复方木鸣口服液质量标准的研究

复方木鸣口服液质量的研究 映体得到部分分离;而CM一口一CD使美托洛尔,艾司 洛尔和维拉帕米的对映体得到完全分离.这|兑明 CM一卢一CD比口一CD对上述药物具有更强的手性识 .CD手性选择 别能力,因此本实验重点讨论CM一口 剂对上述3种药物的手性分离作用 2.2pH对手性分离效果的影响 通过改变BGE中H3P04一Tris缓冲溶液的pH 值研究其对卢CD及CM卢.CD手性分离的影响. 对于口一CD,pH=2.5时,上述3种药物的手性分离 效果最好;对于CM-~’一(D,pH=45时,3种药物的 手性分离效果最好.图1为以CM一口一CD为手性选 择剂时,pH对手性分离效果的影响. pH 圈lDH值对分离度(Rs)的影响 _.-黄托洛尔:65tarsi-LH,T雎,55r?Td-LCM.口.【】J;t 艾司格尔:65m~M,LF0’一Tns,55mm?LCM【1】;—一一维拉帕 米:65n?d-L.It3P0lTtis,55nm?L.CM-口-a) 2.3缓冲溶液浓度对分离效果的影响 以CM一口一CD为手性选择剂,研究了H3PO4. Tris(pH=4.5)缓冲溶液浓度对美托洛尔,艾司洛尔 和维拉帕米的手性分离效果的影响,实验发现缓冲 溶液的最佳使用浓度为65retool?L. 24手性选择剂用量对手性分离效果的影响 在65rnmol?L—H3N)4.”Iris(pH=4.5)缓冲溶 液中加人不同浓度的手性选择剂,以考察手性选择 剂用量对手性分离效果的影响.结果表明,以口一cD 作为手性选择剂时,其最佳用量为12rm~l-L;以 CM-~’一CD作为手性选择剂时,其最佳用量为5. 5nmkol?L. 3讨论 Z缸 复方木鸡口服液质量标准的研究 本实验采用HPCE,通过向B(中加入手性选 择剂的方法对美托洛尔,艾司洛尔和维拉帕米等药 物对映体的手性分离进行了研究,结果表明,CM一8 CD比口.CD对上述药物具有更强的手性识别能力 口CD仅使上述3种药物的对映体得到部分拆分,其 最佳分离条件是:BGE溶液75mm~l?IH3fU— Tris,口.CD12mmol?L-.,pH2.5;CM.—CD使上述3 种药物的对映体得到完全拆分,其最佳分离条件是: BGE溶液65retool?LH3PO4一Tris,CM一口一(,1)5. 5rm~l-L+pH45.本实验所建立的方法可以用 于上述药物对映体的药代动力学和临床研究.图2 为以CM.口一CD作为手性选择剂在最佳分离条件下 获得的谱图. j011日13??16 f,? 圈2美托洛尔,艾司洛尔和雏拉帕米对映体手性分离谱图 一 美托洛自:;h艾司洛尔;c堆拉帕米 参考文辣 1叶平安.束银南主编实用麻醉药理学.西安:陕西科学技术出 版杜.I995:587 2傅丽英.龚培力,byc日lkeleetrophoresisusinga?mnall0n c}lmchafgc~hdextrim?chidselecto~J R*s(~romatogr.1996,I9(12):669 5Ho6maiT.OharaM,Icr哪MOpticalresclulion quir~lone出ubye~pillaryele~mphoresiswith[ig~d—exchange 皿dNat—guestimeraclionsJ(romatogrA,1997,7印:235 (收稿:I99803o2) 王红燕车东,,缪桂风罗责华(沈阳I1Ix】l5沈用药科大学;-丹东lI80o2丹东中药厂;天津3?I7l天津制药r) .____?, ?_-_一 ? 摘要目的:为控制复方木鸡口服液的质量,建立山豆根,较楗橄皮的薄 层色谱鉴别厦苦参碱的薄层扫描定量方法方法:特 样品中的山豆报与较桃橄皮进行薄层鉴别.对山豆报中的苦参碱进 行薄层扫描定量.结果:茔刺方法专属性强.