 尿α-微球蛋白测定 1 1 检验目的 α微球蛋白(αmicroglobulin~α-MG)是一种小分子量(3.3kD)糖蛋白~主要由肝脏和11 1 淋巴组织合成。血液中α-微球蛋白有游离和与IgA结合两种形式。游离的α微球蛋白可11-自由通过肾小球滤过~并在近曲小管被重吸收~因此尿液中含量极微,而与IgA结合的α-1微球蛋白不能通过肾小球滤过。 测定尿α-微球蛋白含量用于肾损伤和糖尿病肾病并发症的预测和观察~具有重要的1 临床价值。 2 检测原理 用抗人α-微球蛋白抗体和样品中α-微球蛋白相结合~利用动力学原理观察单位时11 间内抗原与抗体结合的速率来测定其浓度。 本免疫检验室使用Beckman公司的ARRAY 360型特种蛋白分析仪及东方珠峰公司提供的Beckman配套试剂、标准品等进行α-微球蛋白测定。 1 3 标本 3.1 使用一次性容量瓶收集患者12小时尿液~并记录全部尿量~混匀后取标本5ml送检或随机尿5ml送检。 3.2 标本采集后应立即送到临床检验科免疫检验室。 3.3 样品收到后应立即离心测定。不能及时测定的标本应于2?,8?冰箱保存。 3.4 冷冻标本或混有血液的标本不能测定。 4 设备和试剂 4.1 ARRAY 360 特种蛋白免疫分析仪(主机号:10053或10909)。 4.2 α-微球蛋白抗体(Beckman试剂P/N 465260),尿α-微球蛋白校准品(Beckman试剂11 P/N 441470),稀释液(Beckman试剂P/N 663630),缓冲液(Beckman试剂P/N 663600)。 4.3 α-微球蛋白抗体和α-微球蛋白校准品应于2?,8?冰箱保存~稀释液和缓冲液11 应放室温保存~防紫外线、防潮。 4.4 从冰箱中取出试剂立即可用。在上机前~须将稀释液和缓冲液来回颠倒彻底混匀。超过失效期的试剂不能使用。 5 校准步骤 5.1 ARRAY 360特种蛋白分析仪每14天对仪器进行一次定标。 5.2 仪器在进行定标之前必须对仪器的光路进行设定(OPTICS SET)和外光路进行检查~操作过程详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 1 5.3 仪器校准包括“试剂卡和校准卡的读取和仪器校准”两方面~操作步骤详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 6 操作步骤 6.1 样本的准备:将编好号的样品离心~取上清加入编好号的样品盘并将其放在仪器相应的标本位臵。 6.2 试剂的检查:仪器开机后~检查各种试剂的位臵、体积、批号等~确认无误后方可进行测定。 6.3 操作方法:测定样本项目必须在仪器校准通过的情况下~且每天测试前对仪器的外光路进行检查通过后才能进行样品测定。其操作过程操作步骤详见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 7 质量控制 每天操作过程中应使用Beckman公司的尿α-微球蛋白校准品至少做一次质量控制。1 请参见ARRAY 360特种蛋白分析仪仪器登记文件。 8 干扰因素 尿液标本蛋白质变性可引起测定结果偏低,尿液含有灰尘或其它颗粒物质(如细胞碎片或细菌)可引起分析测定异常反应。 9 计算 ARRAY 360特种蛋白分析系统会自动地计算出结果。 10 生物参考值区间 本法的95%健康人群参考上限为1.2mg/dl。 11 实验室解释 11.1 近端肾小管功能损害 尿α-微球蛋白升高~是反映各种原因包括肾移植后排斥反应所致早期近端肾小管功1 能损伤的特异、敏感指标。与β-微球蛋白(β-M)比较~α-微球蛋白不受恶性肿瘤的影响~221 酸性尿中不会出现假阴性~故更可靠。 11.2 评价肾小球滤过功能 血液中α-微球蛋白有游离和与IgA结合两种形式。游离的α-微球蛋白可自由通过肾11 小球滤过~并在近曲小管被重吸收~因此尿液中含量极微,而与IgA结合的α-微球蛋白1不能通过肾小球滤过。血清α-微球蛋白升高~提示肾小球滤过率降低所致的血潴留。其1 比血肌酐和β-微球蛋白(β-M)和检查更灵敏。肌酐清除率(Ccr)在100ml/分以下时~α-221微球蛋白升高~Ccr为80ml/分以下时~β-M开始升高。可见α-微球蛋白比β-M敏感~而212且患恶性肿瘤时不升高~因此~与β-M相比~α-微球蛋白在早期鉴别诊断肾功能方面更21 具有临床价值。 12 异常结果处理 尿α-微球蛋白试验结果异常需与临床诊断相符合~不符合的结果应复查。 1 2 13 报告时间与标本保存 13.1 尿α-微球蛋白试验4小时出结果,病房患者的检验结果报告单在24小时内发回1 科室~门诊病人的检验结果报告单在收到标本的第二天下午送到化验单领取处。 13.2 尿α-微球蛋白试验检查过的标本应放2?,8?冰箱保存24小时。 1 14 操作性能 14.1 本仪器的尿α-微球蛋白原始线性为0.2,8.0mg/dl~量程为0.2,48mg/dl。 1 14.2 本仪器的尿α-微球蛋白试验的精密度见附表。 1 附表1 尿α-微球蛋白试验批内精密度(n=20) 1 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 0.65 2.22 5.65 , SD(mg/dl) 0.01 0.02 0.07 CV(%) 1.69 0.71 1.21 附表2 尿α-微球蛋白试验批间精密度(n=20) 1 样品 低值 中值 高值 (mg/dl) 0.61 2.04 5.07 , SD(mg/dl) 0.02 0.04 0.08 CV(%) 2.75 1.86 1.55 14.3 本仪器的尿α-微球蛋白试验的准确度与自动浊度法(NIA)进行比较:n=83~1 Y=1.24X-0.25~r=0.998。 15 参考文献 1 Array Systems, Chemistry Information Manual. Beckman Instruction 015 249712 AB.Jar. 1996. Beckman Instruments, Inc. Brea. CA 92621-6209. USA. 2 叶应妩, 王毓三主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第二版. 1997. 3 Kusano, Eiji Suzuki, et al: Human α -microglobulin and its relationship to renal 1 function. Nephron. 1985; 206: 245,247. 4 Weber MH: Diagnosis of tubular proteinuria. Clinical Diagnosis. 1988; 2: 56,65. 3
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