高效液相色谱法测定阿昔洛韦尿素乳膏中阿昔洛韦的含量

高效液相色谱法测定阿昔洛韦尿素乳膏中阿昔洛韦的含量 高效液相色谱法测定阿昔洛韦尿素乳膏中 阿昔洛韦的含量 中国药事2005年第19卷第12期?739? 药品检验?药品质量 高效液相色谱法测定阿昔洛韦尿素乳膏中阿昔洛韦的 含量 李道明,胡守莲,吴红英,杨小林(河南省信阳市药品检验所,464000) 摘要:建立阿昔洛韦尿素乳膏中阿昔洛韦含量的HPLC测定方法.色谱柱为SUNTEKKromasilCs; 流动相为甲醇一水(10:90),流速为1.0ml?rain-,检测波长为254nm.线性范围:2.5,20~tg?ml一, r=O.9999,平均回收率为96.90,RSD为0.77.方法准确可靠,简单易行,适用于阿昔洛韦尿素乳 膏中阿昔洛韦的含量测定. 关键词:阿昔洛韦尿素乳膏;阿昔洛韦;高效液相色谱法;含量测定 中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1002-7777(2005)12-0739—02 DeterminationofAciclovirinAciclovirUreaCreambyHPLC LiDaoming,HuShoulian,WuHongyingandYangXiaolin(InstituteforDrugControlofXiny angCity, HenanProvince,464000) ABSTRACTAHPLCmethodwasestablishedforthedeterminationofAciclovirinAciclovir ureacream. ASUNTEKKromasilC】8columnwasusedwithmethanol—water(10:90)asmobilephase.Theflow ratewas1.Oml?min,anddetectionwavelengthwas254nm.Thelinearrangewas2.5,20~tg?ml,. Theaveragerecoveryratewas96.9andRSDwas0.77.Themethodwasaccurate,reliable,sim ple andfeasible.Itcouldbeusedforthedeterminationofaciclovirinaciclovirureacream. KEYWORDSaciclovirureacream;acyclovir;HPLC;determination 阿昔洛韦尿素乳膏是河南省信阳卫校附属医院 的医院制剂,由阿昔洛韦和尿素加适量基质制成, 主要用于治疗单纯疱疹病毒I,?型与水痘一带状 疱疹及生殖器疱疹等病毒性皮肤病.为了更有效地 控制产品质量,笔者建立了测定产品中阿昔洛韦含 量的高效液相色谱方法,该法专属性强,结果准 确. 1仪器与试剂 T高效液相色谱仪,SPD一 日本岛津LC一10A 10A紫外检测器,C—R6A积分仪.甲醇为色谱 醇,水为纯化水,其它化学试剂均为分析纯. 阿昔洛韦对照品(中国药品生物制品检定所, 批号:200001),阿昔洛韦尿素乳膏(信阳卫校附 属医院制剂室,批号:20040326,20040518, 20040802). 2方法与结果 2.1对照品溶液的制备 精密称定阿昔洛韦对照品12.5mg,置50ml 量瓶中,加109/6氯化钠溶液适量,振摇使溶解, 用109/6氯化钠溶液稀释至刻度,摇匀,即得浓度 为250~tg?ml的阿昔洛韦对照品储备液.精密吸 取上述溶液2.Oml于50ml量瓶中,加流动相稀释 至刻度,摇匀,作为对照品溶液. 2.2样品溶液的制备 取本品约0.625g,精密称定,置分液漏斗中, 加温热的(约40,50?)109/6氯化钠溶液30ml, 振摇使软膏分散,再加氯仿25ml抽提,静置分 层,氯仿放入另一分液器中,加109/6氯化钠溶液 10ml,再抽提1次,弃去氯仿层,合并氯化钠溶 液,置50ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇 匀,静置1小时,滤过,弃去初滤液,精密量取续 滤液2ml,置另一50ml量瓶中,用流动相稀释至 刻度,摇匀,经0.45m微孑L滤膜滤过,即得. 2.3阴性对照溶液的制备 ? 740?中国药事2005年第19卷第12期 取不含阿昔洛韦的空白制剂样品,照供试品溶 液制备方法制备,即得. 2.4色谱条件 色谱柱为SUNTEKKromasilC18(4.6mm× 200mm,0.5m);流动相为甲醇一水(10:90), 检测波长为254nm,进样体 流速为1.0ml?rain-, 积为20/A,柱温室温,分别吸取对照品溶液,供 试品溶液,阴性供试品溶液注入色谱仪色谱 图,阴性对照溶液在阿昔洛韦出峰位置无干扰,见 图. ' a ^ 图阿营洛韦尿素乳膏HPLC色谱图 a.样品;b.对照品;c.阴性对照 2.5线性关系考察 精密吸取上述对照品储备溶液1.0ml于100ml 量瓶中,再分别精密吸取上述对照品储备溶液 0.5,1.0,2.0,3.0,4.0ml于50ml量瓶中,加 流动相稀释至刻度,摇匀,各进样20l,按上述 色谱条件测定峰面积,以峰面积为纵坐标,进样量 (g?ml)为横坐标,绘制标准曲线,并进行回 归分析,结果阿昔洛韦在2.5,20/~g?ml-的浓度 范围内有良好的线性关系,回归方程为:y一 37705x-577.51(r一0.9999). 2.6精密度试验 精密吸取对照品溶液20/A,连续进样5次,结 果阿昔洛韦平均峰面积为378164,其RSD为 0.58. 2.7稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液20l,分别在0,2, 4,6,8小时进样,测定阿昔洛韦的平均峰面积为 376813,结果RSD为0.72,表明供试品溶液以 在8小时内稳定. 流动相为溶剂, 2.8重复性试验 取同一批号样品,精密称取5份,按上述方法 制备供试品溶液,依上述色谱条件测定阿昔洛韦的 平均含量为97.7,其RSD=0.85(n一5). 2.9回收率试验 分别称取按处方比例的基质约0.55g,尿素 0.0625g,称取9份,分别精密加入阿昔洛韦对照 品约10,12.5,15mg,按上述方法制备供试品溶 液,依上述色谱条件测定,计算回收率,结果见表 1. 表1阿昔洛韦回收率试验结果 1O.O8 1O.54 1O.15 12.59 12.31 11.56 15.68 14.83 15.1O 9.78 1O.12 9.78 12.24 11.86 11.35 15.24 14.26 14.76 97.O2 96.O1 96.35 97.22 96.34 98.18 97.O9 96.16 97.75 2.10样品含量测定 取3批样品,按上述供试品溶液的制备方法制 备供试品溶液,依上述色谱条件测定含量,结果见 表2. 表2样品的含量测定(n一3) 3讨论 文献中阿昔洛韦乳膏含量测定为分光光度法, 由于本制剂中阿昔洛韦与尿素难以分离,测定结果 使含量偏高,又由于高效液相法空白基质与尿素对 测定结果无干扰,故采用高效液相法. 阿昔洛韦在冰醋酸或热水中略溶,在乙醚或氯 仿中几乎不溶.加氯化钠有利于破乳,故加温热 10NaC1溶液振摇使分散,再用氯仿抽提,使基 质达到很好的分离. 参考文献: [1]中国药典[s].二部,2000:332 [2]上海市药品标准[s].1993:138