定量方法简 262-inP九n』,1999Ap州,34.4中国药学杂志1999年4月)15) ABSTRACIOI~ECIII:rbestaboiishthequa/flyc州1m】』 of(7+cxnlx-mndMuii.anKoufuye:theTIXT”identificatKmf1lfh_d(1r sjn?subp*.strataand肌 dndsh!~rh’aand1hequm-tthatIvcdctermir~mionofmatrinebyTLCS.M酣 【l|oDs:Thesamplewas identifiedr肼}刚1wIyhy【,I』’ht?n{ms1x++th&J砷0n曲声 Hmand』,口nuand~buticadragsafterit,pretreatedMa trinein(~,mpoundMnjiavIK<mfu+vcv? extractedrefluxcndywithCHCIanddeterminedbythedualwavelengththi~+la yerchro matography~anningRU:theTLCidentificationwh1lysj~~’ificandthespots wereclearandconeentratedTheqoantita— livemethodwassimple,s*qasitive.reproducibleandaceurete丁 kax.erag,v+recOVel-yraatrineinthesample岍1020%(n二5)Th【 tc,]ativestandarddeviati,mwas478%OONClUSION:Thequalitystandard wasabletOcff~’tlvelyeontrolthequalityofComp>und Muji’allKou~uye KEYVCORDS(GmpoundMuianKoufuye,趣0rusMbHxn ?,Jugla,,smatu].4zurT’ca,matrine,TLCS 复方木鸡口服液由山豆根,核桃楸皮等4味中 药组成.具有提高_r_淋巴细胞的免疫活性及巨噬 细胞的吞噬能力,用F治疗甲胎球蛋白(AFP)低浓 度持续阳性,慢性活动性肝炎及早,中期原发性肝癌 的辅助治疗.最近已完成临床验证.为有效地控制 其药品质量,我们进行了定性及定量分析研究+制定 了山显根,核桃楸皮的薄层鉴别及山豆根中苦参碱 的含量测定和云芝提取物中lI芝多糖的含量测定 (另殳发表),现报道如下, 1材料与仪器 11材料 复方木鸡r】服液(丹东中药厂);处方中山豆根 (0Ortlszd~prostrata)及核桃楸皮(J~g&nsmandr shurica)(由丹东中药厂提供+经沈阳药科大学中药 鉴定室许春泉高级下程师鉴定,符合药典规定);山 豆报对照药材及苦参碱对照品(中国药品生物制品 检定所)硅胶(;(青岛海洋化工厂);其它试剂均为 分析纯. 1.2仪嚣 (一910型双波长薄层扫描仪(日本岛津);定 量毛细管(美国Drummond). 2实验方法与结果 2.1薄层色谱鉴别 2.1.1山豆根的薄层色谱鉴别取本品lOml,加 硅藻土15g,搅拌均匀,自然晾干.置沙氏提取器 中+加氯仿150ml回流提取6h,回收氯仿.浓缩液 药学杂志1999年4且第34卷第4 转移至lOml量瓶中并加氯仿定容至刻度,作为供试 品溶液.另取山豆根对照药材粗粉5g.按同法制拔 对照药材溶液.取苦参碱对照品适量,加氯仿溶解 制成每毫升含lnag的溶液,作为对照品溶液吸取 上述3种溶液各10al+分别点于同一硅胶G薄层板 上+以氯仿一甲醇一氨水(10:0.8:06)为展开剂展开. 取出晾干.喷以改良碘化铋钾溶液.供试品,对照 药材眨对照品在色谱相应的位置上显相同的橙红色 斑点(图1) 图L豆根薄层色谱鉴别图谱 iIU辊对照药材2,供试品i3一苦参棘对麒品c4明性对照品 2.1.2核桃楸皮的薄层鉴别取本品lOml,加硅 藻土15(图2) 图2核桃橄皮薄层色谱鉴别图谱 I植槁楸皮对照药材;2供试品,3一阴性对照品 22含量测定 221薄层扫描条件采用双波长反射锯齿扫描 法扫描宽度:100rrml,线性参数Sx=3,由扫描图 确定测定波长s=510m’n,R=600nm. 2.22标准曲线精密称取苦参碱对照品适量,加 氯仿制成1.25mg-mt..的标准溶液.精密吸取2, 4,6,8,12,ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿 一 甲醇一氨水(10:0.8:0.6)为展开剂,展开约10cm, 取出晾干.用改良碘化铋钾显色,扫描测定,以面积 积分值对苦参碱浓度绘制标准曲线,回归方程:Y = 141.87+4961X,r=0.9998.结果表明:苦参 碱在2.5--25mg-ndI1浓度范围内呈现良好的线?性 关系 2.23稳定性实验吸取苦参碱对照品溶液5t4, 点于薄层板上展开,显色后每隔30min扫描一次,结 果在2h内稳定,RSD=066%(=5). 2.24精密度实验?板内:同一板上点同样量的 同一样品,按实验条件测定,结果RSD=0.33%( =5).?板间:二块相同厚度的硅胶G板上点同样 量的同一样品,按实验条件测定,结果RSD= 081%(=5). 225同批样品的重现性实验取同一批样品5 份,分别提取,定容,点样,展开,显色,扫描测定.结 果表明,样品每支的平均含量为11.56rag,RSD为 38% 226样品的测定精密取供试品100ml,加氨 水调pH至8,加硅藻土15g搅拌均匀,晾干.置沙 氏提取器中,用氯仿150mt回流提取6h,回收氯仿, 浓缩液转移至1Om1量瓶中并用氯仿定容至刻度,摇 匀,作为供试品溶液分别吸取标准品溶液6ta,供 试品溶液4”I,点于同一硅胶G薄层板上,按标准曲 线项下展开,扫描,按外标一点法计算含量测定了 3批复方木鸡口服液中苦参碱的含量,结果见表1 264?ChinmJ,1999Ap.vd34No4 表1复万木鸡口服疲中苦参碱测定结果:3 2.2.7加样回收率试验精密称取已知含量的复 方木鸡口服液,加入一定量的苦参碱对照品,按样品 液制备,点样,展开,显色后测定,结果见表2. 表2回收率测定结果 样品6)为展开剂,上行展 开约10cm,取出晾干,以改良碘化铋钾显色后,划出 斑点范围,氨熏至无色,将斑点部位硅胶刮下,装入 小柱,用无水乙醇洗至生物碱沉淀反应为阴性,洗脱 液收集在50m1磨口锥形瓶中,蒸干乙醇.分别加入 2×10mot?LI1的麝香草酚蓝pH76的缓冲溶液 6ml,氯仿6ml,密塞振摇2rnin.倒入50m1分液漏斗 中,分出氯仿层,以不加对照品为空白,在415nm波 长处测定吸光度值以吸光度对苦参碱浓度绘制标 准曲线,回归方程Y=00176+9948×10I3x,r = 0.998.?样品含量测定:取样品的氯仿提取液 20at,按标准曲线项下操作,测定3批样品中苦参碱 含量,结果见表3. 表3复方木鸡口服液中苦参碱含量测定结果=3 结果证明,薄层扫描法与薄层一比色法测定结 果基本一致.经统计学检验无显着性差异 3讨论 31对于样品的提取,曾试用氯仿及甲醇回流提 取,但所提取的杂质多,苦参碱的含量少. 3.2由于薄层扫描所用的层析板展开预平衡时间 长短及展开距离大小对含量测定有影响.故展开预 平衡时间不应少于30rain,展开距离以10cm为宜, 3.3薄层板在喷改良碘化铋钾显色剂之前,板上的 杂志1999年4月第34卷第4 残留氨应彻底挥散(必要时力u热除掉).因为氨水能含量测定结果. 破坏生物碱与碘化铋钾形成的复盐,从而直接影响 z6毛 HPLC测定妇舒液中黄芩苷含量 王永林兰燕宇周宝珠【贵阡1550004贵阳医学院药学系) 矗2.十 三0 (收稿:l99024)6) 摘要目的:采用HPLC测定妇舒液中黄芩苷含量.以控制谊制刑的质量.方法:用十八烷基键合硅肢拄分离黄芩苷.流动相 为甲醇一4g?I..磷酸(5050);检测波长278nm:结果:黄芩苷峰与对硝基苯酚峰的分离度为45;理论塔板数以黄芩苷峰计算 为3800;巍性范围20,900rig(r=09999);平均回收率为9988%.RSD=154%(=5).结论:本法简便,快速,适用于谊 产品质量分析检验, 关键词妇舒液;黄葶苷;高效液相色谱法,扫_= DeterminationofbnicalininFushuyebyHPLC WangYonglin(WangYL),LanYanyu(LanYY),ZhouBaozhu(ZhouBZ)(De lx~rtmeatPharmacy.Gui2a~ng MedicodGdlege.(?ng550004) .43~STRACl”OBSECIIVE:TodonuninatethequalityofFushuye.theconte rRsofbaJcalininFushuyewasdeterminedbyHPLc MEWItOD:Baicalinv,~asseparatedonheri~rbCedunmanddetectedal278n m,byusingmethanoMg’L..phosptxmcacid(50: 50jasmobiIephaSt-’RF.S1JI.IN:Thercsalulion~,VaS45ThenmnberOft]- moretica[platesealeulaldforbaicalinD髑was3800The standardcup,-ew?linearovf2r1herangeof20ng--9OOng.vdththemrmlatic~coefficient09999.Theaveragereoc~erywas9988% wilh尺 SD=154’(=5)CONCLUSION:Themetkissimpteandfast,madCallbeusedfor quantitaliveanalysisofFushuye KEY, t】RDs15Lshuye.baicatin.HPI, 妇舒液系由黄芩,蛇床子,五倍子等中药经提取 力u工制成的溶液剂,具有清热解毒,除湿止带的功 能.临床用于治疗妇女湿热下注之带下而出现的带 下色黄,味臭,阴痒等症.药理试验研究表明,黄芩 苷是妇舒液中的主要有效成分本实验采用HPLC 对妇舒液中的黄芩苷含量测定方法进行了实验研 究,结果表明,该法操作简便,快速,重现性好,可用 于妇舒液的质量控制. 1仪器与试药 LC5A高效液相色谱仪,SPD一6AV紫外检 测器,C—R6A色谱数据处理机(日本岛津).甲醇 (色谱醇),磷酸(分析醇),对硝基苯酚(分析醇),黄 芩苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量 测定用) 2方法与结果 2.1内标溶液的制备 精密称取对硝基苯酚适量,加少量乙醇溶解后, 加水稀释成每hnl含25rag的溶液,即为内标溶 液 中国药学杂志1999牛4月第34卷第4 2.2对照品溶液的制备 精密称取在60?真空干燥4h的黄芩苷对照品 适量,加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液;准确吸 取该溶液100,内标溶液l0,加水稀释至lml,即 为对照品溶液. 2.3供试品溶藏的制备 准确吸取样品原液l0,内标溶液100,加水 稀释至10ml,即为供试品溶液.同法制备不含黄芩 药材的阴性样品溶液. 2.4彦者寿殍 色谱柱为十八烷基键合硅胶(spherimrbCl8 5Wn)250mm×46mm;流动相:甲醇4g?L0磷酸 (50:50);流速:0.8ml?min一;柱温:室温;检测波 长:278nm(黄芩苷的最大吸收波长…I.对硝基苯酚 的最大吸收波长为318rim.但在278nm仍能检测, 并服从朗泊比尔定律). 2.5系统适用性试验 分别取对照品溶液,黄芩苷及内标物对照品溶 液,不加内标物的供试品溶液,阴性供试液,加内标 Chinfm[标签:快照]